壶腹周围癌淋巴结微转移的检测及其意义

目的探讨壶腹周围癌淋巴结微转移的检测及其意义。方法采用免疫组化法检测60例壶腹周围癌根治术患者HE染色阴性的淋巴结（220枚）中CK7、CK18及CK19的表达，并结合临床资料及随访结果进行分析。结果60例患者中有17例共43枚淋巴结有微转移；CK19、CK7及CK18的微转移检出率分别为19．55％（43／220）、14．55％（32／220）及11．36％（25／220）；CK19的微转移检出率高于CK7和CK18（P〈0．05）；CK7和CK19的检出率在临床Ⅲ、Ⅳ期高于Ⅰ、Ⅱ期（P〈0．05）；有微转移者比无微转移者的1年生存率低（P〈0．05）。结论壶腹周围癌淋巴结微转移可能是肿瘤转移的早期阶段。CK抗体是检测壶腹周围癌淋巴结微转移的有效指标，可为临床综合治疗与预后判断提供理论依据。     

CK19表达及其在结肠癌淋巴结微转移诊断中的应用

目的：研究用免疫组化方法检测CK19及其在结肠癌淋巴结微转移诊断中的应用与临床病理意义。方法：取材于50例结肠癌病人肿瘤组织及癌周淋巴结255枚，同时进行HE染色组织学检查和抗角蛋白19抗体的免疫组化检测。结果：50例结肠癌组织中CK19表达均为阳性。255枚淋巴结用HE染色检查阳性者56枚(22．0％)，皆同时表达CK19阳性；另20枚淋巴结HE染色阴性，而CK19表达阳性。50例中有12例淋巴结中发现微转移，其中6例常规组织学检查属淋巴结转移阴性而免疫组化染色诊断表现为转移阳性。占常规病理检查淋巴结转移阴性者的21．4％(6／28)。随着肿瘤分期增加,淋巴结CK19表达阳性率亦增加。CK19表达阳性者预后较阴性者为差。结论：CK19免疫组化法是检测结肠癌淋巴结微转移的敏感而便捷的方法，而检测结肠癌微转移有助于判断肿瘤进展程度与预后。特别对在筛选组织学检查淋巴结阴性但存在微转移的病人有实用价值。     

HE、IHC和RT-PCR方法检测乳腺癌腋窝淋巴结转移的对照研究

目的　探讨检测乳腺癌腋窝淋巴结转移较敏感的方法。方法　应用常规HE染色法、细胞角蛋白19(CK19)作为单抗的免疫组化(IHC)SP染色及CK19 mRNA的逆转录聚合酶链反应(RT PCR)3 种方法检测20 例乳腺癌患者共239 个腋窝淋巴结的转移情况。结果　239 个腋窝淋巴结中,HE染色发现3 例患者7 个(2.9%,7/239)有癌转移,均位于level Ⅰ; IHC检测到7例患者13个(5.4%,13/239)有癌转移,其中11个位于level Ⅰ,2个位于level Ⅱ; RT PCR检测到14例患者52 个(21.8%,52/239)有癌转移,其中30 个位于level Ⅰ,22 个位于level Ⅱ。IHC和RT PCR检测证实,HE染色阳性的7 个淋巴结均有癌转移; IHC染色阳性的淋巴结均出现了PCR阳性扩增产物。HE、IHC及RT PCR 3 种检测方法对腋窝淋巴结微转移的检出率分别是0(0/232)、2.6%(6/232)及19.4%(45/232),P<0.05。结论　IHC及RT PCR是较HE检测淋巴结微转移更敏感的方法,而RT PCR较IHC更为敏感,能更准确地反映乳腺癌患者腋窝淋巴结的状况。     

pT1-4aN0M0胃癌淋巴结微转移检测的临床意义

目的：探讨淋巴结微转移及临床病理因素对 pT1-4aN0M0期胃癌患者术后5年无瘤生存率的影响。 方法：纳入2008年1月—9月期间pT1-4aN0M0期胃癌患者行根治术者45例849枚HE染色阴性淋巴结,应用免疫组化法检测这些淋巴结中CK19表达,观察其淋巴结发生微转移情况,并分析发生微转移胃癌患者的临床病理特征及微转移的发生对患者5年无瘤生存率的影响。 结果：经免疫组化染色,849枚HE常规染色阴性淋巴结中CK19阳性表达率为8.13%（69/849）;有31.11%（14/45）患者的淋巴结CK19表达阳性。术后随访时间13~69个月（平均随访时间55.08个月）,淋巴结中CK19阴性表达、阳性表达患者的5年总生存率分别为83.87%、42.86%;两者无瘤生存率差异有统计学意义（χ2=9.112,P=0.003）。淋巴结CK19阳性表达与胃癌患者的肿瘤直径（P=0.007）、浸润胃壁深度（P=0.032）有关,5年无瘤生存率与临床病理因素无关（P>0.05）。Cox生存回归分析显示淋巴结微转移为独立预后因素,14例患者被检测出微转移,建议重新分期,重新分期率为31.11%（14/45）。 结论：胃癌pT1-4aN0M0期患者,免疫组化染色能检出常规HE染色阴性淋巴结中的微转移,有助于细化分期、判断预后及指导治疗。     

CK在Ⅰ期非小细胞肺癌患者淋巴结中的表达及其临床意义

目的通过检测Ⅰ期非小细胞肺癌(NSCLC)患者淋巴结中细胞角蛋白(CK)的表达,确定微转移灶的存在及其与肿瘤复发、转移和预后的关系。方法以CK作为肿瘤标记物,应用免疫组化链霉亲生物素-生物素-过氧化酶复合物(Streptavidin biotin-peroxidase complex,SABC)法,检测根治术后常规病理HE染色阴性的33例Ⅰ期NSCLC患者的246枚淋巴结中的微转移灶。结果33例患者246枚淋巴结中有10例(30.3%)患者的12枚(4.9%)淋巴结中CK阳性表达。有或无CK阳性表达的患者复发转移率差异有统计学意义(80.0%vs.26.1%,χ2=7.015,P=0.016),CK阳性表达患者的中位生存期显著短于CK阴性表达者(21个月vs.60个月,P=0.016);Cox单因素风险模型(P=0.004)和多因素风险模型(P=0.004)均显示存在淋巴结微转移的期NSCLC患者预后不良。结论CK免疫组化染色可以作为检测和判定肺癌淋巴结微转移的有效方法。CK免疫组化染色检测淋巴结微转移与Ⅰ期NSCLC复发转移相关,有助于更加精确的分期,可以作为Ⅰ期NSCLC患者根治术后的一个预后指标,并为其综合治疗提供理论依据。     

胃癌阴性淋巴结的微转移检测的临床意义

目的 探讨胃癌淋巴结微转移与临床病理参数的关系及其临床意义。方法 采用免疫组织化学方法，用细胞角蛋白CK19，细胞角蛋白CK20及CD44v6检测53例常规病理检查无淋巴结转移的胃癌周围淋巴结509枚。结果 53例胃癌患者中21例有淋巴结微转移（39．6％）。微转移与浸润深度有关；深层组织的微转移阳性率高于浅层（P＜0．05），PT3，PT4患者阳性率明显高于PT1，PT2患者。低分化癌微转移阳性率明显高于高分化癌（P＜0.05)。结论 对常规检查淋巴阴性的胃癌，微转移检测可能对准确地确定临床分期、指导治疗、判断预后有积极临床意义。     

甲状腺滤泡状癌淋巴结微转移与中央组淋巴结处理的探讨

目的 从淋巴结微转移的角度探讨甲状腺滤泡状癌中央组(Ⅵ组)淋巴结处理的意义.方法 选择细胞角蛋白(CK-19)单克隆抗体,应用免疫组化SP法对68例326枚常规病理检查阴性的颈淋巴结(pN0)进行检测,确定其微转移情况并与临床及随访资料进行对比分析.结果 326枚pN0淋巴结中微转移阳性46枚,包括Ⅱ组4枚(4/42),Ⅲ组5枚(5/34),Ⅳ组5枚(5/49),Ⅴ组1枚(1/17),Ⅵ组31枚(31/184).在淋巴结微转移阳性的14例中6例(6/14)出现局部复发或远处转移,而54例微转移阴性病人中仅3例(3/54)复发或远处转移(P＜0.01).结论 甲状腺滤泡状癌Ⅵ组淋巴结是容易发生微转移的区域淋巴结;且淋巴结微转移与肿瘤复发及转移有密切关系.甲状腺滤泡状癌手术时应常规清扫Ⅵ组淋巴结.     

中低位直肠癌区域淋巴结微转移

目的：观察中低位直肠癌区域淋巴结的微转移。方法：采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）技术,扩增角蛋白19（K19）,对15例Duke B期中低位直肠癌患者的癌组织样本和127枚组织学阴性淋巴结进行检测,藉此了解区域淋巴结的微转移状态。结果：15例癌组织均有K19 mRNA表达,127枚病理检查未发现转移的淋巴结中,经RT-PCR检测有13枚存在微转移。另送8枚淋巴结病理组织学阳性,K19 mRNA均表达阳性,良性病人送检11枚淋巴结均不表达K19。结论：中低位Duke B期直肠癌区域淋巴结常规病理学检查阴性,存在10.2%（13/127）微转移。为患者术后辅助治疗及预后判断提供资料。     

CK18和PNA受体在大肠癌淋巴结微转移中的表达及其意义

为探讨CK 18和PNA受体在大肠癌淋巴结微转移中的表达及其意义 ,笔者检测了CK 18和PNA受体在大肠癌患者淋巴结微转移灶中的表达。结果 :(1) 60例大肠癌患者的 2 3 4枚淋巴结中 ,共有 2 2例 (3 6.67% ) 3 9枚 (16.67% )淋巴结存在微转移 ,主要以单个散在和小团状分布于淋巴结的边缘窦内。 (2 )CK 18蛋白表达阳性率为 14 .10 % (3 3 / 2 3 4) ,除 1枚淋巴结外 ,HE染色阳性者CK 18染色均阳性 ;PNA受体表达阳性率为 13 .2 5 % (3 1/ 2 3 4) ,HE染色阳性者PNA染色均阳性。CK 18蛋白和PNA受体阳性表达率明显高于HE染色阳性者 (P <0 .0 1)。 (3 )CK 18和PNA受体共同表达阳性率为 10 .68% (2 5 / 2 3 4) ;CK 18表达阳性而PNA受体阴性的淋巴结 8枚 ,占 3 .42 % ;PNA受体表达阳性而CK 18表达阴性的淋巴结 6枚 ,占 2 .5 6% ;但差异无显著性 (P >0 .0 5 )。 (4 )淋巴结微转移灶的检出率与患者年龄、性别、病理类型、分化程度无关 (P >0 .0 5 ) ,而与Dukes分期有关 ,C期明显高于A和B期 (P <0 .0 1)。提示CK 18和PNA联合应用可提高微转移的检出率     

直肠癌淋巴结微转移标志物的比较研究

目的：评价直肠癌淋巴结CK20、CK19、CEA诊断微转移的敏感性、特异性，探讨微转移的临床病理意义。方法：采用免疫组织化学染色方法，以CK20、CK19、CEA为指标，检测36例直肠癌患者手术区域252枚淋巴结的微转移，对照组为淋巴结反应性增生的标本15例。结果：常规HE检测淋巴结转移阳性率7．94％，CK19、CK20、CEA阳性率分别为20．63％、23．02％、17.46％，均高于HE检测结果（P〈0．01）。三种抗体在淋巴结微转移阳性率存在统计学差异。19枚对照组淋巴结CK19阳性率47.37％，CEA阳性率10．53％．CK20表达阴性。CK20、CK19、CEA淋巴结微转移阳性率与3年复发率无统计学差异（P〉0.05）。结论：对常规病理检测未发现区域淋巴结转移的直肠癌，有必要辅以免疫组化方法检测其微转移，CK20是首先标志物。     

MUC1 mRNA和CK19 mRNA在胃癌淋巴结表达的意义

目的 探讨胃癌淋巴结微转移的基因诊断方法,分析CK19 mRNA、MUC1 mRNA作为胃癌微转移检测分子标志物的可行性。方法 应用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法检测52例胃癌462枚常规病理阴性淋巴结中黏蛋白1（MUC1）mRNA、细胞角蛋白19（CK19）mRNA表达;对照组为4例胃良性病变患者的38枚淋巴结。结果 胃良性病变患者38枚淋巴结中CK19 mRNA和MUC1 mRNA表达均为阴性;CK19、MUC1 mRNA在胃癌患者462枚常规病理阴性的淋巴结中223枚（48.3%）阳性表达,其中180枚（39.0%）淋巴结CK19 mRNA阳性表达,136枚（29.4%）MUC1 mRNA阳性表达,CK19 mRNA和MUC1 mRNA均为阳性者有125枚（27.0%）。不同组织类型淋巴结CK19、MUC1 mRNA阳性率差异无显著性（P〉0.05）,不同肿瘤浸润层次、原发肿瘤大小、肿瘤位置的阳性率差异有显著性（P〈0.05）。结论 MUC1、CK19基因均可作为RT-PCR法检测胃癌患者淋巴结微转移的分子标志物。     

胃癌淋巴管生成、淋巴管浸润及淋巴结微转移的临床意义

目的探讨胃癌淋巴管生成、淋巴管浸润及淋巴结微转移的临床意义。方法免疫组化法检测68例胃癌原发灶中D2-40的表达及其中51例胃癌的791枚淋巴结中CK20和CKpan的表达，结合患者的l临床病理特征进行综合分析。结果胃癌HE染色淋巴管浸润（LVI-HE）和D240染色淋巴管浸润（LVI-IM）的阳性率分别为66．2％（45／68）和76．5％（52／68），差异无统计学意义（P=0．118）。LVI-IM阳性率与肿瘤浸润深度（P=0．044）、TNM分期（P=0．003）及存在淋巴结转移（P=0．000）有关。68例胃癌平均淋巴管密度（LVD）为（18．19&#177;7．44）个／HP.LVD升高与LVI-HE阳性（P=0．040）、LVI—IM阳性（P=0．001）、静脉浸润（P=0．037）、TNM分期较晚（P：0．020）及存在淋巴结转移（P=0．001）有关系。LVD值≥15个／HP者近期生存率较LVD值≤14个／HP者明显降低（P=0．032）。51例胃癌HE染色和CK（CK20或CKpan）染色检出淋巴结转移率分别为74．5％（38／51）和88．2％（45／51），791枚淋巴结的转移淋巴结检出率由HE染色的32．0％（253／791）提高到CK染色的41．5％（328／791），P〈0．001。CKpan的微转移检出率明显高于CK20（P=0．003）。微转移淋巴结数量与肿瘤大小（P=0．001）、LVIHE（P=0．040）、肿瘤浸润深度（P=0．018）及TNM分期（P=0．012）有关。微转移淋巴结的检出使淋巴结转移站别及TNM分期迁移：7例N0→N1，6例N1→N2，1例N2→N3；4例Ⅰb→Ⅱ，4例Ⅱ→Ⅲa，3例Ⅲa→Ⅲb，1例Ⅲb→Ⅳ。结论D2-40及CK检测在诊断淋巴管浸润和淋巴结微转移上优于HE检查。CK20和CKpan的联合检查有利于发现微转移淋巴结。肿瘤TNM分期越晚，越易发生淋巴结微转移。LVI-IM、LVD及淋巴结微转移三者都与胃癌淋巴结转移有关。LVD值较高者近期生存率较低。     

胰头癌患者肠系膜上动脉周围淋巴结清扫与细胞角蛋白检测的意义

目的：探讨胰头癌患者肠系膜上动脉（SMA）周围淋巴结（第14组淋巴结）清扫与淋巴结细胞角蛋白（CK）检测的临床价值。方法：分析24例单纯行胰十二指肠切除术（PD）胰头癌患者（PD组）与32例行PD+SMA周围淋巴结清扫术胰头癌患者（PD+SMA清扫组）的临床资料,比较两组围手术期情况与术后生存率;比较常规病理学检测与CK免疫组化检测对淋巴结微转移的检出率。结果：PD组与PD+SMA组比较,术中出血量[（1 462.5±911.73）mL vs.（1 687.5±1 522.63）mL],手术时间[（4.5±1.03）h vs.（5.0±1.25）h],术后住院时间[（16.13±3.09）d vs.（18.25±7.17）d]及术后并发症发生率（8.3% vs. 9.4%）的差异均无统计学意义（均P>0.05）;PD+SMA清扫组术后3年生存率明显高于PD组（P=0.044）;PD+SMA清扫组切除的淋巴结常规病理检测阳性率为6.25%（2/32）,经CK检测增加至21.88%（7/32）。结论：胰头癌患者SMA周围淋巴结中肿瘤细胞微转移发生率较高,CK检测能提高淋巴结微转移的检出率。PD加行SMA的骨骼化清扫并不增加手术风险及术后并发症发生率,且能改善胰头癌患者预后。

     

CK19mRNA测定在乳腺癌腋淋巴结微转移诊断中的应用

研究敏感的方法检测乳腺癌腋窝淋巴结微转移。方法:对15例乳腺癌者的61个腋淋巴结和5个正常对照淋巴结同时进行HE染色组织学检查和CKl9逆转录-聚合酶链式反应(CK19RT-PCR)检测。结果:15例乳腺癌组织均有CK19mRNA表达,而5个正常淋巴结中均末见表达。61个腋窝淋巴结中7个组织学检查证实转移,其CK19mRNA亦表达阳性。组织学检测无转移的54个淋巴结中有12个CK19RT-PCR表达阳性,42个阴性;提示该12个淋巴结存在微转移只能用CK19RT-PCR方法检测出。经统计学分析,CK19RT-PCR与组织学检查二者有显著差异(X~2检验,P<0.01)。结论:CK19表达于恶性乳腺细胞,正常淋巴细胞无表达,CK19能作为组织特异基因进行RT-PCR扩增以检测乳腺癌腋淋巴结微转移。CK19 RT-PCR方法比组织学方法更敏感,特别对在筛选组织学检查淋巴结阴性而具有高度复发危险性的病人将有实用价值。     

中下段直肠癌E-钙黏附素表达与淋巴结微转移的关系研究

目的:分析中下段直肠癌E-钙黏附素(E-cadherin)表达与淋巴结微转移的关系。方法:应用CK-20免疫组化技术,对56例中下段直肠癌中661枚淋巴结微转移状况进行检测,同时观察肿瘤组织中E-钙黏附素的表达情况。结果:HE染色检测出29例中的190枚淋巴结呈转移,其CK-20免疫组化检测均呈阳性,后者在该29例中另检出12例55枚淋巴结呈阳性;在27例HE染色未检出淋巴结转移者中,有8例12枚淋巴结免疫组化检测呈阳性。20例(36%)67枚(10%)淋巴结检出微转移。中下段直肠癌E-钙黏附素表达阴性率为44.6%(25/56)。中下段直肠癌E-钙黏附素表达阴性与浸润深度(P=0.028)、分化程度(P=0.012)和淋巴结转移(P=0.007)密切相关。20例检测出淋巴结微转移的癌组织中14例(70%)E-钙黏附素表达阴性,而36例未检测出淋巴结微转移的癌组织中仅有11例(30.6%)E-钙黏附素表达阴性;二者差异有统计学意义(P=0.004)。结论:中下段直肠癌E-钙黏附素表达下调参与了淋巴结微转移的发生。     

乳腺癌前哨淋巴结活检

目的 评价前哨淋巴结活检预测腋窝淋巴结有无肿瘤转移的准确性及其临床意义。方法 用^99m锝－硫胶体作为示踪剂,用γ探测仪导向,对70例临床分期为T1－2N0M0的乳腺癌患者进行前哨淋巴结活检,所有的患者均同时行腋窝淋巴结清扫,HE染色阴性的前哨淋巴结再切片,用CK8、CK19、KP－1行免疫组织化学染色。结果 70例患者中成功发现前哨淋巴结的有67例,发现率为95.7%（67／70）。前哨淋巴结的数量为1－5枚,平均每例1.6枚。非前哨淋巴结5－20枚,平均例12.3枚。67例前哨淋巴结活检成功的患者中,29例患者（43.3%）有腋窝淋巴结转移,其中前哨淋巴结有转移者24例（35.8%）,前哨淋巴结未发现转移而非前哨淋巴结有转移者5例（7.5%）。7例患者（10.4%）只有有淋巴结为阳性淋巴结,前哨淋巴结活检的准确性为100％。43例患者的65枚HE染色阴性一的前哨淋巴结,CK8及CK19免疫组织化学染色均为阴性。结论 前哨淋巴结检能较准确地预测腋窝淋巴结转移情况,对原发灶为T1的乳腺癌,前哨淋巴结活检的准确性为100％。同一层面切片行免疫组织化学染色并不能提高淋巴结微转移癌的发现率。     

Detection of Micrometastatic Tumor Cells in pN0 Lymph Nodes of Patients With Completely Resected Nonsmall Cell Lung Cancer: Impact on Recurrence and Survival

OBJECTIVE: To detect occult micrometastatic tumor cells in pN0 lymph nodes of nonsmall cell lung cancer (NSCLC) by a combination of cytokeratin and p53 immunohistochemistry staining, and to evaluate the relation between the micrometastasis in pN0 lymph nodes and the prognosis of patients with completely resected stage 1 NSCLC. SUMMARY BACKGROUND DATA: The average 5-year survival rate for patients with completely resected stage 1 NSCLC is only about 70%; thus, about 30% of these patients have recurrent disease. This suggests that occult micrometastasis may exist at the time of surgery; the rate is clearly underestimated by current clinical staging examinations and conventional histopathologic methods. METHODS: A total of 474 hilar and mediastinal lymph nodes were removed during surgery from 49 patients with completely resected stage 1 NSCLC. The lymph nodes analyzed for micrometastasis using immunohistochemical staining with the biclonal anticytokeratin antibody, AE1/AE3. Of these 474 lymph nodes from 49 patients, 263 lymph nodes from 25 patients, whose primary tumors were positive for the p53 protein, were subjected to immunohistochemical staining with the monoclonal anti-p53 protein antibody DO-1. RESULTS: Cells positive for cytokeratin and p53 protein were found in 35 (7.4%) of 474 and 20 (7.6%) of 263 lymph nodes, respectively; 17 (34.7%) of 49 patients had cytokeratin-positive cells and 10 (40.0%) of 25 patients had p53-positive cells in their pN0 lymph nodes. By a combination of cytokeratin and p53 protein immunohistochemical staining, micrometastatic tumor cells were identified in pN0 lymph nodes in 22 (44.9%) of 49 patients. The patients with lymph node micrometastasis identified by a combination of cytokeratin and p53 protein immunohistochemical staining had a poorer prognosis than those without micrometastasis on both univariate and multivariate analyses (overall survival, P =.0003 and 0.013, respectively). CONCLUSIONS: The detection of lymph nodal micrometastasis by cytokeratin and p53 protein immunohistochemical staining will be helpful to predict the recurrence and prognosis of patients with completely resected stage 1 NSCLC.     

Nodal occult metastasis in patients with peripheral lung adenocarcinoma of 2.0 cm or less in diameter

Background. Detection of occult micrometastasis in regional lymph nodes is crucial for diagnosis and selection of appropriate therapy for patients with pN0 nonsmall-cell lung carcinoma. Using immunohistochemical staining, we evaluated the impact of detection of occult micrometastasis on the prevalence and prognosis of patients with lung adenocarcinoma of 2.0 cm or less in diameter.

Methods. A total of 103 pN0 disease patients with peripheral lung adenocarcinomas of 2.0 cm or less in diameter were enrolled in this study. We studied 1,438 regional lymph nodes for occult micrometastasis by immunohistochemical staining for cytokeratins.

Results. Micrometastasis was detected in 49 lymph nodes (3.4%) of 21 patients (20.4%) but not in patients with localized bronchioloalveolar carcinoma or localized bronchioloalveolar carcinoma with foci of collapse of alveolar structure. The 5-year survival rate (61.9%) of patients with micrometastasis was significantly (p = 0.0041) lower than that of patients without micrometastasis (86.3%).

Conclusions. There still remains a risk of nodal micrometastasis in patients with primary peripheral lung adenocarcinoma, even if the diameter of the tumor is smaller than 2.0 cm. Selection of patients for limited surgery should be done prudently, taking into consideration the risk of nodal micrometastasis.