两种HBV DNA荧光定量试剂盒检测结果比较

目的 比较两种乙型肝炎病毒(HBV)荧光定量PCR检测试剂盒的临床性能.方法 采用两种HBV荧光定量PCR检测试剂盒对526例临床样本进行检测,比较两种试剂的灵敏度、检测结果的一致性及相关性.结果 两种试剂阳性一致性为97.44%,阴性一致性为95.77%,总一致性为96.77%,两种试剂具有较好的相关性,相关系数r=0.965.结论 HBV一步法试剂具有操作简便、定量准确、灵敏度较高等优点,是一种较好的临床HBV快速定量检测试剂.     

两种国产HBV-DNA荧光定量PCR试剂盒检测结果比较

目的探讨两种国产乙型肝炎病毒(HBV)DNA荧光定量试剂的临床检测结果相互之间是否存在差异。方法 80例慢性乙型肝炎患者标本分别用两种国产HBVDNA荧光定量试剂检测,然后对检测结果进行比较,分析相互之间是否存在差异。结果 A、B两种国产荧光定量试剂的HBVDNA定量检测结果相互之间相差小于一个数量级的占95%,大于一个数量级小于两个数量级的占5%。经统计学分析,差异无统计学意义(P=0.883)。40例A试剂检测完全阴性的标本有6例经B试剂检测为阳性,B试剂检测的阳性率高于A试剂(P=0.034)。结论两种国产试剂对于定量结果大于3次方的标本具有很好的可比性。     

实时荧光定量PCR检测布鲁氏菌核酸DNA的应用评价

目的探讨实时荧光定量PCR检测布鲁氏菌核酸DNA浓度的检测范围和检测健康人全血中核酸DNA的Ct本底值。方法采用试剂盒提取纯菌、健康人和临床患者血液中的核酸DNA,应用实时荧光定量PCR进行检测。结果经检测,40份健康人群血液标本Ct值平均值为37.0,标准差为1.9,Ct值95%置信区间为33.0 ~ 38.8。 将布鲁氏菌核酸DNA标准品倍比稀释（56.2 ng ~ 0.026 5 fg）,实时荧光定量PCR检测灵敏度为6.7 fg。结论实时荧光定量PCR检测纯菌核酸DNA的灵敏度相当于2个基因组DNA拷贝数,但用于检测血液标本尚待进一步研究。     

4种SARS-Cov-2核酸检测试剂盒测定结果分析

目的 比对4种严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)核酸检测试剂盒测定结果,为实验室选择试剂盒和评估试剂盒性能提供参考.方法 收集318例咽拭子标本,提取核酸后,分别用4种SARS-CoV-2核酸检测试剂盒进行检测.结果 4种试剂盒检测结果比对的Kappa值分别为0.741(试剂盒A与B比较)、0.653...     

HIV-1实时荧光定量RT-PCR检测试剂盒的比较实验

目的比较及评价市场上主流的3个进口品牌(A-QIAGEN、B-Applied Biosystems、C-Promega) HIV-1病毒实时荧光定量RT-PCR检测试剂盒的特异性、灵敏度、稳定性及所需反应时间,确定3者中较优的试剂盒,为临床HIV-1病毒的核酸检测提供方法学参考。方法根据3个品牌试剂盒的说明书,对系列稀释的国内HIV-1 RNA标准品和确证的HIV阴性的标本进行相应的荧光定量RT-PCR平行检测分析,最后将荧光收集值(RFU)均设定为100,结合扩增曲线图、Ct值及相应的分析,比较它们的特异性、灵敏度、稳定性及所需反应时间。结果 3种试剂盒的特异性都是100%,但B-Applied Biosystems试剂盒在灵敏度(比A-QIAGEN、C-Promega试剂盒的检出Ct值提前0. 4-1. 5)、稳定性(特别是低浓度(HIV-1 RNA标本浓度为2. 31×102)时)及所需反应时间上均优于A-QIAGEN试剂盒和C-Promega试剂盒。结论不同厂家检测试剂盒的特异性、灵敏度等方面存在一定的差异,导致同样的标本检测的结果会有一定的偏差,甚至漏检。因此,进行临床检测前需要对这些检测试剂盒进行评估。     

2种实时荧光定量PCR仪检测HBV DNA定量结果的可比性分析

目的对罗氏cobas~? z480和ABI 7500 2种荧光定量PCR分析仪测定乙型肝炎病毒核酸(HBV DNA)的结果进行比对和偏移评估。方法根据美国临床和实验室标准化协会(CLSI)EP09-C方案,采用罗氏cobas~? z480(参比系统X)和ABI 7500(待评系统Y)2种荧光定量PCR分析仪分别单次测定40份患者血清样本HBV DNA浓度,极端学生化偏差(extreme studentized deviate,ESD)法对结果进行离群值检验,绘制散点图和偏差图,拟合回归方程,计算各参数的95%置信区间(confidence interval,CI)和医学决定水平处的偏移,以≤±0.4(LOG值)为可接受标准。结果通过ESD法检验发现2个离群值,剔除离群值并补充2份相近浓度样本数据后再分析,未发现离群值。根据偏差图特征分析差值具有恒定SD变化,绘制差值频数柱状图并经单样本K-S检验,差值服从正态分布,采用均值初步估算偏移为0.086,小于可接受标准。经OLR、WLS、Deming、Passing-Baklok(P-B)模型进行回归分析,医学决定水平处的偏移均小于可接受标准。2种荧光定量PCR仪检测结果相关性好(R~2=0.997 8)。结论罗氏cobas~? z480和ABI 7500 2种荧光定量PCR分析仪测定HBV DNA的结果具有可比性。     

两种核酸提取方法对HBV DNA定量检测结果的影响

目的研究磁珠法和煮沸法两种核酸提取方法对血浆乙型肝炎病毒(HBV)DNA定量检测结果的影响。方法采用磁珠法和煮沸法同步处理106例"小三阳"或"大三阳"乙型肝炎患者血浆,通过荧光定量聚合酶链反应(PCR)定量检测,比较两种方法的阳性率、定量检测结果并分析两者的关系。结果 106例乙型肝炎患者血浆经磁珠法和煮沸法处理后的HBV DNA阳性率分别为81.1%和71.7%,其中"小三阳"患者的HBV DNA阳性率分别为76.9%、66.7%,"大三阳"患者的阳性率分别为92.8%、85.7%;磁珠法中HBV DNA荧光定量PCR测得其载量为(3.93±2.43)log10copies/mL,而煮沸法为(3.35±2.76)log10copies/mL,且"小三阳"和"大三阳"患者标本经磁珠法提取均明显高于煮沸法提取的PCR检测结果;上述结果经统计学分析差异均有意义(P0.05);此外,两种核酸提取方法处理条件下的HBV DNA载量呈较好的线性关系(R2=0.869 3,P0.05)。结论磁珠法提取核酸阳性率高,检测灵敏度高,值得实验室推广,可用于临床诊断。     

两种荧光定量法检测HCV RNA结果的比较

目的建立双探针荧光定量HCV RNA检测方法,分析其定量检测HCV RNA的灵敏度和特异性以及HCV RNA含量与患者病情的相关性。方法选取100例抗HCV抗体阳性患者,包括慢性肝炎患者45例、肝硬化患者30例、肝癌患者25例的样本,用双探针荧光定量法和两种商品荧光定量试剂方法进行HCV RNA检测,另观察近期196例抗HCV抗体阳性和48例抗HCV抗体阴性样本荧光定量PCR HCV RNA含量与肝功能的相关关系。结果荧光定量双探针法阳性率为93％（93／100）;两种商品荧光定量试剂方法阳性率分别为84％（84／100）和79％（79／100）,经卡方检验差异有统计学意义（P〈0．05）。196例中抗HCV与HCV RNA阳性一致率为57．1％（116／196）,其中伴肝功能改变49．0％（96／196）。HCV RNA含量与AST和ALT异常程度无显著相关性（P〉0．05）,相关系数分别为0．4293及0．3899。HCV RNA高拷贝数患者肝功能异常率为85．2％（69／81）,低拷贝数者肝功能异常率为40．9％（47／115）,经卡方检验,X^2=38．63,差异有统计学意义（P〈0．001）。结论双探针荧光定量提高了HCV RNA检测的灵敏度和特异性,HCV RNA含量与患者肝功能损伤程度无明显相关性。     

HBV-DNA实时荧光定量PCR检测试剂盒性能验证

目的基于ISO15189:2012要求,对一种国产HBV-DNA实时荧光定量聚合酶链反应检测试剂盒的性能参数进行验证,以评价其是否可应用于临床检测。方法依据《医学实验室质量和能力认可准则》相关文件对试剂盒的正确度、精密度、检测下限、线性范围、特异度和抗干扰能力进行性能验证。结果试剂盒正确度符合要求(靶值对数值±0.4)。低值和高值的批内精密度CV为4%、0.65%,标准差(s)为0.19、0.04;低值和高值的中间精密度CV为4.75%、1.33%,s为0.17、0.09。HBV-DNA定量的检测下限定为100IU/mL。线性范围为1.00×102~5.00×108 IU/mL。特异度符合要求。血红蛋白浓度不大于28g/dL、总胆红素浓度不大于30mg/dL、三酰甘油浓度不大于3 200mg/dL,对检测结果没有影响(靶值对数值±0.4)。结论试剂盒的性能参数符合厂家声明,可以应用于临床检测工作。     

两种核酸提取方法在HCV RNA荧光定量检测中的比较

目的 比较氯仿-异丙醇法和核酸提取柱法在丙型肝炎病毒(HCV)RNA荧光定量检测中的灵敏度、重复性和抗干扰性.方法 分别用两种方法提取核酸后,采用荧光定量PCR技术检测HCV RNA含量,比较两种方法对检测灵敏度、重复性和抗干扰性的影响.结果 两种核酸提取方法的灵敏度相近,但核酸提取柱法的重复性和抗干扰能力明显优于氯仿-异丙醇法.结论 两种核酸提取方法的灵敏度差别不大,基本都能满足临床需要,核酸提取柱法更具优势.     

两种荧光定量PCR 仪检测HBV、HCV核酸结果的一致性

目的 探讨不同荧光定量PCR仪检测肝炎病毒 DNA 及RNA结果的一致性。 方法 参照美国NCCLS EP9-A2文件,以MJ Opticon 2为参比仪器,ABI 7300为实验仪器,检测HBV DNA 及 HCV RNA,分析结果的相关性及预期偏倚,评价两种仪器检测结果的一致性。 结果 MJ Opticon 2 及ABI 7300检测HBV DNA 及 HCV RNA具有良好的相关性 （rHBV=0.995;rHCV=0.993）,预期偏差在可接受范围内。 结论 MJ Opticon 2 及ABI 7300检测结果具有较好的一致性,可用于同时检测HBV DNA或HCV DNA。     

不同核酸提取方法在HBV DNA荧光定量检测中的比较

目的研究不同核酸提取方法在HBVDNA荧光定量检测中的提取效率、重复性、抗干扰性及对扩增试剂的兼容能力。方法运用两种具有不同启动温度的Taq酶的扩增试剂分别扩增经一步法、煮沸法和磁珠法提取HBVDNA强阳性血清的模板,比较不同提取方法对扩增试剂的兼容能力。采用3种方法提取3份HBVDNA含量不同的标本各10次,进行扩增,比较不同方法的提取效率和重复性;对HBVDNA阳性标本用HBVDNA阴性的黄疸血清和溶血液进行10倍稀释后分别用前述方法提取进行干扰试验。结果 3种提取方法中,磁珠法和煮沸法提取的模板对两种扩增试剂具有良好的兼容性;重复性比较以一步法最佳,磁珠法次之,煮沸法较差;提取效率比较以磁珠法最理想,一步法次之,煮沸法最差;对黄疸和溶血的抗干扰能力以磁珠法最佳,溶血对煮沸法有一定影响,在无5-羧基-X-罗丹明(5-ROX)校正的情况下,黄疸对一步法影响较大,有5-ROX校正系统分析则可以消除这种影响。结论磁珠法具有良好的重复性和提取效率,对黄疸和溶血有较强抗干扰能力,对扩增试剂的兼容性好,是一种理想的核酸提取方法;相对而言,一步法快捷且重复性更佳。     

两种降钙素原定量检测试剂盒的比较研究

目的比较马鞍山国声生物技术有限公司研制的降钙素原(PCT)定量检测试剂盒(免疫层析法)与已批准上市的同类产品检测结果的符合率和定量检测的等效性,判断其研制产品是否符合临床使用要求。方法选取2014年3~4月收集的各类临床标本122例,分别用两种方法进行检测,比较两种试剂盒的检测结果。统计软件采用Bland-Altman方法分析、回归分析、组内相关分析及Pearson积距相关分析,分析两种检测方法的一致性。结果 cut off值为0.5ng/mL时,两种试剂盒分析的一致性为99.18%;cut off值为2ng/mL时,两种试剂盒分析的一致性为95.08%。一致性限度值为(0.205 7,0.088 4),小于专业界值±0.5。Pearson相关系数为0.979 5,Spearman相关系数为0.972 1,两种试剂盒的检测结果显著相关(P0.01)。结论两种试剂盒具有等效性。     

两种ENA试剂盒测定6种自身抗体结果比较

检测人血清中存在的ENA六种自身抗体对自身免疫性疾病如系统性红斑性狠疮(SLE)、混合性结缔组织(MTCD)、硬皮病(PSS)、干燥综合症(SS)等风湿病在临床上具有重要的辅助诊断和鉴别诊断价值。因此,ENA自身抗体试剂盒的选择显得尤为重要。我们对同一厂家的两种ENA自身抗体试剂盒进行了比较,从而进一步了解ENA自身抗体试剂盒各自的优势和不足。     

两种HBV DNA荧光定量PCR检测试剂的比较与评价

目的探讨A、B两种乙型肝炎病毒(HBV)DNA荧光定量PCR检测试剂盒检测结果之间的差异及各自临床应用的优缺点。方法分别用两种试剂检测100例覆盖HBV DNA浓度测量区间的5组标本,每组20例,比较各组结果之间的差异;分别用黄疸、脂血、溶血标本做两种试剂的干扰试验,比较两者的抗干扰能力。结果两种试剂检测高、中、低、临界值标本的结果符合率(偏倚在±7.5%以内)分别为95%、80%、55%、30%。20例A试剂检测为阴性的标本中有6例B试剂检测为临界值或低浓度阳性值。B试剂检测结果受高黄疸标本影响较大,A试剂检测结果未受明显干扰。结论采用"一步法"的B试剂检测灵敏度较高,范围宽,操作简便,易标准化,省时省力,临床应用价值高;而A试剂抗干扰性相对较好。     

PCR荧光定量检测乙肝病毒核酸的结果分析

【目的】分析乙肝病毒核酸(HBV-DNA)含量检测的结果及其与乙肝血清标志物检测结果的关系。【方法】用荧光定量PCR和ELISA两种方法检测500份乙肝患者血清,并对其结果进行分析。【结果】500例HBV-DNA定量检测阳性283例,阴性217例;52例HbsAg、HbeAg、HbcAb阳性患者(大三阳)检出HBV-DNA阳性51例,66例HbsAg、HbeAb、HbcAb阳性患者(小三阳)检出HBV-DNA阳性39例。【结论】大小三阳患者也有HBV-DNA阴性的情况,因此联合运用乙肝标志物与HBV-DNA检测有助于乙肝的早期诊断、疗效观察和预后判断。     

斑点核酸杂交和荧光定量聚合酶链反应检测HBV DNA方法比较

目的评价斑点杂交(DH)和荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测乙型肝炎病毒核酸(HBV DNA)的临床应用价值.方法用DH和FQ-PCR分别检测乙型肝炎患者血清239例和健康体检者血清41例的HBV DNA.乙型肝炎血清学标志物用ELISA测定.结果用DH和FQ-PCR检测HBV DNA阳性率分别为HBeAg(+)组78.07%和100%(P<0.01);抗HBe(+)组18.18%和77.27%(P<0.01);HBeAg(-)、抗HBe(-)组11.86%和44.07%(P<0.01).健康体检者两法均为阴性.结论 FQ-PCR对乙型肝炎诊断、传染性的判断和抗病毒药物疗效评价方面比DH更具有临床应用价值.     

斑点核酸杂交和荧光定量聚合酶链反应检测HBV DNA方法比较

目的　评价斑点杂交 (DH)和荧光定量聚合酶链反应 (FQ PCR)检测乙型肝炎病毒核酸 (HBVDNA)的临床应用价值。方法　用DH和FQ PCR分别检测乙型肝炎患者血清 2 39例和健康体检者血清 4 1例的HBVDNA。乙型肝炎血清学标志物用ELISA测定。结果　用DH和FQ PCR检测HBVDNA阳性率分别为 :HBeAg( )组 78.0 7%和 10 0 % (P <0 .0 1) ;抗HBe( )组 18.18%和 77.2 7% (P <0 .0 1) ;HBeAg( )、抗HBe( )组11.86 %和 4 4 .0 7% (P <0 .0 1)。健康体检者两法均为阴性。结论　FQ PCR对乙型肝炎诊断、传染性的判断和抗病毒药物疗效评价方面比DH更具有临床应用价值。