Beagle犬的心电图研究

记录50 头6 ～8 月龄Beagle 犬Ⅱ导联的正常心电图并进行统计分析,结果提示雌性与雄性犬比较,各项指标测量值的差异均无显著性意义(P> 0-05) 。对70 头Beagle 犬进行心电图检测,结果出现窦性心律不齐的比率为11-4 % (8/70) ,T 波异常(T 波倒置和双相T 波) 的比率为14-2 % (10/70) ;对T波异常Beagle 犬进行了心肌酶学指标谷草转氨酶(AST) 、肌酸激酶(CK) 、乳酸脱氢酶(LDH) 测定和心脏组织学观察,并与T波正常的Beagle 犬比较,结果显示二者AST、CK、LDH的差异均无显著性意义(P> 0-05) ,但二者心肌均有不同程度的病理改变。     

Beagle犬上颌骨微钛螺纹钉种植体支抗即刻和早期加载的光镜观察

目的 通过光镜观察不同加载时间及加载力值对微钛螺纹钉种植体-骨结合界面的影响.方法 将90枚微钛螺纹钉种植体(mini screw implant, MSI)分为9组,植入5只Beagle犬的上颌骨.分别于即刻、第2周、第4周、第8周加载100 g或300 g的水平力,对照组不加力.第20周处死动物取材.垂直于种植体长轴方向切片,制成50 μm左右的硬组织切片,苦味酸-品红染色,在光学显微镜下观察种植体-骨结合界面的密合程度并计算种植体-骨结合率.结果 本实验共有9枚MSI松动.其余MSI在光镜下显示与骨组织直接接触,未见纤维组织长入.各组MSI与周围骨组织的平均骨结合率为(45.28±23.89)%.各组间骨结合率差别无统计学意义.结论 在一定骨质及初期稳定性的保证下,在Beagle犬的上颌骨MSI即刻加载300 g以内的水平力是可行的.     

YIGSR五肽及RGD三肽对肝窦内皮细胞窗孔的调节作用

目的　探讨酪氨酸 -异亮氨酸 -甘氨酸 -丝氨酸 -精氨酸 (Tyr- Ile- Gly- Ser- Arg,YIGSR)五肽及精氨酸 -甘氨酸 -天门冬氨酸 (Arg- Gly- Asp,RGD)三肽对肝窦内皮细胞 (SEC)窗孔的影响。方法　用胶原酶原位灌注、Percoll不连续密度梯度离心法分离大鼠的 SEC,并加入包被有 型胶原或层粘连蛋白 (lam inin,L N)基质的盖玻片上培养。采用扫描电镜技术及放免方法 ,分别观察 YIGSR五肽及 RGD三肽对 SEC窗孔数目、大小 ,以及 SEC分泌 型胶原能力的影响。结果　生长在包被 L N的盖玻片上 48小时的 SEC,其窗孔数目及大小均比生长在 型胶原上的 SEC明显降低 (P<0 .0 5 ) ;但同时加入 YIGSR五肽 (5 0 μg/ ml)及 RGD三肽 (5 0 μg/ m l)作用 48小时后 ,SEC窗孔数目及大小均有明显增加 (P<0 .0 5 ) ,同样地 ,经 YIGSR五肽及 RGD三肽作用后 ,生长在 L N上的 SEC分泌 型胶原的能力亦明显下降 (P<0 .0 5 )。结论　 YIGSR五肽及 RGD三肽对 SEC的形态 (如窗孔 )及功能 (如分泌 型胶原 )均有一定调节作用     

经微弧氧化/碱处理并加载RGD肽涂层多孔钛合金支架的制备及其生物学特性

目的 通过3D打印技术打印多孔钛合金支架,研究其表面微弧氧化（MAO）/碱处理并加载精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸（RGD）肽涂层对前成骨细胞生物学行为的影响。 方法 设计并打印3D多孔钛合金支架,对其进行不同表面处理后分为MAO组、MAO/碱处理（MN）组、MAO/碱处理加载RGD肽（MNR）组,另设空白对照组。检测各组多孔钛合金支架的弹性模量,扫描电子显微镜（SEM）观察各组多孔钛合金支架表面微观结构,能谱分析仪（EDS）检测各组多孔钛合金支架表面元素构成,接触角测量仪检测各组多孔钛合金支架表面水滴接触角大小。将小鼠胚胎成骨细胞前体细胞（MC3T3-E1细胞）与各组支架共培养,CCK-8法检测各组多孔钛合金支架表面细胞增殖活性,Live/Dead细胞染色法检测各组多孔钛合金支架的生物相容性,细胞黏附实验观察各组细胞在多孔钛合金支架表面黏附情况,采用碱性磷酸酶（ALP）试剂盒检测各组细胞ALP活性,实时荧光定量PCR（RT-qPCR）法检测各组细胞中Runt相关转录因子2（Runx2）、骨桥素（OPN）和骨钙素（OCN）mRNA表达水平。 结果 3D打印多孔钛合金支架的弹性模量为（1.17±0.62） GPa。SEM观察,MAO处理后的多孔钛合金支架表面呈现火山口样形貌,碱处理后出现细小裂纹并呈现纳米级鱼鳞结构,加载RGD肽涂层的多孔钛合金支架表面观察到散在的RGD颗粒。EDS检测,MNR组支架表面RGD涂层成功加载。接触角测量仪检测,多孔钛合金支架表面接触角MAO组>MN组>MNR组。CCK-8法,培养第1、3和5 天时3组细胞增殖活性均呈增长趋势,培养第3和5 天时各组细胞增殖活性组间比较差异均有统计学意义（P<0.05或P<0.01）。Live/Dead细胞染色,3组支架均具备良好的体外相容性。细胞黏附实验,共培养48 h后,MNR组细胞数量和形态伸展均优于MAO组和MN组。培养第7天时,与MAO组比较,MNR组细胞ALP活性明显升高（P<0.01）,培养第14天时3组细胞ALP活性组间两两比较差异均有统计学意义（P<0.05或P<0.01）。RT-qPCR法检测,培养第7天时,与空白对照组和MAO组比较,MN组和MNR组细胞中Runx2和OPN mRNA表达水平均明显升高（P<0.01）,MNR组细胞中OCN mRNA表达水平明显升高（P<0.05）;培养第14天时,MAO组、MN组和MNR组细胞中Runx2和OPN mRNA表达水平组间两两比较差异均有统计学意义（P<0.05或P<0.01）,与空白对照组比较,MAO组、MN组和MNR组细胞中OCN mRNA表达水平均明显升高（P<0.01）。 结论 3D打印多孔钛合金支架具有与人体骨组织匹配的弹性模量,支架表面MAO/碱处理并加载RGD肽涂层对MC3T3-E1细胞无毒性且对其成骨分化有促进作用。     

nrhTNF 对Beagle犬长期毒性的试验

0 引言随着分子生物学技术的发展,人肿瘤坏死因子(Human Tumor Necrosis Factor,hTNF)的氨基酸序列已搞清,并克隆出其编码的cDNA,可大量制备TNF用于癌症治疗. 天然TNF(基因重组人TNF, rhTNF)可产生较多的副作用如肝脏损伤,肠道组织坏死性改变和发热等[1],妨碍了其临床应用.对天然TNF的基因改造后获得新型基因重组人TNF(nrhTNF)[2].     

静脉注射三乙醇胺对Beagle犬的病理性损伤作用

目的 观察静脉注射三乙醇胺后Beagle犬的组织病理学改变及其可逆性。方法 Beagle犬12只,分为对照组和150 mg/kg剂量组,连续给药30 d和恢复4周后,分别进行大体解剖和组织病理学检查。结果 连续给药30 d,Beagle犬出现肝细胞变性、坏死,及肝窦扩张,网状纤维蛋白样物质沉积;肾脏髓质和皮髓交界处肾小管上皮细胞变性;脾脏、淋巴结和肠黏膜相关淋巴组织内淋巴滤泡数量增多,生发中心增大,脾小体帽区局灶性坏死,其中雌性动物肝脏、脾脏病变程度较雄性严重。经过4周恢复,肝脏、脾脏、肾脏、淋巴结、肠黏膜相关淋巴组织病变恢复不明显。结论 静脉注射一定剂量的三乙醇胺,可能对肝脏、肾脏、脾脏、淋巴结以及肠黏膜相关淋巴组织有一定的损伤作用。     

静脉注射三乙醇胺对Beagle犬的病理性损伤作用

目的 观察静脉注射三乙醇胺后Beagle犬的组织病理学改变及其可逆性。方法 Beagle犬12只,分为对照组和150 mg/kg剂量组,连续给药30 d和恢复4周后,分别进行大体解剖和组织病理学检查。结果 连续给药30 d,Beagle犬出现肝细胞变性、坏死,及肝窦扩张,网状纤维蛋白样物质沉积;肾脏髓质和皮髓交界处肾小管上皮细胞变性;脾脏、淋巴结和肠黏膜相关淋巴组织内淋巴滤泡数量增多,生发中心增大,脾小体帽区局灶性坏死,其中雌性动物肝脏、脾脏病变程度较雄性严重。经过4周恢复,肝脏、脾脏、肾脏、淋巴结、肠黏膜相关淋巴组织病变恢复不明显。结论 静脉注射一定剂量的三乙醇胺,可能对肝脏、肾脏、脾脏、淋巴结以及肠黏膜相关淋巴组织有一定的损伤作用。     

Beagle犬动眼神经损伤模型的建立

目的 建立具有良好可行性及可重复性的Beagle犬动眼神经损伤模型。方法 10只雌性Beagle犬常规开颅暴露动眼神经海绵窦后段,将动眼神经锐性切断,再予直接端——端吻合。结果 全部实验步骤均能被Beagle犬耐受,幕下段动眼神经暴露充分,神经损伤后可予直接缝合。结论 Beagle犬动眼神经损伤动模型已经建立,并具有良好可重复性,可进一步用于动眼神经损伤后功能修复的研究。     

微螺钉种植体支抗感染后骨界面的组织学变化

目的：观察在1.96N水平力作用下感染微螺钉种植体-骨界面的组织学变化。方法：健康雄性杂种犬4只,在犬的双侧上颌尖牙近远中、第二双尖牙近远中颊侧骨板各植入微螺钉种植体1枚,共32枚。种植体颈部缠绕正畸橡皮圈及4-0缝合线以诱导炎症。选左侧为实验组,右侧为对照组。实验组用镍钛拉簧在2种植体间即刻施加1.96N的水平力,对照组不加力。分别于种植体植入后1、2、4和8周处死动物。采用HE染色法观察种植体-骨界面的组织学变化。结果：观察期内实验组2枚种植体松动,未脱落。1周时种植体周围牙龈黏膜组织均出现明显的红、肿等炎性反应。实验组1周时种植体出现大量的急慢性炎症细胞,毛细血管增生扩张,有少许新生纤维组织,越接近尖部炎性反应越轻;2周时中部压力侧骨质连续性破坏;4周时颈部见少量骨质破坏,同时有片状的新生骨形成;8周时颈部骨质破坏吸收,中部压力侧见纤维增生,排列杂乱。对照组骨质破坏较实验组轻。结论：微螺钉种植体在感染状态下,骨质的吸收由颈部向尖部进行;加力较不加力对骨质破坏严重。     

RGD多肽仿生修饰微种植体支抗骨界面结合强度的实验研究

目的:探讨即刻负载条件下,RGD多肽涂层对微型支抗种植体-骨界面结合强度的影响。方法:选择28只新西兰大白兔,左侧胫骨平行植入2枚附着RGD多肽涂层微支抗种植体,右侧为2枚未经RGD多肽涂层附着处理的对照组。根据种植体即刻负载力值的不同,分为200 g、400 g。种植后1周、2周、4周、8周分别处死两组实验对象,通过推出实验测试种植体与骨界面的结合强度。结果:在200 g、400 g力加载中RGD多肽仿生修饰组与对照组进行比较,术后第4、8周时,RGD多肽仿生修饰组骨的力学结合强度高于对照组的结合强度,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:RGD多肽仿生修饰微支抗种植体能够加强微种植体与骨组织的结合强度。     

低强度脉冲超声波对Beagle犬牙周炎组织修复效应的初步研究

目的探讨低强度脉冲超声波(LIPUS)对Beagle犬牙周炎组织的初步修复效应。方法采用牙槽骨缺损联合弹性结方法制备慢性牙周炎的Beagle犬动物模型,在相同常规治疗基础上选用LIPUS不同强度(50mW/cm2、100mW/cm2)脉冲波和50mW/cm2连续波治疗(频率1.5MHz、调制信号波宽200μs、重复率1kHz),共治疗8周(1次/d,20min/次),并进行牙周临床指标检测与组织学切片检查。结果 LIPUS治疗8周后,治疗组牙龈组织肿胀减轻,菌斑指数(PLI)、牙龈指数(GI)、牙周探针深度(PD)均较对照组低(P<0.05),未发现明显的牙龈退缩、附着丧失和根分叉病变等;组织学切片检查发现LIPUS治疗组牙龈组织黏膜上皮增生不明显,有丰富的胶原纤维生成,牙槽骨组织中骨吸收陷窝减少,成骨细胞较活跃地排列在新骨周围。结论 LIPUS具有潜在的牙周炎组织修复效应,应进一步考虑LIPUS在引导组织再生术(GTR)治疗中的辅助修复效应。     

Beagle犬异氟醚组织/气分配系数测定

目的测定Beagle犬异氟醚不同组织/气分配系数。方法选择健康成年Beagle犬4只,雌雄各半。在氯胺酮基础麻醉下,经股动脉放血处死后,分别取其部分心、肝、肾、脑、肌肉及腹腔脂肪组织并制成匀浆。采用注射器顶空2次平衡法,首先经气相色谱仪测定异氟醚组织匀浆/气分配系数,再根据容积比分配系数而获得异氟醚各组织/气分配系数。结果在37℃条件下,Beagle犬异氟醚脂肪/气分配系数(53.21±2.55)与所测得的其它各组织/气分配系数相比,有显著性差异(P<0.01);而心(2.11±0.43)、肝(1.98±0.27)、肾(1.76±0.19)、脑(2.02±0.08)和肌肉(2.11±0.42)的异氟醚组织/气分配系数间无显著性差异(P>0.05)。结论在所测定的Beagle犬异氟醚各组织/气分配系数中,以脂肪/气分配系数为最大。     

比格犬埃立克体人工感染的病理学观察

目的观察比格犬人工感染埃立克体后的病理学变化。方法用常规病理学方法,对6只人工感染埃立克体的比格犬进行病理解剖学和病理组织学观察。结果剖检见主要器官和皮下出血、淤血,脾、肝肿胀;病理组织学变化的主要特征是淋巴结的严重水肿,脾、肝、肺和肾的血管内及肝血管周围存在浆细胞和淋巴细胞灶性增生,皮肤表皮层变薄、皮肤皮脂腺腺泡上皮和毛囊变性坏死。结论比格犬人工感染埃立克体后剖检和病理组织学变化与文献基本吻合,但剖检病变更为明显,这可能与中国病原株的致病性不同有关。     

丹红注射液对Beagle犬的13周亚慢性毒性试验

目的研究Beagle犬连续静脉注射给予丹红注射液13周后所产生的亚慢性毒性作用。方法选取Beagle犬24只,分为4组,连续静脉给药13周,以体重、血液生化学、血液学、脏器重量、组织病理学检查为检测指标,综合评价丹红注射液对Beagle犬的毒性作用。结果丹红注射液494 mg/kg组Beagle犬体重增长明显延缓,肾功能指标(BUN、CR)明显增加,组织病理学检查表明肝脏枯否细胞增生。结论丹红注射液494 mg/kg剂量下连续静脉注射13周可致Beagle犬产生明显的肾脏和肝脏毒性。     

自发性肝硬化比格犬肝脏病理形态学研究

目的研究自发性肝硬化比格犬肝脏的病理形态学改变和血清生化改变,以建立适用于GLP的实验动物背景资料。方法下肢静脉采血制备血清,全自动生化分析仪测ALT、AST、TP、ALB、ALP、TBIL、TC、TG、GGT等肝功能指标,比较患病动物与同期空白对照组动物上述指标的差异;对比格犬肝脏进行组织病理学检查,光学显微镜下描述其病理形态学特点。结果与同期空白对照组动物相比,患病动物ALT、AST、ALP、TBIL、GGT显著升高,ALB显著降低;与正常组织相比,肝硬化的肝细胞呈结节状再生、排列紊乱,形成数量不等的假小叶,假小叶周围被增生的胶原纤维所包裹。结论需加强比格犬自发病变的病理监测,为药物安全性评价提供实验动物的背景资料。     

毕格犬血液精氨酸加压素等应激相关激素在前庭功能锻炼后的改变

目的:观察毕格犬接受旋转刺激后血液应激相关激素的变化及前庭功能锻炼的影响,探讨应激相关激素与运动病的关系。方法:选取运动病敏感的8只毕格犬,进行旋转刺激,诱发运动病,测定呕吐潜伏期。用放射免疫分析法测定血浆精氨酸加压素(AVP)、肾上腺素与去甲肾上腺素水平,观察旋转刺激前后的变化。接着前庭功能锻炼3个月后,观察呕吐潜伏期的变化,并测定旋转刺激前后相应的激素水平。结果:(1)毕格犬经前庭功能锻炼后,旋转刺激引起的呕吐潜伏期显著延长;潜伏期为8.38±2.03min,功能锻炼后延长至27.75±2.25min(P<0.01)。(2)前庭功能锻炼前旋转刺激前血浆AVP水平为9.34±1.24pg/mL,旋转刺激后16.14±1.20pg/mL;前庭功能锻炼后旋转刺激前血浆AVP水平为14.12±1.51pg/mL,旋转刺激后13.61±1.28pg/mL。前庭功能锻炼前,旋转刺激引起血浆AVP水平提高(P<0.05),前庭功能锻炼后,血浆AVP的基础水平升高(P<0.05),但对旋转刺激的反应明显减弱。(3)前庭功能锻炼前旋转刺激前血浆肾上腺素水平为2.31±0.08ng/mL,旋转刺激后2.42±0.11ng/mL,去甲肾上腺素水平为99.15±4.75pg/mL,旋转刺激后108.07±4.53pg/mL;前庭功能锻炼后旋转刺激前血浆肾上腺素水平为2.32±0.07ng/mL,旋转刺激后2.51±0.14ng/mL,去甲肾上腺素水平为97.45±4.58pg/mL,旋转刺激后105.35±4.14pg/mL。旋转刺激及前庭功能锻炼对血浆肾上腺素与去甲肾上腺素水平的改变,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:(1)毕格犬进行前庭功能锻炼可引起机体适应,抑制运动病;(2)前庭功能锻炼能提高血浆AVP基础水平,减弱对运动病诱发刺激的反应。     

同种异体Beagle犬肾移植模型的建立

通过建立一种可靠简便的Beagle犬肾移植模型,观察了伪手术组与模型组犬肾移植术后血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)和一般情况变化。发现Beagle犬肾移植模型稳定;Beagle犬经肾移植术后第3天起,血清Scr和BUN迅速升高,Scr从术前61.1±1 3.5 μ mol／L上升到术后1153.9±124.4μmol／L,BUN从术前3.6 8±0.62 mmol／L到术后24.23±7.17 mmol／L,而伪手术组的Scr和BUN则一直稳定维持;一般情况观察和移植肾外观形态检查均发现典型的急性排斥反应表现。因此,该模型制作简便、可靠,稳定性高,可用于移植免疫学研究和免疫抑制剂药物的筛选。     

比格犬垂体囊肿的组织形态学研究

目的研究比格犬垂体囊肿自发性病变的发生情况,以建立适用于GLP的实验动物背景资料。方法采用常规组织学方法,对60只8～10月龄实验对照组比格犬垂体进行组织病理学检查,光学显微镜下描述垂体囊肿的组织形态学特点并统计其发生率。结果囊肿多出现在垂体的远侧部,囊壁由一层扁平或立方状上皮构成,囊腔内可见黏液状物;囊肿总体发生率为23.3%,其中雌性为13.3%,雄性为33.3%。结论应加强比格犬自发病变的病理监测,为药物安全性评价提供实验动物的背景资料。     

谷胱甘肽及其构成氨基酸在犬经口、静注给药的药代动力学

目的　主要研究谷胱甘肽（ＧＳＨ）口服后的吸收情况。方法　Ｂｅａｇｌｅ犬５只，先后分别经口、静注给予ＧＳＨ及其构成氨基酸后，用ＨＰＬＣ法测定血中浓度。结果　在清醒犬，单剂量（３．８９、１．６２ｍｍｏｌ／ｋｇ）一次或单剂量（０．４９ｍｍｏｌ／ｋｇ）连续５、１０ｄ经口给ＧＳＨ后，犬前肢静脉血浆中ＧＳＨ、甘氨酸明显升高（Ｐ＜０．０５～０．０１）；如上单次给予１．６２ｍｍｏｌ／ｋｇ（等于ＧＳＨ分子中含有的摩尔数）构成氨基酸后，血浆中的ＧＳＨ水平未见变化，但构成氨基酸均显著增加（Ｐ＜０．０１）；在麻醉犬，经口给ＧＳＨ１．６２ｍｍｏｌ／ｋｇ后，１～６ｈ内肠系膜静脉血浆ＧＳＨ水平高于前肢静脉（Ｐ＜０．０５～０．０１）；清醒犬ｉｖＧＳＨ０．０６５ｍｍｏｌ／ｋｇ后静脉血浆中ＧＳＨ的Ｋｅｌ１和Ｔ１／２α分别为８．０４ｈ－１和０．０９ｈ，且在降至基值后又出现一个再分布的小峰。结论　ＧＳＨ经口给药后部分可以整分子吸收，经肝脏后血浆中ＧＳＨ浓度明显下降，可能是由于肝脏的摄取所致。