益气解毒颗粒对大鼠鼻咽癌变中端粒酶和端粒酶RNA表达的影响

OBJECTIVE: Telomerase activation is a common event in malignant transformation, and is associated with tumorigenesis. This has been clarified in nasopharyngeal carcinoma. YIQIJIEDU powder (Chinese traditional medicine) is used to treated the patients with nasopharyngeal carcinoma (NPC) after radio-therapy and patients with precancerous lesion of NPC. We investigated whether YIQIJIEDU powder inhibits the telomerase activity in nasopharyngeal carcinogenesis. METHODS: Nasopharyngeal carcinomas in rats were induced by N, N' Dinitrosopiperazine (DNP), and some of them were treated with YIQIJIEDU powder. Telomerase and telomerase RNA in the rats' nasopharyngeal tissue were assayed by using PCR-ELISSA and Nested-PCR, and were pathologically diagnosed. RESULTS: YIQIJIEDU powder could inhibit telomerase activity and nasopharyngeal carcinogenesis in the nasopharyngeal tissue of the rats treated, but no telomerase RNA. CONCLUSION: The findings suggest that the anticancer effect of YIQIJIEDU powder links with their inhibitory effects on telomerase.     

益气解毒颗粒对二亚硝基哌嗪诱导人胚鼻咽上皮细胞转化的阻抑作用

目的 :探讨中药复方益气解毒颗粒对人胚鼻咽上皮细胞转化的阻抑作用。方法 :二亚硝基哌 (DNP)诱导人胚鼻咽上皮细胞转化 ,同时用益气解毒颗粒作用于DNP诱导的鼻咽上皮细胞 ,共同培养 ,然后收集不同代数细胞 ,酶连免疫聚合酶链反应 (PCR -ELISA)和巢式聚合酶链反应 (Nested -RT -PCR)法检测实验细胞端粒酶活性和端粒酶RNA的表达。结果 :加益气解毒颗粒药液组鼻咽细胞形态明显好于盐水对照组 ,其端粒酶活性 (0 34± 0 19)也明显低于对照组 (0 73± 0 2 7) (P <0 0 5 )。结论 :益气解毒颗粒能够抑制鼻咽上皮细胞端粒酶的激活 ,进而阻断DNP诱导的细胞转化。     

益气解毒片对鼻咽癌细胞端粒酶和端粒酶RNA抑制作用的实验研究

为研究益气解毒片对鼻咽癌细胞端粒酶和端粒酶RNA的影响,先用MTT法检测其杀伤鼻咽癌细胞(HNE1)的半抑制浓度(IC50),再用10×IC50、1×IC50、0.5×IC50作用HNE1 12 h、24 h、48 h、72 h、96 h,然后检测HNE1端粒酶(Telomerase)活性和端粒酶RNA的表达.结果:10×IC50作用HNE1 24 h,端粒酶活性下降为阴性,同时端粒酶RNA的表达受到抑制;1×IC50作用后,端粒酶活性稍有下调,但端粒酶RNA表达无明显改变;0.1×IC50作用后,端粒酶活性没有明显变化,但低于白空对照组.这提示较高浓度益气解毒片在体外能抑制端粒酶的活性和端粒酶RNA表达,可能通过对鼻咽癌细胞及其端粒酶的活性抑制而发挥抑瘤效应.     

乳癌组织中端粒酶活性与端粒酶RNA的表达

目的:分析乳癌组织中端粒酶(telomerase)活性和端粒酶mRNA(hTR)的表达.方法:采用PCR-TRAP-ELISA法对54例乳癌、配对癌旁及30例乳腺良性病变组织中端粒酶活性进行半定量检测,运用原位杂交方法检测hTR的表达.结果:癌组织中端粒酶活性及hTR表达率高于癌旁及良性病变组织(P＜0.01).乳癌组织中端粒酶活性的表达与患者年龄、肿块大小、分化程度无关(P＞0.05),但与组织学类型及淋巴结转移关系密切(P＜0.05).结论:端粒酶激活与乳癌的发生关系密切.     

中药益气解毒颗粒下调端粒酶活性抑制鼻咽癌细胞的生长

目的研究益气解毒颗粒对鼻咽癌细胞端粒酶(Telomerase)活性的影响。方法先用MTT法检测益气解毒颗粒杀伤鼻咽癌细胞系(HNE1)的半抑制浓度(IC50),再用10×IC50,1×IC50,0.5×IC50作用HNE1 12,24,48,72和96 h,然后检测HNE1端粒酶活性;将HNE1接种至BABL/C裸鼠,制备鼻咽癌细胞系裸鼠移植瘤,灌喂中药益气解毒颗粒药液,观察其在体内对鼻咽癌细胞端粒酶活性的影响。结果益气解毒颗粒体外杀伤鼻咽癌细胞的IC50为6.625 mg/mL,10×IC50作用HNE1端粒酶活性下降为阴性(<0.20);1×IC50作用后,端粒酶活性(0.47±0.11)稍有下调,0.1×IC50作用后,端粒酶活性(0.78±0.17),低于空白对照组(1.20±0.23)。灌喂益气解毒颗粒组移植瘤生长受到明显的抑制,抑瘤率为(83.20±7.56)%,端粒酶活性为(0.37±0.10),明显低于对照组(0.89±0.27)。结论益气解毒颗粒在体外和体内均能抑制端粒酶的活性,可能是通过对鼻咽癌细胞端粒酶的活性抑制而发挥抑瘤效应。     

益气解毒方对大鼠鼻咽癌变过程中细胞凋亡和增殖的干预

目的探讨益气解毒方对大鼠鼻咽癌变过程中细胞凋亡和增殖的干预作用。方法用二亚硝基哌嗪（DNP）诱导大鼠诱发鼻咽癌变模型,益气解毒方进行干预治疗。定期分批处死大鼠,取鼻咽组织做病理检测,TUNEL法检测细胞凋亡活性,免疫组织化学SABC法检测PCNA蛋白活性表达。结果益气解毒方组大鼠鼻咽上皮组织的癌变率为0％,明显低于生理盐水模型组（86．3％）;维甲酸阳性对照组大鼠的癌变率为0％,但该组所有动物均于实验周期的第250-,310天间逐渐死亡。在诱发性鼻咽上皮细胞癌变进程中的单纯性增生阶段,大鼠鼻咽上皮细胞凋亡活性和PCNA蛋白表达活性组问差异均无统计学意义（P〉0．05）;在异型增生阶段,益气解毒方组鼻咽上皮细胞凋亡活性明显高于模型组,差异具有统计学意义（P〈0．05）,PCNA蛋白表达活性则显著低于模型组,差异具有硫计学意义（P〈0．05）。结论益气解毒方能有效阻逆大鼠鼻咽上皮细胞癌变进程,其作用与其有效诱导细胞凋亡、抑制细胞增殖活性有关。     

鼻咽解毒颗粒对鼻咽癌放疗反应及疗效的研究

目的：观察鼻咽解毒颗粒对初治鼻咽癌急性放射反应和疗效。方法：2017年10月至2021年12月,120例无远处转移的初治鼻咽癌,根据分期和NCCN指南,分层治疗,随机分为两组。对照组：放疗期间未口服鼻咽解毒颗粒;研究组：放疗期间口服鼻咽解毒颗粒,20 g,每天三次。观察急性放射反应,比较临床疗效。结果：两组患者急性放射性口腔黏膜炎、口干有统计学差异（P<0.05）。1、2、3年局部区域控制率、无远处转移率、总生存率无统计学差异（P>0.05）。结论：初治鼻咽癌放疗期间口服鼻咽解毒颗粒,减轻了急性放射性口腔黏膜炎、口干等症状,降低了鼻咽周围正常组织的放射性损伤,但没有明显提高临床疗效。     

人乳腺癌中端粒酶结构表达的研究

目的研究人端粒酶逆转录酶(hTERT)、人端粒酶RNA亚基(hTR)和预后指标包括肿瘤的大小、分级、结节状态和患者年龄间的联系。方法RT-PCR检测92例人乳腺恶性肿瘤和10例良性肿瘤的hTERT和hTR的表达。结果hTR和hTERT的表达分别为62例(67.4%)和76例(82.6%),与<40岁的人群比较,>40岁的人群hTR表达更显著,良性肿瘤中没有1例表达hTR,6例表达hTERT。hTR和hTERT的表达与肿瘤的分级、分期、淋巴结转移和病理分型呈显著相关,与肿瘤大小没有相关性,在76例hTERT阳性的患者中,均有不同程度的hTR表达阴性,在hTR阳性的患者中没有hTERT阴性。结论hTERT和hTR的表达同乳腺癌具有相关性;hTR比hTERT更能反映乳腺癌的发生情况。     

益气解毒颗粒配合放射治疗鼻咽癌的临床研究

目的观察益气解毒颗粒配合放射治疗鼻咽癌的临床疗效。方法应用益气解毒颗粒配合放射治疗鼻咽癌35例，并选择纯放射治疗的35例作为对照组，进行临床疗效、急性毒副反应及细胞免疫功能对比观察和治疗后随访。结果①治疗组鼻咽部及颈部肿瘤消退率显著优于对照组（P〈0．05）；②治疗组鼻咽癌及颈肿瘤消退时的放射治疗剂量（简称肿瘤消退剂量）明显低于对照组（P〈0．05）；⑧治疗组急性毒副反应明显低于对照组（P〈0．05）；④治疗组放疗后T淋巴细胞亚群无显著变化，而对照组CD3、CD4、CD8水平放疗后显著降低，与放疗前比较差异有显著性（P〈0．05）；（9治疗组3年生存率明显优于对照组（P〈0．05）。结论中药益气解毒颗粒配合放射治疗鼻咽癌可以降低肿瘤消退剂量，具有放射增敏效果，减轻放疗副反应，改善机体细胞免疫功能，提高远期生存率。     

Expression of telomerase and its RNA in nasopharyngeal carcinoma

Ｔｅｌｏｍｅｒａｓｅ ,ａｒｉｂｏｎｕｃｌｅｏｐｒｏｔｅｉｎｔｈａｔｐａｒｔｉｃｉｐａｔｅｓｉｎｔｈｅｍａｉｎｔｅｎａｎｃｅｏｆｔｅｌｏｍｅｒｅｌｅｎｇｔｈ ,ｈａｓｂｅｅｎｆｏｕｎｄｃｌｏｓｅｌｙｒｅｌａｔｅｄｔｏｔｈｅｃｅｌｌｉｍｍｏｒｔａｌｉｔｙａｎｄｍａｌｉｇｎａｎｃｙ Ｒｅｃｅｎｔｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅｒｅｉｓａｈｉｇｈａｃｔｉｖｉｔｙｏｆｔｅｌｏｍｅｒａｓｅｉｎｍｏｓｔｈｕｍａｎｃａｎｃｅｒｓａｓｗｅｌｌａｓｉｎｉｍｍｏｒｔａｌａｎｄｔｕｍｏｒｃｅｌｌｌｉ…     

端粒酶RNA反义寡核苷酸对鼻咽癌HNE-1细胞生长的影响

目的检测针对端粒酶RNA的反义寡核苷酸对鼻咽癌HNE-1细胞株生长的影响。方法用PCR—ELISA法检测细胞内端粒酶活性。采用MTT法及平板集落形成实验评价细胞增殖活性。采用电镜观察细胞超微结构的改变。结果端粒酶RNA反义寡核苷酸作用HNE-1细胞后,细胞端粒酶活性受到明显抑制;细胞增殖受到明显抑制,此作用有剂量、时间依赖性和序列特异性;电镜发现少量细胞肿胀坏死,但未见细胞凋亡和大片坏死灶。结论端粒酶RNA反义寡核苷酸可抑制鼻咽癌HNE-1细胞的生长。     

反义寡核苷酸抑制端粒酶活性对鼻咽癌细胞增殖的影响

目的：检测针对端粒酶的反义寡核苷酸(AS-ODN)对鼻咽癌HNE-1细胞株增殖的影响。方法：用PCR-ELISA法检测细胞内端粒酶活性。采用MTT法及平板集落形成实验评价细胞增殖活性。结果：鼻咽癌细胞株HNE-1与5μmol/L，20μmol/L反义寡核苷酸共同孵1d，对其细胞内端粒酶活性抑制率分别为32.9％、61.6％。而同浓度正义寡核苷酸(S-ODN)对细胞端粒酶活性无抑制作用。5μmol/L、20μmol/L反义寡核苷酸与HNE-1细胞共同孵育2d，对细胞增殖的抑制率分别为34.4％，72.9％，同浓度正义寡核苷酸的抑制率为14.4％、15.6％。20μmol/L反义寡核苷酸和20μmol/L正义寡核苷酸对细胞克隆形成能力的抑制率分别为78.39％、23.37％。结论：该反义寡核苷酸可抑制鼻咽癌细胞端粒酶活性，此作用有序列特异性和浓度依赖性。该反义寡核苷酸明显抑制了鼻咽癌细胞HNE-1的增殖，此作用有剂量、时间依赖性和序列特异性。     

反义寡核苷酸对鼻咽癌细胞端粒酶活性的抑制

目的：检测针对端粒酶的反义寡核苷酸（AS－ODN）对鼻咽癌HNE－1细胞株端粒酶活性的影响。方法：用PCR－ELISA法检测细胞内端粒酶活性。结果：鼻咽癌细胞株HNE－1与5μmol/L，20μmol/L反义寡核苷酸共同孵育1d，对其端粒酶活性抑制率分别为32．9％，61．6％。而同浓度正义寡核苷酸（S－ODNA）对细胞端粒酶活性无抑制作用。结论：该反义寡核苷酸可抑制鼻咽癌细胞端粒酶活性，此作用有序列特异性和浓度依赖性。     

HTR反义寡核苷酸抑制鼻咽癌细胞生长及对其致瘤能力的影响

目的:研究针对端粒酶RNA(Human telomerase RNA,HTR)的反义寡核苷酸(Antisense oligodeoxynucleotide,ASODN)抑制鼻咽癌HNE-1细胞株生长及对其致瘤能力的影响.方法:PCR-ELISA法检测细胞内端粒酶活性.MTT法及平板集落形成实验评价细胞增殖活性.电镜观察细胞超微结构的改变.将经AS-ODN处理的HNE-1细胞接种于裸鼠皮下,观察其致瘤情况.结果:HTR反义寡核苷酸作用HNE-1细胞后,细胞端粒酶活性受到明显抑制;细胞增殖受到明显抑制,此作用有剂量、时间依赖性和序列特异性;电镜发现少量细胞肿胀坏死,但未见细胞凋亡和大片坏死灶.AS-ODN降低了HNE-1细胞的致瘤能力,裸鼠成瘤时间延长,肿瘤生长速度变慢.结论:HTR反义寡核苷酸可通过抑制鼻咽癌HNE-1细胞端粒酶活性而抑制细胞的生长,并抑制其对裸鼠的致瘤能力.     

端粒酶的义寡核苷酸抑制肺癌细胞端粒酶活性的研究

目的探讨端粒粒酶反义寡核苷酸对肺癌细胞端粒酶活性的抑制作用.方法脂质体介导的端粒酶反义寡核苷酸转染A549肺腺癌细胞株,采用TRAP-PCR-ELIsA法半定量检测转染后肺腺癌细胞端粒酶活性,观察它们的变化结果端粒酶反义寡核苷酸转染A549细胞72h后,A549细胞端粒酶活性明显下调.结论端粒酶反义寡核苷酸可以有效抑制肺腺癌细胞端粒酶活性.     

Expression of telomerase activity， telomerase RNA component and telomerase catalytic subunit gene in lung cancer

目的：探讨hTR、hTERT与端粒酶活性的表达是否与肺癌的发生发展有关,深入了解端粒酶基因对端粒酶活性的调控是在基因水平还是在转录水平。方法：采用TRAP-PCR和RT-PCR方法分别检测68例肺癌组织、68例癌旁组织端粒酶活性、端粒酶基因hTR和hTERT的表达。结果：68例肺癌组织中端粒酶阳性率79%,HTR阳性率为98.5％,HTERT阳性率为91.2%。68例癌旁组织中,无一例表达端粒酶阳性,且大多数癌旁组织均表达HTR(91.2%),而HTERT在68例癌旁组织中仅7例为阳性。结论：肺癌组织中表达高频率的端粒酶活性而癌旁组织无一例表达端粒酶阳性说明了端粒酶的活性是肺癌发生发展所必须的。与HTR相比,HTERT同端粒酶具有更市制一致性,其一致率为88.9％。HTR与HTERT可能是在转录后或翻译水平对端粒酶进行调控的。