益气解毒颗粒对二亚硝基哌嗪诱导人胚鼻咽上皮细胞转化的阻抑作用

目的 :探讨中药复方益气解毒颗粒对人胚鼻咽上皮细胞转化的阻抑作用。方法 :二亚硝基哌 (DNP)诱导人胚鼻咽上皮细胞转化 ,同时用益气解毒颗粒作用于DNP诱导的鼻咽上皮细胞 ,共同培养 ,然后收集不同代数细胞 ,酶连免疫聚合酶链反应 (PCR -ELISA)和巢式聚合酶链反应 (Nested -RT -PCR)法检测实验细胞端粒酶活性和端粒酶RNA的表达。结果 :加益气解毒颗粒药液组鼻咽细胞形态明显好于盐水对照组 ,其端粒酶活性 (0 34± 0 19)也明显低于对照组 (0 73± 0 2 7) (P <0 0 5 )。结论 :益气解毒颗粒能够抑制鼻咽上皮细胞端粒酶的激活 ,进而阻断DNP诱导的细胞转化。     

中药益气解毒颗粒下调端粒酶活性抑制鼻咽癌细胞的生长

目的研究益气解毒颗粒对鼻咽癌细胞端粒酶(Telomerase)活性的影响。方法先用MTT法检测益气解毒颗粒杀伤鼻咽癌细胞系(HNE1)的半抑制浓度(IC50),再用10×IC50,1×IC50,0.5×IC50作用HNE1 12,24,48,72和96 h,然后检测HNE1端粒酶活性;将HNE1接种至BABL/C裸鼠,制备鼻咽癌细胞系裸鼠移植瘤,灌喂中药益气解毒颗粒药液,观察其在体内对鼻咽癌细胞端粒酶活性的影响。结果益气解毒颗粒体外杀伤鼻咽癌细胞的IC50为6.625 mg/mL,10×IC50作用HNE1端粒酶活性下降为阴性(<0.20);1×IC50作用后,端粒酶活性(0.47±0.11)稍有下调,0.1×IC50作用后,端粒酶活性(0.78±0.17),低于空白对照组(1.20±0.23)。灌喂益气解毒颗粒组移植瘤生长受到明显的抑制,抑瘤率为(83.20±7.56)%,端粒酶活性为(0.37±0.10),明显低于对照组(0.89±0.27)。结论益气解毒颗粒在体外和体内均能抑制端粒酶的活性,可能是通过对鼻咽癌细胞端粒酶的活性抑制而发挥抑瘤效应。     

益气解毒片对鼻咽癌细胞端粒酶和端粒酶RNA抑制作用的实验研究

为研究益气解毒片对鼻咽癌细胞端粒酶和端粒酶RNA的影响,先用MTT法检测其杀伤鼻咽癌细胞(HNE1)的半抑制浓度(IC50),再用10×IC50、1×IC50、0.5×IC50作用HNE1 12 h、24 h、48 h、72 h、96 h,然后检测HNE1端粒酶(Telomerase)活性和端粒酶RNA的表达.结果:10×IC50作用HNE1 24 h,端粒酶活性下降为阴性,同时端粒酶RNA的表达受到抑制;1×IC50作用后,端粒酶活性稍有下调,但端粒酶RNA表达无明显改变;0.1×IC50作用后,端粒酶活性没有明显变化,但低于白空对照组.这提示较高浓度益气解毒片在体外能抑制端粒酶的活性和端粒酶RNA表达,可能通过对鼻咽癌细胞及其端粒酶的活性抑制而发挥抑瘤效应.     

益气解毒方对大鼠鼻咽癌变过程中细胞凋亡和增殖的干预

目的探讨益气解毒方对大鼠鼻咽癌变过程中细胞凋亡和增殖的干预作用。方法用二亚硝基哌嗪（DNP）诱导大鼠诱发鼻咽癌变模型,益气解毒方进行干预治疗。定期分批处死大鼠,取鼻咽组织做病理检测,TUNEL法检测细胞凋亡活性,免疫组织化学SABC法检测PCNA蛋白活性表达。结果益气解毒方组大鼠鼻咽上皮组织的癌变率为0％,明显低于生理盐水模型组（86．3％）;维甲酸阳性对照组大鼠的癌变率为0％,但该组所有动物均于实验周期的第250-,310天间逐渐死亡。在诱发性鼻咽上皮细胞癌变进程中的单纯性增生阶段,大鼠鼻咽上皮细胞凋亡活性和PCNA蛋白表达活性组问差异均无统计学意义（P〉0．05）;在异型增生阶段,益气解毒方组鼻咽上皮细胞凋亡活性明显高于模型组,差异具有统计学意义（P〈0．05）,PCNA蛋白表达活性则显著低于模型组,差异具有硫计学意义（P〈0．05）。结论益气解毒方能有效阻逆大鼠鼻咽上皮细胞癌变进程,其作用与其有效诱导细胞凋亡、抑制细胞增殖活性有关。     

鼻咽癌组织端粒酶活性的表达

目的为探讨端粒酶在鼻咽癌发生发展过程中的作用。方法采用端粒重复片段扩增法（ＴＲＡＰ）对５０例鼻咽部组织标本进行端粒酶活性检测。结果鼻咽部慢性炎症、癌前病变组织端粒酶阳性率均为１００％,鼻咽癌端粒酶阳性率为８７．５％。本实验首次报道鼻咽部慢性炎症粘膜端粒酶活性表达较弱,但在癌前病变．鼻咽癌组织端粒酶活性明显增强,唯一１例高分化鳞状细胞癌检测不出端粒酶活性。结论从慢性炎症、癌前病变到鼻咽癌的演变过程中,端粒酶可能在癌前病变期激活,并在鼻咽癌的发生发展过程中起着重要作用。端粒酶活性可能与鼻咽部鳞状细胞癌的恶性程度有关。     

大肠癌端粒酶活性的意义及其与人端粒酶催化亚基表达的相关性

目的 :研究大肠癌组织中端粒酶活性在大肠癌发生发展中的作用及其与人端粒酶催化亚基 (h TERT)表达的相关性。方法 :运用 PCR- TRAP- EL ISA及免疫组织化学方法 (免疫组化法 )对 30例大肠癌及相应的癌旁组织、正常大肠组织及 2 0例大肠腺瘤性息肉组织中端粒酶活性和 h TERT表达进行检测。结果 :1端粒酶在大肠癌组织中的阳性表达明显高于癌旁组织、正常大肠黏膜及大肠腺瘤性息肉 (P<0 .0 5 ) ;2大肠癌组织端粒酶与淋巴结转移关系密切 ,伴淋巴结转移大肠癌端粒酶阳性表达率明显高于无淋巴结转移者 (P <0 .0 1 ) ;3相关分析显示端粒酶活性与 h TERT表达存在相关性 (P <0 .0 5 )。结论 :端粒酶在大肠癌的发生发展过程中可能起着重要作用 ,h TERT的表达与端粒酶活性密切相关     

肺癌组织端粒酶活性测定

①目的　探讨端粒酶作为肺癌诊断标记物的可行性及临床意义。②方法　用TRAP法检测 2 9例肺癌组织、2 7例癌旁组织和 35例正常组织标本中端粒酶活性表达。③结果　 2 9例肺癌组织中 2 1例 (72 .4 % )端粒酶活性表达阳性 ,2 7例癌旁组织中 6例 (2 2 .2 % )端粒酶活性表达阳性 ,35例正常组织均不表达端粒酶活性。癌组织、癌旁组织与正常组织标本端粒酶活性比较有显著差异 (χ2 =34.0 13、3.937,P <0 .0 1、0 .0 5 )。④结论　端粒酶表达与肿瘤发生有关 ,其癌旁组织中端粒酶活性有可能成为判定肿瘤复发和预后的指标。     

益气解毒方阻断气虚染毒大鼠鼻咽上皮细胞癌变的研究

目的探讨益气解毒方调节NF-κB途径阻断气虚染毒大鼠鼻咽癌变的影响。方法大鼠腹腔注射二亚硝基哌嗪（DNP）和佛波醇酯（TPA）,同时进行力竭游泳,诱导大鼠诱发鼻咽癌变模型,予以益气解毒方干预,定期分批处死大鼠,取鼻咽组织做病理检测,免疫组织化学SABC法检测蛋白表达。结果在诱发鼻咽癌变进程的单纯性增生阶段,与模型组比较,益气解毒方组和维甲酸组大鼠鼻咽上皮细胞的NF-κB p65和IκBα蛋白表达活性均无统计学意义,但在异型增生阶段,益气解毒方组对鼻咽上皮细胞的NF-κB p65蛋白表达活性显著低于模型组,差异具有统计学意义（P〈0.05）,而IκBα蛋白表达活性显著高于模型组,差异具有统计学意义（P〈0.05）。结论益气解毒方能够有效阻断气虚染毒大鼠鼻咽上皮细胞癌变进程,其作用与其有效调节NF-κB途径关键基因NF-κBp65和IκBα的蛋白表达密切相关。     

非小细胞肺癌端粒酶活性的相对定量检测

应用端粒酶聚合酶链反应 (PCR) -酶联免疫吸附测定 (ELISA)法 ,检测手术切除标本中肺癌组织、癌旁组织及正常肺组织端粒酶活性。结果显示 :1 5例肺癌组织端粒酶活性为 0 84± 0 3 8;其中 8例鳞癌为 0 82± 0 3 9,7例腺癌为 0 86± 0 3 9,明显高于 1 5例癌旁组织 0 1 6± 0 0 3和 3例正常肺组织 0 1 4± 0 0 2 (均P <0 .0 0 1 )。以吸光度A450>0 .2 0为阳性 ,1 5例肺癌组织端粒酶活性阳性率为 86 7% (1 3 /1 5 ) ;其中腺癌阳性率为 85 7% (6 /7) ,鳞癌阳性率为87 5 % (7/8) ;而 1 5例癌旁组织和 3例正常肺组织端粒酶活性表达均为阴性。提示端粒酶活性可作为非小细胞肺癌诊断的特异性较强的分子标记物 ;TRAP PCR ELISA法检测端粒酶活性具有方法简便 ,结果可靠。     

煤焦沥青诱发大鼠肺癌组织中端粒酶的表达

目的 :判断端粒酶活性在肺癌中的诊断价值。方法 :将Wistar大鼠随机分为实验组 17只和对照组 8只 ,实验组采用支气管灌注煤焦沥青法诱导大鼠肺癌 ,用改良的TRAP银染法测定大鼠肺癌及正常组织中的端粒酶活性。结果 :实验组诱发出肺癌 8例 ,鳞状上皮化生 1例 ,8例肺癌中有 7例为端粒酶阳性 (87.5 % ) ,鳞状上皮化生的1例也为端粒酶阳性 ,实验组其余 8例与对照组 8例端粒酶均为阴性。有癌组与对照组和无癌组相比差异均有显著性 (P <0 .0 1)。结论 :端粒酶较特异地表达于肺癌组织中 ,有望成为肺癌的诊断指标。     

益气解毒颗粒对大鼠鼻咽癌变中端粒酶和端粒酶RNA表达的影响

OBJECTIVE: Telomerase activation is a common event in malignant transformation, and is associated with tumorigenesis. This has been clarified in nasopharyngeal carcinoma. YIQIJIEDU powder (Chinese traditional medicine) is used to treated the patients with nasopharyngeal carcinoma (NPC) after radio-therapy and patients with precancerous lesion of NPC. We investigated whether YIQIJIEDU powder inhibits the telomerase activity in nasopharyngeal carcinogenesis. METHODS: Nasopharyngeal carcinomas in rats were induced by N, N' Dinitrosopiperazine (DNP), and some of them were treated with YIQIJIEDU powder. Telomerase and telomerase RNA in the rats' nasopharyngeal tissue were assayed by using PCR-ELISSA and Nested-PCR, and were pathologically diagnosed. RESULTS: YIQIJIEDU powder could inhibit telomerase activity and nasopharyngeal carcinogenesis in the nasopharyngeal tissue of the rats treated, but no telomerase RNA. CONCLUSION: The findings suggest that the anticancer effect of YIQIJIEDU powder links with their inhibitory effects on telomerase.     

Expression of telomerase and its RNA in nasopharyngeal carcinoma

Ｔｅｌｏｍｅｒａｓｅ ,ａｒｉｂｏｎｕｃｌｅｏｐｒｏｔｅｉｎｔｈａｔｐａｒｔｉｃｉｐａｔｅｓｉｎｔｈｅｍａｉｎｔｅｎａｎｃｅｏｆｔｅｌｏｍｅｒｅｌｅｎｇｔｈ ,ｈａｓｂｅｅｎｆｏｕｎｄｃｌｏｓｅｌｙｒｅｌａｔｅｄｔｏｔｈｅｃｅｌｌｉｍｍｏｒｔａｌｉｔｙａｎｄｍａｌｉｇｎａｎｃｙ Ｒｅｃｅｎｔｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅｒｅｉｓａｈｉｇｈａｃｔｉｖｉｔｙｏｆｔｅｌｏｍｅｒａｓｅｉｎｍｏｓｔｈｕｍａｎｃａｎｃｅｒｓａｓｗｅｌｌａｓｉｎｉｍｍｏｒｔａｌａｎｄｔｕｍｏｒｃｅｌｌｌｉ…     

胃癌组织端粒酶活性与催化亚基hTERT表达的关系

研究胃癌、胃黏膜肠化生及正常黏膜组织端粒酶活性与人端粒酶催化亚基(hTERT)表达的相关性及端粒酶激活在胃癌发生中的作用.方法:通过端粒重复序列扩增(TRAP)和逆转录聚合酶链反应(RT -PCR)方法测定3种胃癌细胞株、26例胃癌、10例胃黏膜肠化生和36例正常胃黏膜组织标本端粒酶活性和hTERT表达.结果:3种胃癌细胞株、24例胃癌组织有端粒酶活性;4例肠化生端粒酶活性较弱;36例正常胃黏膜标本未测到端粒酶活性.hTERT在26例胃癌组织、5例肠化胃黏膜中表达;正常胃黏膜无表达.端粒酶活性、hTERT表达与肿瘤的分期和病理分级无关.结论:hTERT在肿瘤形成的早期阶段表达,端粒酶的激活是胃癌形成的关键步骤.     

人胰腺癌端粒酶亚单位的表达及其意义

目的：探讨端粒酶亚单位表达水平与人胰腺癌发生的关系，以及表达与端粒酶活性高低的相关性。方法：应用RT－PCR，DNA测序等技术研究端粒酶亚单位在胰腺癌中的表达情况，用ELISA法检测端粒酶活性。结果：24例胰腺癌标本中hTERT mRNA表达阳性率为83．3％，而癌旁组织为8．3％，两者有显著性差异。hTERT mRNA的表达是人端粒酶活性表达的关键性因素。hTR入TP1 mRNA在癌组织及癌旁组织中的表达无统计学差异，与端粒酶活性的表达无相关性。结论：端粒酶参与了胰腺癌的发生；hTERT mRNA表达水平的上调可能在胰腺癌形成过程中起重要作用。     

肿瘤患者外周血淋巴细胞端粒酶活性的表达

目的 通过检测外周血淋巴细胞端粒酶活性。为癌症的治疗及预后的评估,随访提供可靠的依据。方法 采用PCR-TRAP方法检测癌症患外周血淋巴细胞中端粒酶活性。结果 癌症患43例中,有37例端粒酶表达阳性,总阳性率86%,阳性结果经EB染色后可见间隔6bp的梯形区带。其中,宫颈癌12例中有10例阳性表达,阳性率83%;卵巢癌6例中有6例阳性表达,阳性率100%;肝癌6例中有5例阳性表达,阳性率83%;肺癌11例中有9例阳性表达,阳性率82%,乳腺癌8例中有7例阳性表达,阳性率88%,5例正常对照中未检出阳性。结论 端粒酶活性表达与癌症的发生与发展有密切的关系。对癌症患外周血淋巴细胞端粒酶活性的测定,对癌症的治疗、预后的评估,随访及复发等都有重要的临床意义。     

鼻咽癌端粒酶各组分基因表达与端粒酶活性的关系

目的明确鼻咽癌组织端粒酶各组分(hTR、TP1、hTERT)基因表达及其与端粒酶活性关系.方法采用RT-PCR和PCR-ELISA方法分别检测同一标本,包括鼻咽癌(NPC)组织、慢性鼻咽炎(CINE)组织端粒酶各组分基因表达和端粒酶活性.结果(1)43例NPC组织中,38例(88%)可检测到hTERTmRNA表达;16例CINE组织中均未能检测到hTERTmRNA表达,hTETRmRNA在NPC组织中表达显著高于CINE组织中hTERTmRNA的表达(P<0.05).(2)43例NPC组织中,39例(90.7%)表达hTR,38例(88%)表达TP1mRNA;16例CINE组织中,14例(87.5%)分别表达hTR和TP1mRNA.hTR或TP1mRNA在NPC和CINE组织中表达比较差异无显著意义(P>0.05).(3)NPC组织端粒酶活性(86%)显著高于CINE组织端粒酶的活性(0%)(P<0.05).(4)hTERTmRNA表达与端粒酶活性显著相关(P<0.05);而hTR或TP1mRNA的表达与端粒酶活性无关(P>0.05).(5)端粒酶各组分基因表达均与NPC临床分期和有无颈淋巴结转移无关(P>0.05).结论hTR和TP1mRNA在NPC和CINE组织中均高阳性率表达,并与端粒酶活性无关,hTERTmRNA仅在NPC组织中表达,与端粒酶活性呈高度一致性,提示hTERT在端粒酶活性调节中可能起决定性作用,对hTERTmRNA检测可以作为NPC临床诊断指标之一.     

宫颈癌组织中端粒酶活性定量定性测定

目的 :探讨宫颈癌组织中端粒酶活性检测的意义及其与临床病理因素的关系。方法 :用TRAP ELISA定量及TRAP 银染定性方法 ,对 36例宫颈癌组织进行端粒酶活性检测 ,2 5例非癌宫颈组织作为对照。结果 :91 6 7%(33/ 36 )宫颈癌组织端粒酶活性阳性 ,而对照组 2 5例中仅 1例 (4 % )癌旁组织端粒酶活性阳性 ;宫颈癌和对照组端粒酶活性均值分别为 (1 5 80± 0 831) ,(0 0 38± 0 0 2 3) ,差异有显著性 (P <0 0 1) ;端粒酶活性高低与宫颈癌临床分期、体积大小无关 ,而与肿瘤分化程度和盆腔淋巴结转移有关 ,肿瘤分化程度越差 ,端粒酶活性越高 ,有淋巴结转移的宫颈癌组织端粒酶活性显著高于无淋巴结转移者。结论 :端粒酶活化在宫颈癌的发生过程中起重要作用 ,端粒酶活性可能与宫颈癌某些临床病理因素有关