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1.
目的:对不同HAT浓度下抗二性霉素B的杂交瘤细胞株的生长情况进行了观察。方法:用二性霉素B免疫BLAB/C小鼠,取脾细胞与SP2/O小鼠骨髓瘤细胞融合,在不同HAT浓度下培养杂交瘤细胞,结果:常规HAT浓度筛选杂交瘤细胞,细胞大多数在8天~10天死亡,而H.T浓度不变,A为0.118μg/ml和0.132μm/ml杂交瘤细胞均长良好,并用间接ELISA筛选到二株抗二性霉素B的杂交瘤细胞,结论:在制 相似文献
2.
次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶缺陷型杂交瘤细胞的快速筛选方法 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 建立一种快速而简便的次黄嘌呤-氨基喋呤-胸腺嘧啶(HAT)敏感型杂交瘤细胞株的筛选方法,以缩短二次杂交瘤细胞制备时间。方法 在培养瓶中培养杂交瘤细胞,每2~3天倍比提高培养液中8-氮鸟嘌呤(8-N)浓度,从1.25μg/ml直至20μg/ml,并用酶联免疫吸附试验(ELISA)比较筛选前后抗体吸光度(A)值。结果成功地诱导筛选后,获得HAT敏感的次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(HGPRT)缺 相似文献
3.
一株抗人胆管癌相关抗原杂交瘤细胞株的建立及鉴定 总被引:2,自引:1,他引:1
目的 建立能分泌与人胆管癌组织特异结合的高效价抗人胆管癌相关抗原单克隆抗体的杂交瘤细胞株。方法 用2的人胆管癌细胞系Sk-CHA-1免疫BALB/c小鼠后,获取免疫小鼠的脾细胞。与小鼠骨髓瘤SP2/0融合,ELISA方法及免疫荧光染色法筛选细胞晤后生成的杂交瘤细胞株。结果 ELISA方法及免疫荧光染色法共筛选出5株能持续稳定分泌抗人胆管癌相关抗原单克隆抗体的杂交瘤细胞株,其中2F4E8杂交瘤细胞株 相似文献
4.
目的:防治支原体污染是细胞培养中难以解决的问题.我们用CIP和BMcyclin联合治疗清除了杂交瘤细胞HAb18,A10,骨髓瘤细胞SP2/0和人白血病细胞K562中的支原体污染.方法:3株小鼠细胞系(HAb18,A10,SP2/0)用含有10μg/mlCIP的培养液治疗12d后根除了污染的支原体.人细胞株(K562)用CIP加BMcyclin联合治疗26d后清除了支原体的污染.结果:清除支原体后,细胞的增殖率和杂交瘤细胞抗体分泌稳定性增强.未见有任何毒性作用.结论:用CIP和BMcyclin清除培养细胞中支原体的污染是一个安全有效的方法. 相似文献
5.
应用杂交瘤技术获得4株分泌抗小鼠腺病毒(MurineAdenovirusMAd)单克隆抗体细胞株,并对其特性进行分析。经鉴定,它们所分泌的抗体类型均为IgM,腹水效价为10-3~10-6。相对亲和力分别为0.1μg/ml(A9)、0.65μg/ml(Bl)、12.5μg/ml(G4)和23μg/ml(D4)。与其他10种鼠源性病毒均无交叉反应,表明McAb具有良好的特异性。单抗标记FITC后用于人用鼠源性单抗制品及各种传代细胞和原代细胞中MAd检测,获得良好的实验结果。 相似文献
6.
用HBeAg阳性血清纯化HBeAg,免疫BALB/C小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞进行融合,反复克隆化培养,最终获得4株分泌抗-HBe单克隆抗体的杂交瘤细胞株。对其中两株进行了鉴定。其细胞培养上清中的EL/ISA效价分别为1:800和1:500,诱生同属小鼠腹水中的ELISA效价均为1:1000,特异性试验表明,两株杂交瘤分泌的抗体为特异性抗体,小鼠Ig亚类鉴定,两株抗体均为IgG1亚类球蛋白。细胞染色体数为95~110条。结果证明,此细胞株为特异性分泌抗—Hke单克隆抗体细胞株。 相似文献
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防治支原体污染是细胞培养中难以解决的问题,我们用CIP和BMcyclin联合治疗清除了杂交瘤细胞HAb18,A10,骨髓细胞SP2/0和人白血病细胞K562中的支原体污染。方法:3株小鼠细胞系(HAb18,A10,SP2/0)用含有10μg/mlCIP培养液治疗12d后根除了污染的支原体。人细胞株(K562)用CIP加BMcyclin联合治疗26d后清除了支原体的污染。结果:清除支原体后,细胞的增 相似文献
8.
用HBeAg阳性血清纯化HBeAg,免疫BALB/C小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞进行融合,反复克隆化培养,最终获得4株分泌抗-HBe单克隆抗体的杂交瘤细胞株。对其中两株进行了鉴定。其细胞培养上清中的ELISA效价的分别为1:800和1:500,诱生同属小鼠腹水中的ELISA效价均为1:1000,特异性试验表明,两株杂交瘤分泌的抗体为特异性抗体,小鼠Ig亚类鉴定,两株抗体均为IgG1亚类球蛋白。细胞染 相似文献
9.
以自己合成的黄曲霉毒素B_1一人血清白蛋白(AFTB_1-HSA)偶联物免疫BALB/c鼠,应用杂交瘤技术,建立了两株能持续分泌抗AFTB_1单克隆抗体(AFTB_1McAb)的杂交瘤细胞株,命名为IB5和2F1,接种BALB/c鼠腹腔均能诱发产生含特异性抗体的腹水。用间接竞争抑制ELISA鉴定McAb的反应特异性,使McAb与固相黄曲霉毒素B_1一牛血清白蛋白(AFTB_1-BSA)结合产生50%抑制所需的AFTB_1、B_2、G_1、G_2浓度依次为:1B54.0、36.9、23.3、403.3ng/ml,2F12.4、2.6、2.8、4。7ng/ml。 相似文献
10.
核心蛋白聚糖对肝细胞和肝星形细胞体外增殖的影响 总被引:5,自引:0,他引:5
目的:探讨核心蛋白聚糖(decorin)在肝纤维化形成机制中的作用。方法:在正常人肝细胞株L-02及大鼠肝星形细胞株HSC-T6体外培养体系中,分别加入不同质量浓度(0.01,5,10μg/ml)decorin共培养不同时间后,进行细胞计数以及^3H-TdR和^3H-Leu掺入量测定。结果:实验组经0.01μg/ml decorin作用4d或6d后,HSC-T6和L-02细胞增殖数量以及^3H-T 相似文献