制备抗二性霉素B单克隆抗体对HAT浓度的选择

目的：对不同ＨＡＴ浓度下抗二性霉素Ｂ的杂交瘤细胞株的生长情况进行了观察。方法：用二性霉素Ｂ免疫ＢＬＡＢ／Ｃ小鼠，取脾细胞与ＳＰ２／Ｏ小鼠骨髓瘤细胞融合，在不同ＨＡＴ浓度下培养杂交瘤细胞，结果：常规ＨＡＴ浓度筛选杂交瘤细胞，细胞大多数在８天～１０天死亡，而Ｈ．Ｔ浓度不变，Ａ为０．１１８μｇ／ｍｌ和０．１３２μｍ／ｍｌ杂交瘤细胞均长良好，并用间接ＥＬＩＳＡ筛选到二株抗二性霉素Ｂ的杂交瘤细胞，结论：在制     

次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶缺陷型杂交瘤细胞的快速筛选方法

目的 建立一种快速而简便的次黄嘌呤－氨基喋呤－胸腺嘧啶（ＨＡＴ）敏感型杂交瘤细胞株的筛选方法,以缩短二次杂交瘤细胞制备时间。方法 在培养瓶中培养杂交瘤细胞,每２～３天倍比提高培养液中８－氮鸟嘌呤（８－Ｎ）浓度,从１．２５μｇ／ｍｌ直至２０μｇ／ｍｌ,并用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）比较筛选前后抗体吸光度（Ａ）值。结果成功地诱导筛选后,获得ＨＡＴ敏感的次黄嘌呤－鸟嘌呤磷酸核糖转移酶（ＨＧＰＲＴ）缺     

一株抗人胆管癌相关抗原杂交瘤细胞株的建立及鉴定

目的 建立能分泌与人胆管癌组织特异结合的高效价抗人胆管癌相关抗原单克隆抗体的杂交瘤细胞株。方法 用２的人胆管癌细胞系Ｓｋ－ＣＨＡ－１免疫ＢＡＬＢ／ｃ小鼠后，获取免疫小鼠的脾细胞。与小鼠骨髓瘤ＳＰ２／０融合，ＥＬＩＳＡ方法及免疫荧光染色法筛选细胞晤后生成的杂交瘤细胞株。结果 ＥＬＩＳＡ方法及免疫荧光染色法共筛选出５株能持续稳定分泌抗人胆管癌相关抗原单克隆抗体的杂交瘤细胞株，其中２Ｆ４Ｅ８杂交瘤细胞株     

用Ciprofloxacin和BMcyclin清除培养细胞中的支原体污染

目的：防治支原体污染是细胞培养中难以解决的问题．我们用ＣＩＰ和ＢＭｃｙｃｌｉｎ联合治疗清除了杂交瘤细胞ＨＡｂ１８，Ａ１０，骨髓瘤细胞ＳＰ２／０和人白血病细胞Ｋ５６２中的支原体污染．方法：３株小鼠细胞系（ＨＡｂ１８，Ａ１０，ＳＰ２／０）用含有１０μｇ／ｍｌＣＩＰ的培养液治疗１２ｄ后根除了污染的支原体．人细胞株（Ｋ５６２）用ＣＩＰ加ＢＭｃｙｃｌｉｎ联合治疗２６ｄ后清除了支原体的污染．结果：清除支原体后，细胞的增殖率和杂交瘤细胞抗体分泌稳定性增强．未见有任何毒性作用．结论：用ＣＩＰ和ＢＭｃｙｃｌｉｎ清除培养细胞中支原体的污染是一个安全有效的方法．     

小鼠腺病毒单克隆抗体的研制及初步应用

应用杂交瘤技术获得４株分泌抗小鼠腺病毒（ＭｕｒｉｎｅＡｄｅｎｏｖｉｒｕｓＭＡｄ）单克隆抗体细胞株，并对其特性进行分析。经鉴定，它们所分泌的抗体类型均为ＩｇＭ，腹水效价为１０－３～１０－６。相对亲和力分别为０．１μｇ／ｍｌ（Ａ９）、０．６５μｇ／ｍｌ（Ｂｌ）、１２．５μｇ／ｍｌ（Ｇ４）和２３μｇ／ｍｌ（Ｄ４）。与其他１０种鼠源性病毒均无交叉反应，表明ＭｃＡｂ具有良好的特异性。单抗标记ＦＩＴＣ后用于人用鼠源性单抗制品及各种传代细胞和原代细胞中ＭＡｄ检测，获得良好的实验结果。     

分泌抗—HBe单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

用ＨＢｅＡｇ阳性血清纯化ＨＢｅＡｇ，免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞进行融合，反复克隆化培养，最终获得４株分泌抗－ＨＢｅ单克隆抗体的杂交瘤细胞株。对其中两株进行了鉴定。其细胞培养上清中的ＥＬ／ＩＳＡ效价分别为１：８００和１：５００，诱生同属小鼠腹水中的ＥＬＩＳＡ效价均为１：１０００，特异性试验表明，两株杂交瘤分泌的抗体为特异性抗体，小鼠Ｉｇ亚类鉴定，两株抗体均为ＩｇＧ１亚类球蛋白。细胞染色体数为９５～１１０条。结果证明，此细胞株为特异性分泌抗—Ｈｋｅ单克隆抗体细胞株。     

用Ciprofloxacin和BMcyclin清除培养细胞的支原体污染

防治支原体污染是细胞培养中难以解决的问题，我们用ＣＩＰ和ＢＭｃｙｃｌｉｎ联合治疗清除了杂交瘤细胞ＨＡｂ１８，Ａ１０，骨髓细胞ＳＰ２／０和人白血病细胞Ｋ５６２中的支原体污染。方法：３株小鼠细胞系（ＨＡｂ１８，Ａ１０，ＳＰ２／０）用含有１０μｇ／ｍｌＣＩＰ培养液治疗１２ｄ后根除了污染的支原体。人细胞株（Ｋ５６２）用ＣＩＰ加ＢＭｃｙｃｌｉｎ联合治疗２６ｄ后清除了支原体的污染。结果：清除支原体后，细胞的增     

分泌抗——HBe单克隆抗体杂交瘤细胞株的建立

用ＨＢｅＡｇ阳性血清纯化ＨＢｅＡｇ，免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞进行融合，反复克隆化培养，最终获得４株分泌抗－ＨＢｅ单克隆抗体的杂交瘤细胞株。对其中两株进行了鉴定。其细胞培养上清中的ＥＬＩＳＡ效价的分别为１：８００和１：５００，诱生同属小鼠腹水中的ＥＬＩＳＡ效价均为１：１０００，特异性试验表明，两株杂交瘤分泌的抗体为特异性抗体，小鼠Ｉｇ亚类鉴定，两株抗体均为ＩｇＧ１亚类球蛋白。细胞染     

黄曲霉毒素B_1单克隆抗体的制备和鉴定

以自己合成的黄曲霉毒素Ｂ＿１一人血清白蛋白（ＡＦＴＢ＿１－ＨＳＡ）偶联物免疫ＢＡＬＢ／ｃ鼠，应用杂交瘤技术，建立了两株能持续分泌抗ＡＦＴＢ＿１单克隆抗体（ＡＦＴＢ＿１ＭｃＡｂ）的杂交瘤细胞株，命名为ＩＢ５和２Ｆ１，接种ＢＡＬＢ／ｃ鼠腹腔均能诱发产生含特异性抗体的腹水。用间接竞争抑制ＥＬＩＳＡ鉴定ＭｃＡｂ的反应特异性，使ＭｃＡｂ与固相黄曲霉毒素Ｂ＿１一牛血清白蛋白（ＡＦＴＢ＿１－ＢＳＡ）结合产生５０％抑制所需的ＡＦＴＢ＿１、Ｂ＿２、Ｇ＿１、Ｇ＿２浓度依次为：１Ｂ５４．０、３６．９、２３．３、４０３．３ｎｇ／ｍｌ，２Ｆ１２．４、２．６、２．８、４。７ｎｇ／ｍｌ。     

核心蛋白聚糖对肝细胞和肝星形细胞体外增殖的影响

目的：探讨核心蛋白聚糖（ｄｅｃｏｒｉｎ）在肝纤维化形成机制中的作用。方法：在正常人肝细胞株Ｌ－０２及大鼠肝星形细胞株ＨＳＣ－Ｔ６体外培养体系中,分别加入不同质量浓度（０．０１,５,１０μｇ／ｍｌ）ｄｅｃｏｒｉｎ共培养不同时间后,进行细胞计数以及＾３Ｈ－ＴｄＲ和＾３Ｈ－Ｌｅｕ掺入量测定。结果：实验组经０．０１μｇ／ｍｌ ｄｅｃｏｒｉｎ作用４ｄ或６ｄ后,ＨＳＣ－Ｔ６和Ｌ－０２细胞增殖数量以及＾３Ｈ－Ｔ