ELISA法在梅毒螺旋体抗体检测中的临床意义

目的探讨基因重组抗原ELISA法在梅毒螺旋体抗体检测中的临床意义。方法用甲苯胺红不加热血清实验（TPPA）对355份梅毒患者和非梅毒患者的临床血清标本进行检测。结果以TPPA阳性者为标准,TRUST有7份为假阴性,4份为假阳性;TRUST和ELISA的敏感性、特异性分别为92.7%、98.3%和100%、99.1%。TRUST与TP-PA的符合率为96.3%,ELISA与TPPA的符合率为99.4%。ELISA的敏感性、特异性都优于TRUST,与TPPA符合率高。结论重组抗原ELISA法检测梅毒螺旋体特异性抗体具有敏感性高、特异性好、结果客观、自动化程度高等优点,适用于梅毒初筛和确诊。     

不同检测方法在检查梅毒螺旋体抗体中的应用价值研究

目的探讨不同检测方法在检查梅毒螺旋体抗体中的应用价值。方法收集2013年1月~2014年6月我院收治的90例经临床确诊为梅毒感染患者的90份血清标本,另随机抽取非梅毒患者的90份血清标本,共180份血清标本为研究对象。采用甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)、梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)、梅毒酶联免疫吸附试验(ELISA-TP)三种检测方法对标本进行检测。比较三种检测方法的灵敏度、特异度以及Youden指数。结果三种检测方法在检测梅毒患者的90份血清标本时,TRUST、TPPA、ELISA-TP检测的阳性率分别为83.33%、95.56%、98.89%,三种方法比较差异具有统计学意义(P<0.05)。三种检测方法在检测非梅毒患者的90份血清标本时,TRUST、TPPA、ELISA-TP检测的假阳性率分别为7.78%、1.11%、2.22%,三种方法比较差异具有统计学意义(P<0.05)。三种检测方法中灵敏度的高低依次为ELISA-TP、TPPA、TRUST;特异度高低依次为TPPA、ELISA-TP、TRUST;Youden指数高低依次为ELISA-TP、TPPA、TRUST。结论TPPA和ELISA-TP的灵敏度、特异度以及Youden指数均高于TRUST,更适合用作临床诊断梅毒的实验室检测方法,临床工作者需根据患者实际情况,选择正确的检测方法。     

204例ELISA法测梅毒抗体阳性结果分析

目的:探讨梅毒螺旋体抗体酶联免疫吸附试验(ELISA)检测梅毒抗体在临床的应用价值。方法:对住院患者ELISA筛查阳性的204例结果分析。TP-ELISA法对住院的各科患者共8 160例进行梅毒抗体初筛,如阳性则进一步做梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(T PPA)及梅毒甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)以TPPA法为标准对检测结果进行分析。结果:临床标本TP-ELISA法筛查阳性204例,检出率2.5%(204/8160);与TPPA符合率为93.6%(191/204),而这204例中TRUST滴度≥1∶2,为70.6%。(144/204)。另外在这204例中60岁以上老年人占39.2%(80/204)。结论:ELISA法是较好的梅毒筛查试验。在临床检测中仍有一定数量假阳性,部分筛查阳性病例并非梅毒现症感染患者.     

三种梅毒螺旋体检测方法的临床评价

目的:探讨三种血清梅毒螺旋体检测方法的应用价值。方法:应用甲苯胺红不加热血清学试验(TRUST),酶联免疫吸附试验(ELISA)、梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)分别检测596份标本,其中57例确诊为梅毒感染。结果:ELLSA法与TPPA法检测结果之间无显著性差异(P>0.05),二者敏感性和特异性分别为94.7%,98.1%和91.2%,97.2%;TRWST与ELISA法、TPPA法之间有显著性差异(P<0.05)。结论:ELISA法和TPPA法在临床的诊断中是较好的血清梅毒螺旋体的检测方法。     

4种方法检测梅毒螺旋体抗体的结果分析

目的 评价酶联免疫吸附试验(TP-ELISA)和化学发光法(TP-CLIA)、梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)和甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)在手术和输血前梅毒螺旋体抗体检测中的应用价值,并分析不同年龄段患者梅毒螺旋体抗体阳性率.方法 用ELISA法检测7656例手术和输血前住院患者血清中的梅毒螺旋体抗体,筛查出的阳性样本再采用CLIA法、TPPA法和TRUST法进行检测;对ELISA法的检测结果(S/CO值)和CLIA的法检测结果(S/CO值)进行相关性分析;对于TPPA确诊试验阳性标本按年龄段分组,分析不同年龄段梅毒螺旋体抗体阳性率有无差异.结果 ELISA法检测出梅毒螺旋体抗体阳性标本173例,总阳性率为2.26%(173/7656);CLIA法、TPPA法和TRUST法检测梅毒螺旋体抗体阳性符合率分别为100%(173/173)、99.42%(172/173)和29.48%(51/173).相关性分析显示ELISA法和CLIA检测结果(S/CO值)呈显著正相关(r=0.711,P<0.001).梅毒螺旋体抗体阳性率随年龄增长而增高,60岁以上老年人阳性率显著高于其他人群(P<0.05).结论 ELISA法和CLIA法是手术和输血前梅毒螺旋体抗体筛查的可靠方法,但须行TPPA确诊试验;TRUST法不适用于梅毒螺旋体抗体的筛查,适宜疗效观察;梅毒螺旋体抗体阳性率随着年龄增长而增高,要慎重对待老年人梅毒试验阳性结果.     

2种方法检测梅毒螺旋体结果分析

目的对2种方法检测梅毒螺旋体的结果进行分析。方法对47555人次无偿献血者分别用甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)、酶联免疫吸附试验(ELISA)两种方法做梅毒螺旋体血清学检测,对初检阳性的标本进行梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)加以确认。结果47555个样本中,TRUST法阳性率0.39%,ELISA法阳性率0.8%。TPPA法确认的340份标本中,TRUST法检出153份,占45%(153/340),ELISA法检出340份,占100%(340/340)。结论ELISA法检测敏感度高于TRUST法,但ELISA法存在假阳性,只有两种方法联合使用,才能保证血液安全。     

酶联吸附法代替反应素测定法测定梅毒螺旋体

梅毒(syphilis)是由苍白螺旋体(treponema pallidum,TP)所引起的一种性传播疾病,而且近年来我国梅毒的发病率有逐年上升的趋势。梅毒螺旋体一旦侵袭人体后,血清中可产生非特异性反应素抗体和抗梅毒螺旋体抗原的特异性抗体。目前,广泛用于血站和临床筛选的血清学方法是检测非特异     

ELISA法与TPPA法检测梅毒螺旋体抗体的相关性研究

目的：探讨酶联免疫吸附试验（ELISA）与梅毒螺旋体抗体明胶颗粒凝集试验（TPPA）对梅毒螺旋体抗体检测的相关性。方法：采用ELISA法对患者血清进行梅毒螺旋体抗体检测,收集阳性血清标本207例,阴性标本50例,使用TPPA法进行确认;根据测定的s/co值将患者分为4组,分析各组TPPA的阳性率。结果：50份ELISA测定值s/co〈1的样本经TPPA检测均为阴性;62份ELISA测定值s/co为1-3.99的样本经TPPA检测阳性率为88.7%;80份ELISA测定值s/co为4-9.99的样本经TPPA检测阳性率为98.6%;65份ELISA测定值s/co≥10的样本经TPPA检测阳性率为100.0%。TPPA检测梅毒螺旋体抗体的阳性率均随着ELISA法s/co值的升高而升高（P〈0.01）。结论：ELISA检测梅毒具有高度的敏感性,自动化程度高,适合大批量标本的常规筛查,但对测定值s/co在1-9.99的样本应采用TPPA联合检测,以便尽可能减少假阳性,给临床对梅毒的诊断和治疗提供可靠实验室证据。     

ELISA等3种方法检测血清TPIgG的比较研究

目的：探讨ELISA方法测定血清TPIgG诊断梅毒的应用价值。尤其是对大批标本检测的应用。方法：随机抽取245例卖淫嫖娼人员的血清标本,分别用ELISA与TRUST,TPPA3种方法检测。比较三者间的敏感性和特异性。结果：ELISA法与TRUST法符合率99．18％,ELISA对TRUST的敏感率为99．03％,特异性99．03％,ELISA与TPPA结果符合率99．18％,ELISA对TPPA敏感率为99．51％,特异性为97．30％,结论：3种方法比较,差异无显著性,ELISA方法检测梅毒有较高应用价值。     

ELISA,RPR、Trust、TPPA四种方法检测梅毒螺旋体抗体的结果分析

目的比较临床常用的四种梅毒血清学实验室检测方法的特异性和敏感性,探讨四种筛查方法的应用价值。方法对梅毒患者血清标本共1053份及对照组非梅毒患者血清2098份分别进行梅毒酶联免疫吸附试验（ELISA）、梅毒螺旋体明胶凝集试验（TPPA）、甲苯胺红不加热血清试验（TRUST）、梅毒快速血浆反应素（RPR）法检测。结果 ELISA,RPR,Trust及TPPA法检测梅毒病人血清阳性率分别为96.6%,80.2%,86.7%及96.6%。结论四种方法侧重点各有不同,应结合实践情况配合使用,最大程度提高检出率,降低误诊漏诊率。     

牛淑会为并列第一作者.梅毒螺旋体重组蛋白Tp0608的表达与鉴定

目的表达梅毒螺旋体(Tp)重组蛋白Tp0608(rTp0608)并鉴定其抗原性,为深入探讨其在梅毒血清学诊断中的价值奠定基础。方法PCR扩增Tp0608全长基因,构建原核表达重组体pET-28a(+)/Tp0608,转化宿主菌诱导表达rTp0608,Ni-NTA亲和层析法纯化蛋白,SDS-PAGE分析蛋白表达形式与纯度,Western blot鉴定rTp0608的抗原性。结果原核表达重组体pET-28a(+)/Tp0608在宿主菌内经诱导表达了分子量大约为38 kDa的重组蛋白,以包涵体表达形式为主,纯化蛋白的纯度>95%;Western blot结果显示纯化蛋白能被梅毒患者混合血清特异性识别。结论PET-28a（+）表达载体高效表达了rTp0608,该重组抗原有良好的抗原性。     

梅毒抗体不同检测方法在献血者血液筛查中应用探讨

目的:比较梅毒螺旋体抗体ELISA与RPR、TPPA试验,并对检测结果进行综合分析,选择适合采供血机构筛检梅毒的方法.方法:选用ELISA方法在无偿献血者筛检中产生的50例梅毒抗体阳性标本,分别进行梅毒螺旋体抗体酶联免疫试验(TP-ELISA)、血浆反应素环状卡片试验(RPR)以及梅毒螺旋体血球凝集试验(TPPA),将检测结果进行综合分析.结果:ELISA-1、ELISA-2、RPR法的灵敏度分别为100%、100%、44%;假阳性率分别为4%、60%、0;漏检率分别为0、0、56%.TPPA法与RPR法检测结果之间有显著性差异,TPPA法与ELISA-2法检测结果之间有显著性差异,TPPA法与ELISA-1法之间无显著性差异.结论:ELISA-1法适用于大批量的血液筛查,但此法可能会造成检测结果出现一定程度的假阳性,采用TPPA法再进行确证,有利于血液质量安全.     

人巨细胞病毒重组抗原在酶联免疫吸附试验中的应用研究

探讨人巨细胞病毒重组抗原在ＥＬＩＳＡ中应用，方法，采用基因工程方法组建含有巨细胞病毒ＰＰＵＬ３２及ＰＰＵＬ４４蛋白共三侦缉 抗原决定簇基因的重组抗原克隆，以此重组抗原建立ＥＬＩＳＡ方法，用于１１７份待测血清巨细胞病毒ＩｇＭ抗体的检测，并将ＥＬＩＳＡ方法与免疫转印方法进行了结果经统计学分析，建立了的ＥＬＩＳＡ方法与免疫转印检测方法的检测结果具有非常显著的一致性（Ｘ＾２＝５４．０８，Ｐ〈０．０１）。Ｇ     

梅毒检测不同方法的比较

目的:对甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)、酶联免疫吸附试验(TP-ELISA)检测方法的有效性进行综合分析,选择适合采供血机构筛查梅毒的方法。方法:用TRUST、TP-ELISA方法对献血者进行梅毒筛查,阳性标本用梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)方法确证。结果:TRUST方法灵敏度为39.02%,假阳性率为3.03%,漏检率为60.98%;ELISA方法灵敏度为98.73%,假阳性率为20.59%,漏检率为1.22%。结论:TRUST、ELISA两种试剂作为献血员筛查梅毒的首选组合方案,更有利于血液质量安全。     

ELISA法筛查联合TRUST、TPPA在梅毒诊断中的应用价值

目的探讨酶联免疫吸附试验(ELISA)梅毒筛查联合梅毒甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)、梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)在梅毒检测中的应用价值,建立本实验室梅毒检测和报告系统。方法用ELISA法作为临床标本的梅毒筛查,对筛查阳性标本和S/CO值在0.70~0.99范围的疑似标本,进一步作TRUST和TPPA。结果TP-ELISA法检出的145例梅毒阳性标本,TPPA确证阳性141例,阳性符合率为97.24%(141/145);其中91例TRUST阳性,且TP-PA确证实验均为阳性;54例TRUST阴性,TPPA确证50例阳性,4例为阴性。20例S/CO值在0.70~0.99之间的标本中,TPPA阳性4例。4份阳性标本的倍比稀释后检测结果也说明ELISA敏感性低于TPPA。结论梅毒ELISA法筛查存在着一定的假阳性和假阴性结果。TP-ELISA阳性标本首先应做TRUST,而对TRUST阴性标本应进一步用TPPA确证;对S/CO值在0.70~0.99之间的疑似标本也应用TPPA确证,以减少梅毒的误诊和漏诊。     

Preparation of Artificial Antigen and Egg Yolk-derived Immunoglobulin （IgY） of Citrinin for Enzyme-Linked Immunosorbent Assay

Objective To prepare artificial antigens and anti-citrinin egg yolk-derived immunoglobulin （IgY） to build an enzyme-linked immunosorbent assay （ELISA） for citrinin （CTN）. Methods CTN was conjugated with bovine serum albumin （BSA）, ovalbumin （OVA） with formaldehyde condensation method to prepare artificial antigens and identified by ultraviolet （UV） spectrometry and Infrared （IR） spectrometry. Artificial antigens for CTN and anti-CTN IgY were purified with polyethylene glycol two-step precipitation method and identified by sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis （SDS-PAGE）. ELISA with IgY was established. Cross-reactivity of IgY with various structural similarities to CTN and possible co-occurrence with CTN in agricultural commodities were studied. Results UV and IR absorption spectra suggested that CTN was correlated with the carrier protein of BSA or OVA. SDS-PAGE patterns showed that the anti-CTN IgY was almost pure with a molecular weight of approximate 100 KD. The indirect competitive ELISA showed that the detection limit of CTN was 10 ng·mL^-1, with a good linearity ranging 20-640 ng·mL^-1. Conclusion Artificial antigens of CTN can be successfully synthesized. The established ELISA can be used to determine CTN- contaminated samples.     

四种梅毒血清学实验检测方法的比较

目的比较四种梅毒血清学实验检测方法的准确性及在临床诊断中的价值。方法分别用甲苯氨红不加热实验(TRUST)、酶联免疫吸附法(ELISA)、梅毒螺旋体明胶颗粒凝胶实验(TPPA)、化学发光法检测180例梅毒血清样本。结果TRUST、ELISA、TPPA、化学发光法的敏感性分别为86.11%、97.78%、99.44%、98.89%,特异性分别为81.25%、98.75%、100%、98.75%。以TPPA作为标准,ELISA和化学发光法的敏感性高于TRUST,差异有统计学意义(P<0.05),特异性ELISA和化学发光法间差异无统计学意义(P>0.05)。结论ELISA和化学发光法可作为TPPA的替代实验,在临床中广泛应用。