一个携带罕见β—地中海贫血突变家系的分子诊断

用反向点杂交法对临床诊断的１例重症β－地中海贫血患及其家庭成员进行了基因分析。在该家庭中检出两种中国人罕见的β－地贫突变，基因型分别为：先证者，ＣＤ２７－２８（＋Ｃ）／ＣＤ４３（Ｇ→Ｔ）；父，ＣＤ４３（Ｇ→Ｔ）／Ｎ；母，ＣＤ２７－２８（＋Ｃ）／Ｎ；胞组，Ｎ／Ｎ（正常）。这两种突变经ＰＣＲ－限制酶谱分析法进一步证实；ＣＤ２７－２８（＋Ｃ）突变为国内首次报道。     

一个携带罕见β－地中海贫血突变家系的分子诊断

用反向点杂交法（ＲＤＢ）对临床诊断的１例重症β－地中海贫血患儿及其家庭成员进行了基因分析。在该家庭中检出两种中国人罕见的β－地贫突变，基因型分别为：先证者，ＣＤ２７－２８（＋ｃ）／ＣＤ４３（Ｇ→Ｔ）；父，ＣＤ４３（Ｇ→Ｔ）／Ｎ；母，ＣＤ２７－２８（＋ｃ）／Ｎ；胞姐，Ｎ／Ｎ（正常）。这两种突变经ＰＣＲ－限制酶谱分析法进一步证实；ＣＤ２７－２８（＋Ｃ）突变为国内首次报道。     

中间型β地中海贫血的基因诊断

研究中间型β地中海贫血（地贫）的分子缺陷，为中间型β地中海贫血的基因诊断和产前诊断提供科学依据。方法应用Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹杂交、多重等位基因特异聚合酶链反应（ＭＡＳ－ＰＣＲ）、双链ＤＮＡ循环测序和珠蛋白肽链生物合成速率测定等技术，对１４例中间型β地贫病例进行了血液学、珠蛋白基因（α、β和γ）以及珠蛋白肽链生物合成速率的分析。并对２５０例脐带血的α珠蛋白基因组织进行了鉴定。结果１４例β地贫病人中４例为β地贫杂合子复合右侧和（或）左侧不等交换型α珠蛋白基因增多（ααａｎｔｉ３．７和／或αααａｎｔｉ４．２），３例为β地贫遗传复合体复合α珠蛋白基因减少，１例为β地贫遗传复合体复合γ珠蛋白基因上游启动区－１５８ｎｔＣ→Ｔ的突变杂合子，６例的α和Ｇγ珠蛋白基因未见异常。对２５０例脐带血共５００条染色体的α珠蛋白基因的分析表明，共有８条染色体的α珠蛋白基因异常，占染色体总数的１．６％，其中—ＳＥＡ１条，α－３．７４条，αααａｎｔｉ３．７３条。结论除β地贫基因纯合子或遗传复合体复合α珠蛋白基因缺失外，β地贫基因杂合子复合α珠蛋白基因增多是导致中间型β地中海贫血的又一种重要的分子病因。     

干血纸片法用于广东人G6PD基因点突变筛查研究

对１６８例广东籍男婴葡萄糖－６－磷酸脱氢酶（Ｇ６ＰＤ）缺陷者进行 Ｇ６ＰＤ基因突变型研究。方法：运用７对特异性引物,采用滤纸干血斑ＤＮＡ直接扩增法,结合限制性内切酶分析技术。结果：７２例患儿（４２．９％）为Ｇ６ＰＤ１３７６Ｇ→Ｔ,３５例（２０．８％）为Ｇ６ＰＤ１３８８Ｇ→Ａ,３０例（１７．９％）为Ｇ６ＰＤ９５Ａ→Ｇ,６例（３．６％）为Ｇ６ＰＤ３９２Ｇ→Ｔ,３例（１．８％）为Ｇ６ＰＤ１０２４Ｃ→Ｔ。尚有２２例未能定型。未发现 Ｇ６ＰＤ４９３Ａ→Ｇ和４８７Ｇ→Ａ突变。结论：Ｇ６ＰＤ１３７６,１３８８,９５为广东人中常见的Ｇ６ＰＤ基因突变,与我国台湾的研究资料相类似。１６８例中未检出台湾人中的４Ｇ３Ａ→Ｇ和４８７Ｇ→Ａ突变。滤纸干血斑标本为遗传病流行病学研究提供了采血、保存、运输方便。     

胰腺癌K—ras基因12密码子突变方式的研究

目的 阐明中国胰腺癌患者Ｋ－ｒａｓ基因１２密码子突变方式。方法 采用３′碱基特异性引物ＰＣＲ技术分析３０例已证明存在突变的胰腺癌ＤＮＡ标本。结果 检测到４种突变方式即ＧＡＴ、ＧＴＴ、ＣＧＴ和ＧＣＴ，比例分别为５２．９％、３２．４％、８．８％和５．９％。结论 中国胰腺癌Ｋ－ｒａｓ基因１２密码子存在４种突变方式，因地区不同可能存在差异。     

101例乙肝患者HBVDNA前C区nt1896位点基因突变的研究

用错配聚合酶链反应（Ｍ－ＰＣＲ）及限制性片段长度多态性（ＲＦＬＰ）分析方法对１０１例乙肝病毒感染者ＨＢＶＤＮＡ前ＣＡ我ｎｔ１８９６（Ｇ→Ａ）点突变进行检测。结果共检出１８９６（Ｇ→Ａ）点突变株感染者２９例,检出率２６．１３％。其在电性肝炎患者及肝硬化患者中的检出率明显高于急性肝炎患者中,（Ｐ〈０．０５）,在肝硬化及慢性重症肝炎患者中的检出率又高于在慢性肝炎患者中（Ｐ〈０．０１）。同时对慢性肝炎患者中检出突变的病例和未检出突变的病例进行了ＡＬＴＡＳＴ以及ＴＢＩＬ的比较,结果差别有显著性（Ｐ〈０．０５）。以上结果说明,ＨＢＶ前Ｃ区ｎｔ１８９６位（Ｇ→Ａ）变异株感染可能是导致部分病人病情加重的原因之一,与肝脏病变的活动有关。     

肾细胞癌γ-谷氨酰转移酶糖链的凝集素分析

目的探讨肾细胞癌标记物。方法用荧光分光光度法测定了正常肾皮质及肾细胞癌组织中γ－谷氨酰转移酶（γ－ＧＴ）的活力，并用凝集素亲和层析法测定了γ－ＧＴ的糖链与ＣｏｎＡ吸附百分比以研究肾细胞癌γ－ＧＴ中糖链的结构变化。结果肾细胞癌组织中的γ－ＧＴ均较正常肾皮质γ－ＧＴ活力明显降低。组织γ－ＧＴ糖链ＣｏｎＡ分析，肾癌组与正常肾皮质组相比，不吸附组分由（６８．２±１０．６）％降低至（３９．３±１０．８）％，而弱吸附和强吸附组分均显著升高，其中弱吸附部分由（２２．１±９．３）％增加至（４０．８±７．９）％，强吸附部分由（９．７±５．４）％增加至（１９．９±８．５）％；尿液γ－ＧＴＣｏｎＡ分析，与对照组相比，肾癌组不吸附组分由（６６．９±８．０）％降低至（５７．８±１１．２）％，差别有显著意义，弱结合组分别为（２７．８±８．３）％和（２４．１±８．７）％，两者无明显差别；强结合组由（９．０±５．８）％增加至（１４．４±８．９）％，差别有显著意义。结论肾细胞癌组织中γ－ＧＴ活力明显降低，肾癌组织及尿液γ－ＧＴ的糖链结构也发生明显的变化，尿液γ－ＧＴＣｏｎＡ层析可用于肾癌的诊断。     

线粒体DNA tRNA^leu（UUR）和DN1双重突变——糖尿病家系报道

目的：探讨线粒体ＤＮＡ突变在糖尿病发病中的作用。方法：采用ＰＣＲ－ＲＦＬＰ、亚克隆及ＤＮＡ序列分析等技术，对一个母系遗传糖尿病家系成员的线粒体ＤＮＡ ｔＲＮＡ＾ｌｅｕ（ＵＵＲ）及其临近区域进行了突变分析。结果：发现ｍｔＤＮＡ ｔＲＮＡ＾ｌｅｕ（ＵＵＲ）ｎｔ ３２４３ Ａ→Ｇ和ＮＤ １ ｎｔ ３３６５ Ｔ→Ａ双重突变。结论：结合该家系糖尿病患者具有发病年龄早（〈３０岁），对胰岛素依赖，伴耳聋等较严重     

成都地区β地中海贫血基因为突变型及产前基因诊断初步分析

我们通过ＤＮＡ扩增和等位特异寡核苷酸苷酸探针杂交，检测了成都地区可疑β地中海贫血患者３３个家系，９５人。共检出５８例，７３条染色体的β珠蛋白基因突变。其中，Ｃｏｄｏｎ１７突变２８例，Ｃｏｄｏｎ ４１－４２突变２１例；ＩＶＳ－Ⅱ－６５４突变１４例；ｎｔ－２８和ｎｔ－２９突变分别是６例。     

重症肌无力自身抗体、T淋巴细胞亚群及其临床意义的探讨

目的：探讨重症肌无力（ＭＧ）抗乙酰胆碱受体抗体（ＡｃｈＲａｂ）、抗突触前膜受体抗体（ＰｓｍＲａｂ）和Ｔ淋巴细胞亚群与临床的关系。方法：应用ＥＬＩＳＡ法检测４０例重症肌无力病人血清中上述两种自身抗体，应用Ｔ淋巴细胞亚群单克隆抗体微量细胞毒法检测该组病人Ｔ淋巴细胞亚群。结果：①ＡｃｈＲａｂＩｇＧ型阳性２４例（６０％）、ＩｇＭ型阳性１５例（３７．５％），ＰｓｍＲａｂＩｇＧ型阳性２４例（６０％）、ＩｇＭ型阳性１１例（２７．５％）；②仅ＡｃｈＲａｂＩｇＧ型阳性３例（７．５％）、ＩｇＭ型阳性１例（２．５％），只有ＰｓｍＲａｂＩｇＧ型阳性２例（５％），二种抗体的ＩｇＧ型和ＩｇＭ型均阴性７例（１７．５％）；③ＡｃｈＲａｂ与ＰｓｍＲａｂ存在直线正相关；④本组病人ＣＤ＋４增高、ＣＤ＋８降低、ＣＤ＋４／ＣＤ＋８比率增高；⑤ＣＤ＋４／ＣＤ＋８比率与这两种自身抗体无相关关系；⑥年龄大于４０岁组的ＣＤ＋８低于４０岁以下组，而ＣＤ＋４／ＣＤ＋８高于４０岁以下年龄组；⑦病程大于或等于３年组的ＣＤ＋８、ＣＤ＋４／ＣＤ＋８分别低于、高于病程小于３年组。结论：ＭＧ病人存在体液免疫和细胞免疫的异常；ＭＧ可受到ＡｃｈＲａｂ和ＰｓｍＲａｂ的免疫性损害     

白血病中P16基因突变的检测

用聚合酶链反应－单链构象多态性（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ）、ＤＮＡ直接测序和多重ＰＣＲ法，检测了１８例慢性粒细胞白血病（ＣＭＬ），１例Ｋ５６２细胞株，９例急性粒细胞性白血病（ＡＭＬ），６例急性淋巴细胞性白血病（ＡＬＬ），２例多发性骨髓瘤（ＭＭ）患者外周血／培养细胞ＤＮＡ中Ｐ１６基因的点突变和基因缺失。用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ共筛查出５例ＣＭＬ中Ｐ１６基因的异常，突变率为２７．８％（５／１８），对其中１例外显子２异常者经测序证实为第１５１密码子ＣＣＣ→ＣＧＣ的转换，导致Ｐｒｏ→Ａｒｇ的错义突变；并检出１例ＭＭ中Ｐ１６基因外显子３的异常；受检的ＡＬＬ，ＡＭＬ，Ｋ５６２细胞株中，未检出突变。各病例中均未检出Ｐ１６基因的缺失。本文探讨了白血病中Ｐ１６基因突变的意义。     

大鼠乳腺肿瘤细胞色素b基因序列分析

该文用ＤＮＡ自动测序方法,测定了大鼠乳腺癌组织、癌旁组织和正常组织的细胞色素ｂ基因序列。结果表明,癌组织屯ｎｈｔ１９０Ｃ→Ｇ,ｎｔ２６３Ｃ→和ｎｔ６９４Ｔ→Ｃ三处点突变。癌旁组织发生了ｎｔ６９５Ａ→Ｃ突变。正常组织没有突变。癌 组织在ＮＤＡ水平属非正常组织。     

小儿急性白血病MTS1基因缺乏及点突变的研究

为探讨ＭＴＳ１基因突变与恶性血液病的关系，应用ＰＣＲ－ＳＳＣＰ和ＤＮＡ印迹方法检测３５例急性白血病（ＡＬ）患儿ＭＴＳ１基因改变。结果显示：急性淋巴细胞白血病（ＡＬＬ）缺乏（包括点突变）为２５．８％（８／１３）。Ｂ－ＡＬＬ纯合缺失为１６％（４／２５），Ｔ－ＡＬ为３３％（２／６）。点突变则两型各１例。结果证明：我国儿童ＡＬＬ ＭＴＳ１基因失活的存在，Ｔ－ＡＬ高于Ｂ－ＡＬＬ，点突变仅见于少数病例。该基     

广西地区β－地中海贫血突变基因的分析

应用聚合酶链反应结合寡核苷酸探针斑点杂交技术，和聚合酶链反应结合双脱氧核苷酸终止法ＤＮＡ测序技术，测定了广西地区５６例β－地中海贫血患者１０５条染色体的β基因突变类型及其频率。结果共检测出９种突变类型，其中ＩＶＳ－Ⅱ－５（Ｇ→Ｃ）是一种新发现的突变类型。如果将广西常见的ＨｂＥ和另一种少见的ＣＯＤＯＮ１４－１５（＋Ｇ）的突变类型计算在内的话，到目前为止，广西共发现有１１种β－地贫穷变类型。研究结果对在广西和邻近地区开展β－地贫的基因分析和产前诊断有一定的参考价值。     

抗—HBe阳性患者HBV—DNA,β2—MG及肝组织学改变的研究

对３２例抗－ＨＢｅ阳性患者血清的ＨＢＶ－ＤＮＡ，β－ＭＧ及肝组织学改变进行了观察，结果显示：抗－ＨＢｅ阳性患者５９％存在病毒复制，β２－ＭＧ慢活肝稍高于慢直，但全部均偏低，均有肝病理组织学改变，其中ＣＰＨ２８例（８７．５％），ＣＡＨ３例（９．４％），ＥＨＣ１例（３．１％）。指出鉴于抗－ＨＢｅ阳性患者仍有半数以上有病毒复制，免疫功能低下，全部有肝组织学损害，故其治疗难度不亚于ＨＢｅＡｇ阳性者。     

大鼠乳腺肿瘤线粒体细胞色素b基因突变

目的 了解大鼠乳腺癌组织、癌旁组织和正常组织的线粒体细胞色素ｂ基因变异,６方法 提取细胞总ＤＮＡ,用ＰＣＲ法扩增细胞色素ｂ基因,产物用ＤＮＡ自动测序法进行序列分析。结果 癌组织发生了ｎｔ １４９３１Ｃ→Ｇ,ｎｔ１５００４Ｃ→Ｇ和ｎｔ １５４３５ Ｔ→Ｃ３处点突变。癌旁组织发生了ｎｔ１５４３６Ａ→Ｃ突变,正常组织没有突变。结论 大鼠乳腺癌组织和癌旁组织线粒体细胞色素ｂ基因存在突变。     

国产洛伐他汀调血脂作用多中心临床研究

对国产洛伐他汀进行多中心临床研究，洛伐他汀用药４、８周ＴＣ分别降低２２．３％及２６．２％，ＬＤＬ－Ｃ分别降低２８．１％及３３．５％，ＨＤＬ－Ｃ分别升高８．８％及１１．７％，（ＴＣ－ＨＤＬ－Ｃ）／ＨＤＬ－Ｃ比值降低２９．５％及３７．２％。对高胆固醇血症合并高甘油三酯血症患者可使血清ＴＧ水平分别降低２１．５％及２８．２％。国产洛伐他汀对高脂血症患者调血脂临床疗效及不良反应与进口产品美降之基本相同。     

肝豆状核变性病基因突变分析

目的：寻找中国人肝豆状核变性病（ＷＤ）基因突变的形式及频率。方法：应用ＰＣＲＳＳＣＰ法对４５名ＷＤ患者进行基因ｅｘｏｎ５、８、１４、１８筛选，对确定异常者进行ＤＮＡ序列分析。结果：在４５名患者ＤＮＡ样本的ＰＣＲ扩增产物中未发现ｅｘｏｎ１８泳动异常，而３名患者显示ｅｘｏｎ１４多态性泳动异常，但这种泳动也可见于正常标本中。４例患者显示ｅｘｏｎ５单链构象多态性，序列分析表明为Ｔ插入突变，其突变频率为８８９％；２例存在ｅｘｏｎ８泳动异常，序列分析表明该外显子同时存在７７０ｃｏｄｏｎＣ２２５０→Ｇ同义突变和Ｇ２２７３→ＴＡｒｇ７７８→Ｌｅｕ错义突变，其突变频率为４４４％。结论：不同功能区域的ｅｘｏｎ５及ｅｘｏｎ８外显子突变可能是中国人ＷＤ发病的原因     

国产洛伐他汀调血脂作用多中心临床研究

对国产洛伐他汀进行多中心临床研究，洛伐他汀用药４、８周ＴＣ分别降低２２．３％及２６．２％，ＬＤＬ－Ｃ分别降低２８．１％及３３．５％，ＨＤＬ－Ｃ分别升高８．８％及１１．７％，（ＴＣ－ＨＤＬ－Ｃ）／ＨＤＬ－Ｃ比值降低２９．５％及３７．２％。对高胆固醇血症合并高甘油三酯血症患者可使血清ＴＧ水平分别降低２１．５％及２８．２％。国产洛伐他汀对高脂血症患者调血脂临床疗效及不良反应与进口产品美降之基本相同。     

错配PCR—RFLP检测乙型肝炎病毒X基因／C基因启动子变异

设计错配ＰＣＲ－限制性片段长度多态性分析（ＰＣＲ－ＲＦＬＰ）检测中国ＨＢＶ毒株Ｃ基因启动子（ＢＣＰ）区第２个ＡＴ丰富区的一对点突变；核苷酸（ｎｔ）１７６２的碱基由Ａ→Ｔ和１７６４的碱基由Ｇ→Ａ变异。结果发现在３２例慢性ＨＢＶ感染者中ＢＣＰ变异者有１０例总检出率为３１．２％。提示在我国ＨＢＶ毒株ＢＣＰ区这一联合估变较常见。ＰＣＲ－ＲＦＬＰ技术与序列分析结合，对于研究这一新发现的热点变异与临床的关系具