脑胶质瘤组织PTEN基因异常及其蛋白表达

目的:研究不同级别脑胶质瘤中PTEN基因第7外显子缺失,突变及PTEN蛋白的表达,分析PTEN基因与脑胶质瘤发生发展的关系.方法:64例胶质瘤标本中病理分化为高分化组(Ⅰ,Ⅱ级)29例,低分化组(Ⅲ,Ⅳ级)35例.采用双重PCR,PCR-SSCP,DNA测序对PTEN基因第7外显子的异常进行分析;采用免疫组化技术对PTEN蛋白表达进行分析.结果:PTEN基因第7外显子总的缺失和突变率为52%.高分化组14%,低分化组83%,2组差异显著(P＜0.05).PTEN 蛋白的表达率为48%.高分化组66%,低分化组34%,2组差异显著(P＜0.05).PTEN蛋白表达在PTEN基因异常组阳性表达率3%,低于PTEN基因正常组的97%,2组差异显著(P＜0.05).结论:PTEN基因缺失和突变是胶质瘤发生的晚期事件,与其蛋白阳性表达率呈负相关.PTEN蛋白阳性表达随胶质瘤恶性程度的增加有不同程度的减少.     

FHIT、PTEN在人脑胶质瘤中的表达和意义

目的 检测人脑胶质细胞瘤中脆性组氨酸三联体基因（FHIT）、第10号染色体同源丢失性磷酸酶-张力蛋白基因（PTEN）的表达情况.方法 采用S-P免疫组织化学法.结果 FHIT和PTEN阳性染色定位于细胞浆,52例胶质瘤标本中,有39例FHIT呈阳性表达,低度恶性肿瘤（Ⅰ～Ⅱ级）的阳性表达率明显高于高度恶性（Ⅲ～Ⅳ级）肿瘤（P 〈0.05）;而有37例PTEN呈阳性表达,低度恶性肿瘤的阳性表达率明显高于高度恶性肿瘤（P〈0.05）.FHIT与PTEN在脑胶质瘤细胞中的表达呈正相关.结论 FHIT与PTEN的表达与脑胶质瘤的发生、发展密切相关,联合检测FHIT、PTEN在胶质瘤中的表达有助于对肿瘤细胞增殖能力、分化程度做出正确评价.     

PTEN基因在子宫内膜癌中的表达及其临床意义

ＰＴＥＮ是 1997年发现的肿瘤抑制基因 ,有报道 ,ＰＴＥＮ是子宫内膜癌中突变率最高的基因 ,也是该肿瘤恶性事件中占主导地位的突变基因[1] 。ＰＴＥＮ表达在不同类型的恶性肿瘤组织和肿瘤细胞系中有缺失 ,但在子宫内膜癌中的研究国内外很少有报道。一、对象与方法1 对象 :5 4例新鲜组织标本取自我院 1999年 4月至2 0 0 1年 10月首次诊断的术中所取子宫内膜。回顾性对 2 0 0例石蜡包埋的子宫内膜组织进行切片。所有组织均经病理学证实。其中正常子宫内膜组织 31例 ,子宫内膜增殖症 71例 ,非典型增生 2 5例 ,子宫内膜癌 73例 ,其中腺癌 5 7例…     

PTEN、Ki-67在脑胶质瘤中的表达及意义

目的:对抑癌因子PTEN、Ki-67及其在人脑胶质细胞瘤中的表达进行相关研究。方法:免疫组化法检测80例已确诊为脑胶质瘤中PTEN、Ki-67的表达,结合临床随访资料进行分析。结果:PTEN阳性染色定位于细胞核,高分化脑胶质瘤(Ⅰ～Ⅱ级)的阳性表达率明显高于低分化肿瘤(Ⅲ～Ⅳ级)的阳性表达率。Ki-67阳性染色定位于细胞核,高分化脑胶质瘤(Ⅰ～Ⅱ级)阳性表达率明显低于低分化肿瘤(Ⅲ～Ⅳ级)。PTEN和Ki-67的表达与患者的年龄、性别、肿瘤的大小及发病部位均无相关性但二者之间的表达呈负相关。结论:PTEN、Ki-67在脑胶质瘤中的异常表达与肿瘤的分化程度相关,PTEN、Ki-67基因异常在脑胶质瘤的形成及其发展中有着拮抗作用。可以认为PTEN突变或缺失在人脑胶质瘤的发生发展中起重要作用,Ki-67可作为反映胶质瘤细胞增殖潜能的指标。     

脑胶质瘤组织PTEN mRNA表达及其基因突变SSCP分析

目的：探讨PTEN基因表达水平及其基因突变与脑胶质瘤的发生及恶性进展的关联性。方法：选取脑胶质瘤组织15例,以4例非胶质瘤脑组织为对照,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测脑胶质瘤组织PTEN mRNA表达水平,采用单链构象多态性分析法（SSCP analysis）快速筛查脑胶质瘤组织PTEN基因突变状况。结果：RT-PCR结果,脑胶质瘤组织PTEN mRNA表达水平(0.063±0.006)较对照组(0.126±0.015)明显降低（P<0.05）。经单链构象多态性分析, 脑胶质瘤组织PTEN基因外显子8、9未检测到突变,但其中1例PTEN基因外显子5的聚丙烯酰胺凝胶电泳结果显示电泳带飘移,考虑可能为杂合子突变。结论：PTEN基因低表达及基因突变可能对胶质瘤发生、发展有促进作用。     

PTEN基因在喉鳞癌中的表达及意义

目的:探讨蛋白酪氨酸磷酸酶基因(PTEN)在喉鳞癌中的表达及其临床意义.方法:应用半定量RTPCR方法检测喉癌组织中PTEN mRNA的表达.结果:淋巴结转移组喉癌较正常喉组织PTEN mRNA表达下降有统计学意义(P＜0.05).病理低分化与高分化相比,PTEN mRNA表达差异有统计学意义(P＜0.05).结论:PTEN基因表达下降在喉鳞癌演进中起重要作用.     

PTEN基因在卵巢子宫内膜异位症组织中的表达

①目的　探讨卵巢子宫内膜异位症 (内异症 )组织中PTEN基因表达及临床意义。②方法　用半定量逆转录聚合酶链反应 (RT PCR) ,检测内异症组织和正常卵巢组织中PTEN基因外显子 1 9和 5 9mRNA的表达水平 ,同时结合病人的临床资料进行分析。③结果　内异症组织中PTENmRNA外显子 1 9、5 9相对表达水平与正常卵巢组织比较 ,差异有显著性 (t=3.12 2、2 .2 0 9,P <0 .0 1、0 .0 5 )。内异症组织中PTENmRNA表达水平与病人年龄、囊肿大小无关 (t =0 .111～ 1.4 4 7,P >0 .0 5 ) ;与临床分期有关 (t =2 .6 78、2 .2 84 ,P <0 .0 5 )。④结论PTENmRNA转录水平的异常可能是内异症恶变的早期事件。     

WWOX基因在脑胶质瘤中的表达

目的 探讨抑癌基因WWOX在胶质瘤发生发展中的作用以及与胶质瘤病理分级的关系.方法 采用半定量RT-PCR方法检测31例胶质瘤手术切除标本和3例正常脑组织WWOX mRNA的表达情况,用琼脂糖凝胶电泳PCR产物,凝胶图像分析系统检测基因的相对量.最后实验数据采用SAS软件行x2检验,分析WWOX mRNA的表达与胶质瘤病理分级的关系.结果 31例胶质瘤组织中共有17例(54.8%)发生WWOX基因表达缺失,3例正常脑组织均无基因表达缺失.胶质瘤组织和正常脑组织中WWOX mRNA失表达水平存在明显差别(P＜0.05).各病理分级组间WWOX mRNA失表达水平无明显差别(P＞0.05).结论 WWOX mRNA在胶质瘤中表达缺失率较高,且胶质瘤组织和正常脑组织中WWOX mRNA失表达水平存在明显差别(P＜0.05).但恶性程度高的胶质瘤组织与恶性程度低的胶质瘤组织WWOX mRNA失表达水平无明显差异,这表明WWOX基因缺失或低表达在胶质瘤发生过程中起重要作用,但可能对胶质瘤的进一步发展作用不明显.     

PTEN基因诱导人脑胶质瘤SHG-44细胞凋亡及bcl-2表达下调

目的 探讨PTEN基因对人脑胶质瘤SHG－44细胞凋亡及凋亡相关基因bcl-2表达的影响，阐明PTEN基因抑制肿瘤细胞增殖的机制。方法PTEN基因体外转染SHG－44细胞，筛选阳性细胞克隆，以原位杂、免疫组化方法检测PTEN基因的表达情况；采用透射电镜、流式细胞仪和核DNA琼脂糖凝胶电泳检测细胞的凋亡情况；以免疫荧光法检测bcl-2基因的表达。结果 PTEN基因转染的SHG－44细胞有PTEN蛋白的表达。透射电镜下可见转染PTEN基因后细胞核染色质浓缩边集、胞质浓缩、核破裂及凋亡小体形成等典型的凋亡表现；流式细胞仪显示细胞周期从G1期到S期发生抑制，并且在G1期峰前出现一明显的凋亡峰（15．9％）；细胞核DNA琼脂糖凝胶电泳呈现凋亡细胞特有的梯状条带；bcl-2的表达也显著下调。结论 PTEN基因可诱导SHG－44细胞凋亡，并下调bcl-2蛋白的表达，这可能是PTEN基因抑制肿瘤细胞增殖的分子机制之一。     

COX-2在脑胶质瘤中的表达及与PTEN的相关性研究

目的:研究环氧化酶-2(CXO-2)与蛋白酪氨酸磷酸酶基因(PTEN)在各级脑胶质瘤中的表达阳性率与脑胶质瘤病理分级的关系,以及COX-2与PTEN之间的关系.方法:利用免疫组化SP法检测46例脑胶质瘤手术中标本中COX-2与PTEN的表达水平,并比较二者的相关性.结果:随着脑胶质瘤病理级别的升高,COX-2的表达阳性率分别为Ⅰ级15.38%,Ⅱ级33.33%,Ⅲ级70.00%,Ⅳ级87.50%.PTEN的表达阳性率分别为Ⅰ级53.85%,Ⅱ级46.67%,Ⅲ级30.00%,Ⅳ级0.00%.并且将样本分为低级别组合高级别组,二者之间的差别具有统计学意义(P＜0.05).结论:COX-2与PTEN的表达对判断胶质瘤的病理分级及开展临床新的治疗方法有一定的意义.     

PTEN基因在人肝细胞癌组织中的表达及临床意义

目的:研究人原发性肝癌(HCC)PTEN基因的表达及其临床意义.方法:用RT-PCR和免疫组织化学方法分别检测人HCC组织、癌旁组织、正常组织中PTEN-mRNA和人HCC组织、癌旁组织中PTEN蛋白的表达情况.结果:PTEN mRNA在人的正常组织、癌旁组织、HCC组织中的表达依次降低,差异有统计学意义(P＜0.01);PTEN蛋白的表达在人HCC组织显著低于癌旁组织(P=0.038).PTEN基因的表达与临床分期、门脉癌栓、病理分级有密切的关系(P=0.031, P=0.001, P=0.025).临床分期为Ⅰ～Ⅱ期的,其表达较Ⅲ～Ⅳ期的高;无门脉癌栓的较有门脉癌栓的表达高;病理分级为Ⅰ～Ⅱ级的较Ⅲ～Ⅳ级的表达高.结论:HCC的发生中可能存在PTEN 基因的突变或缺失.PTEN基因的表达缺失可能与HCC的恶性程度、疾病的进程及HCC的侵袭转移有密切关系.PTEN基因低表达,HCC病人病程较晚、肝癌的恶性程度较高,较容易发生侵袭转移,预后较差.     

卵巢上皮性癌组织中PTEN mRNA的表达

①目的　探讨卵巢上皮性癌组织中PTEN基因的表达及其临床意义。②方法　应用半定量逆转录聚合酶链反应 (RT PCR) ,分别检测 4 9例卵巢上皮性癌组织和 2 0例正常卵巢组织中PTEN基因外显子 5 8和 1 8mRNA的表达 ,同时结合临床病理资料进行分析。③结果　 4 9例卵巢上皮性癌组织中PTENmRNA相对表达水平外显子 5 8为 0 .83± 0 .17,外显子 1 8为 0 .78± 0 .14 ;2 0例正常卵巢组织中PTENmRNA相对表达水平外显子5 8为 1.4 2± 0 .2 9,外显子 1 8为 1.37± 0 .2 4 ,两者比较差异有显著性 (t=10 .93、12 .73,P <0 .0 5 )。卵巢上皮性癌组织中PTENmRNA表达水平的降低与卵巢上皮性癌的组织类型、淋巴结有无转移无关 (t =1.32、1.14 ,F =1.14、1.0 4 ,P >0 .0 5 ) ;但随临床分期和组织学分级的增高其表达水平明显降低 (t=2 .5 3～ 2 .99,P <0 .0 5 )。④结论　PTEN基因转录水平的异常在卵巢上皮性癌的发生发展中具有一定的作用。     

脑胶质瘤多药耐药基因表达及其对化疗药物敏感性

①目的　检测 1型多药耐药基因 (MDR1)产物P170在人脑胶质瘤组织中表达及其对化疗药物敏感性。②方法　采用免疫组化的方法 ,对 38例人脑胶质瘤手术切除标本的MDR1表达水平进行检测 ;采用四唑蓝快速比色法检测氟尿嘧啶 (FU )、顺铂 (DDP)、甲氨喋呤 (MTX)、丝裂霉素 (MMC)、司莫司汀 (MeCCNU)、洛莫司汀(CCNU)、双氯乙基亚硝脲 (BCNU)、威猛 2 6 (VM 2 6 )对脑胶质瘤细胞的抑制率。③结果　 38例人脑胶质瘤细胞P170阳性表达率为 6 5 .7% ,与正常脑组织 (表达率为 0 )比较差异有显著性 (P =0 .0 0 0 2 ) ;BCNU ,MeCCNU ,CCNU对胶质瘤的抑制率较高 ,FU ,MTX ,MMC对胶质瘤的抑制率较低 ,差异有显著性 (F =4 7.6 ,q =5 .2 5～ 6 .78,P <0 .0 5 )。脑胶质瘤对 8种化疗药物的敏感性差异有极显著性 ;随着胶质瘤恶性程度的增高 ,P170的阳性表达率逐渐升高 (胶质瘤Ⅰ～Ⅳ级的表达率分别为 0 ,5 3.3% ,70 .6 % ,10 0 .0 % )。④结论　脑胶质瘤的耐药性与MDR1表达水平密切相关。     

PTEN基因在原发性肝细胞癌中的表达

目的 探讨PTEN基因变异在原发性肝细胞癌（HCC）发生发展中的作用。方法 应用半定量逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）技术,对30例肝癌组织、30例癌旁组织和16例正常肝组织细胞中PTEN基因的表达情况进行了检测和分析。结果 肝癌组织中PTEN基因表达水平明显低于癌旁组织和正常肝组织（F=6．785,q=4．269、4．549,P〈0．05）。低分化肝癌组织中PTEN基因表达水平显著低于高、中分化肝癌组织（t=3．266,P〈0．01）。结论 PTEN基因失活与肝癌发生密切相关;PTEN基因表达水平与HCC恶性程度有明显相关性,提示萁蛮异可以作为病人预后判断的指标．     

EFFECTS OF MUTATION AND EXPRESSION OF PTEN GENE mRNA ON TUMORIGENESIS AND PROGRESSION OF EPITHELIAL OVARIAN CANCER

PTEN/MMAC1/TEP1phosphotaseandtensinho-mologuedeletedonchromosome10/mutatedinmultipleadvancedcancers/TGF-βregulatedandepit-helialcellenrichedphosphatase1mapstohumanchro-mosomesubband10q32.3andencodesadualspecificproteinphospholipidphosphatasethatisinvolvedinavarietyofsignaltransductionpathways.1PTENin-hibitsshc'sphosphorylationandthereforeblockstheactivationoftheRas/MAP-kinaseMAPKpathwayhe-nceexplainingthetumorsuppressiveeffectofPTEN.2AnothermechanismofPTENisdephosphorylationandina…     

DOWN-REGULATED EXPRESSION OF PTEN GENE AND LOH OF ITS EPIGENETIC MICROSATELLITES IN GASTRIC CARCINOMA

TherecentlyidentifiedPTEN/MMAC1/TEP1(phosphataseandtensinhomologuedeletedonchro-mosome10/mutatedinmultipleadvancedcancers/TGF-βregulatedandepithelialcellenrichedphos-phatase1)geneisanoveltumorsuppressorgenelo-catedtochromosome10q23.3(1).PTENencodingproductisadualspecificityphosphatasewithhomolo-gytotensinandauxillin.PTENdephosphorylatesphosphatidylinositol?triphosphated(PIP3),whichacti-vatesserine/threoninekinase,Akt.(2,3).Thephos-phataseactivityofPTENdown?regulatestheAktsig-nalin…     

P16基因重组质粒的构建及其对人脑胶质瘤细胞的抑制作用

目的：探讨P16基因对人胶质瘤细胞的抑制作用,为胶质瘤致瘤机理的研究和基因治疗提供理论基础。方法：运用分子克隆技术构建重组人P16基因功体（pcDNA3-P16),通过脂质体介导法将P16cDNA转染到存在P16基因纯合缺失的人胶质瘤细胞系SHG－44。结果：PCR证实含P16cDNA质粒DNA已转入SHG－44细胞,Western blot显示有P16蛋白表达。细胞生长曲线显示转杂P16基因的SHG－44细胞（SHG－44－P16）生长明显受到抑制,基抑制率达84．27％。在软琼脂上克隆形成能力下降约6倍。细胞周期分析表明,处在G1期细胞由30．70％提高到66．21％。结论：野生型P16基因导入P16基因功能缺失的肿瘤细胞,能恢复其抑制肿瘤细胞生长的功能。     

人锰超氧化物歧化酶基因在大肠杆菌中的表达

目的：研究人锰超氧化物歧化酶(hMn—SOD)基因在不同大肠杆菌中的表达水平。方法：以人肝细胞株(L02)总RNA为模板,用RT—PCR扩增出hMn—SOD cDNA,构建重组质粒pSE380—MnSOD并分别转化至3种大肠杆菌DH5α、TOP10和BL21。采用SDS—PAGE和改良的连苯三酚法分别检测SOD酶蛋白及其活性。结果：hMn—SOD基因在3种大肠杆菌中都可以表达,表达量分别为菌体总蛋白质的11．9％、15．8％和30．2％。表达产物具有SOD酶活性,酶比活性分别为90．15U／mg、114．06U／mg和216．13U／mg。结论：hMn—SOD基因在不同大肠杆菌中的表达水平明显不同,在BL21中表达量较高。     

脑胶质瘤组织中P170蛋白的表达及意义

①目的　探讨多药耐药基因在脑胶质瘤组织中的表达及其意义。②方法　采用免疫组化Ｓ－Ｐ法,检测了３８ 例脑胶质瘤组织中多药耐药基因Ｐ１７０ 蛋白的表达。③结果　３８ 例脑胶质瘤组织中Ｐ１７０ 蛋白的阳性表达率为６５．７％ ,与正常脑组织（表达率为０）比较差异有显著性（Ｐ＝ ０）。Ｐ１７０在Ⅰ～Ⅳ级脑胶质瘤的阳性表达率分别为０,５３．３％ ,７０．６％ ,１００．０％ ,其中Ⅰ级与Ⅲ,Ⅳ级间差异有显著性（Ｐ＝ ０．０１８,０．００３）, 其余各组间差异无显著性。Ｐ１７０ 的异常表达与脑胶质瘤的病理级别呈正相关（ｒｓ＝ ０．８８２,Ｐ＜ ０．０５）。④结论　检测脑胶质瘤Ｐ１７０ 表达水平对判断化疗效果及预后有一定意义。