L-苏糖酸盐对破骨细胞骨吸收功能影响的体外研究

目的　观察 L -苏糖酸盐对体外兔破骨细胞 (OC)骨吸收功能的影响。方法　制备骨磨片 ,培养 OC,并分别加入高中低浓度 (10 - 5、10 - 7、10 - 9m ol/L )的 L -苏糖酸钙、L -苏糖酸钠、阿仑膦酸钠、17β-雌二醇、葡萄糖酸钙 ,实验设以上各浓度组及对照组 (共 16组 ,每组 n=8) ,甲苯胺蓝染色 -光镜观察分析骨片上骨吸收陷窝面积 ,EL ISA测定上清液 型胶原 C-末端肽 (CTx或 Crosslaps)浓度。结果　 1L -苏糖酸钙各组陷窝面积及 CTx浓度均较葡萄糖酸钙组及对照组减少 (P<0 .0 0 1) ;L -苏糖酸钠各组作用较对照组显著 (P<0 .0 5 ) ;而葡萄糖酸钙组与对照组无显著差异 (P>0 .0 5 )。 2同浓度 L -苏糖酸钙较 L -苏糖酸钠组陷窝面积、CTx浓度减少显著 (P<0 .0 5 ) ;按 CTx水平 ,低、中浓度 L -苏糖酸钙组达到或超过中、高浓度 L -苏糖酸钠组作用 (P<0 .0 5 )。 3高浓度 L -苏糖酸钙组作用介于中、低浓度 17β-雌二醇组之间 (P<0 .0 5 ) ,但无阿仑膦酸钠各组显著 (P<0 .0 0 1) ;4上清液 CTx浓度与陷窝面积高度相关 (r=0 .876 )。 5 CTx在多个组间比较时显示比陷窝面积更敏感、更稳定 (平均变异系数分别为 10 .0 1%vs14 .6 6 %)。结论　 L -苏糖酸盐尤其是 L -苏糖酸钙在体外有一定的抑制破骨细胞骨吸收的作用 ,其     

高效液相色谱法同时测定3种补钙剂的含量

目的建立同时测定乳酸钙、葡萄糖酸钙和柠檬酸钙3种补钙剂的方法。方法以C18色谱柱、0.025mol·L-1NaH2PO4(pH=2.50)溶液为流动相分离、210nm紫外检测、外标法定量。结果乳酸、柠檬酸、葡萄糖酸钙的线性范围分别为0.9592～46.04、0.4302～20.65、0.2404～11.54mmol·L-1;方法回收率>98.0%;日内及日间精密度<2.0%。结论该方法快速、简便、准确,可用于乳酸钙、葡萄糖酸钙、柠檬酸钙的质量控制。     

苏安心鼻吸剂中冰片的含量测定

目的建立苏安心鼻吸剂中冰片的含量测定方法。方法采用气相色谱方法。结果冰片标准曲线A=4.8582C+14.809(r=0.9998);在20.08～100.4μg/mL峰面积和浓度呈良好线性关系;平均回收率为101.2%,RSD为1.96%(n=6)。结论气相色谱方法灵敏、准确,重复性好,可用于测定苏安心鼻吸剂中冰片的含量。     

高效液相色谱法测定阴洁肤净洗液中苦参碱的含量

目的建立阴洁肤净洗液中苦参碱的含量测定方法。方法高效液相色谱法测定样品中苦参碱含量采用ODS柱、流动相为乙腈-0.2mol.L-1磷酸二氢钾(0.2mol.L-1磷酸二氢钾里含0.2%的三乙胺,用磷酸调pH值2.7)6∶94,检测波长207nm;流速1.0mL.min-1。结果该方法苦参碱在0.7968~3.984μg范围内线性关系良好(r=0.9999),平均回收率100.2%,RSD为1.18%(n=5)。结论所建立的方法简便、快速、准确,可用于测定阴洁肤净中苦参碱的含量。     

抗坏血酸及L-半胱氨酸的同时快速测定法

目的建立抗坏血酸与L-半胱氨酸的动力学吸光光度同时测定法。方法pH值在2~9时,抗坏血酸与L-半胱氨酸均可与Fe3-+邻菲咯啉混合液反应,生成Fe2-+邻菲咯啉有色配合物,但两者反应速度相差极大。根据这个原理,采用停流流动注射分析法。结果两者测定的线性范围分别为0~24mg.L-1和0~280mg.L-1,相应的检出限为1mg.L-1和16mg.L-1,抗坏血酸与L-半胱氨酸浓度分别为12.0mg.L-1和160.0mg.L-1时,测定的相对标准偏差分别为0.9%和0.6%,采样频率为30样.h-1。结论该法灵敏、快速、准确,选择性较高,且流路及设备简单,实用性强,抗坏血酸及L-半胱氨酸的加标回收率分别可达95.2%和92.8%。     

原子吸收法测定钙片中的钙含量

目的:探讨用火焰原子吸收分光光度法测定钙片中钙含量的临床价值。方法:5份样品经酸消解,在选定的最佳工作条件下,采用火焰原子吸收光谱法测定钙片中的钙含量。结果:该方法的RSD为2.58%;加标回收率为94.5%～103.7%。结论:原子吸收法简便、快速、灵敏,精密度高,结果稳定,重复性好,适用于检测钙片中的钙含量。     

高效液相色谱法测定生物样品中儿茶酚胺及其代谢产物

目的 :建立一种测定生物中儿茶酚胺及其代谢产物的灵敏方法。方法 :样品经过磺基水杨酸去蛋白后直接进样 ,测定各种生物样品中的儿茶酚胺及其相关的代谢产物 ;流动相为 2 0mmol·L- 1 柠檬酸三钠 (pH4 .5 0 ) 甲醇(95∶5 ,V V) ,柱温 35℃ ,检测器电压为 0 75V。结果 :该方法能同时检测 7种化合物。最低检测限为 10～ 2 5pg·ml- 1 ,回收率均在 96 %以上 ,线性范围为 2 0pg·ml- 1 ～ 10 μg·ml- 1 。结论 :该方法灵敏可靠 ,能同时测定生物样品中的儿茶酚胺及其代谢产物     

分光光度法测定琥珀酸亚铁片中铁的含量

目的建立分光光度法测定琥珀酸亚铁片中铁的含量的方法。方法在酸性条件下,Fe2+与邻二氮菲生成有色配合物,该配合物在510 nm处有最大吸收,利用分光光度法测定铁的含量。结果Fe2+的线性范围为0.042 44~2.546 4 mg.L-1,方法平均回收率为99.5%,日内及日间精密度相对标准偏差(RSD)小于1.9%。结论用分光光度法测定琥珀酸亚铁片含量简便、快速、准确,并可同时测定琥珀酸亚铁片中Fe2+和Fe3+的含量,可用于该制剂的质量控制。     

高效液相色谱法对比紫外分光光度计法测定奥硝唑片的含量

目的 HPLC法及UV法测定奥硝唑片的含量对比。方法高效液相色谱法选择色谱柱为Agilent Eclipse C18(4.6×250mm,5μm),流动相为甲醇-水(20:80),流速为1.0m L·min-1,检测波长为318nm;紫外法选择312nm波长测定含量。结果 HPLC法中奥硝唑在2.59μg·m L-1~51.75μg·m L-1范围内线性关系良好,回归方程:Y=14.895X+1.9243,r=0.9998(n=6),加样回收率平均值为99.94%,RSD为0.4%;UV法中奥硝唑在2.08μg·m L-1~20.76μg·m L-1范围内线性关系良好,回归方程:Y=0.035X-0.003,r=0.9999(n=6),加样回收率平均值为99.83%,RSD为0.5%;结论 HPLC法对比紫外分光光度法测定奥硝唑含量结果更准确、线性范围更宽,建议考虑HPLC法来测定奥硝唑片中奥硝唑含量。     

高效液相色谱法测定细辛脑注射液的含量及有关物质

目的建立测定细辛脑注射液的含量及有关物质的高效液相色谱法。方法采用KromasilC18柱,以甲醇-水(体积比80∶20)为流动相,检测波长313 nm。结果本色谱条件能分离细辛脑及有关物质;在2~80 mg.L-1浓度范围内,细辛脑的峰面积与其浓度呈线性关系,方法平均回收率为100.2%,RSD为0.37%。结论本法可用于细辛脑注射液的含量及有关物质测定。     

离子交换色谱法同时分析绿茶中有机酸和无机阴离子的含量

目的　建立能够同时检测绿茶中有机酸和无机阴离子的方法 ,了解不同绿茶中有机酸和无机阴离子的含量。方法　将市售信阳毛尖茶、龙井茶和湖南茉莉花茶分别浸泡于新沸后蒸馏水中 2 0min ,过滤 ,过Shim - packIC阴离子交换柱 ,0 .75mmol·L-1邻苯二甲酸氢钾0 .2 5mmol·L-1邻苯二甲酸混合液洗脱 ,离子色谱仪分析。结果　经过简单的样品处理即可方便的同时检测茶叶中的多种有机酸和无机阴离子含量 ,各色谱峰分离良好。信阳毛尖茶、龙井茶和湖南茉莉花茶 3种绿茶中乙酸含量为 5 .71～ 6 .99mg·g-1,抗坏血酸 9.2 1～ 10 .87mg·g-1,苹果酸 3.6 6～ 5 .18mg·g-1,柠檬酸 6 .94～ 8.94mg·g-1,酒石酸 0 .80～ 1.5 9mg·g-1,琥珀酸 4 9.4 9～ 6 6 .79mg·g-1,H2 PO-47.76～ 8.88mg·g-1,Cl-1.5 2～ 2 .0 0mg·g-1,SO2 -43.6 3～ 4 .73mg·g-1。结论　不同产地绿茶中有机酸和无机阴离子的含量有所不同 ,离子交换色谱法可同时检测各种含量     

反相高效液相色谱法测定脑脊液中头孢三嗪浓度

目的建立脑脊液中头孢三嗪含量的测定方法。方法以C18色谱柱、0.05mol.L-1Na2HPO4(pH=7.20)∶甲醇=85∶15为流动相,在35℃2、40nm波长下分离、检测头孢三嗪,外标法定量。结果线性范围为0.625~20.0mg.L-1,r=0.9989。10.0、5.0、1.0mg.L-1头孢三嗪的平均回收率为98.5%。3浓度的平均日内精密度(RSD)为3.60%,平均日间RSD为4.06%。结论本方法快速、简便、准确,可用于科研和临床工作中头孢三嗪脑脊液浓度的快速检测。     

牛磺酸对乙醇醛细胞毒性的抑制作用

目的：研究牛磺酸对乙醇醛所致细胞毒性的抑制作用。 方法：采用单细胞凝胶电泳技术（彗星实验）检测牛磺酸（50 mmol•L^-1）对乙醇醛（GA, 0.1 mmol•L^-1）所致小鼠脾淋巴细胞DNA损伤的抑制作用,并用2,4-二硝基苯肼法定量检测牛磺酸对反应体系中乙醇醛含量的影响,同时设乙醇醛阳性对照组和PBS阴性对照组。 结果：在0.1 mmol•L^-1乙醇醛溶液中加入50 mmol•L^-1牛磺酸后,小鼠脾淋巴细胞DNA的损伤率较阳性对照组明显降低（P<0.01）,彗星实验的迁移距离（尾长）也显著缩短（P<0.01）,牛磺酸呈剂量依赖性明显降低反应体系中乙醇醛的含量。 结论：牛磺酸对乙醇醛的细胞毒性有明显抑制作用。     

Citicoline对大鼠中脑原代细胞培养的神经保护作用

目的：探讨胞二磷胆碱（citicoline,CC）对6-OHDA诱导的帕金森体外细胞模型的保护作用及其机理。方法：孕15 d大鼠胚胎中脑原代培养,在培养第6 、8及10天,实验组加不同浓度CC（2、1、0.1、0.01和0.001 mmol·L^-1 ）,并于第11天加50 μmol·L^-1的6-OHDA作用0.5 h,制作帕金森病细胞模型;6-OHDA组为原代培养细胞加50 μmol·L^-1的6-OHDA;对照组为原代培养细胞。培养11 d收集细胞。采用MTT法测细胞活力,通过流式细胞仪,用Fluo3/AM检测细胞内Ca²⁺i及用罗丹明123检测线粒体膜电位（Δψm）。结果：2、1和0.1 mmol·L^-1 CC组,细胞活力与对照组比较明显增高,并随着浓度的增加而增加,差异具有显著性(P<0.05)。1、0.1、0.01 和0.001 mmol·L^-1 CC+6-OHDA组,细胞活力均高于6-OHDA组,差异有显著性（P<0.01）。1、0.1、0.01、0.001 mmol·L^-1 CC+6-OHDA组细胞内Ca²⁺i均明显下降,分别为(32.23±1.87)%、(17.09±7.45)%、(21.71±8.89)%及(29.18±4.71)%,与6-OHDA组（49.30±7.62）%相比,差异均有显著性（P<0.01）;与对照组（42.40±0.81）%比较明显下降,差异均有显著性（P<0.01）。CC+6-OHDA各组与6-OHDA组比较均使Δψm升高,其中1 mmol·L^-1CC+6-OHDA组Δψm高于对照组,差异有显著性（P<0.01）。结论：CC通过保护神经元细胞膜、增加细胞活力、降低细胞内Ca²⁺i以及提高Δψm,发挥其对神经元的保护作用。     

三氯化镧对体外培养人肝癌细胞的抑制作用

目的：研究三氯化镧（LaCl₃）对人肝癌细胞株SMMC-7721生长的影响及其作用机理。方法：体外培养的人肝癌细胞SMMC-7721，给予LaCl₃（0.05、0.10、0.50及1.00 mmol•L^-1）培养不同时间（1、3、5和7 d），观察癌细胞生长曲线、集落抑制率、培 养上清中甲胎蛋白(AFP)的变化。采用流式细胞术检测SMMC-7721细胞周期变化。免疫组织化学检测培养 细胞CyclinD1、 PCNA、 CDK₄及P16的表达情况。结果: MTT法显示0.50及1.00 m mol•L^-1LaCl ₃对SMMC-7721生长具有明显的抑制作用, 且具有剂量和时间的依赖性; 0.10和0.50 mm ol•L^-1的LaCl₃对肝癌细胞集落的形成抑制率分别为51%和67%（P<0.05）,1.00 mmol•L^-1 LaCl ₃的集落形成抑制率达97％（P<0.01 ）；不同剂量LaCl₃　 作用SMMC-7721细胞3 d后，细胞周 期发生明显变化，表现为G₀/G₁期细胞百分数增加，与对照组比较差异有显著性（P<0.01）。0.10、0.50及1.00 mmol•L^-1 LaCl_{3均可抑制AFP的分泌，其中以1.00 mmol•L^-1 LaCl3组作用最显著（P<0.01 ）。免疫细胞化学结果显示，LaC l3促进P16蛋白 的表达，使Cyclin D1、PCNA和CDK4蛋白的表达下降。结论: LaCl3 对SMMC-7721细胞生长具有明显的抑制作用, 其机制可能与阻断细胞周期进程、降低细胞的恶性程度有关。}     

青龙藤提取物对糖尿病模型大鼠的降血糖作用

目的：探讨青龙藤提取物(BH)降低糖尿病模型大鼠的血糖作用。方法：将32只雄性Wistar大鼠随机均分成4组,正常对照组,其他3组以链脲佐菌素（STZ）制成接近于人1型糖尿病的大鼠糖尿病模型。3 d后经血糖测试仪检测,血糖含量>16.65 mmol•L^-1为制模成功。1组作为糖尿病模型对照组,另外2组7d后每天分别灌胃给予BH(465 mg•kg^-1)和消渴丸（XKW,625 mg•kg^-1）,连续5周给药。每周1次测定给药过程中各组大鼠血糖变化。注射STZ 3 d和实验结束后,采用放射免疫分析方法分别测定各组大鼠血清中胰岛素含量。实验结束后观察各组大鼠胰岛β细胞的形态变化。结果：给予BH和消渴丸5周后,糖尿病BH给药组大鼠血糖由(18.3±1.8)mmol•L^-1下降到(5.3±1.2) mmol• L^-1,消渴丸对照组血糖由（18.4±1.9）mmol•L^-1下降到(5.2±0.8) mmol•L^-１,两组与糖尿病模型对照组［(19.9±1.9) mmol•L^-1］比较差异均有显著性(P<0.001)。糖尿病BH给药组大鼠血清胰岛素含量由(18.8±2.3)mU• L^-1升高到（42.2±3.5）mU•L^-1, 消渴丸组大鼠血清胰岛素含量由(18.1±3.3)mU•L^-1升高到（40.9±3.7）mU•L^-1,两组与糖尿病模型对照组［(18.7±3.1) mU •L^-1］ 比较差异均有显著性（Ｐ<0.01）,且基本接近正常对照组。糖尿病模型组大鼠的胰岛变小,细胞萎缩,胞核固缩、消失,分泌颗粒减少。应用BH和消渴丸5周后,上述异常变化消失且胰岛细胞形态趋向正常。结论：BH对糖尿病大鼠有降低血糖、升高血清胰岛素、恢复和保护胰岛β细胞的作用。     

牛磺酸在大鼠肝星状细胞中的抗氧化作用

目的：探讨牛磺酸在体外培养的大鼠肝星状细胞（HSC）的抗氧化作用。 方法：将新鲜分离的大鼠HSC分别在普通培养基、含25及50 mmol•L^-1牛磺酸的培养基中孵育培养,检测三种培养基上清中脂质过氧化物(LPO)、羟脯氨酸的表达水平及三种培养基培养的HSC表达转化生长因子β1（TGF-β1）的水平。利用BrdU法检测牛磺酸对HSC增殖的影响。结果：HSC活化后,各培养液上清中LPO浓度均较活化前明显上升（P<0.05）;在含25及50 mmol•L^-1牛磺酸培养基中培养的HSC与普通培养基培养的HSC相比, LPO及羟脯氨酸的分泌水平明显下降（P<0.05）;与普通培养基相比,两组牛磺酸培养基培养的HSC表达TGF-β1明显减少（P<0.05）; 50 mmol•L^-1牛磺酸可以明显抑制HSC的增殖（P<0.05）。 结论：牛磺酸在体外实验中可以有效抑制大鼠肝星状细胞的LPO及羟脯氨酸的合成,并显示出显著的抑制HSC增殖的作用,提示牛磺酸可能在抗肝纤维化治疗中作为抗氧化剂具有重要的治疗价值。     

白藜芦醇诱导急性T淋巴母细胞白血病Jurkat细胞凋亡

目的：探讨白藜芦醇抑制急性T淋巴母细胞白血病Jurkat细胞增殖、引发S期阻滞和诱导凋亡的作用。方法：白藜芦醇体外处理培养的Jurkat细胞后,采用MTT法测定细胞活力,Wrigh-Giemsa染色、Hoechest 33258/PI荧光染色和透射电镜观察Jurkat细胞的形态学改变;流式细胞术分析细胞周期。结果：白藜芦醇0.2 mmol·L^-1处理组的抑制Jurkat细胞增殖率达64.01%,并具有剂量和时间依赖性。白藜芦醇处理细胞24 h后可见凋亡形态学改变,Hoechest 33258/PI染色显示白藜芦醇处理组细胞部分细胞核呈亮蓝色,随培养时间延长,亮蓝色荧光染色细胞数量逐渐增多。Wrigh-Giemsa染色和透射电镜观察发现部分细胞体积缩小、染色质浓缩及边集等现象的出现。流式细胞术检测表明,0.05 mmol·L^-1白黎芦醇处理48 h组62.57％的细胞被阻滞于细胞周期S期,亚二倍体细胞数量12.01%,未加药对照组细胞亚二倍体细胞数量2.05%。结论：白藜芦醇可以抑制Jurkat细胞的增殖,引起细胞周期的S期阻滞,并诱导其发生凋亡     

牛磺酸对原代培养新生大鼠乳鼠心肌细胞和心肌成纤维细胞的作用

目的：探讨牛磺酸（Tau）对原代培养的新生大鼠乳鼠心肌细胞的保护作用及对心肌成纤维细胞的生长抑制作用。方法：将心肌细胞分为对照组、H₂O₂损伤模型组以及H₂O₂损伤加药物治疗组：阳性药川芎嗪（Lig）组及Tau大、中、小（80、40及20 mmol·L^-1）剂量组，预先24 h给予治疗药物后使用0.5 mmol·L^-1 H₂O₂损伤心肌细胞6 h，观察Tau对心肌细胞形态学的影响，MTT法测定反映心肌细胞存活力的A值以及测量乳酸脱氢酶（LDH）、超氧化物歧化酶（SOD）和丙二醛（MDA）含量的变化；将心肌成纤维细胞随机分为7组，分别给予0、10、20、40、80、160及320 mmol·L^-1 Tau，MTT法测定不同浓度Tau对心肌成纤维细胞生长的影响。结果：H₂O₂损伤心肌细胞6 h后，Tau（80、40及20 mmol·L^-1）剂量组A值分别为0.479±0.055、0.437±0.052及0.421±0.062，与H₂O₂组（0.304±0.050）比较，差异均具有显著性（P<0.001或P<0.01）；Tau（80及40 mmol·L^-1）剂量组使H₂O₂损伤的心肌细胞LDH释放减少、SOD含量增加、MDA含量降低，与H₂O₂损伤组比较差异均具有显著性（P<0.01或P<0.05）；40～320 mmol·L^-1 Tau抑制心肌成纤维细胞的生长，与空白对照组比较差异具有显著性（P<0.05，P<0.01或P<0.001）。结论：Tau可通过减轻自由基对心肌细胞的损伤，抑制心肌成纤维细胞生长，达到心脏保护作用。