二甲氨基乙醇和复方氨基酸溶液对衰老大鼠皮肤MMP-1和TIMP-1mRNA表达的影响

目的依据Mesotherapy的治疗理念,观察真皮内注射二甲氨基乙醇（DMAE）和复方氨基酸溶液（AA）对D-半乳糖诱导的化学性衰老大鼠皮肤MMP-1和TIMP-1mRNA表达的影响。方法80只wistar大鼠随机分人正常对照组、衰老对照组、衰老治疗组。衰老治疗组从注射D．半乳糖后第18天开始,在大鼠两侧臀部皮肤分别皮内注射0．2％DMAE＋AA、0．1％DMAE＋AA、0．2％DMAE、0．1％DMAE、AA、生理盐水（NS）,每周1次,连续4周。观察各组皮肤组织学、真皮厚度、羟脯氨酸（Hyp）、MMP-1、TIMP-1mRNA和成纤维细胞核增殖抗体（PCNA）表达水平的变化。结果真皮内注射0．1％DMAE＋AA、0．2％DMAE＋AA,可使衰老大鼠真皮厚度、Hyp含量和MMP-1mRNA表达水平显著增加,而对TIMP-1mRNA和PCNA的表达没有影响。结论在衰老大鼠真皮内注射0．2％DMAE＋AA、0．1％DMAE＋AA,可促进老化、变性胶原蛋白分解,重构衰老皮肤组织结构,使皮肤中胶原蛋白含量显著增多,真皮厚度增加．具有一定延缓皮肤衰老的作用。     

二甲氨基乙醇和复方氨基酸溶液对衰老大鼠皮肤Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白mRNA表达的影响

目的依据中胚层疗法理念,观察真皮内注射二甲氨基乙醇（Dimethylaminoethano,DMAE）和复方氨基酸溶液（compound amino acid injection,AA）对D-半乳糖（D-galactose,D-gal）诱导的化学性衰老大鼠皮肤Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白mRNA表达的影响。方法80只Wistar大鼠随机分为正常对照组、衰老对照组和衰老治疗组。衰老治疗组从注射D-gal后第18天开始,在大鼠两侧臀部皮肤分别皮内注射0．2％DMAE＋AA、0．1％DMAE＋AA、0．2％DMAE、0．1％DMAE、AA、生理盐水（NS）,1次／周,连续4周。观察各组皮肤组织学变化、真皮厚度、羟脯氨酸（Hydroxyproline,Hyp）、Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白mRNA和成纤维细胞增殖细胞核抗体（proliferating cell nuclea antigen,PCNA）表达水平的变化。结果真皮内注射0．1％DMAE＋AA、0．2％DMAE＋AA可使衰老大鼠真皮厚度、Hyp、Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白mRNA表达水平显著增加（P〈O．05）,而对PCNA表达无显著影响（P〉O．05）。结论真皮内注射0．2％DMAE＋AA、0．1％DMAE＋AA可促进衰老大鼠皮肤Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白合成,显著增加真皮厚度和胶原蛋白含量,具有一定延缓皮肤衰老的作用。     

十精丸延缓大鼠皮肤衰老作用的实验研究

目的:探讨中药复方十精丸对皮肤的抗衰老功效及作用机制.方法:观察十精丸对老龄大鼠皮肤中SOD活力、Hyp含量、血清MDA含量及皮肤组织形态学的影响.结果:十精丸高低剂量组皮肤中SOD活力、Hyp含量高于老龄对照组(P<0.01);而血清MDA含量则明显低于老龄对照组(P<0.01),尤以高剂量组明显;形态学观察表明十精丸能促进皮肤真皮胶原纤维增殖,减少基底层色素沉着,角质层变薄.结论:十精丸能够改善皮肤衰老状态,具有延缓皮肤衰老的作用.     

黄芪对D-半乳糖致小鼠衰老模型作用的实验研究

目的:观察黄芪对D-半乳糖致衰老小鼠超氧化物歧化酶(SOD)的活性及羟脯氨酸(HYP)含量的影响,以探讨其延缓衰老的机理。方法:将小鼠分为4组,分别为空白对照组、衰老模型组、黄芪低剂量组和黄芪高剂量组。除空白对照组外其余各组采用皮下连续注射D-半乳糖40天建立小鼠衰老模型,各用药组在造模同时给予相应记录剂量的药物,并测定皮肤组织中SOD、HYP的变化。结果:与空白对照组比较,衰老模型组皮肤组织中SOD活性降低(P<0.05),HYP含量减少(P<0.05);黄芪组皮肤组织中SOD活性明显增强(P<0.05),HYP含量增多(P<0.05)。结论:黄芪具有抗衰老作用。     

黄芪穴位注射对D-半乳糖致衰老小鼠皮肤抗氧化酶和羟脯氨酸的影响

目的:观察足三里穴位注射黄芪对D-半乳糖致衰老小鼠皮肤抗氧化酶及羟脯氨酸含量的影响。方法:颈背部皮下注射D-半乳糖造成小鼠亚急性衰老模型,黄嘌呤氧化酶法测定皮肤超氧化物歧化酶(Super oxi de Di smut ase,SOD),消化法检测皮肤羟脯氨酸(Hydroprol i ne,HYP)含量的变化。结果:黄芪穴位注射可提高衰老小鼠皮肤SOD活性(P<0.05),增加皮肤HYP含量(P<0.05)。结论:黄芪穴位注射有预防和延缓皮肤衰老的作用。     

a-硫辛酸对阻塞性黄疸大鼠肝细胞线粒体内能量代谢保护作用及机制

目的 探讨α-硫辛酸对阻塞性黄疸大鼠肝细胞线粒体内能量代谢的保护作用及其机制. 方法 将72只SD雄性大鼠随机分为对照组（SO组）,胆总管结扎＋0.9%氯化钠溶液组（BDL＋NS组）,胆总管结扎α-硫辛酸组（BDL＋LA组）.分别于术后7 d、14 d和2l d检测肝细胞线粒体内MDA、SOD、ATP、ADP和AMP含量并计算总腺苷酸（TAN）和能荷（EC）. 结果 BDL＋NS组各时间点肝细胞线粒体内MDA、ADP、AMP含量明显升高,而SOD、ATP、EC含量却明显降低.胆总管结扎7 d、14 d时,肝细胞线粒体内MDA含量BDL＋LA组比BDL＋NS组低,差异有统计学意义（P＜0.01）;2l d时,AMP、MDA含量BDL＋NS组和BDL＋LA中都更进一步升高,但两组比较差异无统计学意义（P＞0.05）.胆总管结扎7 d、14 d时,肝细胞线粒体内SOD含量、ATP含量BDL＋LA组比BDL＋NS组下降程度有显著性差异（7 d,P＜0.01;14 d,P＜0.05）;21 d时,两组肝细胞线粒体内SOD含量都进一步下降,但差异无统计学意义（p＞0.05）. 结论 α-硫辛酸在阻塞性黄疸早、中期有保护线粒体能量代谢作用,减轻了阻塞性黄疸时肝的损伤.     

北虫草提取物延缓皮肤衰老的实验研究

目的：研究北虫草提取物对延缓D-半乳糖所致小鼠皮肤组织衰老的作用。方法：昆明种3月龄小鼠72只,雌雄各半,随机分为高剂量组、中剂量组、低剂量组、模型对照组、正常对照组和阳性对照组。各给药组、模型组和阳性组每日颈背部皮下注射D-半乳糖,连续注射42天造成亚急性衰老模型,正常组注射相同剂量生理盐水。各给药组造模的同时皮肤涂布给药,42天后取背部皮肤检测。结果：北虫草提取物能够增加衰老小鼠的含水量和SOD活力,降低皮肤中MDA含量。结论：北虫草提取物具有延缓皮肤衰老的作用。     

加减滋水清肝饮抗毛发衰老的实验研究

目的：探讨加减滋水清肝饮抗毛发衰老的作用机理。方法：采用D-半乳糖皮下注射复制衰老动物模型，加减滋水清肝饮高、中、低剂量灌胃给药一个月。观察鼠毛的形态并检测毛发微量元素和皮肤SOD活性、MDA含量。结果：高、中剂量药物能使衰老鼠毛微量元素含量和皮肤SOD活性明显增加，而皮肤MDA含量降低（P〈0.01，P〈0.05），而低剂量药物无明显统计学意义（P〉0.05）。结论：加减滋水清肝饮抗毛发衰老的主要作用机制是增加毛发微量元素含量、升高皮肤SOD活性、降低皮肤MDA含量。     

纳米脂肪改善裸鼠光老化皮肤质地的实验研究

目的初步探讨纳米脂肪改善紫外线诱导的光老化裸鼠皮肤质地的作用和机理,为纳米脂肪在临床中应用于皮肤光老化治疗提供相关证据.方法选用6-8 周龄雌性BALB/c裸鼠1 8 只,分为4 组Control组（不行任何干预,n=6 ） ,PBSUVB 组（紫外线照射＋ PBS注射）,ADSCs-UVB 组（紫外线照射＋ADSCs注射,n = 6 ）,N anofat-UVB组（紫外线照射＋nanofat注射,n= 6 ） .注射4 周后取材,肉眼观察各组裸鼠皮肤质地;HE 和Masson染色分别观察裸鼠皮肤结构、真皮层厚度和胶原纤维排列情况;免疫组织化学CD31、K i- 6 7 染色观察皮肤微血管及细胞增殖情况.结果注射4 周后,皮肤大体观发现ADSCs-UVB 组、N anofat-UVB组与PBS -UVB 组之间未见明显差异.ADSCs-UVB 组、Nanofat-UVB组较PBS-UVB 组真皮厚（P 〈 0.05 ）,且 ADSCs-UVB 组比 Nanofat-UVB 组真皮厚（P 〈 0 .0 5 ）oADSCs-UVB 组和 Nanofat-UVB 组均较PBS -UVB 组微血管密度髙（P〈0.05）.ADSCs-UVB 组与Nanofat-UVB组间微血管密度无差异（P 〉 0 .0 5 ）.ADSCs-UVB 组较N anofat-UVB组表皮细胞增殖多（P〈 0 .0 5 ）,在真皮细胞增殖上两组无差异（P〉0 .0 5 ）.结论纳米脂肪具有促进真皮中胶原生成、微血管密度增加及表皮细胞增殖的作用.     

针刺足三里对小鼠皮肤光老化的影响

目的：研究针刺足三里对紫外线照射引起的无毛小鼠皮肤光老化模型皮肤组织丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活力的影响。方法：实验选取2月龄健康昆明种无毛小鼠32只,雌雄各半,体重18～22g。随机分成4组：正常对照组、模型组、针刺组、电针组,每组8只。用紫外线灯管模拟紫外线照射,造成无毛小鼠皮肤光老化,造模同时针剌小鼠足三里,采用生化分析方法测定SOD活性及MDA含量。结果：与对照组比较,模型组无毛小鼠皮肤组织SOD活性明显降低（P〈0．01）,MDA含量明显增加（P〈0．05）;与模型组比较,针刺组和电针组对SOD活性有提高作用（P〈0．05）,并可降低MDA含量（P〈0．01）。结论：针刺足三里对紫外线照射引起的无毛小鼠皮肤光老化具有保护作用。其机制可能是：一方面足三里本身具有清除自由基的作用;另一方面可以通过提高SOD活力来达到抗氧化的目的,从而达到抗皮肤光老化的目的。     

中医抗老驻颜古方抗小鼠光老化损伤的初步研究

目的：初步研究中医古医籍记载的美容驻颜抗衰古方可能的抗光老化作用。方法：采用UVA/320～400nm＋UVB/280～320nm紫外灯模拟日光紫外线组合造模光老化小鼠,选择中药古医籍记载的美容驻颜抗衰古方每天分别灌胃各组小鼠,共12周。生化法检测小鼠受试区皮肤组织中超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH2Px）活性和丙二醛（MDA）、羟脯氨酸（HYP）含量。结果：接受实验选择的古医籍记载的美容驻颜抗衰古方治疗的小鼠,表现出不同程度的光保护效果。各组与UV损伤组比较：滋阴为主的神仙驻颜方GSH-Px、HYP表达有极显著性差异（P〈0.01）,SOD表达有显著性差异（P〈0.05）;以补气为主的黄芪六一散SOD、GSH-Px的表达有极显著性差异（P〈0.01）,MDA表达有显著性差异（P〈0.05）;气阴双补生脉散SOD、GSH-Px、MDA、HYP的表达均有极显著性差异（P〈0.01）;气血双补延龄固本丸SOD、GSH-Px的表达有极显著性差异（P〈0.01）,MDA、HYP的表达有显著性差异（P〈0.05）;阴阳双补、益肾填精的龟龄集方SOD、HYP的表达有极显著性差异（P〈0.01）,GSH-Px、MDA的表达有显著性差异（P〈0.05）。结论：实验选择的中药古医籍记载的美容驻颜抗衰古方有一定的抗光老化作用,有进一步研究运用的价值。     

不同治则中药对胆囊胆固醇结石小鼠模型的成石影响

目的：观察中药清胆胶囊和养肝利胆颗粒对C57小鼠胆囊胆固醇结石模型成石的影响和差异。方法：应用C57BL/6J雌性10周龄小鼠建立胆固醇结石模型（n=15）,并设立正常对照组（n=10）、清胆胶囊组（n=13）及养肝利胆颗粒组（n=13）,观察各组动物的成石率、血清胆固醇、钙离子及肝脏丙二醛（MDA）及过氧化物歧化酶（SOD）等生化指标的差异。结果：各组动物成石率分别73.33%、0%、23.08%及30.77%（P〈0.001）。模型组各项指标均出现明显异常,而清胆胶囊和养肝利胆颗粒组的各项指标均有不同程度的改善,其中二者在改善血清总胆固醇（TC）及低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）有明显差异（均P〈0.01）。两种中药相比,清胆胶囊更能显著升高高密度脂蛋白（HDL-C）含量（P〈0.05）,而养肝利胆颗粒更能增强肝脏SOD活性（P〈0.05）。4组间血清Ca2＋浓度无显著性差异。结论：疏肝清热利胆中药清胆胶囊和养肝柔肝中药养肝利胆颗粒均可降低小鼠胆固醇结石模型成石率,改善与成石相关的血清及肝脏等生化学异常,二者均呈多靶点作用,但仍存在着一定的差异。养肝利胆颗粒在增强肝脏SOD活性方面优于清胆胶囊。     

玉屏风散对大鼠光老化皮肤HYP含量、LC数量及形态的影响

目的：探讨玉屏风散是否对大鼠光老化皮肤具有保护作用。方法：将大鼠随机分成6组,除正常对照组外,模拟UV连续照射60天,造成皮肤光老化模型,给药组照射同时分别灌胃高、中、低剂量的玉屏风散提取液,模型组灌胃等剂量生理盐水。第61天碱水解法测定皮肤组织中羟脯胺酸（HYP）含量,免疫组织化学染色法观察表皮郎格罕斯细胞（LC）数量及形态。结果：模型组HYP含量明显减少;模型＋玉屏风散高、中、低剂量组HYP含量均有所提高,并呈剂量依赖（分别是P〈0.01,P〈0.05）。模型＋玉屏风散高剂量组LC数量较多,树突状结构明显,排列较规则;模型＋玉屏风散中、低剂量组对LC数量、形态及排列也有不同程度的改善作用。结论：玉屏风散对紫外线照射引起的大鼠皮肤光老化具有保护作用。其机制可能是一方面玉屏风散具有清除自由基、促进表皮细胞分裂,增加真皮胶原蛋白合成的作用;另一方面玉屏风散能够减少表皮LC的迁移,保护其树突状结构。     

【原创论文】同侧和对侧大鼠睾丸缺血再灌注损伤的生化效应和褪黑激素对此的保护作用

睾丸扭转（TT）,是一个多发于青春期男性的泌尿急症,如果不及时治疗,可致不孕不育。睾丸扭转所致缺血再灌注（I／R）损伤在睾丸损伤的病理生理过程中起一定作用。我们研究了褪黑激素在单侧睾丸扭转大鼠中同侧和对侧睾丸的氧化损伤效应：将21只青春期雄性Wistar大鼠分成三组,每组七只,处理如下：第1组（假手术组）：行左睾丸和双边睾丸假切除术;第2组（I/R组）：通过以下方式诱发缺血再灌注损伤（顺时针720°旋转左侧睾丸2小时,2小时后复位）：第3组（I／R＋MEL组）：大鼠经诱导缺血再灌注损伤和一次性褪黑激素注射（50mgkg-1,i．p）。处理后离体分离各组大鼠双侧睾丸,用于检测睾丸组织中抗氧化过氧化氢酶、超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶的活性,丙二醛、蛋白质羰基和一氧化氮的组织水平。较对照组,褪黑激素注射组同侧睾丸的脂质过氧化水平,相关酶活性降低,具有显著性（P〈0．05）,而在对侧的睾丸中相关酶活性变化无统计学意义（P〉0．05）。在对侧睾丸中,丙二醛水平改变具有明显统计学意义（P=0．009）。应用褪黑素能减轻老鼠同侧睾丸扭转所致缺血再灌注损伤的不利影响,而对于对侧睾丸,睾丸扭转影响不大。     

阿魏酸哌嗪对大鼠环孢素A肾损伤的保护作用

目的探讨阿魏酸哌嗪对肾脏有无保护作用及其可能的机制。方法将24只SD大鼠随机分为模型组（M组）、对照组（N组）、阿魏酸哌嗪低剂量治疗组（PF50组）、阿魏酸哌嗪高剂量治疗组（PF100组），并建立慢性环孢素A（CsA）肾毒性模型，PF50组、PF100组同时给予阿魏酸哌嗪灌胃。灌胃第4周末处死全部大鼠，收集血尿标本，根据公式计算肌酐清除率（Ccr），测量各组血清和肾组织内超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）的含量及总抗氧化能力（T-AOC）并观察肾组织。结果与N组比较，M组Ccr、血清和肾组织中SOD及T-AOC均减少，MDA含量增加；与M组比较，PF50和PF100组Ccr、血清和肾组织中SOD及T-AOC均增加，MDA含量下降，肾组织病变减轻。结论阿魏酸哌嗪能减轻大鼠慢性CsA毒性的肾脏氧化损害，对肾脏具有保护作用。     

七氟烷后处理减轻大鼠局灶性脑缺血-再灌注损伤与黄嘌呤氧化酶

目的：探讨七氟烷后处理减轻大鼠局灶性脑缺血-再灌注（I／R）损伤中黄嘌呤氧化酶（xanthine oxidase,XO）含量变化的意义。方法：40只SD大鼠,随机入假手术（Sham）组、缺血-再灌注（I／R）组、七氟烷后处理（PostS）组．IR＋别嘌醇（Adenock A,I／R＋A）组。各10只。大脑中动脉线栓（MCAO）法建立大鼠局灶性脑缺血损伤模型。观察缺血前、再灌注后各组血清XO．超氧化物岐化酶（SOD）活性．丙二醛（MDA）含量及脑组织Na^＋-K^＋-ATP酶（Na^＋-K^＋-ATPase）活性变化。实验结束后,处死大鼠。取脑组织经HE．TTC染色,观察各组脑组织梗死体积。结果：再灌注24h末,Sham组血清XO活性,MDA含量低于其它三组（p〈0．05）。SOD及脑组织Na^＋-K^＋-ATPase活性高于其它三组（p〈0．05）：I／R组与Posts组、I／R＋A组比较．XO活性升高（p〈0．05）,MDA含量增加（p〈0．05）,SOD、Na＋^-K^＋-ATPase活性降低（p〈0．05）;S组SOD、XO以及Na^＋-K^＋-ATPase活性均高于IR＋A组（p〈0．05）．MDA含量低于IR＋A组（p〈0．05）。结论：下调XO活性。可能是七氟烷后处理有效减轻大鼠脑缺血-再灌注损伤重要途径之一。     

N-乙酰半胱氨酸抑制大鼠肾草酸钙结石形成机制的研究

目的：探讨N一乙酰半胱氨酸（NAc）对大鼠肾草酸钙结石形成的影响及机制,为临床预防尿路结石提供理论依据。方法：将30只健康清洁成年雄性Wistar大鼠先在相同环境下适应性喂养1周,然后随机分为3组：A组（空白对照组）、B组（单纯诱石组）、C组（诱石＋NAC干预组）。A组饮去离子水,B组饮1％乙二醇的去离子水,C组饮1％乙二醇去离子水,并给予NAC100mg／（kg·d）灌胃。第4周处死大鼠,取出双肾,左肾纵向剖开,用10％甲醛固定,HE染色石蜡切片,在100、400倍光镜下观察肾组织草酸钙结晶沉积情况,并进行分级及评分。右肾皮质制成10％的匀浆,检测丙二醛（MDA）及超氧化物歧化酶（SOD）。全部实验数据通过SPSS17．0统计软件分析处理。结果：①肾脏结晶沉积情况分级及评分结果：与B组相比,C组的肾脏结晶沉积评分明显降低（P〈0．05）。②MDA检测结果：与B组相比,C组的MDA含量降低,差异有统计学意义（P〈0．05）。③SOD检测结果：与B组相比,C组的SOD含量增高,差异有统计学意义（P〈0．05）。④A、B、C三组肾组织结晶等级评分与s0D含量的相关系数为-0．499（P〈0．01）,结晶评分与MDA含量的相关系数为0．592（P〈0．01）。结论：NAc可以通过其抗氧化作用抑制大鼠肾草酸钙结石的形成。