二甲氨基乙醇和复方氨基酸溶液对衰老大鼠皮肤MMP-1和TIMP-1mRNA表达的影响

目的依据Mesotherapy的治疗理念,观察真皮内注射二甲氨基乙醇（DMAE）和复方氨基酸溶液（AA）对D-半乳糖诱导的化学性衰老大鼠皮肤MMP-1和TIMP-1mRNA表达的影响。方法80只wistar大鼠随机分人正常对照组、衰老对照组、衰老治疗组。衰老治疗组从注射D．半乳糖后第18天开始,在大鼠两侧臀部皮肤分别皮内注射0．2％DMAE＋AA、0．1％DMAE＋AA、0．2％DMAE、0．1％DMAE、AA、生理盐水（NS）,每周1次,连续4周。观察各组皮肤组织学、真皮厚度、羟脯氨酸（Hyp）、MMP-1、TIMP-1mRNA和成纤维细胞核增殖抗体（PCNA）表达水平的变化。结果真皮内注射0．1％DMAE＋AA、0．2％DMAE＋AA,可使衰老大鼠真皮厚度、Hyp含量和MMP-1mRNA表达水平显著增加,而对TIMP-1mRNA和PCNA的表达没有影响。结论在衰老大鼠真皮内注射0．2％DMAE＋AA、0．1％DMAE＋AA,可促进老化、变性胶原蛋白分解,重构衰老皮肤组织结构,使皮肤中胶原蛋白含量显著增多,真皮厚度增加．具有一定延缓皮肤衰老的作用。     

真皮内注射二甲氨基乙醇对大鼠衰老模型胶原合成代谢的影响

目的:探讨真皮内注射二甲氨基乙醇(DMAE)复合制剂(赛雷弗 ?)对D-半乳糖诱导的亚急性衰老大鼠皮肤胶原合成代谢的影响。 方法:2014年4—10月,在青岛大学解剖教研室进行实验研究。30只Wistar雄性大鼠分为衰老对照组、衰老治疗组、正常组,每组各10只。衰老对照组、衰老治疗组两组颈背部皮下...     

二甲氨基乙醇和复方氨基酸溶液对衰老大鼠皮肤Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白mRNA表达的影响

目的依据中胚层疗法理念,观察真皮内注射二甲氨基乙醇（Dimethylaminoethano,DMAE）和复方氨基酸溶液（compound amino acid injection,AA）对D-半乳糖（D-galactose,D-gal）诱导的化学性衰老大鼠皮肤Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白mRNA表达的影响。方法80只Wistar大鼠随机分为正常对照组、衰老对照组和衰老治疗组。衰老治疗组从注射D-gal后第18天开始,在大鼠两侧臀部皮肤分别皮内注射0．2％DMAE＋AA、0．1％DMAE＋AA、0．2％DMAE、0．1％DMAE、AA、生理盐水（NS）,1次／周,连续4周。观察各组皮肤组织学变化、真皮厚度、羟脯氨酸（Hydroxyproline,Hyp）、Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白mRNA和成纤维细胞增殖细胞核抗体（proliferating cell nuclea antigen,PCNA）表达水平的变化。结果真皮内注射0．1％DMAE＋AA、0．2％DMAE＋AA可使衰老大鼠真皮厚度、Hyp、Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白mRNA表达水平显著增加（P〈O．05）,而对PCNA表达无显著影响（P〉O．05）。结论真皮内注射0．2％DMAE＋AA、0．1％DMAE＋AA可促进衰老大鼠皮肤Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白合成,显著增加真皮厚度和胶原蛋白含量,具有一定延缓皮肤衰老的作用。     

氨基胍对大鼠内毒素性肺损伤的影响

目的 观察诱导型一氧化氮合酶抑制剂氨基胍(AG)对内毒素性肺损伤的影响。方法 采用静脉注射脂多糖(LPS)制备内毒素性肺损伤大鼠模型。将40只SD雄性大鼠随机分为5组：空白对照组、LPS组、AG高剂量(100mg／kg)、中剂量(50mg／kg)、低剂量(25mg／kg)治疗组，LPS组、AG高剂量、中剂量和低剂量治疗组手术后稳定1h静脉注射LPS(5mg／kg)，空白对照组给等量生理盐水，AG高剂量、中剂量和低剂量治疗组于给予LPS 3h后经腹腔给AG，空白对照组和LPS组给等量生理盐水。实验过程中监测平均动脉压(MAP)，于注射LPS后1、3和6h时取静脉血0．4Tnl测定血浆NO浓度，于注射LPS 6h后处死大鼠，迅速取出肺脏，测定肺系数、肺含水量和肺组织中丙二醛(MDA)含量、一氧化氮合酶(NOS)、超氧化物歧化酶(SOD)活性的变化；在光镜下观察肺形态结构的变化。结果 LPS可明显降低MAP，升高肺系数和肺含水量，升高血浆中NO含量，可显著升高肺组织中NOS活性、增加MDA含量、降低SOD活性，引起肺形态结构的病理变化。氨基胍可明显改善吣引起的以上肺损伤，病理变化也表明：AG使肺泡萎陷明显减轻，肺间隔变窄，毛细血管增生不明显，肺间隔炎细胞浸润减轻，且高剂量比低剂量明显。结论 静脉注射LPS(5mg/kg)可成功制备大鼠内毒素性肺损伤模型；氨基胍可减轻内毒素性肺损伤，且随剂量增大作用增强。     

黄芪穴位注射对D-半乳糖致衰老小鼠皮肤抗氧化酶和羟脯氨酸的影响

目的:观察足三里穴位注射黄芪对D-半乳糖致衰老小鼠皮肤抗氧化酶及羟脯氨酸含量的影响。方法:颈背部皮下注射D-半乳糖造成小鼠亚急性衰老模型,黄嘌呤氧化酶法测定皮肤超氧化物歧化酶(Super oxi de Di smut ase,SOD),消化法检测皮肤羟脯氨酸(Hydroprol i ne,HYP)含量的变化。结果:黄芪穴位注射可提高衰老小鼠皮肤SOD活性(P<0.05),增加皮肤HYP含量(P<0.05)。结论:黄芪穴位注射有预防和延缓皮肤衰老的作用。     

透明质酸对创面胶原代谢的影响

目的:通过观察外源性透明质酸(HA)对兔耳创面胶原代谢的影响,探讨外源性透明质酸在伤口愈合中的作用.方法:18只日本大耳白兔,建立兔耳创伤愈合模型后,随机分成2％HA治疗组(A组),1％HA治疗组(B组)和生理盐水对照组(C组).观察创面愈合及瘢痕形成情况,术后第3、7、10、14、18天取标本匀浆后测定羟脯氨酸(HPr)含量,将数据进行统计学处理.结果:A、B两组羟脯氨酸含量明显低于C组(P＜0.01),A、B两组间也有统计学差异(P＜0.05).A、B两组创面愈合相对C组延迟,形成瘢痕小于C组.结论:外源性HA能够抑制成纤维细胞合成胶原,延迟创面愈合,减少瘢痕形成,其作用有剂量依赖性.     

氯胺酮对脑冷冻伤后自由基和脑水肿的影响

目的 探讨N-甲基-D-天门冬氨酸(N—methyl—D-aspartate，NMDA)受体非竞争性拮抗药氯胺酮对鼠脑冷冻伤后脑内超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)、丙二醛(malondialdehyde，MDA)和脑水肿的影响。方法 49只SD大鼠随机分为假手术组、未治疗组和氯胺酮治疗组。采用液氮局部冷冻左侧鼠脑30s制作冷冻伤模型，分别于2、6、24h处死动物后，用分光光度法测10％脑组织匀浆中SOD活性和MDA产量。结果 脑组织含水量在冷冻伤后显著升高，并随时间延长而加重。氯胺酮治疗后脑组织含水量没有明显减少；脑组织SOD活性在2、6h高于未治疗组，但24h后SOD活性无显著差异。MDA含量比未治疗组在相应时段显著减少。结论 自由基是脑水肿形成的重要因素，氯胺酮能减轻冻伤脑组织中SOD活性的抑制，减少MDA生成，但对脑水肿无明显治疗作用。     

十精丸延缓大鼠皮肤衰老作用的实验研究

目的:探讨中药复方十精丸对皮肤的抗衰老功效及作用机制.方法:观察十精丸对老龄大鼠皮肤中SOD活力、Hyp含量、血清MDA含量及皮肤组织形态学的影响.结果:十精丸高低剂量组皮肤中SOD活力、Hyp含量高于老龄对照组(P<0.01);而血清MDA含量则明显低于老龄对照组(P<0.01),尤以高剂量组明显;形态学观察表明十精丸能促进皮肤真皮胶原纤维增殖,减少基底层色素沉着,角质层变薄.结论:十精丸能够改善皮肤衰老状态,具有延缓皮肤衰老的作用.     

外源性透明质酸对兔耳创面胶原代谢的影响

目的　通过观察外源性透明质酸 (HA)对兔耳创面愈合前后胶原代谢的影响 ,探讨透明质酸抑制瘢痕增生的机理。方法　 18只日本大耳白兔 ,建立兔耳创伤愈合模型后 ,随机分成 2 %HA治疗组 (A组 ) ,1%HA治疗组 (B组 )和生理盐水对照组 (C组 )。术后第 3、7、10、14、18天取标本匀浆后测定羟脯氨酸 (HPr)含量 ,将数据进行统计学处理。结果　A、B两组羟脯氨酸含量明显低于C组 (P <0 .0 1) ,A、B两组间也有统计学差异 (P <0 .0 5 )。结论　HA能够抑制成纤维细胞合成胶原 ,其作用有剂量依赖性     

外源性透明质酸对兔耳创面胶原代谢的影响

目的　通过观察外源性透明质酸(HA)对兔耳创面愈合前后胶原代谢的影响,探讨透明质酸抑制瘢痕增生的机理。方法　18只日本大耳白兔,建立兔耳创伤愈合模型后,随机分成2％HA治疗组（A组）,1％HA治疗组（B组）和生理盐水对照组（C组）。术后第3、7、10、14、18天取标本匀浆后测定羟脯氨酸（HPr）含量,将数据进行统计学处理。结果　A、B两组羟脯氨酸含量明显低于C组（P＜0.01）,A、B两组间也有统计学差异（P＜0.05）。结论　HA能够抑制成纤维细胞合成胶原,其作用有剂量依赖性。     

二十碳五烯酸对人肝胆管癌FRH-0201细胞生长的影响

目的 评价二十碳五烯酸(EPA)体外抑制人肝胆管癌FRH-0201细胞增殖和诱导细胞凋亡的能力.方法 在处于指数生长期的FRH-0201细胞株培养基中添加EPA,采用噻唑蓝法、流式细胞仪等方法检测人肝胆管癌FRH-0201细胞株的生长和增殖情况.通过生化检测及组织化学等方法,研究EPA对人肝胆管癌FRH-0201细胞生长的抑制作用.结果 EPA作用后,人肝胆管癌FRH-0201细胞增殖受抑制.随EPA浓度的递增FRH-0201细胞增殖率逐次下降,呈现明显量效关系,同时诱导细胞凋亡；流式细胞仪检测出凋亡峰,经不同浓度EPA作用后,人肝胆管癌FRH-0201细胞的超氧化物歧化酶( SOD)活性显著或极显著降低(P＜0.05; P＜0.001),丙二醛(MDA)含量极显著上升(P＜0.01;P＜0.001).结论 EPA可能通过增加脂质过氧化反应而阻遏人肝胆管癌FRH-0201细胞的增殖,诱发细胞凋亡.     

L-精氨酸对大鼠阻塞性黄疸肝细胞线粒体内Ca2+的保护作用及其机制

目的 探讨L-精氨酸(L-Arg)对阻塞性黄疸大鼠肝细胞线粒体内Ca^2 保护作用及其机制。方法 将72只SD雄性大鼠随机分为对照组(SO组)，胆总管结扎 生理盐水组(BDL NS组)，胆总管结扎 L-Arg(BDL L-Arg组)。分别于术后7、14和21d检测肝细胞线粒体内MDA、SOD、Ca^2 含量。结果 BDL NS组各时间点肝细胞线粒体内Ca^2 、MDA含量明显升高，而SOD含量却明显降低。胆总管结扎7、14d时，肝细胞线粒体内Ca^2 、MDA含量BDL L-Arg组比BDL NS组低，差异有统计学意义(P＜0．01)；21d时，肝细胞线粒体内Ca^2 、MDA含量BDL NS组和BDL L-Arg中都更进一步升高，但两组比较差异无统计学意义(P＞0．05)。胆总管结扎7d时，肝细胞线粒体内SOD含量BDL L-Arg组比BDL NS组高(P＜0．05)；14、21d时，两组肝细胞线粒体内SOD含量都进一步下降，但差异无统计学意义(P＞0．05)。结论 L-Arg在阻塞性黄疸早、中期有保护线粒体作用，减少Ca^2 内流，不引起钙超载，减轻了阻黄时肝的损伤。     

Effects of mechanical strain on oxygen free radical system in bone marrow mesenchymal stem cells from children

Background

Physiological loading is widely believed to be beneficial in maintaining skeletal integrity by stimulating new bone formation through increases in osteoblastic activity and concomitant decreases in osteoclastic activity. However, excessive or nonphysiological loading is associated with bone injuries, including stress fractures and osteoporotic fractures, thereby leading to a decreased functional capacity of bone. It is known that the excessive generation of reactive oxygen species (ROS) is a significant factor underlying tissue injury observed in many disease states. The aim of this study was to study the effects of mechanical strain on oxygen free radical system [ROS, superoxide dismutase (SOD) and malondialdehyde (MDA)] in bone marrow mesenchymal stem cells (MSCs) from children.

Methods

To determine whether extreme levels of mechanical strain enhance ROS synthesis, we loaded cyclic tensile stretch of varying magnitude on MSCs. After MSCs were stimulated by mechanical strain, ROS labelled with 2,7-dichlorodihydrofluorescein (DCFH) fluorescent probe in cells were detected by flow cytometry (FCM) whilst SOD activity and MDA level were detected by xanthine oxidase method and thiobarbituric acid method, respectively.

Results

Extreme levels (>12%) of mechanical strain applied to children's MSCs enhanced ROS synthesis, decreased the activity of SOD and increased the level of MDA, in a time- and magnitude-dependent fashion.

Conclusions

These data suggest that excessive magnitude of cyclic tensile strain (>12%) could induce oxygen free radical disequilibrium, resulting in cytotoxicity. The findings may have clinical implications for orthopaedic practice.     

缺氧预处理对缺血缺氧脑组织超微结构与自由基的影响

目的 观察缺氧预处理对缺血缺氧脑组织超微结构及脑组织自由基的影响。方法 将40只小鼠随机分为4组。A组为盐水对照组,B组为缺氧预处理组,IH组为缺血缺氧组,BIH组为缺氧预处理后缺血缺氧组。各组有6只小鼠分别采用黄嘌呤氧化酶法和硫代巴比妥酸法和硫巴比妥酸法检测脑组织的超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）含量,另4只小鼠用于透射电镜下脑组织超微结构的观察。结果 与A组比较,B组SOD活性增加,IH组MDA组含量明显增加,而IH组SOD活性明显增加的同时,MDA含量比IH明显降低。电镜显示B组除部分神经元轻度肿胀外,脑组织超微结构基本同A组,IH组细胞核变形,细胞浆成空泡,严重者满视野几乎找不到正常细胞,无损害的神经元＜10％,BIH组细胞结构基本恢复正常,无损伤神经元达63％。结论 缺氧预处理对再缺血缺氧引起的神经元损伤有保护作用,内源性抗氧化物质的增加与其有直接关系。     

Effect of ascorbic acid on protein synthesis and collagen hydroxylation in continuous flow organ cultures of adult mouse periodontal tissues

Summary A continuous flow organ culture system (CFCS) was used to determine the effect of ascorbic acid on the synthesis of collagen and noncollagenous protein by bone of the alveolar process and periodontal ligament in organ cultures of adult mouse periodontium. For the last 24 h of 2 day cultures, 5 μCi/ml³H-proline was added to the medium. Highly purified collagenase was used to separate the collagenous and noncollagenous proteins and the incorporation of isotope into each fraction measured. Collagen synthesized in the presence of less than 10 μg/ml ascorbic acid was found to be highly under-hydroxylated (pro:hypro sp. acts. 2.3–3.1) in both tissues. When the ascorbic acid levels were between 25 and 100 μg/ml, the synthesis of collagenous proteins was selectively stimulated and hydroxylation significantly improved (pro:hypro sp. acts 1.72–1.89). The effect of ascorbic acid was not related to tissue viability since tissues cultured initially in the absence of ascorbic acid were able to recover completely when compared to controls given ascorbic acid continuously. The proportion of radioactivity in collagen and noncollagenous protein, collagen hydroxylation, and percentage of collagen synthesized as type III (av. 23%) in bone of the alveolar process was similar to that found in vivo. However, in the periodontal ligament in vitro the proportion of noncollagenous protein synthesized was increased from 70% to 87% and the percentage of type III collagen increased from 14% to 26% compared to in vivo results.     

N-(3,4-二甲氧基肉桂酰)邻氨基苯甲酸介导小鼠皮肤移植免疫负向调节的作用及机制研究

目的 研究N-(3,4-二甲氧基肉桂酰)邻氨基苯甲酸[N-(3,4-dimethoxycinnamonyl)anthranilic acid,3,4-DAA]在小鼠皮肤移植中的免疫负调节作用,并探索其发挥作用的机制.方法 体外实验中,取同种异基因小鼠皮肤移植7 d后的BALB/C小鼠脾脏制得淋巴细胞单细胞悬液,一半用四...