氧糖剥夺条件下p75神经营养素受体在人神经母细胞瘤细胞中的表达和作用

目的 探讨氧糖剥夺（OGD）条件下p75神经营养素受体（p75NTR）在人神经母细胞瘤细胞（SH-SY5Y）中的表达变化和作用。方法 SH-SY5Y细胞OGD模型的建立采用三气培养箱无糖无血清培养方法。模型成功建立后设立3组：无血清常规培养组（对照组）、OGD组和OGD+p75NTR竞争性阻断剂LM11A-31处理组（OGD+LM11A-31组）。在细胞培养12 h时用利用四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测3组细胞存活率,乳酸脱氢酶（LDH）活力检测试剂盒测定LDH释放活力,流式细胞术检测凋亡细胞比例,蛋白质印迹法检测p75NTR的蛋白表达。结果 成功构建SH-SY5Y细胞OGD模型。细胞培养12 h时,对照组、OGD组和OGD+LM11A-31组细胞存活率分别为（94.80±4.06）%、（50.34±5.55）%、（64.68±4.59）%,LDH释放活力分别为（46.93±5.49）U/L、（353.09±30.67）U/L和（282.20±25.60）U/L,凋亡细胞比例分别为（1.82±0.45）%、（14.98±2.59）%和（7.36±1.98）%,p75NTR蛋白相对表达量分别为0.06±0.01、0.41±0.02和0.19±0.03,差异均有统计学意义（F=67.94、142.10、36.28、221.20,P均<0.05）。多重比较显示,OGD组细胞存活率低于对照组,LDH释放活力高于对照组,凋亡细胞比例高于对照组,p75NTR蛋白表达高于对照组,差异均有统计学意义（Bonferroni法,P''均<0.05）;而LM11A-31处理后OGD+LM11A-31组细胞存活率高于OGD组,LDH释放活力低于OGD组,凋亡细胞比例低于OGD组,p75NTR蛋白表达低于OGD组,差异均有统计学意义（Bonferroni法,P''均<0.05）。结论 OGD条件下p75NTR在人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y中表达增加,可能促进了神经损伤和凋亡。     

子宫肌瘤腹腔镜剥除术中止血药物效果分析

目的 探讨垂体后叶素与缩宫素在腹腔镜下肌壁间子宫肌瘤剥除术的临床效果。方法 选取2015年10月~2016年12月行腹腔镜下子宫肌瘤剥除术的患者60例,分成两组各30例。治疗组注射6IU垂体后叶素+10ml生理盐水,对照组注射20U缩宫素+10ml生理盐水,按照两组的用药情况,观察比较血压变化和其他情况。结果 治疗组与对照组比较,手术时间明显减少（98.13±5.07min vs 110.83±8.03min,t=-7.324,P=0.000）,术中出血量明显减少（67.50±10.24ml vs 97.83±16.10ml,t=-8.705,P=0.000）,血红蛋白术前术后变化（9.67±2.09g/L vs 11.53±2.21g/L,t=-3.362,P=0.001）。术中用药后15min,治疗组收缩压上升,显著高于对照组（150.77±5.57mmHg vs 142.03±5.21mmHg,t=6.273,P=0.000）。结论 腹腔镜下肌壁间子宫肌瘤剥除术应用垂体后叶素止血效果明显优于缩宫素,但会引起短暂性血压升高,临床使用应结合患者病情个性化选择。     

临床护理路径在小儿腹泻护理中的应用效果

目的 探讨临床护理路径在小儿腹泻护理中的应用效果。方法 选取2015年4月至2015年12月阜阳市第二人民医院住院的108例腹泻患儿,随机分为两组,观察组（54例）和对照组（54例）。观察组实施临床护理路径,对照组给予常规的护理。结果 观察组止泻时间、住院时间较对照组短[（3.32±1.03）d vs（4.12±1.06）d,（5.42±1.06）d vs（6.13±1.08）d],差异有统计学意义（t=3.9775,P < 0.001;t=3.4478,P < 0.001）;观察组住院费用低于对照组[（3 014.98±752.97）元vs（3438.12±671.33）元],差异有统计学意义（t=3.0824,P < 0.05）;观察组复发率及满意度均优于对照组,差异有统计学意义（P < 0.05）。结论 将临床护理路径应用于小儿腹泻护理过程中,能改善护理质量,具有良好的临床护理效果。     

大鼠血浆血清对软骨细胞纤维化转变的影响

目的 观察大鼠的血清和血浆对大鼠软骨细胞的增殖,形态改变,基质蛋白及基质调控基因的表达变化。方法 取出生24h SD大鼠关节处软骨,Ⅱ型胶原酶多次消化后获得软骨细胞,取P1代细胞进行实验。软骨细胞分别培养于含10%大鼠血浆（rat plasma,RP）和10%大鼠血清（rat serum,RS）的DMEM低糖培养基中,分别为血浆组和血清组。分别培养24h,镜下观察细胞形态变化,CCK8方法检测24h、48h和72h软骨细胞增殖（A₄₅₀）。细胞免疫荧光、Western blot和定量PCR检测软骨指标Sox9、Ⅱ型胶原、MMP13、Col2a1、A-can、ADAMTS5、MMP9、MMP3的表达。结果 培养于大鼠血清和血浆的培养基中,24h后血清组的软骨细胞由鹅卵石样排列的多角形变成长梭形。血清组24h（0.67±0.01）,48h（1.29±0.05）和72h（1.92±0.03）A₄₅₀值,明显高于血浆组24h（0.43±0.01）,48h（0.72±0.01）和72h（1.27±0.04）A₄₅₀值,差异均有统计学意义（P<0.01）。血清组软骨细胞MMP13和Col1a1表达显著上调,Ⅱ型胶原和Sox9的表达显著下调。PCR结果表明,血清组A-can（0.24±0.01）和Sox9（0.56±0.04）基因表达相对于大鼠血浆组Sox9（1.00±0.05）和A-can（1.00±0.08）表达明显降低,而血清组ADAMTS5（34.51±2.25）和MMP3（40.33±2.43）表达相对于大鼠血浆组ADAMTS5（1.02±0.21）和MMP3（1.00±0.11）表达明显增强,两组间基因表达差异均有统计学意义（P<0.01）。结论 血清促进软骨细胞转变成纤维样软骨细胞。     

腹腔镜下肛门成形术治疗高位肛门闭锁的疗效

目的 探讨腹腔镜下高位肛门闭锁成形术的临床疗效。方法 2010年6月至2014年6月安徽省立医院收治高位肛门闭锁患儿45例,23例行腹腔镜下肛门成形术（LAARP）,22例行后矢状路肛门成形术（PSARP）,比较两种肛门成形术手术时间、出血量,以及住院时间和肛门括约肌功能。结果 LAARP与PSARP比较,出血量[（12.1±3.6）mL vs（16.1±2.6）mL,t=-4.25,P<0.05）]、住院时间[（10.2±2.7）d vs（15.2±1.9）d,t=-7.1,P<0.05）]降低,肛门括约肌功能[（1.5±0.5）分vs（1.1±0.4）分,t=2.94,P=0.005）]改善;而手术时间及术后大便失禁、直肠积粪状况无明显差异。结论 高位肛门闭锁患儿LAARP术后肛门括约肌功能恢复较好,且住院时间、出血量较PSARP明显降低,LAARP值得推广应用。     

不同清洗口腔器械方法的效率与质量比较

目的 比较手工、手工联合超声清洗口腔器械的效率与质量。方法 将安徽医科大学附属口腔医院2019年1~6月口腔器械按随机数字表法分为A组（手工清洗）与B组（手工联合超声清洗）,每组200件。比较两组器械清洗耗时及合格率。结果 A组器械一次清洗耗时（1.02±0.29）h,B组（1.33±0.19）h,两组差异有统计学意义（t=-12.500,P<0.001）;A组器械二次清洗耗时（0.68±0.32）h,B组（0.32±0.20）h,两组差异有统计学意义（t=4.318,P<0.001）;A组器械完全合格清洗耗时（1.12±0.44）h,B组（1.34±0.21）h,两组差异有统计学意义（t=-6.367,P<0.001）。A组器械一次清洗合格率为85.50%,B组为94.50%,两组差异有统计学意义（χ²=9.000,P=0.003）。A组器械二次清洗合格率为89.66%,B组为100.00%,两组差异无统计学意义（P>0.05）。结论 手工联合超声清洗口腔器械,效率、清洗质量更高。     

人工智能辅助系统结合CBL教学在眼科住院医师斜视专业教学中的应用

目的　探讨人工智能（artificial intelligence,AI）辅助系统结合病例教学法（case-based learning,CBL）在眼科住院医师斜视专业教学中的应用。方法　将2020年1月至2021年12月在北京大学人民医院眼科规培的40名眼科住院医师作为研究对象,将其分为对照组和试验组,每组20人。对照组采用传统教学,试验组采用AI辅助系统结合CBL教学。专科培训结束时对两组学生进行理论知识、临床技能、临床思维考核,用问卷调查来评估教学效果。采用SPSS 26.0对数据进行卡方检验、单因素方差分析和独立样本t检验。结果　试验组理论知识考核成绩[（34.10±1.33）分]高于对照组成绩[（33.15±1.35）分]（t=2.24,P=0.031）,临床技能考核成绩[（24.75±1.02）分]高于对照组成绩[（23.60±0.82）分]（t=3.93,P<0.001）,临床思维考核成绩[（24.80±0.77）分]高于对照组成绩[（24.20±0.83）分]（t=2.37,P=0.023）。对教学效果的评估,试验组在提升学习兴趣（t=11.47,P<0.001）,提升临床思维能力（t=9.36,P<0.001）,提升知识与技能水平（t=17.71,P<0.001）,加大知识共享程度（t=31.17,P<0.001）,整体满意度（t=10.60,P<0.001）5方面评分均高于对照组。结论　AI辅助系统结合CBL教学能提高眼科住院医师对斜视疾病的独立诊疗能力,建立正确的临床思维路径,教学效果良好。     

反复冻融对血浆抵抗素和内脂素测定水平的影响

目的 探讨反复冻融对血浆抵抗素和内脂素测定水平的影响。方法 抽取-70℃保存的血浆标本22份,化冻后用酶联免疫吸附法（ELISA）检测血浆抵抗素和内脂素水平（冻融1次标本）,同时将每份标本分装2管,一管放入-20℃冷冻后取出,室温融解,重复3次（冻融4次标本）;另一份按相同方法重复5次（冻融6次标本）,用同一试剂盒、在同一批内检测血浆抵抗素、内脂素水平。比较3种冻融方式间的差异。结果 标本在冻融1次、4次和6次的情况下,抵抗素测定水平分别为2.24±0.99、2.01±1.05、1.89±1.01ng/ml,内脂素测定水平分别为16.3±7.6、13.4±6.3、12.1±5.6ng/ml,后两次检测抵抗素水平较第1次分别下降10.3%（t=5.05,P=0.000）和15.6%（t=10.65,P=0.000）;内脂素水平较第1次检测分别下降17.8%（t=5.19,P=0.000）和25.8%（t=6.58,P=0.000）。结论 反复冻融对血浆标本中抵抗素和内脂素的水平有显著影响,提示在血标本贮存运输、测定和分析中要注意这一现象对研究结果的影响,避免标本的反复冻融。     

心理护理对骨折术后心理状态、疼痛和护理满意度的影响

目的 探讨心理护理对骨折术后心理状态、疼痛和护理满意度的影响。方法 回顾性分析2012年8月~2014年8月浙江省黄岩区中医院骨科病房住院患者72例, 将实施心理护理前36例作为对照组, 实施心理护理后36例作为观察组, 比较两组心理状态、疼痛评分、护理满意度。结果 对照组术后72h SAS评分和SDS评分分别为39.38±5.47、39.21±6.14分;观察组术后72h SAS评分和SDS评分分别为36.31±5.32、36.35±5.66分, SAS观察组显著低于对照组(t=2.41, P<0.01), SDS观察组显著低于对照组(t=2.05, P<0.01);对照组疼痛评分入院时、术后24h、术后72h分别为8.52±1.41、7.25±1.81、6.36±1.57分, 观察组疼痛评分入院时、术后24h、术后72h分别为8.74±1.38、6.37±1.45、4.42±1.48分, 术后24h疼痛评分观察组显著低于对照组(t=2.28, P<0.01);术后72h观察组疼痛评分低于对照组更明显(t=5.40, P<0.01);对照组护患沟通、护理主动性、服务态度分别为4.23±0.42、4.18±0.43、4.16±0.46分, 观察组护患沟通、护理主动性、服务态度分别为4.51±0.44、4.41±0.38、4.39±0.48分, 两组满意度比较差异有统计学意义(t=2.07~2.76, P<0.01)。结论 心理护理能改善骨折术后心理状态和疼痛, 提高护理满意度。     

早产儿肺功能发育与脑损伤关系的初步探讨

目的 探讨早产儿肺功能发育与脑损伤之间的关系。方法 2012年6月至2014年6月入住安徽医科大学第三附属医院新生儿科早产儿,除外肺部感染、需吸氧及机械通气等影响肺功能疾病的早产儿。依据临床表现及头颅MRI结果,分为脑损伤组及非脑损伤组,矫正胎龄40周时行潮气呼吸肺功能检测,比较两组早产儿肺功能的特点及差异。结果 符合入选标准共55例,其中脑损伤组22例(男性12例,女性10例),非脑损伤者33例(男性19例,女性14例)。脑损伤组早产儿呼吸频率[(51.4±6.3)次/min比(42.8±5.8) 次/min,t=5.19]、每分钟通气量[(431.0±84.4)mL/min比(344.3±64.5) mL/min,t=4.31,P<0.05]明显高于非脑损伤组,达峰时间比[(28.1±4.3)%比(35.4±7.2)%,t=-4.27]、达峰容积比[(32.8±2.3)%比(39.9±3.8)%,t=-9.42]、呼气峰流速[(58.7±11.7)mL/s比(67.7±13.7) mL/s,t=-2.54]及75%、50%、25%潮气量时呼气流速[(51.7±8.4)mL/s比(61.6±12.8) mL/s,t=-3.19;(34.4±4.9)mL/s比(47.4±7.4) mL/s,t=-7.23;(31.5±4.0)mL/s比(40.7±7.3) mL/s,t=-6.24,P均<0.05]均明显低于非脑损伤组。结论 脑损伤组早产儿肺功能发育较非脑损伤组早产儿更为不成熟。     

Caspase-9抑制剂对SD大鼠椎间盘软骨终板细胞凋亡的影响

目的 探讨caspase-9抑制剂对低胎牛血清培养诱导的大鼠椎间盘软骨终板细胞凋亡影响的研究。方法 取3月龄SD大鼠椎间盘软骨终板，序贯消化法获取细胞原代培养，以1％FBS培养48h为诱导凋亡条件。实验分为1％FBS凋亡组、caspase-9抑制剂组（Z-LEHD-FMK）及DMSO对照组，分别处理细胞48h，后经流式细胞仪检测细胞凋亡率、western blot检测procaspase-9，active caspase-9及active caspase-3的表达。结果 流式细胞仪检测显示，caspases-9抑制剂组细胞凋亡率（26．3±2．56）％与1％FBS组（40．8±0．84）％及DMSO组（40．2±1．56）％相比凋亡率较低，有显著统计学差异（P＜0．05）；western blot检测caspases-9抑制剂组active caspase-9及active caspase-3较1％FBS凋亡组及DMSO对照组表达均明显减少，有显著统计学意义（P＜0．05）。结论 caspase-9抑制剂能明显抑制低胎牛血清培养诱导的大鼠椎间盘软骨终板细胞凋亡，有望成为治疗椎间盘退变的新型药物。     

骨关节病与大骨节病关节软骨细胞凋亡的比较

目的比较成年人大骨节病与骨关节病关节软骨细胞凋亡及凋亡相关调控因子Fas和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的表达分布特点,探讨两种疾病发病机制的异同。方法收集15例大骨节病、15例正常对照以及15例骨关节病的关节软骨,分别采用脱氧核糖核酸末端转移酶介导的脱氧核糖核酸缺口标记(TUNEL)技术和免疫组化法,观察大骨节病、骨关节病和正常对照关节软骨的细胞凋亡率、Fas及iNOS蛋白表达及其分布特点。结果大骨节病及骨关节病关节软骨细胞凋亡率较正常对照高(P<0·01),且关节软骨剥蚀区的细胞凋亡率较未剥蚀区高(P<0·05),但大骨节病与骨关节病之间软骨细胞凋亡率差异无显著性。大骨节病与骨关节病关节软骨Fas及iNOS表达阳性细胞数较正常关节软骨增多(P<0·01),且关节软骨剥蚀区Fas及iNOS表达阳性细胞数较未剥蚀区增多(P<0·05),但大骨节病与骨关节病之间Fas及iNOS表达阳性细胞数差异无显著性。结论骨关节病和大骨节病均存在软骨细胞异常凋亡,Fas和iNOS可能参与了细胞凋亡过程。     

糖蛋白YKL-40在骨关节炎中的表达

目的探讨YKL-40在骨关节炎软骨细胞中的表达及意义。方法用免疫组化SP法、原位末端标记技术(TUNEL)等检测YKL-40在22例骨关节炎患者关节软骨细胞中的表达和软骨细胞凋亡情况。结果在软骨细胞中YKL-40的表达实验组阳性率高于对照组(P<0.05);实验组软骨细胞凋亡程度与YKL-40的表达呈正相关(P<0.05)。结论YKL-40骨关节炎发生发展有密切关系。     

Caspase-3、XIAP在骨关节炎中的表达及意义

目的探讨Caspase-3、XIAP在骨关节炎软骨细胞中的表达及意义。方法用免疫组化SP法、原住末端标记技术（TUNEL）等检测Caspase-3、XIAP在22例骨关节炎患者关节软骨细胞中的表达和软骨细胞凋亡情况。结果在软骨细胞中Caspase-3的表达实验组阳性率高于对照组（P〈0．01）；实验组软骨细胞凋亡程度与XIAP的表达呈负相关（P〈0．05），与Caspase-3的表达呈正相关（P〈0．01）。结论Caspase-3、XIAP基因的表达与骨关节炎发生发展有密切关系。     

胎儿脐动脉及大脑中动脉血流动力学指标预测胎儿窘迫的价值

目的 探讨胎儿脐动脉(UA)及大脑中动脉(MCA)血流动力学指标预测胎儿窘迫的价值.方法 选取2018年6月至2020年6月宣城市人民医院收治的76例发生胎儿窘迫的孕妇设为观察组,另选取同期68名健康胎儿孕妇作为对照组.比较两组孕妇孕32～41周的UA及MCA的血流阻力指数(RI)、搏动指数(PI)、收缩期峰值流速与舒...     

人骨关节炎软骨细胞的体外培养

目的:对人骨关节炎软骨细胞的分离、消化和培养进行初步研究,并就其生物学活性同人正常软骨细胞进行比较和评价。方法:以含血清培养液配制的0.05%和0.2%Ⅱ型胶原酶顺序消化关节软骨分离细胞,检测细胞存活率;体外传代培养观察细胞形态、生长、增殖和Ⅱ型胶原、蛋白多糖聚集体等的变化,以及用流式细胞仪检测有或无IL-1β诱导的细胞凋亡和周期变化。结果:①消化后骨关节炎组原代细胞活力平均为82%,少于正常组的95%(P<0.01)。②MTT检测骨关节炎组细胞增殖低于正常组(P<0.01),Ⅱ型胶原免疫组化和甲苯胺蓝O异染反应均较弱,传至第4代软骨细胞生物学特性基本消失。③骨关节炎组细胞凋亡率为6.9%,而正常组为0.5%,IL-1β诱导后凋亡率增加了27.4%,正常组只有12.7%。结论:酶二步消化法具有较高细胞存活率、低污染率和操作简便等特点,分离培养的骨关节炎软骨细胞符合人患骨关节炎时软骨细胞退变的表现,能很好的为骨关节炎细胞水平的研究提供最佳实验对象。     

大骨节病关节软骨细胞凋亡及其相关调控因子的表达

OBJECTIVE: To investigate the characteristics of chondrocyte apoptosis and distribution of Bcl-2, Bax, Fas and iNos expressions in articular cartilage in Kashin-Beck disease (KBD). METHODS: Samples of articular cartilage were collected from 15 healthy children and 15 children with KBD diagnosed according to the Pathological Criteria of KBD Diagnosis in China. Chondrocyte apoptosis was detected by TUNEL method, and the articular chondrocytes positive for Bcl-2, Bax, Fas and iNos were stained by B-SA immunohistochemistry. RESULTS: The percentage of apoptotic chondrocytes positively stained by TUNEL in the middle layer of articular cartilage was significantly higher in KBD children than in the control group (33.60%+/-2.71% vs 1.33%+/-0.41%, t=11.59, P<0.01). Significant difference in Bcl-2, Bax, Fas and iNos expressions was observed between the upper, middle and deep layers of the articular cartilage of KBD children (F =73.49-114.42, P<0.01), and staining for Bcl-2, Bax, Fas and iNos in KBD children was prominent in the upper layer (41.93%+/-12.26%, 45.60%+/-15.78%, 53.60%+/-16.49%, and 45.47%+/-14.02%, respectively) and the middle layer (14.93%+/-3.50%, 13.87%+/-4.32%, 23.27%+/-4.83%, and 21.67%+/-6.82%, respectively) of the articular cartilage; the percentages of chondrocytes positively stained for Bcl-2, Bax, Fas and iNos were significantly higher than those of the control group (t=11.75-18.65, P<0.01). CONCLUSION: The percentages of apoptotic chondrocytes and chondrocytes positive for Bcl-2, Bax, Fas and iNos in the articular cartilage of children with KBD are significantly higher than those in healthy children.