老年大鼠肾脏微分离肾小球、肾小管及动脉血管紧张素Ⅱ受体的表达

目的: 观察老年大鼠肾脏不同部位不同亚型的血管紧张素Ⅱ受体(ATR)基因表达的改变。方法: 取3月龄及24月龄雄性Wistar大鼠肾脏,行Western印迹杂交及Northern 印迹杂交检测肾皮质AT₁R的蛋白及基因表达,行冰冻切片(厚5 μm),通过激光切割、弹射微分离系统分离肾小球、肾小管及动脉,提取RNA,利用RT-PCR方法观察AT_1aR mRNA、AT_1bR mRNA及AT₂R mRNA的表达。结果: 24月龄大鼠肾脏的AT₁R在蛋白水平及基因水平均低于3月龄大鼠。应用自动激光微分离技术成功分离了大鼠肾脏的肾小球、肾小管及小动脉。24月龄大鼠肾小球AT_1aR mRNA的表达与3月龄大鼠比较无明显差异,在肾小管表达低于3月龄大鼠,动脉表达高于3月龄大鼠;AT_1bR mRNA在肾小球、肾小管表达均低于3月龄大鼠,在动脉的表达高于3月龄大鼠;AT₂R mRNA的表达在肾小管明显高于3月龄大鼠,在肾小球及动脉的表达无明显差异。结论: 老年大鼠的肾小球、肾小管及肾内动脉各型血管紧张素受体的改变不同,有可能在肾脏增龄性改变中起重要作用。     

糖尿病大鼠肾脏细胞因子基因表达初步研究

目的:研究糖尿病大鼠肾脏细胞因子mRNA的表达。方法:大鼠随机分成2组:单肾切组、糖尿病组。实验第8周,应用RT-PCR技术检测大鼠肾皮质转化生长因子-β₁ (TGF-β₁)、血小板衍化生长因子-B(PDGF-B)、肿瘤坏死因子-α (TNF-α)及Ⅳ型胶原mRNA的表达。 结果: 糖尿病组大鼠肾皮质TGF-β₁ (P＜0.01)、 PDGF-B(P＜0.01)、TNF-α(P＜0.01)及Ⅳ型胶原(P＜0.01)mRNA的表达显著高于单肾切组大鼠。结论: 在实验性大鼠糖尿病肾皮质TGF-β₁、PDGF-B 、TNF-α和Ⅳ型胶原mRNAs表达显著增加。     

糖尿病大鼠肾小球蛋白激酶Cα表达与肾病发病关系的研究

目的:观察四氧嘧啶诱发的糖尿病大鼠肾小球中蛋白激酶Cα(PKCα)、转化生长因子-β₁(TGF-β₁)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达的动态变化, 探讨3者之间相互关系以及与肾损害之间的关系。方法:将大鼠随机分为正常对照组(A组), 糖尿病1周组(B组), 糖尿病1月组(C组)和糖尿病2月组(D组)。用免疫组化和Western印迹法检查PKCα, TGF-β₁和α-SMA在肾小球的表达情况。光镜观察肾组织的形态改变, 生化法测定大鼠血糖, 血脂, 血尿肌酐以及尿蛋白。结果:糖尿病各组肾小球PKCα和TGF-β₁的表达多于正常组(P<0.05), 糖尿病各组PKCα, TGF-β₁和α-SMA3者间呈正相关, 并且与肾脏病变程度呈正相关。结论:糖尿病早期肾组织PKCα表达持续增加, 可使肾小球滤过率和滤过膜通透性增加, 参与了肾病早期蛋白尿的发生机制, 使TGF-β₁增多并诱导α-SMA的表达, 标志着肾脏固有细胞激活及表型转变和肾脏组织学改变。     

肾性高血压大鼠与心脏α1肾上腺素能受体自身抗体的关系

目的:研究肾性高血压大鼠发病与心脏α₁肾上腺素能受体自身抗体的关系。方法:利用手术的方法建立肾性高血压大鼠模型,观察心脏α₁肾上腺素能受体自身抗体与肾性高血压发病的关系,同时对自身抗体生物活性进行分析。结果:在狭窄左肾动脉两周后,大鼠血浆中心脏α₁肾上腺素能受体自身抗体的阳性率和滴度与术前相比均明显升高,并且可持续到12周,以后逐渐下降|同时心脏α₁肾上腺素能受体自身抗体对培养的乳鼠心肌细胞的跳动具有激动剂样效应。结论:心脏α₁肾上腺素能受体自身抗体可能通过作用使外周血管阻力增加,从而促进肾性高血压大鼠心肌肥厚。     

去甲肾上腺素对血管平滑肌细胞A7r5基因表达谱的影响

目的: 探讨去甲肾上腺素刺激后A7r5血管平滑肌细胞基因表达谱的改变。方法: 应用放射配体结合实验明确A7r5细胞上肾上腺素受体(AR)的表达。采用基因芯片技术观察去甲肾上腺素引起的血管平滑肌细胞基因表达谱的变化。用荧光实时定量PCR验证α_1A－AR,α_1B-AR的mRNA表达变化。结果:A7r5细胞中有α₁-AR和β-AR表达,其最大结合容量(Bmax)分别为(45.0±11.8)fmol／mg蛋白和(17.4±2.5)fmol／mg蛋白。去甲肾上腺素刺激细胞24 h后,有75个基因表达发生明显改变,其中涉及细胞结构、防御、代谢及信号转导等多方面的基因。荧光实时定量PCR结果显示去甲肾上腺素刺激细胞24 h后α_1A－AR和α_1B-AR的mRNA表达增加,与基因芯片的结果一致。结论:去甲肾上腺素激动AR引起A7r5血管平滑肌细胞多种不同功能的基因表达发生改变,提示在血管平滑肌中AR可能通过基因水平的调控而介导多种生物学功能。     

全反式维甲酸对人胚肺成纤维细胞增殖及α-SMA表达的影响

目的: 研究全反式维甲酸(ATRA)对人胚肺成纤维细胞(HFL-I)增殖与分化的影响。方法: 体外培养HFL-I, MTT法检测不同浓度ATRA(0.1 μmol/L、1 μmol/L、10 μmol/L)作用3 d对HFL-I增殖能力的影响。5 μg/L 转化生长因子β₁(TGF-β₁)刺激0 h、6 h、12 h、24 h、48 h、72 h后,RT-PCR法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA) mRNA表达,刺激0 d、1 d、3 d、5 d后,Western blotting法检测α-SMA蛋白表达。不同浓度ATRA干预,24 h后RT-PCR方法检测α-SMA mRNA表达,3 d后用Western blotting方法检测α-SMA蛋白表达。结果: (1) MTT法检测显示不同浓度ATRA以浓度依赖性方式抑制HFL-I细胞的增殖(P<0.05)。(2)5 μg/L TGF-β₁诱导后,HFL-I细胞中α-SMA mRNA和蛋白表达均上调(P<0.05)。(3) ATRA以浓度依赖性方式下调TGF-β₁诱导的α-SMA mRNA和蛋白的表达(P<0.05)。结论: ATRA能够抑制HFL-I细胞的增殖和TGF-β₁诱导的分化,该作用可能是通过下调α-SMA mRNA和蛋白的表达实现的。     

苯那普利对糖尿病大鼠肾皮质JAK/STAT信号蛋白磷酸化的影响

目的: 探讨血管紧张素Ⅱ转换酶抑制剂苯那普利对糖尿病大鼠肾皮质p-JAK2、p-STAT1和p-STAT3信号蛋白表达的影响。方法: 雄性Wistar大鼠随机分为对照组、糖尿病组和苯那普利治疗组。腹腔注射STZ诱发糖尿病大鼠模型，治疗组每日灌胃给予苯那普利10 mg/kg，共2周。采用免疫沉淀和Western blotting检测JAK2磷酸化，Western blotting检测肾皮质p-STAT1、p-STAT3和TGF-β₁蛋白的表达，半定量RT-PCR检测肾皮质细胞TGF-β₁ mRNA的表达。结果: 糖尿病组肾皮质p-JAK2、p-STAT1、p-STAT3及其TGF-β₁表达明显高于对照组，同时TGF-β₁ mRNA表达亦明显强于对照组；苯那普利治疗组p-JAK2、p-STAT1和p-STAT3表达低于糖尿病组，同时TGF-β₁ 蛋白及其mRNA 表达亦低于糖尿病组。结论: JAK/STAT信号途径可能参与糖尿病早期肾脏变化的过程，苯那普利的肾脏保护作用可能部分是通过影响JAK/STAT信号途径的激活而实现。     

“一肾一夹”高血压大鼠下丘脑钠泵α亚单位的基因表达

目的 :拟探讨“一肾一夹 ( 1Ｋ1Ｃ)”高血压大鼠下丘脑 (对水盐代谢的调节起着重要的作用 )钠泵α亚单位 (催化亚单位 )各异构体基因表达的改变 ,为高血压发病机制的深入研究提供理论及实验依据。方法 :选择雄性Ｓｐｒａｇｕｅ-Ｄａｗｌｅｙ大鼠制备 1Ｋ1Ｃ高血压模型 ,设立假手术对照组 ,术后 4周处死动物采集下丘脑 ,进行以下实验 :( 1 )应用相应计算机软件 ,设计并合成针对钠泵α1、α2、α3亚单位及Ｇ3ＰＤＨ(内参照 )的4对特异性引物 ,应用分子生物学ＲＴ -ＰＣＲ及图像分析方法探讨 1Ｋ1Ｃ高血压大鼠及假手术组下丘脑钠泵α1、α2及α…     

大鼠30 min全脑缺血再灌注肾脏损伤及其机制研究

目的: 从血栓素(TXA₂)与前列环素(PGI₂)平衡失调和肿瘤坏死因子(TNF-α)的变化方面探讨老龄大鼠脑缺血再灌注肾脏损伤的发生机制。方法: 青年(5月龄)和老龄(20月龄以上)大鼠均分为模型组和正常对照组, 观察大鼠全脑缺血30 min再灌注60 min后肾脏组织形态、肾内及血浆TXB₂、6-Keto-PGF_1α和肾内TNF-α含量的变化。结果: 青年和老龄模型组大鼠肾脏组织形态均出现明显的病理改变, 且老龄较青年更为严重。青年模型组血浆TXB₂/6-Keto-PGF_1α高于青年对照组和老龄模型组, 老龄对照组高于青年对照组。青年对照组肾脏组织TXB₂/6-Keto-PGF_1α低于老龄对照组和青年模型组, 老龄模型组高于青年模型组。老龄模型组肾组织TNF水平高于老龄对照组和青年模型组。结论: 以TXA₂占优势的TXA₂与PGI₂的平衡失调及TNF的增高与大鼠脑缺血再灌注肾脏损伤有关, 老龄大鼠脑缺血再灌注肾脏损伤的病理变化更明显。     

糖尿病大鼠心肌肌浆网钙调蛋白基因表达的改变

目的:探讨糖尿病大鼠心肌细胞肌浆网钙调蛋白基因表达的改变。方法: 雄性SD大鼠经尾静脉注射四氧嘧啶(40 mg/kg)复制糖尿病大鼠模型,对照组注射生理盐水,分别于4,6周处死,取心室肌组织,应用逆转录-聚合酶反应技术以肌动蛋白为内参照,测定肌浆网钙调蛋白钙泵(SERCA )、磷酸受纳蛋白(phospholamban)、ryanodine受体2型(RyR₂)、1,4,5三磷酸肌醇受体2型(IP₃R₂)mRNA的变化。结果: 4,6周后糖尿病组大鼠的体重和心脏重量均低于正常对照组,但心脏/体重比显著大于正常对照组。4周糖尿病组大鼠心肌肌浆网SERCA 、磷酸受纳蛋白、RyR₂、IP₃R₂ mRNA的表达与对照组相比无显著差异;6周的糖尿病组大鼠心肌肌浆网Ca²⁺-ATP酶 的 mRNA表达无明显变化,但磷酸受纳蛋白的mRNA表达显著高于而RyR₂、IP₃R₂的mRNA表达显著低于对照组。结论: 糖尿病大鼠心肌细胞的肌浆网磷酸受纳蛋白的mRNA表达增加,RyR₂、IP₃R₂的mRNA表达下降。     

缺碘致甲状腺功能减退大鼠肾脏抗氧化能力降低

目的研究甲减大鼠肾脏抗氧化能力的变化,探讨甲状腺激素水平对肾脏的影响。方法Wistar大鼠随机分2组:甲减组(HT)和对照组(Control)。2组大鼠通过不同碘含量饮食复制甲减动物模型;肾脏形态定量学观察;比色法测定肾脏组织丙二醛(MDA)含量、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)、超氧化物歧化酶(SOD)及生物膜Na+,K+-ATPase活性;RT-PCR方法测定肾脏Na+,K+-ATPaseα1亚基的基因表达。结果与对照组比较,HT组FT3、FT4、TT3、TT4显著降低(P<0.01);肾小球萎缩;MDA含量和GPx活性显著升高(P<0.05),而SOD和Na+,K+-ATPase活性显著降低(P<0.05);Na+,K+-ATPaseα1亚基的基因表达下降(P<0.05)。结论甲状腺激素不足可导致肾脏抗氧化能力下降,肾小球萎缩。     

内洋地黄素拮抗剂上调缺血再灌注损伤大鼠心肌细胞膜钠泵亚基的表达

目的： 观察内洋地黄素特异性拮抗剂地高辛抗血清对心肌缺血再灌注（MIR）损伤大鼠心肌组织内洋地黄素水平、钠泵活性、线粒体总钙浓度以及钠泵各亚基基因表达的影响，探讨内洋地黄素在心肌缺血再灌注损伤中的作用及其机制。方法: 将56只雄性SD大鼠随机分成7组，每组8只。假手术对照组（sham）：丝线穿过左冠状动脉前降支，但不结扎；缺血再灌注组（MIR）：结扎左冠状动脉前降支30 min，再灌注45 min；生理盐水组（NS）、维拉帕米组（Ver）、小剂量、中剂量、大剂量地高辛抗血清组（ADA）：于再灌注前5 min经股静脉分别注射生理盐水、维拉帕米5 mg·kg^-1、地高辛抗血清8.6 mg·kg^-1、 17.3 mg·kg^-1、34.5 mg·kg^-1，容积均为5 mL·kg^-1，5 min内注射完毕，其余同MIR模型组。再灌注结束后，立即取缺血区左室心肌检测心肌匀浆内洋地黄素水平、心肌细胞膜Na+ K+_ATP酶和Ca2+_Mg2+_ATP酶活性、线粒体总钙浓度；分别采用RT-PCR及Western blotting方法和免疫组化方法检测心肌钠泵α₁、α₂、α₃和β₁亚基mRNA及蛋白水平基因表达的改变。结果: 心肌缺血再灌注损伤时，心肌组织内洋地黄素水平明显升高，心肌细胞膜钠泵和Ca2+_Mg2+_ATP酶活性显著下降，线粒体总钙浓度升高，钠泵α₁、α₂、α₃和β₁亚基在mRNA及蛋白水平基因表达均明显下降；维拉帕米除具有降低线粒体总钙浓度外，对其它各项指标无明显影响。地高辛抗血清呈剂量依赖性地显著降低心肌组织内洋地黄素水平，恢复细胞膜钠泵和Ca2+_Mg2+_ATP酶活性，降低线粒体总钙浓度，上调钠泵α₁、α₂、α₃和β₁亚基mRNA及蛋白水平的基因表达。结论: 心肌缺血再灌注促进机体内洋地黄素分泌增加，后者通过下调心肌细胞膜上的钠泵α₁、α₂、α₃和β₁亚基基因表达抑制钠泵活性，进而抑制Ca2+_Mg2+_ATP酶活性，导致线粒体内钙超载，介导心肌缺血再灌注损伤。内洋地黄素特异性拮抗剂地高辛抗血清通过阻断内洋地黄素的生物学作用，上调钠泵各亚基的基因表达，发挥其抗心肌缺血再灌注损伤的作用。     

“一肾一夹”高血压鼠血清及组织内哇巴因含量及其与血压相关性的研究

目的:探讨内源性哇巴因(EO)在“一肾一夹(1k1c)”高血压模型血压升高中的作用及其分泌特点。方法:采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定“1k1c”高血压大鼠血清及多种组织内EO含量的改变,并对体内EO含量与大鼠血压进行相关性分析。结果:“1k1c”高血压鼠血清及心脏、肾脏、肾上腺、垂体及下丘脑内EO含量均高于正常大鼠;尤以肾上腺及下丘脑内EO含量最高;其中血清、肾脏及下丘脑内EO含量与大鼠血压呈显著正相关。结论:EO含量增加可能在“1k1c”模型高血压的发生机制中发挥着较为重要的作用;肾上腺可能是EO的来源之一。     

Impairment and recovery of the clipped kidney in two kidney, one clip hypertensive rats during and after antihypertensive therapy

Earlier experiments have shown that in sodium depleted hypertensive rats with bilaterally constricted renal arteries the arterial pressure normalized after blockade of the renin-angiotensin system; simultaneously acute renal failure occurred. In hypertensive rats with unilateral renal artery stenosis an impaired excretory function of the clipped kidney can be expected, but may not be detectable by conventional tests of renal function. Male Wistar rats with chronic two kidney, one clip hypertension were fed a low sodium diet. After 7 days the rats were treated with vehicle, with the vasodilator dihydralazine, or with the angiotension converting enzyme inhibitor MK 421 for 2 weeks. During the 14-day treatment period a continuous blood pressure reduction was achieved in dihydralazine and MK 421 treated rats. Overall excretory kidney function (plasma creatinine concentration) was well maintained in all three groups until the end of the antihypertensive drug treatment. At the end of drug therapy mean glomerular filtration rates of the left clipped kidneys were significantly lower in both treated groups compared to hypertensive controls, and mean glomerular filtration rate of the left clipped kidneys of dihydralazine treated rats was significantly higher than in MK 421 treated rats: controls (N = 6) 1.03 +/- 0.03, dihydralazine-group (N = 10) 0.28 +/- 0.07, MK 421-group (N = 9) 0.03 +/- 0.01 ml/min. Renal blood flows were comparable in both treated groups. Only the left kidneys of rats treated with MK 421 showed a prominent tubular atrophy. Seven days after declipping of the left renal artery and right nephrectomy a considerable restitution of the tubular structure had occurred in the MK 421-group. The recovery of tubular epithelial cells was paralleled by a rise in glomerular filtration rate: MK 421 group (N = 7) 1.25 +/- 0.08 ml/min. Thus, the clipped kidney in two kidney, one clip hypertensive rats showed functional and morphological signs of impairment when systemic arterial pressure was reduced to the normal range. The alterations of the clipped kidney were most pronounced in rats with renin-angiotensin system-blockade.     

The second sodium pump: from the function to the gene

Transepithelial Na⁺ transport is mediated by passive Na⁺ entry across the luminal membrane and exit through the basolateral membrane by two active mechanisms: the Na⁺/K⁺ pump and the second sodium pump. These processes are associated with the ouabain-sensitive Na⁺/K⁺-ATPase and the ouabain-insensitive, furosemide-inhibitable Na⁺-ATPase, respectively. Over the last 40?years, the second sodium pump has not been successfully associated with any particular membrane protein. Recently, however, purification and cloning of intestinal α-subunit of the Na⁺-ATPase from guinea pig allowed us to define it as a unique biochemical and molecular entity. The Na⁺- and Na⁺/K⁺-ATPase genes are at the same locus, atp1a1, but have independent promoters and some different exons. Herein, we spotlight the functional characteristics of the second sodium pump, and the associated Na⁺-ATPase, in the context of its role in transepithelial transport and its response to a variety of physiological and pathophysiological conditions. Identification of the Na⁺-ATPase gene (atna) allowed us, using a bioinformatics approach, to explore the tertiary structure of the protein in relation to other P-type ATPases and to predict regulatory sites in the promoter region. Potential regulatory sites linked to inflammation and cellular stress were identified in the atna gene. In addition, a human atna ortholog was recognized. Finally, experimental data obtained using spontaneously hypertensive rats suggest that the Na⁺-ATPase could play a role in the pathogenesis of essential hypertension. Thus, the participation of the second sodium pump in transepithelial Na⁺ transport and cellular Na⁺ homeostasis leads us to reconsider its role in health and disease.     

Renin gene and angiotensin II AT1 receptor gene expression in the kidneys of normal and of two-kidney/one-clip rats

This study aimed to investigate the inter-relation between the angiotensin II (ANG II) AT₁ receptor and renin gene expression in rat kidneys. To this end, renin mRNA levels and mRNA levels for AT_1a and AT_1b were assayed by RNase protection in the kidneys of normal rats, in animals treated with the AT₁ antagonist losartan and in rats bearing 0.2-mm left renal artery clips for 2 days. In normal rats, we found a negative correlation between renin mRNA levels and AT_1a receptor mRNA levels. Losartan led to a fourfold increase in renin mRNA levels without changing AT₁ receptor mRNA levels. Unilateral renal artery clipping increased renin mRNA levels fourfold in the clipped kidney and suppressed renin mRNA levels in the contralateral kidneys. AT₁ receptor mRNA levels were not changed in the contralateral intact kidneys, but were significantly decreased by 15–25% in the clipped kidneys. Renin mRNA levels were inversely correlated to AT_1a mRNA levels in the clipped, but not in the contralateral, kidneys. Our findings suggest that the systemic activity of the renin angiotensin system has no regulatory influence on renal AT₁ receptor gene expression. Renin mRNA levels in normal and in clipped kidneys appear to be negatively determined by the level of AT_1a receptor gene expression. Thus modulation of AT_1a receptor gene expression could be a pathway for indirect modulation of renin gene expression by ANG II. This conclusion is in agreement with the observation that AT₁ receptor antagonists are powerful stimulators of the renin system.     

血管紧张素Ⅱ刺激高草酸尿症大鼠肾脏NADPH氧化酶的表达

目的： 观察肾素-血管紧张素系统（RAS）和NADPH氧化酶在高草酸尿症大鼠肾脏氧化应激（OS）形成中的相互作用。方法: 采用0.8%乙二醇饮水法诱导建立高草酸尿症大鼠模型。动物分6个组（n=8）,A组:空白组;B组：高草酸尿症组;C组：高草酸尿症+apocynin治疗组;D组：单纯apocynin治疗组;E组：高草酸尿症+losartan治疗组;F组：单纯losartan治疗组。后4组分别灌胃给予apocynin（0.2 g·kg-1·d-1）或losartan（30 mg·kg-1·d-1）。4周后检测大鼠尿液、肾组织中的OS指标（尿8-IP和肾组织SOD活性）,放免法检测肾组织血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）的含量,免疫组化法观察NADPH氧化酶亚单位P47phox蛋白在肾脏中的表达位置,RT-PCR法检测肾组织p47phox mRNA的表达水平。结果: p47phox在各组大鼠肾脏中都有广泛表达,表达部位包括肾皮质、内髓、外髓。与A组比较,B组尿液8-IP明显增多,肾组织SOD活性降低,肾组织AngⅡ含量增多,p47phox mRNA在肾组织中的表达水平也明显增多。使用apocynin（C组）和losartan（E组）均可抑制肾组织p47phox mRNA的表达,同时肾脏的OS程度减轻。结论: 在高草酸尿症大鼠模型中,肾脏p47phox mRNA表达增多,导致肾脏OS;同时肾脏RAS也被激活,后者可通过刺激p47phox mRNA的表达而促进肾脏OS程度增加。     

木犀草素对STZ诱导的糖尿病肾脏的保护作用

目的:探讨木犀草素对糖尿病肾脏的保护作用及其可能机制。方法:雄性SD大鼠随机分为5组,即正常对照组、糖尿病模型组、木犀草素低、中、高剂量组,采用腹腔注射链脲佐菌素法建立糖尿病大鼠模型,生化方法测定血糖、尿蛋白、血及肾组织超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)的活性及肾组织丙二醛(MDA)的含量;W estern blotting检测肾皮质转化生长因子β1(TGF-β1)、纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1)蛋白质水平;光镜观察肾组织形态改变。结果:与糖尿病模型组相比,木犀草素治疗组大鼠血糖水平明显降低(P0.01)、24 h尿蛋白明显减少(P0.01),血清及肾组织SOD、CAT活性升高(P0.01),肾组织MDA含量显著降低(P0.01),木犀草素治疗组肾皮质TGF-β1及PAI-1蛋白表达明显低于糖尿病模型组。结论:木犀草素对STZ诱导的糖尿病大鼠肾脏具有一定的保护作用,其机制可能与其抗氧化作用及降低肾组织TGF-β1、PAI-1的蛋白表达有关。     

锌指转录因子Snail 1在糖尿病大鼠肾组织中的表达

目的： 观察锌指转录因子Snail 1在糖尿病大鼠肾组织中的表达并探讨其与糖尿病肾病（DN）发生、发展的关系。方法: 链脲佐菌素（STZ）诱发大鼠糖尿病（DM），分为2、4、8、12、16、20、24周以及16周A、20周A和24周A组，其中A组动物从第13周起用胰岛素控制血糖至正常水平，每个时点均设鼠龄匹配的正常对照组。测定各组血糖、24 h尿蛋白、血肌酐（Scr）、肾脏指数。PAS染色光镜观察肾脏病理改变。免疫组化、RT-PCR方法检测肾皮质Snail 1和纤连蛋白（FN）的蛋白及mRNA水平，Western blotting检测Snail 1蛋白表达。结果: DM各组大鼠的血糖、24 h尿蛋白、血肌酐、肾脏指数明显高于正常对照组（P<0.05,P<0.01），A组上述指标均明显低于DM组（P<0.05,P<0.01）。Snail 1免疫组化阳性染色见于各组DM大鼠肾小管，正常对照组未见阳性表达，A组见弱阳性表达，并随治疗时间延长而减少。DM组肾皮质Snail 1、FN蛋白和mRNA的表达水平高于正常对照组（P<0.01），而A组显著低于DM组（P<0.01）。Snail 1与FN mRNA的表达水平呈显著正相关（P<0.01），Snail 1蛋白表达水平与血糖、尿蛋白、血肌酐、肾脏指数亦呈正相关（ P<0.01）。结论: Snail 1基因和蛋白在DM大鼠肾组织过度表达，提示Snail 1可能参与了DN的发生、发展机制。