云南省家、野两型鼠疫菌生化特性及营养需求的比较研究

目的 探讨云南家、野两型鼠疫菌株问遗传背景的关系．方法 采用固体平皿法，对云南省32株家、野两型鼠疫菌，进行了生化特性及营养需求的研究。结果 ①21株家鼠鼠疫菌株中，16株为典型菌株．3株分别在发酵麦芽糖、甘油时出现了阴性和阳性两种发酵菌落．2株显现与野鼠鼠疫相似的生化特性。其中12株为Pgm^-，8株有Pgm^ 和Pgm^-两种菌落．1株为Pgm，19株对谷氨酸半依赖．2株对谷氨酸不依赖．21株均为苯丙氨酸依赖；②11株野鼠鼠疫菌株中．8株为典型菌株．2株分别在发酵麦芽糖、甘油时出现了阴性和阳性两种发酵菌落，1株发酵麦芽糖阳性。9株为Pgm^-，2株有Pgm^-和Pgm^-两种菌落。3株对谷氨酸半依赖，8株对谷氨酸不依赖．11株均为苯丙氨酸依赖。结论 云南省家、野两型鼠疫菌具有亲缘性．家鼠鼠疫可能是由野鼠鼠疫传入的。     

准噶尔盆地鼠疫耶尔森氏菌营养需求的实验分析

目的探讨新疆准噶尔盆地鼠疫野外分离株的营养需求。方法应用定性和定量两种方法相结合分析准噶尔盆地28株鼠疫菌对11种氨基酸的营养需求。结果准噶尔盆地28株鼠疫菌株中,低营养型1株(No.25,Phe+)占检测菌株的3.57%;色氨酸依赖1株(No.24,Try-)占检测菌株的3.57%;苯丙氨酸、甲硫氨酸、缬氨酸依赖,异亮氨酸半依赖1株(No.21,Phe-、Met-、Val-、Ile±)占检测菌株的3.57%;余下25株表现为对苯丙氨酸、甲硫氨酸、缬氨酸依赖(Phe-、Met-、Val-)占检测菌株的89.3%。结论新疆准噶尔盆地鼠疫菌株的营养型主要表现为对苯丙氨酸、甲硫氨酸、缬氨酸依赖(Phe-、Met-、Val-)。     

贵州省鼠疫耶尔森菌生物学特征研究

目的研究贵州省鼠疫耶尔森菌的生物学特征,探讨疫源地性质。方法对37株鼠疫菌进行生化试验、营养需求试验、毒力基因检测、随机扩增多态性DNA分析和脉冲场电泳分析。结果37株鼠疫菌均不发酵鼠李糖和甘油,发酵麦芽糖和阿拉伯糖,脱氮阳性。选择20株代表菌株检测均为苯丙氨酸依赖(Phe )、谷氨酸半依赖(Glu±);用Pla、Cafl、inv、hms4对引物分别进行PCR扩增,均得到456、249、1000和700bp的目标基因条带;随机引物(RAPD)分析均获得505、790、1140和1680bp的条带;脉冲场电泳图谱显示338、242.5、168和77kbp的条带。结论贵州省鼠疫菌株的生物学特征与云南省滇闽居民生态型鼠疫菌相同。     

云南省玉龙县鼠疫菌的生化特性

目的 对玉龙县、云南家、野两型及西藏北部旱獭鼠疫菌代表株的生化特性进行比较,分析玉龙县疫源地的性质.方法 采用常规方法对玉龙县鼠疫菌、云南省家、野两型及西藏北部旱獭型共12株鼠疫菌代表株进行生化特性的研究.结果 5株玉龙县鼠疫菌发酵甘油、麦芽糖、阿胶糖,不发酵密二糖、鼠李糖,脱氮阳性.结论 玉龙县鼠疫菌与云南剑川菌株(野鼠型)及云南省家鼠型菌株生化特性不同,与西藏北部旱獭鼠疫菌的生化特性接近;按纪树立分型接近于喜马拉雅早獭青藏高原生态型,按宋延富分型属于喜马拉雅旱獭生物型A生物亚型.     

青藏铁路沿线鼠疫菌营养需求的研究

目的检测青藏铁路沿线鼠疫菌的营养需求。方法选用 Lawton 最小培养基,采用 Lawton 最小培养基中加减各种氨基酸的方法进行。结果试验用青藏铁路沿线菌株对色氨酸(Trp)、苏氨酸(Thr)、亮氨酸(Leu)、精氨酸(Arg)不依赖,而对苯丙氨酸(Phe)、甲硫氨酸(Met)、半胱氨酸(Cys)依赖,对异亮氨酸(Ile)和谷氨酸(Glu)表现出低营养。结论鼠疫菌营养需求的特征可作为鼠疫菌分型的重要指征之一。     

青海省鼠疫菌营养需求及营养突变研究

收集１９６０－１９９２年间不同地区，不同宿主及媒介分离的鼠疫菌４６２株进行营养需求及突变的研究，利用Ｌａｗｔｏｎ氏最小培养基进行初筛，所有菌株均能生长。在限定培养基上，应用影印与定量法同步在２８℃下进行培养，结果表９５％的菌株需要苯丙氨酸，甲硫氨酸和半胱氨酸，少数菌株出现了营养突变，形成四种营养依赖型：缬氨酸依赖，异亮氨酸依赖，甘氨酸依赖和缬，甘氨酸联合依赖；四种低营养型：苯丙氨酸不依赖。甲硫氨酸     

云南省不同型鼠疫自然疫源地鼠疫菌生化特性比较

目的 通过对云南省不同流行地区、宿主、媒介分离出的鼠疫菌生化特性及毒力因子Pst Ⅰ的鉴定结果,比较云南省家、野鼠型鼠疫自然疫源地及新发现玉龙县鼠疫疫源地鼠疫菌生化特性的差别及疫源地相互之间的联系.方法 采用资料回顾方法,收集用试管法鉴定的云南省218株鼠疫菌生化特性(酵解鼠李糖、甘油、麦芽糖、阿胶糖、密二糖)和毒力因子Pst Ⅰ的结果,利用SAS 8.0统计软件进行汇总,采用双向无序R×C表χ2检验的Fisher确切概毕法对鉴定结果进行分析.结果 收集野鼠型鼠疫疫源地鼠疫菌48株.其中有1株发酵麦芽糖,48株均发酵甘油;收集家鼠型鼠疫疫源地鼠疫菌165株,其中有1株不发酵麦芽糖、发酵甘油,1株脱氮阴性,属变异菌株;收集玉龙县新分离鼠疫菌5株,均发酵甘油、麦芽糖.对不同疫源地鼠疫菌麦芽糖、甘油发酵试验结果进行比较,差异有统计学意义(P<0.01);对鼠疫菌鼠李糖、阿胶糖、密二糖发酵试验和毒力因子Pst Ⅰ进行比较.差异无统计学意义(P>0.01).结论 云南省不同型鼠疫自然疫源地鼠疫菌生化特性不同,其中家、野鼠型疫源地鼠疫菌生化特性有交串现象;玉龙县鼠疫菌生化特性与家、野鼠型疫源地鼠疫菌截然不同,与西藏北部旱獭鼠疫菌的生化特性接近.     

四川省德格县2株疑似喜马拉雅旱獭鼠疫菌株的鉴定

目的 通过对四川省德格县自毙喜马拉雅旱獭体内分离出的2株疑似鼠疫菌株进行生化特征、毒力鉴定,确定四川省是否存在旱獭鼠疫自然疫源地.方法 菌株鉴定采用细菌形态染色、培养特性、鼠疫噬菌体裂解试验、生化及糖醇类酵解试验、毒力因子、毒力、营养需求、质粒、基因检测及基因分型方法进行.结果 光镜下,2株被检菌株均为革兰染色阴性,呈球杆状,两极浓染、两端钝圆;在赫氏普通琼脂上24-48 h,被检菌株形态呈中心发暗,有黄褐色粗糙颗粒,边缘不整呈锯齿状、薄而透明的花边;在赫氏血琼脂上,菌落隆起,色泽深,花边消失或残留锯齿状痕迹.2株被检菌株均能酵解阿胶糖、麦芽糖、甘油,不酵解鼠李糖、密二糖,脱氮阳性;毒力因子均为F1+、VW+、Pgm+,Pst I+;携带鼠疫菌常见的质粒,相对分子质量(Mr)为6.0×106、45.0×106、65.0×106,具有鼠疫菌的毒力相关质粒基因Pla、calfl、LcrG;对小鼠的毒力试验,绝对致死量(LD100)均为50个菌;营养需求上,对苯丙氨酸、甲硫氨酸依赖;基因型是Genomovar 5;与假结核菌(PTB)在鉴别培养基尿素、奥腾、枸橼酸盐上有明显区别,含鼠疫菌特有的Pst I和F1抗原,22℃下能被鼠疫噬菌体完全裂解.含有鼠疫菌特有的3a片段.结论 四川省德格县喜马拉雅早獭体内分离的2株疑似菌株均为鼠疫耶尔森菌,具有青藏高原喜马拉雅旱獭型鼠疫菌株的特性,四川省存在喜马拉雅旱獭鼠疫自然疫源地.     

青海高原藏系绵羊鼠疫病原生态学研究及流行病学意义

目的 分析青海高原藏系绵羊鼠疫病原生态学特征及流行病学意义.方法 以青海省1975-2009年间从藏系绵羊鼠疫所分离出的14株鼠疫菌株进行生化试验、毒力测定、毒力因子鉴定、质粒分析、差异片段(DFR)分型、宿主及媒介感染谱等研究.结果 14株鼠疫菌株的生物型为古典型,生态型均为青藏高原型.78.57％(11/14)的菌株具有鼠疫菌夹膜抗原(F1)、鼠疫杆菌素Ⅰ(PstⅠ)、毒力抗原因子(VW)、色素沉着因子(Pgm)4种毒力因子.毒力检测结果显示,14株鼠疫菌最小致死量(MLD)均在1 000个菌以下,为强毒菌.14株鼠疫菌均携带有3种质粒,其相对分子质量为6×106、45×106、65×106或6×106、45×106、52×106,其中具有分类意义的大质粒有65×106和52×106两种.玉树县、囊谦县、治多县地区分离的菌株携带65×106大质粒,而德令哈地区分离的菌株携带52×106大质粒.鼠疫菌DFR基因分型结果显示,玉树县、治多县分离的菌株均为5型,囊谦县分离的菌株1株为5型、1株为7型,德令哈市分离的菌株为8型.结论 藏系绵羊鼠疫分离的菌株均具备青藏高原鼠疫病原体特性,藏系绵羊参与鼠疫流行,使青海鼠疫流行演变出许多新的特点.因此,应加强藏系绵羊鼠疫的监测工作,尤其是在旱獭鼠疫流行地区.     

中国鼠疫菌营养需求研究概述

细菌吸收利用营养物质的过程称为营养。不同种细菌因其合成能力和代谢方式不同表现为不同的营养型。鼠疫菌属异养菌,需利用葡萄糖作为碳源和能源,利用氨基酸作为氮源。世界各疫源地分离的大多数鼠疫菌株在28℃下表现为需要苯丙氨酸、甲硫氨酸和半胱氨酸。但从不同疫源地分离的鼠疫菌常常表现有不同的营养需求。鼠疫菌营养需求与菌株的培养温度、菌株来源、培基种类及接种菌量等诸多因素有关。本文仅就中国各生态型鼠疫菌营养需     

新疆2株人蚤鼠疫菌栓形成能力的研究

分别用人工感染患鼠疫败血症而濒死的灰旱獭和经人工饲养装置定量鼠疫菌感染的人蚤灰旱獭株共552只,在整个观察期间末形成栓塞。以强毒鼠菌株7239号2.1×109个菌/ml狗血,感染和田人蚤狗株,其菌栓率为3.4％,这为人——人蚤——人的鼠疫传播途径提供了可靠的实验依据。证实1972年新疆和田地区洛浦县玉龙喀什乡发生人间腺鼠疫流行的媒介是和田人蚤狗株。     

Chromosomal Rearrangement Features of Yersinia pestis Strains from Natural Plague Foci in China

The Yersinia pestis chromosome contains a large variety and number of insert sequences that have resulted in frequent chromosome rearrangement events. To identify the chromosomal rearrangement features of Y. pestis strains from five typical plague foci in China and study spontaneous DNA rearrangements potentially stabilized in certain lineages of Y. pestis genomes, we examined the linking mode of locally collinear blocks (LCBs) in 30 Y. pestis strains by a polymerase chain reaction-based method. Our results suggest most strains have relatively stable chromosomal arrangement patterns, and these rearrangement characteristics also have a very close relationship with the geographical origin. In addition, some LCB linking modes are only present in specific strains. We conclude Y. pestis chromosome rearrangement patterns may reflect the genetic features of specific geographical areas and can be applied to distinguish Y. pestis isolates; furthermore, most of the rearrangement events are stable in certain lineages of Y. pestis genomes.     

Plague

Bubonic plague is an often fulminant systemic zoonosis, caused by Yersinia pestis. Conventional microbiology, bacterial population genetics, and genome sequence data, all suggest that Y pestis is a recently evolved clone of the enteric pathogen Yersinia pseudotuberculosis. The genetic basis of this organism's rapid adaptation to its insect vector (the flea) with transmission between mammalian hosts by novel subcutaneous and pneumonic routes of infection is becoming clearer. This transition provides a paradigm for the way in which new pathogens could emerge. Plague in humans is controlled by suppression of rodent reservoir hosts and their fleas and by early detection and treatment of cases of disease. Detection systems for plague in non-endemic regions might now be needed because of a bioterrorism threat. Rapid diagnostic tests are available and a subunit vaccine is in clinical trials.     

Plague

In the United States, plague poses a threat to humans from the infected animals in the endemic areas of the Western states. Plague may also be used in the near future as an agent of warfare or terrorism. Although the presentation of bubonic plague may be less of a problem, the septicemic and pneumonic forms present challenges to early diagnosis and prompt treatment. The major threat of plague as an agent of terrorism will probably be through the inhalational route. which could result in many cases of the pneumonic form, requiring early recognition and initiation of appropriate therapy. In a mass-casualty scenario, the clinician should be aware of the potential agents of biowarfare and be familiar with the treatment and prophylaxis recommendations outlined by the CDC. It is also prudent to employ universal precautions and respiratory isolation when treating patients with any unknown exposure. In endemic areas, personal protective measures such as use of insecticides, insect repellants, and prompt prophylaxis in cases of exposure to plague are recommended for reducing the incidence of infection. The author also recommends review of CDC website on bioterrorism (http://www.bt.cdc.gov) to keep informed of plague updates.