ILK 和 TGF-β1在实验性大鼠肝纤维化中的表达和意义

目的：研究转化生长因子β1（TGF-β1）和整合素连接激酶（ILK）在大鼠肝纤维化中的表达和意义。方法采用40％CCl4诱导的大鼠肝纤维化模型。60只SD大鼠随机分为五组：正常对照组,模型2周组,模型4周组,模型6周组,模型8周组。对2、4、6、8周肝纤维化模型及对照组大鼠HE染色、网状纤维染色、免疫组化反应,观察肝组织病理变化、纤维增生及ILK和TGF-β1的表达情况。结果随着肝纤维化的发展,ILK和TGF-β1在2、4、6、8周组中表达程度呈明显递增趋势,表明大鼠肝组织纤维化与ILK和TGF-β1的表达相关。结论 ILK和TGF-β1的表达可能和大鼠肝纤维化有联系,或许可为肝纤维化的防治提供新的理论依据。     

糖尿病大鼠肝纤维化对血糖变化的影响及其机制

目的研究糖尿病所致大鼠肝纤维化对血糖变化的影响及其机制。方法将大鼠随机分为正常组1、2、3,每组12只;模型组1、2、3,每组12只。除正常组外,其余各组用STZ(链脲佐菌素)诱导并建立糖尿病SD大鼠模型,将造模成功的DM大鼠随机抽样分成以下3个组:模型组1、2、3,对组1、2、3分别干预处理8周、12周、16周,放射免疫测定肝纤维化指标:透明质酸、IV型胶原,测定空腹、餐后2h血糖;免疫组织化学法检测肝组织TGF-β1表达。结果模型组肝纤维化指标明显增高,以模型组3为主;模型组空腹和餐后血糖波动明显,肝脏TGF-β1表达显著增高,与正常组比较差异有统计学意义(P0.05)。并且以模型组3差异最显著(P0.01)。结论糖尿病大鼠肝纤维化对血糖有显著影响,且随病变加重而明显,其影响可能与TGF-β1在肝组织的表达增多有关。     

高血糖对肝纤维化大鼠肝组织α—SMA和CTGF表达的影响

目的 探讨高血糖对肝纤维化大鼠肝组织α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA反映肝星状细胞HSC活化)和结缔组织生长因子(CTGF)表达的影响.方法 将52只SD雄性大鼠随机分为糖尿病肝纤维化组、正常血糖肝纤维化组与正常对照组.通过链脲佐菌素(streptozocin,STZ)诱导糖尿病,后用四氯化碳诱导肝纤维化.肝组织HE染色检测病理改变.免疫组化法检测肝组织α-SMA、CTGT蛋白表达.结果 高血糖肝纤维化组α-SMA(灰度值142.5±3.67)和CTGF(灰度值144.2±5.01)表达水平较正常血糖肝纤维化组(α-SMA灰度值158.9±2.18,CTGF灰度值157.7±6.80)显著升高(P＜0.05).结论 高血糖可通过诱导肝脏α-SMA、CTGF表达,加重大鼠肝纤维化的程度,促进肝纤维化的形成.其机制与促进肝星状细胞的增殖活化及细胞外基质的合成分泌等有关.     

苦参素对肝纤维化大鼠肝脏TGF-β1的调节作用

目的观察苦参素(OM)对肝纤维化大鼠的防治作用及对转化生长因子β1(TGF-β1)表达的影响。方法采用CCl4诱导大鼠肝纤维化模型。于实验的第12周末采血,检测ALT、AST、Ⅰ型胶原和TGF-β1。肝脏病理学检测HE染色后观察肝组织改变,Masson胶原纤维染色,每组样本随机观察8个视野的肝纤维化程度,RT-PCR检测TGF-β1mRNA表达。结果苦参素组能明显降低肝纤维化大鼠血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、Ⅰ型胶原和TGF-β1水平,同时病理组织学显示苦参素能明显改善CCl4诱导的肝纤维化大鼠的肝组织结构和肝纤维化;TGF-β1基因表达量较模型组明显减少。结论苦参素可明显降低实验大鼠胶原沉积,对CCl4诱导的肝纤维化大鼠有良好的保护作用,对TGF-β1表达的影响可能是其作用机制之一。     

鬼针草总黄酮对肝纤维化大鼠细胞因子的影响

目的观察鬼针草总黄酮(totalflavones of Bidenspilo-saL,TFB)对肝纤维化大鼠细胞因子的影响。方法将大鼠随机分成正常组、对照组、TFB160、80、40mg·kg-1组和秋水仙碱(Col)0.1mg·kg-1阳性药对照组。除正常组外,其余各组采用四氯化碳(CCl4)诱导肝纤维化模型。于造模wk9起,给药组分别灌胃相应的受试药物,正常组和对照组灌胃等容量的生理盐水,疗程10wk。实验结束后,股动脉采血,放免法测定血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)的含量,同时取固定部位肝脏组织,免疫组化技术测定TFB对肝组织中TGF-β1和NF-κB蛋白表达的影响,RT-PCR技术测定TFB对肝组织中TGF-β1 mRNA表达的影响。结果TFB160、80mg·kg-1能明显降低肝纤维化大鼠血清TNF-α、IL-1β含量,抑制肝纤维化大鼠肝组织中NF-κB、TGF-β1蛋白和TGF-β1 mRNA表达。结论TFB通过降低肝纤维化大鼠炎症细胞因子而抗肝纤维化。     

扶正化瘀胶囊对大鼠肝纤维化转化生长因子β1表达的影响

目的:观察BDL法诱导的大鼠肝纤维化模型在扶正化瘀胶囊干预下的防治作用,研究其对胆汁淤积性肝纤维化模型防治作用可能的机制.方法:45只雄性SD大鼠,随机分为假手术组、模型组及扶正化瘀胶囊治疗组3组.采用BDL法制备肝纤维化大鼠模型.假手术组与模型组给予生理盐水灌胃.扶正化瘀胶囊治疗组给予扶正化瘀胶囊混悬液胃.4周后处死全部大鼠,采用放射免疫法(RIA)测定大鼠血清中透明质酸(HA)、Ⅲ型前肢原氨端肽(PⅢNP)的含量;同时采用染色观察比较各组大鼠肝组织的病理变化;取肝组织检测肝组织中羟脯氨酸(Hyp)的含量.免疫组化ABC法检测大鼠肝组织转化生长因子β1 (TGF-β1)的表达情况.结果:模型组与假手术组大鼠比较,大鼠肝组织Hyp的含量显著升高;扶正化瘀胶囊治疗组与模型组大鼠比较,肝组织Hyp的含量显著降低.与假手术组大鼠比较,其余两组大鼠血清中HA和PⅢNP的含量均明显升高,有显著差异.与模型组大鼠比较,扶正化瘀胶囊治疗组大鼠血清中HA、PIIINP含量明显降低,有显著差异.扶正化瘀胶囊治疗组与模型组大鼠比较,大鼠肝组织内纤维化程度降低,肝小叶结构趋于正常;肝组织TGF-β1表达明显降低.结论:扶正化瘀胶囊能有效地减轻胆总管结扎诱导的肝纤维化大鼠的肝损伤及改善纤维化程度,可以有效降低胆总管结扎诱导的肝纤维化大鼠血清中肝纤维化指标的含量,其机制可能与扶正化瘀胶囊能够抑制肝内TGF-β1表达有关.     

三羟基异黄酮对肝纤维化大鼠血清和肝组织中TGF-β1表达的影响

目的观察4,5,7-三羟基异黄酮（Genistein）对四氯化碳（CCl4）诱导的肝纤维化大鼠的防治作用及对转化生长因子β1（TGF-β1）表达的影响。方法采用CCl4造成大鼠肝纤维化模型,在实验的第10周末采血和取肝组织,检测血清中ALT、AST、TGF-β1和Ⅰ型胶原,HE染色法观察肝组织改变,免疫组织化学法检测肝组织TGF-β1表达。结果血清学检测显示Genistein能明显降低肝纤维化大鼠ALT、AST、TGF-β1和Ⅰ型胶原水平,病理组织学观察发现Genistein能明显改善肝纤维化大鼠肝组织结构和肝纤维化,免疫组织化学检测表明肝组织TGF-β1表达量与模型组比较显著降低。结论 Genistein对CCl4诱导的肝纤维化大鼠有较好的保护作用,对TGF-β1表达的影响可能是其作用机制之一。     

白芍总苷对免疫性肝纤维化大鼠肝组织NF-KB和TGF-β1蛋白表达的影响

目的研究免疫性肝纤维化大鼠肝组织中核转录因子-KB（nuc｜ealrfactor-KB，NF-KB）和转化生长因子β1（transforming growth factor betal，TGF-β1）的变化以及白芍总苷（TGP）对两者蛋白表达的影响。方法采用猪血清诱导建立大鼠肝纤维化模型，肝组织HE染色和V-G染色观察肝组织损伤及胶原表达变化；免疫组化S-P法观察NF-KB065和TGF-β1蛋白表达；显微摄像及图像分析检测胶原、NF-KB065和TGF-β1蛋白的表达量。结果与正常组比较，模型组大鼠肝组织明显破坏，胶原合成增加，NF-KB065和TGF-β1表达增强（P〈0．01）；与模型组比较，TGP治疗组肝组织破坏减轻，纤维化程度也明显改善，胶原面积、NF-KB065和TGF-β1表达均明显减少（P〈0．01），三者呈相关性。结论NF-KB介导TGF-β1产生或活化在免疫性肝纤维化过程中可能发挥着重要作用，而TGP抑制纤维化大鼠肝组织NF-KB和TGF-β1的表达可能是TGP的抗肝纤维化主要作用机制之一。     

培哚普利和缬沙坦对肝纤维化大鼠TGF-β1及其Ⅱ型受体mRNA与Smad3、Smad7表达的影响

目的观察培哚普利和缬沙坦抗大鼠肝纤维化的疗效.方法 60只Wistar大鼠随机平均分为4组正常组、模型组、培哚普利治疗组和缬沙坦治疗组.四氯化碳诱导大鼠肝纤维化模型,治疗组于造模第4周开始分别予以培哚普利和缬沙坦灌胃.RT-PCR检测肝组织转化生长因子-β1(TGF-β1)、Ⅱ型受体(TGFRⅡ mRNA);免疫组化技术检测TGF-β1、Smad3及Smad7在肝内的表达及定位,肝组织HE染色检测病理改变.结果与模型组大鼠比较,经培哚普利或缬沙坦治疗大鼠肝内TGF-β1与TGFRⅡ mRNA、以及Smad3蛋白表达明显降低;而Smad7的表达增加.TGF-β1与Smad3的免疫阳性反应信号主要位于纤维间隔中的细胞浆,Smad7则主要在肝细胞浆表达,上述物质在两种药物组之间表达差异无显著性(P＞0.05).培哚普利或缬沙坦治疗后肝小叶均趋于正常,纤维间隔明显变薄.结论培哚普利或缬沙坦均能有效地减轻肝纤维化大鼠的肝脏损伤及纤维化程度,其机理可能与直接或间接抑制肝内TGF-β1、与TGFRⅡ mRNA及Smad3表达,并促进Smad7表达有关.     

鬼针草总黄酮对免疫性肝纤维化大鼠胶原代谢的影响及机制

目的探讨鬼针草总黄酮(TFB)对免疫性肝纤维化大鼠胶原代谢的影响及机制。方法 SD大鼠随机分为正常组、模型组、TFB大、中、小剂量组和秋水仙碱阳性药对照组,采用腹腔注射猪血清诱导肝纤维化模型,造模后灌服相应的受试药物。ELISA法测定大鼠血清Ⅲ型前胶原酶(PCⅢ)、Ⅳ型胶原酶(CⅣ)含量;免疫组化法测定肝组织中Ⅰ型胶原蛋白的表达;RT-PCR技术检测肝组织中Ⅰ型胶原、α-SMA、TGF-β1 mRNA的表达情况;Western blot检测肝组织中Smad2蛋白的表达。结果与模型组相比,TFB能明显降低肝纤维化大鼠血清中PCⅢ、CⅣ含量,抑制肝组织中Ⅰ型胶原、α-SMA、TGF-β1 mRNA及Ⅰ型胶原、Smad2蛋白的表达。结论 TFB能明显降低免疫性大鼠肝纤维化胶原含量,其机制可能与降低TGF-β1表达进而抑制肝星状细胞活化减少胶原生成有关。