腺病毒受体及其介导基因转导的分子机制研究

腺病毒载体 (AdV)是一种重要的基因转导系统。腺病毒依两种不同的受体侵入靶细胞 :Ad纤维蛋白与CAR作用 ,介导病毒黏附细胞 ;Ad五邻体基底蛋白与整合素αvβ3 及αvβ5结合 ,促进病毒内化。靶细胞的CAR和整合素αvβ3 及αvβ5表达水平与AdV介导的基因转导效率直接相关 ,受体低表达限制AdV的转导率。动力蛋白调节Ad进入靶细胞 ,整合素聚集与肌动蛋白相关。Ad侵入靶细胞需要的信号通路包括GTP酶Pho家族成员P13K和肌动蛋白单纤维聚合。     

αvβ3与恶性肿瘤的侵袭和转移

αvβ3 是整合素家族中的一员 ,可表达于多种不同组织来源的恶性肿瘤 ,通过诱导肿瘤血管的生成 ,调节肿瘤细胞凋亡和水解细胞外基质等作用 ,参与肿瘤的侵袭和转移过程。深入研究αvβ3 在恶性肿瘤中的表达与功能 ,有助于进一步认识恶性肿瘤侵袭转移的分子机制 ,也为恶性肿瘤的诊断和预后判断提供了新的指标     

RGD肽类肿瘤受体显像剂的研究进展

细胞与细胞、细胞与基质间的相互作用是肿瘤血管生成、侵袭和转移的基础.整合素属于细胞黏附分子家族,是一种跨膜糖蛋白,有19种α亚基8种β亚基构成,在肿瘤侵袭和转移中起到重要作用[1,2].     

整合素在成年中枢神经系统中的分布和作用

整合素在成年ＣＮＳ中,主要分布在血管结构,神经纤维网,海马等部位,α４β１等在介导外周白细胞穿过血脑屏障中的作用β１等增强星形胶质瘤细胞与ＥＣＭ分子的粘附,αｖβ３等促进恶性胶质瘤细胞入侵正常脑组织。此外,整合素还与阿耳茨海默氏病的发生,脑的衰老和ＣＮＳ生理可塑性可形成等过程密切相关,本文尚提及其配体ＥＣＭ分子,如生腱蛋白,层粘连蛋白等的表达水平与ＣＮＳ损伤呈正相关。     

α5和β1整合素亚基在肺腺癌细胞系凋亡中的作用

整合素作为细胞外基质蛋白(ECM)的受体,参与细胞的生长、增殖及凋亡的调节。当其被ECM激活后,则可刺激细胞产生生存信号并抑制细胞凋亡。如果整合素与ECM的结合导致细胞内原癌基因的持续激活,肿瘤细胞则可不需要黏附于ECM而生长,因此,其与肿瘤细胞的侵袭性生长及转移等密切相关[1]。为探讨α5、β1整合素亚基对体外培养的人肺腺癌细胞系GLC-82凋亡的作用,研究中我们以α5、β1整合素亚基,观察了GLC-82细胞的凋亡。1材料和方法1.1材料人肺腺癌细胞株GLC-82引自中国医学科学院肿瘤研究所。鼠抗人抗α5整合素亚基mAb1956Z购于CHEMI…     

VEGF-C和整合素α4β1促进肿瘤淋巴道转移

肿瘤转移是导致癌症患者死亡的主要原因,淋巴道转移是癌症转移的主要途径之一。VEGFC是淋巴血管发育的中枢调节剂,在多种肿瘤淋巴管生成的调控中起到不可替代的作用。肿瘤细胞VEGF-C的表达上调与淋巴结转移显著相关。研究表明整合素α4β1在结肠癌、黑色素瘤中表达上调时能促进肿瘤生长和转移。整合素α4β1是VEGF-C受体通路的新成员,联合抑制VEGF-C和α4β1的表达为抑制肿瘤淋巴道转移提供新的思路。     

整合素与血管生成

整合素是介导细胞与细胞外基质粘附作用的主要因子。血管生成中 ,整合素通过调节内皮细胞的粘附和迁移能力参与血管管腔的形成和血管网络构建。细胞外基质是整合素的配体 ,胶原和层粘连蛋白的沉积形成新的血管管腔。αvβ3整合素的单克隆抗体和环RGD能抑制血管生成 ,有望成为抗肿瘤的辅助药物。     

侧支血管整合素αvβ3的表达及细胞外基质对其表达的调节

目的:研究侧支血管生成过程中整合素αvβ3的表达及细胞外基质对其表达的调节。方法:结扎大鼠股动脉,应用免疫荧光组织化学技术检测侧支血管整合素αvβ3的表达;并在体外实验中检测不同细胞外基质成分对整合素αVβ3表达的影响。结果:侧支血管整合素αvβ3表达明显增强,为正常血管的3.47倍;种植在纤维连接蛋白(fibronectin,FN)上的血管平滑肌细胞(smooth muscle cells,SMC)整合素αvβ3的表达最高,层粘连蛋白(laminin,LN)上次之,三维Matrigel基膜成分胶里最低,差异具有显著性(P<0.001)。结论:相对于正常血管,侧支血管生整合素αvβ3的表达显著上调;不同细胞外基质成分对血管平滑肌细胞中整合素αvβ3表达的影响不同。     

整合素与血管生成

整合素是介导细胞与细胞外基质粘附作用的主要因子。血管生成中，整合素通过调节内皮细胞的粘附和迁移能力参与血管管腔的形成和血管肉络构建。细胞外基质是整合素的配体，胶原和层粘连蛋白的沉积形成新的血管管腔。αvβ3整合素的单克隆抗体和环RGD能抑制血管生成，有望成为抗肿瘤的辅助药物。     

大鼠后肢侧支动脉生成过程中整合素α5β1和纤维连接蛋白的表达

目的:探讨侧支动脉生成过程中平滑肌细胞(smooth muscle cells,SMC)移动增殖的机制。方法:结扎大鼠股动脉,应用免疫荧光组织化学技术检测侧支血管中整合素α5β1、纤维连接蛋白(fibronectin,FN)和层粘连蛋白(laminin,LN)的表达。并在体外实验中检测了不同的细胞外基质对SMC表达整合素α5β1的影响。结果:侧支血管整合素α5β1和FN的表达分别是对照侧的1.9倍和2倍;而LN的表达是对照侧的1／3。种植在FN上的SMC高表达整合素α5β1;种植在LN上的表达较低;而种植在三维Matrigel基膜成分胶里的SMC几乎不表达整合素α5β1。结论:在侧支血管发育过程中,整合素α5β1、FN和LN的表达变化,有助于侧支血管生长发育过程中SMC的迁移和增殖。     

整合素α5β1蛋白及mRNA在子宫颈鳞状细胞癌中的表达及意义

目的 探讨子宫颈鳞状细胞癌(cervix squamous cell carcinoma,CSCC)中整合素α5β1蛋白和mRNA的表达,并分析其与临床病理特征的关系.方法 采用免疫组化SP法、RT-PCR技术检测60例CSCC及40例子宫颈正常组织中整合素α5β1蛋白及mRNA的表达.结果 CSCC中整合素α5β1蛋白及mRNA表达均高于子宫颈正常组织,差异有统计学意义(P＜0.05);整合素α5β1蛋白及mRNA的表达均与CSCC分化程度、pTNM分期、淋巴结转移、浸润深度有相关性(P＜0.05),与患者年龄无相关性(P＞0.05).结论 CSCC中整合素α5β1蛋白及mRNA的表达与其生长、侵袭与转移密切相关.采用免疫组化SP法与RT-PCR技术联合检测CSCC中整合素α5β1蛋白及mRNA,有望成为评估CSCC恶性程度、侵袭、转移和临床预后的指标.     

整合素αvβ3受体靶向载药脂质体的制备及体外靶向性

背景:含RGD序列的多肽是多种整合素的识别位点,以其相对分子质量小、稳定、易于制备,且无免疫原性等优点被广泛用于纳米靶向药物传递系统的设计。目的:制备以RGD环五肽为配基的整合素αvβ3载药脂质体,通过体外细胞学实验证实其受体靶向性。方法:使用人工合成的RGD环五肽作为靶向分子探针,通过高压均质法制备靶向整合素αvβ3载药脂质体,采用扫描电镜和激光粒度分析仪检测纳米颗粒形态和粒径;以流式细胞分析观察其对血管平滑肌细胞的特异性标记,并考察荷载药物的离体缓释能力以及体外靶向能力。结果与结论:合成的靶向载药脂质体粒径为(175±6)nm,包封率为(96.33±1.02)%,体外溶出时间超过5d。靶向载药脂质体对整合素αvβ3具有较高的特异性亲和力,可通过受体介导的内吞作用进入细胞内。提示制备的靶向整合素αvβ3载药脂质体,具有较高的药物包封率及缓释性,能与整合素αvβ3受体特异性结合,是一种新型的受体介导靶向制剂。     

整合素与肿瘤血管生成及抗血管生成作用

肿瘤血管生成不仅与肿瘤的生长和转移密切相关 ,而且在肿瘤病理分级、治疗和预后判断上具有重要的评估价值。研究表明 ,细胞粘附分子介导的细胞粘附行为异常在肿瘤的浸润和转移中有重要作用。近年 ,随着免疫和分子生物学的发展 ,肿瘤血管生成及抗血管生成逐渐成为肿瘤研究的重点和热点之一 ,细胞粘附分子与血管生成的关系也日益受到关注〔1〕。现就其中整合素家族在肿瘤血管生成及抗血管生成中的作用作一简要综述。1　整合素分子的基本结构整合素家族 (ｉｎｔｅｇｒｉｎｆａｍｉｌｙ)为细胞粘附分子家族的重要成员之一 ,是一组广泛分布于细…     

内皮细胞粘附分子的研究进展

本文综述近十年来内皮细胞粘附分子的研究进展。概述了免疫球蛋白基因超家族成员中的I CAM 1,VCAM 1,PECAM 1;整合素家族中的αvβ3;及选择素家族中的E 选择素在介导内皮细胞与肿瘤细胞粘附的作用 ,从而提示内皮细胞粘附分子在恶性肿瘤细胞沿血管或淋巴管转移的作用     

Expression and clinical significance of CD151 and integrin α3β1 in colorectal tumors

目的:探讨CD151和整合素α3β1在直肠腺瘤及结直肠腺癌组织中的表达及其与临床各个病理因素之间的关系,并且研究两者的相关性.方法:应用免疫组织化学双染方法对正常结直肠黏膜、结直肠腺瘤及结直肠腺癌组织各120例进行CD151和整合素α3β1检测,并进行Kaplan-Meier生存分析.采用Spearman等级相关分析CD151和整合素αβ1之间的相关性.结果:CD151结直肠正常黏膜、腺瘤、腺癌组织的阳性率分别为21.7％、52.5％、72％,腺瘤和腺癌组织分别与正常黏膜比较均具有统计学意义.整合素α3β1在结直肠正常黏膜、腺瘤、腺癌组织的阳性率分别为34.2％、55％、70％,腺瘤和腺癌组织分别与正常黏膜比较均具有统计学意义.在结直肠腺癌中,CD151和整合素α3β1的表达与患者年龄、性别和肿瘤的部位、大小无相关性,与肿瘤的分化程度、浸润深度、淋巴结转移及Duke's分期有关.CD151和整合素α3β1在大肠正常黏膜、腺瘤及腺癌组织中的表达经双变量相关分析,表达呈正相关.从图的Kaplan-Meier生存曲线及Log-Rank检验可知,CD151+、α3β1+、CD151+α3β1+与大肠癌患者5年生存期密切相关,是影响大肠癌预后的因素.结论:CD151和整合素α3β1在大肠癌的表达密切相关,提示CD151与整合素α3β1复合物存在于大肠癌,其表达对预后产生明显的影响.CD151与整合素α3β1联合表达是临床预后判断的可靠指标.     

整合素及其相关miRNA在肝纤维化中作用的研究进展

整合素家族是一类拥有细胞黏附、信号通路传导枢纽和机械力信号传感功能的跨膜二聚体蛋白.整合素广泛分布于肝星状细胞和其他多种类型的肝内细胞中,其中,含有αⅤ亚基的整合素αⅤβ3和αⅤβ5,以及含β1亚基的整合素α4β1、α5β1、α8β1、α9β1和α11β1能促进肝纤维化.miR-125b通过靶向下调整合素α8β1中α8...     

整合素α4β1及其配体与大鼠肝肿瘤周边肥大细胞募集的关系

目的：D整合素α4β1(VLA-4)主其配体VCAM－1（vascular cell adhesion molecular-1)和FN（fibronectin)与肝肿瘤周边肥大细胞（mast cell,MC)募集的关系。方法：根据肝肿瘤周边肥大细胞数量,将18只雄性Wistar大鼠移植肝肿瘤模型进行分析,8只正常雄性Wistar大鼠作对照,用间接免疫荧光和流式细胞术检测各级一大鼠腹腔肥大细胞整合素VLA－4分子的表达水平,同时用免疫组化研究肿瘤周边肝组织血管内皮细胞和肝窦内皮细胞表面VCAM－1和肿瘤周边FN的表达。结果：不同肝肿瘤大鼠肿瘤周边浸润肥大细胞数量有明显差异。各组大鼠腹腔MC表达整合素VLA－4分子均呈阳性,肿瘤周边肥大细胞浸润较多组,其整合素α4β1表达水平也较高。肿瘤周边血管内皮和窦内皮细胞表达VCAM－1阳性。肿瘤周边沉积大量呈阳性表达的FN与须大细胞紧密相联。结论：整合素α4β1及其配体VCAM－1和FN在肝肿瘤周边肥大细胞集要作用;整合素α4β1的表达水平与肿瘤周边MC数呈平行关系。     

载脂蛋白（a）对血管平滑肌细胞增殖及其信号通路的影响

目的： 探讨载脂蛋白（a）［apo（a）］对血管平滑肌细胞增殖的影响及其机制。方法：原代培养血管平滑肌细胞并给予传代以进行实验，并采用α-actin抗体进行免疫组化细胞鉴定；分别给予apo（a）、apo（a）+整合素αⅤβ3单克隆抗体LM609及单独LM609干预细胞，采用细胞计数和MTT实验观察细胞增殖情况，采用Western blotting分析相关信号蛋白的变化。结果：所用实验细胞经鉴定均为血管平滑肌细胞；apo（a）能促进血管平滑肌细胞增殖，但这一作用能被整合素αⅤβ3单克隆抗体LM609所对抗，单独的LM609干预对细胞生长并无影响；Western blotting显示apo（a）能促进黏附斑激酶（FAK）磷酸化，并使总的转化生长因子β1（TGF-β1）及其磷酸化形式均表达减少，而LM609能对抗apo（a）的这些作用。结论：Apo（a）促进血管平滑肌细胞增殖的作用是通过整合素αⅤβ3介导的， 以致FAK活化，进而TGF-β1表达及磷酸化均减少。     

tenascin-C促进肿瘤转移的分子机制研究进展

tenascin-C(TNC)是一种细胞外基质糖蛋白,在胚胎组织和肿瘤组织中高表达,而在成熟组织中不表达或低表达。TNC在肿瘤转移过程中涉及多种复杂的信号通路,通过与syndecan-4、整合素α5β1、基质金属蛋白酶(MMPs)、血管内皮生长因子(VEGF)等相互作用,对FAK和RhoA信号通路、Wnt信号通路及Notch信号通路进行调节,从而影响上皮间质转化、肿瘤细胞黏附、侵袭、增殖和血管生成,增强多种肿瘤侵袭和转移的能力。随着研究的深入,TNC在某些恶性肿瘤中可以用于评价患者预后或者作为转移的标志。     

RGDyK环肽对肝星状细胞增殖和迁移的影响

目的：探讨RGDyK环肽对活化肝星状细胞中整合素αvβ3表达和细胞迁移的影响。方法分离SD大鼠肝星状细胞,体外传代培养诱导细胞活化,用人工合成的整合素αvβ3特异配基RGDyK环肽处理肝星状细胞,MTT法计算其生长抑制率,通过免疫化学和荧光染色,RT-PCR和Western Blot分析,与对照组比较肝星状细胞中整合素αvβ3和α-SMA的表达变化,划痕实验观察RGDyK环肽对活化肝星状细胞迁移的影响。结果与对照组相比,RGDyK环肽抑制肝星状细胞增殖并有明显的量效关系, RGDyK环肽下调肝星状细胞中整合素αvβ3和α-SMA的在mRNA和蛋白质水平的表达（P<0.05）,降低肝星状细胞的迁移率（P<0.01）。结论 RGDyK环肽抑制肝星状细胞增殖、收缩和迁移等生物行为与下调活化肝星状细胞整合素αvβ3表达有关。