孕妇血清与胎儿脐血HBV-DNA定量检测及其相关性研究

为了探讨母婴之间 HBV- DNA含量的关系 ,应用 Amplisensor荧光定量 PCR方法检测 79例 HBV感染孕妇血清及胎儿脐血 HBV- DNA含量。结果 :2 6例 HBe Ag (+)和 5 3例 HBe Ag (- )孕妇其静脉血、脐血 HBV- DNA阳性率分别为 10 0 .0 %、 85 .0 %和 6 2 .3%、 35 .8% ,其含量 (对数值 )分别为 7.780± 0 .82 3、 5 .12 2± 0 .883和 5 .46 0±1.375、 3.96 1± 0 .912 (P均 <0 .0 0 5 ) ,其中 42例脐血 HBV- DNA阳性者其母血也呈阳性 ;孕妇血清与胎儿脐血 HBV-DNA的含量呈线形相关 (r=0 .2 70 ,P<0 .0 5 )。提示 :孕妇血清 HBV- DNA含量的高低反映 HBV垂直感染的强弱。     

乙肝病毒感染与原发性肝癌关系的血清学调查

目的　了解乙肝病毒感染与原发性肝癌的关系。　方法　对 2 11例原发性肝癌病人进行乙型肝炎病毒感染血清标志物 ( HBV- M)检测 ,并与同期 2 2 0例非肝癌消化道肿瘤病人检测的 HBV- M进行对比分析。　结果　肝癌组HBV- M阳性 186例 ( 88.15 % ) ,非肝癌组 HBV- M阳性 87例 ( 3 9.5 5 % ) ,有显著差异 ( P<0 .0 0 1)。肝癌组乙肝病毒感染以“小三阳”为主 ,“小三阳”指标为阳性者占 12 1例 ( 60 .75 % ) ,明显高于非肝癌组“小三阳”阳性 3 1例 ( 3 5 .63 % )。　结论　乙肝病毒感染在原发性肝癌病因学中起着十分重要的作用     

HBV感染患者血清标志物模式与HBVDNA含量的关系

目的探讨HBV感染患者常见血清标志物(HBVM)模式与HBVDNA含量的关系。方法对254例患者血清同时用酶联免疫吸附试验(ELISA)、荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)检测血清标本中HBVM及HBVDNA含量。结果模式Ⅰ112例,HBVDNA阳性率94.6%(106/112),含量为8.21±1.36;模式Ⅱ16例HBVDNA阳性率100%(16/16),含量8.45±0.44;模式Ⅲ57例HBVDNA阳性率63.16%(36/57),含量为4.4±1.05;模式Ⅳ41例,HBVDNA阳性率53.6%(22/41),含量为4.58±0.77;模式Ⅴ11例,HBVDNA阳性率36.3%(4/11),含量为4.49±1.38;模式Ⅵ8例,HBVDNA阳性率12.5%(1/8),含量为4.61拷贝/ml;模式Ⅶ3例和Ⅷ5例未检出HBVDNA。结论ELISA方法检测的是人体对HBV感染的免疫反应状态,不能提示体内病毒的多少,而FQ-PCR检测血清中HBVDNA含量可以真实、准确的反映HBV感染和复制情况,对乙型肝炎的早期诊断、治疗方案的制定,尤其对抗病毒药物治疗的疗效观察具有重要的临床意义。     

乙型肝炎病毒感染者血清HBV-LP检测意义及其与PreS1抗原、HBV DNA之间关系的研究

目的初步探讨HBV感染者血清中的乙肝大蛋白(HBV-LP)检测的临床意义,并对其与Pre S1抗原、HBV DNA之间的关系进行分析。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)方法检测192例HBV感染者血清中的HBV-LP,Pre S1抗原及HBV分子标志物(HBV M),并用荧光定量PCR方法检测HBV DNA。结果 192例HBV感染者血清HBVLP、Pre S1抗原、HBV DNA及HBe Ag阳性率分别为67.18%、54.17%、52.60%和9.38%,HBV-LP阳性率高于Pre S1抗原阳性率(χ~2=6.82,P0.05)、HBV DNA检测阳性率(χ~2=8.50,P0.05)及HBe Ag阳性率(χ~2=135.80,P0.05);HBVLP含量(A值)与HBV DNA拷贝数的对数值呈正相关关系(r=0.798,P0.05)。结论血清中HBV-LP的含量与HBV DNA的拷贝数相关性较好,HBV-LP能准确的反映乙肝病毒复制情况,是HBe Ag、Pre S1抗原的重要补充。     

血清HBV-DNA荧光定量PCR检测与乙肝病毒标志物模式的相关性

目的 探讨HBV-DNA荧光定量PCR检测与乙肝病毒标志物模式之间的相关性.方法 将265例血清标本同时进行乙肝病毒标志物和HBV DNA的荧光定量PCR检测,按照不同的乙肝病毒标志模式情况分组后,进行HBV DNA与乙肝病毒标志物的分析研究.结果 乙肝病毒标志物HBsAg、HBeAg、HBcAb阳性组HBV-DNA阳性率98.3%,HBsAg、HBeAb、HBcAb阳性组阳性率77.8%,HBsAg、HBcAb阳性组阳性率83.3%;HBsAg阳性组阳性率60%;:HbeAb、HBcAb阳性组阳性率42.1%;HBsAb阳性组阳性率38.1%;全阴性组阳性率3.1%.结论 HBV DNA荧光定量PCR法检测在各种模式的HBV标志阳性血清甚至全阴性的血清中均可检出,但检出率相差甚大(3.1%～98.3%);乙肝病毒标志中HBeAg阳性者其HBV-DNA阳性率较高;HBsAg及其抗体阳性者也可检出HBV DNA,甚至乙肝模式全阴性者仍可检出HBV DNA.说明仅仅依靠乙肝病毒标志进行早期诊断以及判断患者是否具有传染性是不够的.因此同时检测乙肝标志物和HBV DNA有助于乙肝的早期诊断、疗效观察和预后判断.     

原发性肝癌患者HBV血清标志物、前S1抗原与HBV-DNA的关系分析

[目的]了解原发性肝癌(PHC)患者中乙肝病毒(HBV)的感染状况,探讨HBV血清标志物(HBVM)、前S1抗原与HBV-DNA之间的关系. [方法]采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测患者血清中FIBVM、前S1抗原和荧光定量PCR法检测HBV-DNA载量. [结果]357例PHC患者中,HBV感染率94.96%(339/357),HBsAg阳性率83.75%(299/357);感染模式以HBsAg、抗HBe和抗HBc 3项阳性为多见,占52.94%(189/357);前S1抗原、HBV-DNA阳性率分别为50.14%(179/357)、70.59%(252/357);以HBsAg、HBeAg和抗HBc 3项阳性模式中前S1抗原、HBV-DNA阳性率最高,分别为73.3%、93.3%.HBV-DNA的阳性率高于前S1抗原(X2=31.19,P<0.001),随着血清HBV-DNA载量增加,前S1抗原阳性率增加. [结论]HBV感染与原发性肝癌关系密切,以HBsAg、抗HBe和抗HBc 3项阳性多见:HBV-DNA阳性率高于前S1抗原,检测肝癌患者血清中前S1抗原、HBV-DNA可更全面反映患者体内HBV的活动性复制程度,弥补HBV血清标志物在肝癌检测中的不足.     

HBeAg阴性乙肝患者血清前S1抗原检测分析

目的探讨HBeAg阴性乙肝患者血清前S1抗原检测的意义及应用价值。方法用ELISA方法对314例慢性乙型肝炎患者血清进行前S1抗原的测定并对其HBV-DNA含量进行分析研究。分析170例HBeAg阴性乙肝患者和144例HBeAg阳性的乙肝患者血清中HBV-DNA的含量。结果在170例血清HBeAg阴性患者中,60%为PreS1阳性,其阳性率显著低于144例HBeAg阳性患者,PreS1阳性检出率为76%(χ2=9.55,P<0.005)。在212例PreS1阳性标本中,HBV-DNA阳性检出率为94%,其病毒载量(log)为5.78±1.94,HBV-DNA阳性率和HBV-DNA病毒载量均显著高于PreS1阴性患者(102例)HBV-DNA阳性率为82%(χ2=11.45,P<0.005)和病毒载量(log)4.35±2.33,(t=5.36,P=0.000 1)。在HBeAg阴性患者中,90%的PreS1(+)者为HBV-DNA阳性,其病毒载量为(log)4.89±2.00,显著高于PreS1阴性患者的HBV-DNA阳性检出率(75%)(χ2=7.52,P<0.01),和病毒载量(log)37.7±2.46(t=3.13,P=0.002)。结论乙肝病毒前S1抗原的检测能敏感的反映乙肝病毒的复制,当HBeAg阴性时PreS1阳性可预测血清HBV-DNA的状态,PerS1检测具有重要的临床价值。     

肿瘤特异生长因子在临床诊断中的应用

[目的 ]探讨 TSGF与恶性肿瘤的关系。[方法 ]183份标本采用 EL ISA方法 ,并根据癌症的种类进行分组统计 ,计算 x± s(u/ ml)和阳性率 (% )。 [结果 ]恶性肿瘤组 TSGF检测阳性率约 80 % ,与正常组比较差异显著。 [结论 ]TSGF检测对恶性肿瘤有特异性。     

HBV—DNA和乙肝血清标志物的相关性研究

[目的]探讨乙肝血清学标志物（HBV—M）与乙肝病毒DNA间的关系。[方法]对320例血清标本,分别采用酶联免疫吸附试验（ELISA）和荧光定量聚合酶链反应（FQ—PCR）法检测。[结果]乙肝“大三阳”HBV—DNA阳性率为96．9％（95／98）,“小-Z阳”HBV—DNA阳性率为59．9％（91／152,Х^2=42．99,P〈0．01）。HBeAg阳性标本中,HBV—DNA阳性率为96．2％（100／104）;HBeAg阴性标本中,HBV—DNA阳性率为60．2％（130／216,Х^2=44．93,P〈0.01）。[结论]血清HBV—DNA能直接反映HBV的存在状态及感染性标志。在乙肝诊治中,不能仅凭检测乙肝病毒标志物,同时应做HBV-DNA定量测定。     

荧光定量检测HBV DNA与血清五项指标对比分析

目的血清乙肝病毒标志物(HBV-M)与血清HBV DNA含量的相关性。方法采用ELISA法测定HBV抗原、抗体,FQ-PCR测定HBV DNA。结果在1600例血清标本中,FQ-PCR273例阳性,阳性率17．1%；在五项指标组合模式中以HBsAg、HBeAg和HBeAb均阳性者FQ-PCR检出HBV-DNA阳性率最高为98．9%(180/182),HBV DNA平均拷贝数2．48×10~7；其次为257例HBsAg、抗-Hbe、抗HBc均阳性者,FQ-PCR186例阳性,阳性率72．3%,HBV DNA平均拷贝数3．92×10~5。结论两种方法具有很好的相关性,都是诊断乙肝病毒感染的重要方法。同时进行乙型肝炎血清标志物的检测及HBV DNA定量PCR的检测,更有利于临床对HBV感染的诊断,对治疗方案的选择及疗效判断。     

乙肝疫苗免疫规划对乙肝流行影响

目的 了解乙型肝炎(HB)疫苗纳入免疫规划后,江苏省HB的流行病学特征及影响因素.方法 根据《2006年全国人群乙肝等有关疾病血清学调查总体方案》,对3 906人进行现场和血清流行病学调查,并对结果进行描述流行病学分析.结果 全省HBsAg、抗-HBs、抗-HBc阳性率和乙肝病毒(HBV)感染率分别为4.99%,58.70%,25.91%和25.93%.<15岁人群乙肝疫苗(HepB)接种率达96.99%;HBsAg、抗-HBc阳性率及HBV感染率均比其他年龄组低,抗-HBs阳性率则较高,首针及时接种率为70.75%.城市HBsAg阳性率为5.19%,农村为4.80%.家庭中HBsAg阳性者关系中,夫妻占41.67%.结论 HepB纳入免疫规划后,江苏省乙肝感染率大幅下降,<15岁人群更为明显,感染高峰后移;<15岁人群首针及时接种率仍处于较低水平.     

Immunization of woodchucks (Marmota monax) with hepatitis delta virus DNA vaccine

We investigated the DNA immunization approach in order to induce a protective immune response against hepatitis delta virus (HDV) superinfection of chronically woodchuck hepatitis virus (WHV) infected woodchucks. The animals were immunized with an expression vector encoding HDAg by gene gun. T cell and humoral immune responses induced by this protocol were determined and compared with those induced by HDAg immunization using a CpG oligonucleotide as an adjuvant. After immunization the woodchucks were challenged with 10⁶ genome equivalents of HDV. The protein immunization with HDAg induced good humoral and T helper cell responses in the woodchucks, but did not protect them from HDV superinfection. The DNA immunized woodchucks were also not protected from HDV superinfection, however, the course of infection was modified: HDV viremia occurred later, the typical fluctuation of the HDV RNA titer with several peaks was absent, and antibodies to HDV were not detectable.     

Immunization of woodchucks (Marmota monax) with hepatitis delta virus DNA vaccine

We investigated the DNA immunization approach in order to induce a protective immune response against hepatitis delta virus (HDV) superinfection of chronically woodchuck hepatitis virus (WHV) infected woodchucks. The animals were immunized with an expression vector encoding HDAg by gene gun. T cell and humoral immune responses induced by this protocol were determined and compared with those induced by HDAg immunization using a CpG oligonucleotide as an adjuvant. After immunization the woodchucks were challenged with 10⁶ genome equivalents of HDV. The protein immunization with HDAg induced good humoral and T helper cell responses in the woodchucks, but did not protect them from HDV superinfection. The DNA immunized woodchucks were also not protected from HDV superinfection, however, the course of infection was modified: HDV viremia occurred later, the typical fluctuation of the HDV RNA titer with several peaks was absent, and antibodies to HDV were not detectable.     

乙肝疫苗联合免疫球蛋白阻断母婴传播效果

目的 观察比较乙肝疫苗(Hep-B)联合乙肝免疫球蛋白(HBIG)阻断乙肝母婴传播的效果,为制订阻断乙肝母婴传播策略提供依据.方法 选择上海市宝山区6家综合性医院妇产科产前检查中检出的HBsAg阳性和HBsAg/HBeAg双阳性的本区户籍产妇85人,分为3组.其中观察Ⅰ组(22人)新生儿出生24 h内和15 d各接种1针HBIG;观察Ⅱ组孕产妇(37人)于28,32,36孕周各接种1针HBIG,婴儿出生24 h内和15 d各接种1针HBIG;对照组(26人)不接种HBIG.HBIG均为200 U/针.3个组的新生儿均按正常免疫程序于0,1,6个月时各接种1针10μg重组(酵母)Hep-B疫苗.1年后采集幼儿静脉血,采用ELISA法检测HBsAg和抗-HBs.结果 观察Ⅰ组、Ⅱ组和对照组婴儿出生后12个月时,HBsAg阳性率分别为17.24%,2.70%和23.04%,抗-HBs阳性率分别为86.36%,97.30%和76.92%;观察Ⅱ组母婴传播阻断率和免疫保护率均高于观察Ⅰ组和对照组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 HBIG与重组(酵母)Hep-B疫苗联合应用免疫效果好,安全可行,且观察Ⅱ组的效果优于观察Ⅰ组.     

血清骨桥蛋白和肝癌的关系可能归因于乙型肝炎病毒慢性感染

目的研究乙型肝炎病毒(HBV)感染是否增加血清骨桥蛋白(OPN)浓度及OPN与肝癌之间的关系。方法按病例对照研究原理,研究对象分为6个组:HBsAg无症状携带者组(ASC组)、HBsAg阳性慢性肝病组、HBsAg阳性肝癌组、HBsAg阴性其他肿瘤组、HBsAg阴性肝癌和慢性肝脏病组、健康对照组。用化学发光微粒子免疫检测法检测血清HBsAg浓度,用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清OPN浓度,用Mann-Whitney U检验和线性回归分析法进行统计分析。结果6组研究对象共241名。HBsAg阳性肝癌组与HBsAg阴性其他肿瘤组、健康对照组血清OPN浓度差异均有统计学意义(P值均=0.0001)。在HBsAg阳性肝癌组与ASC组、HBsAg阳性慢性肝病组间,以及在HBsAg阴性肝癌和慢性肝脏病组与健康对照组间,血清OPN浓度差异均无统计学意义(P值分别为0.360、0.588和0.075)。多元线性回归分析结果显示,血清HBsAg浓度是与OPN浓度有关的唯一变量(P=0.0001)。结论血清OPN浓度可能与肝癌本身无关,而与HBV慢性感染有关,在HBV感染者中,可以用血清HBsAg浓度预测血清OPN浓度。     

套式聚合酶链反应法检测外周血单个核细胞中HBcVccDNA

目的:建立套式聚合酶链反应法(nPCR)检测慢性乙型肝炎患者外周血单个核细胞(PBMC)中乙型肝炎病毒共价闭合环状DNA(HBV cccDNA)。方法:根据HBV基因组DNA正负链上下游缺口序列,设计两套相对保守的引物,建立HBV cccDNA套式PCR,并用该法检测200例慢性乙型肝炎患者PBMC中HBV cccDNA。结果:该法检测200例慢性乙型肝炎患者,HBV cccDNA阳性率为60%。结论:套式PCR法简便、灵敏,可用于测定PBMC中HBV cccDNA。     

乙型肝炎患者重叠感染丙型肝炎、庚型肝炎病毒的研究

[目的 ]了解乙型肝炎患者重叠感染丙型肝炎病毒 (HCV)、庚型肝炎病毒 (HGV)的情况。 [方法 ]应用 EL ISA法分别对 86 8例乙肝患者、5 17例乙肝病毒携带者检测血清抗 - HCV和抗 - HGV,应用逆转录聚合酶链反应法分别对HCV、HGV感染者进行血清 HCV- RNA、HGV- RNA检测 ,并与乙肝病毒携带者比较。 [结果 ]乙肝患者与乙肝病毒携带者 HCV感染率分别为 14.5 %、2 .3% ,HGV感染率分别为 15 .6 %、3.9% ,HCV和 HGV的重叠感染率分别为 2 .3%、0 .2 % ,两组间 HCV、HGV合并感染率均有非常显著性差异 (P<0 .0 1)。乙肝患者中 HCV感染者 HCV- RNA阳性率14.3% ,HGV感染者 HGV- RNA阳性率 11.9%。 [结论 ]乙型肝炎、丙型肝炎、庚型肝炎可以重叠感染。急慢性乙型肝炎患者的 HCV、HGV重叠感染率不同。     

同时检测SEN病毒D和H聚合酶链反应法的建立

目的 建立同时检测SEN病毒D和H（SENV－D和H）巢式聚合酶链反应法（nPCR)。方法 第一轮PCR外引物为SENV－D和H开放读码框架（ORF）1区的共同序列，第二轮PCR内引物分别为SENV－D和H ORF1区型特异性引物。应用双脱氧链末端终止法对SENV－D和H的PCR产物进行克隆测序。结果 应用同时检测SENV－D和H的nPCR法最终检出SENV-D和H的表稀释度为10^3。序列分析表明，用本法检出的SENV－D（DTd株）和SENV－H（DTh株）与GenBank收录的SENV－D和H株核苷酸序列同源性均为92％。检测173例慢性乙型肝炎（轻、中度）患者，SENV－D和H的总感染率为58.4%。结论 本法可用于SENV－D和H感染的临床诊断和流行病学调查。     

成都市区健康体检人群乙型肝炎病毒血清学标志检测结果分析

目的分析成都市区健康体检人群中乙型肝炎病毒（HBV）血清学标志（HBVm）阳性结果、分布情况及可能的影响因素，增强人们对HBV感染的认知能力，合理干预，提高人们对乙型肝炎的自觉免疫意识。方法对2007—07—01／2008—06—30在四川省人民医院健康体检中心体检的108685名成都市区人群进行乙肝病毒表面抗原（HB-sAg）、乙肝病毒表面抗体（HBsAb）、乙肝病毒e抗原（HBeAg）、乙肝病毒e抗体（HBeAb）、乙肝病毒核心抗体（HB—cAb）及肝功能进行检测，同时调查HBV感染过去史、家族史、乙肝疫苗预防接种史。结果HBVm阴性31063人，占28．58％；HBsAg、HBeAg、HBcAb均阳性者4637人，阳性率4．27％；HBsAg、HBeAb、HBcAb均阳性者5250人，阳性率4．83％；HBsAg、HBcAb均阳性者527人，阳性率0．48％；单纯HBsAb阳性51228人，阳性率47．13％；HB—sAb、HBeAb、HBcAb均阳性者1921人，阳性率1．77％；HBsAb、HBcAb均阳性者13200人，阳性率12．15％；其他（HBeAb、HBcAb阳性、单纯HBeAb、单纯HBcAb阳性）共859人，阳性率0．79％；肝功异常（单项转氨酶和／或两项转氨酶增高）共计896人，异常率为0．82％；乙肝疫苗预防接种33779人；接种率31．08％。结论成都市区乙肝表面抗原携带总人数或阳性率与全国水平接近，而乙肝疫苗接种率较低。加强乙肝保健知识健康教育，强化乙肝疫苗接种是进一步降低乙型肝炎病毒感染率的最有效的手段。     

无锡市乙型肝炎防制和成人免疫策略研究

目的阐述无锡市乙型肝炎发病特点,开展成人乙肝免疫策略研究。方法收集无锡市19年乙型肝炎年发病率和新生儿乙肝疫苗接种率,用横断面整群抽样的方法选择城区二个调查点、部分幼儿园和中小学校学生,开展入户问卷调查,采集空腹血样,用ELISA方法检测乙肝抗-HBs。结果19年乙肝发病率下降趋势明显,新生儿乙肝疫苗接种率保持在98%以上,20岁以上年龄组人群乙肝疫苗接种率经标化后为20.20%,2007年全人群标化后的乙肝抗-HBs阳性率为46.00%,其中15岁年龄组乙肝抗-HBs阳性率为30.77%,乙肝发病率以20～40岁年龄组为高峰。结论无锡市乙肝防制工作成效显著,但成人发病率仍较高,成人乙肝疫苗接种率低,全人群乙肝免疫水平低,对15岁以下儿童补种乙肝疫苗和成人开展乙肝免疫策略研究意义重大。