外燥对小鼠肺组织水通道蛋白5表达的影响及意义

目的观察外燥对小鼠肺组织水通道蛋白5(AQP5)表达的影响。方法40只SPF级昆明小鼠随机分为常温常湿组(A组)、常温常燥组(B组)、温燥组(C组)、凉燥组(D组),每组10只。图像分析各组第6天、12天、18天小鼠肺组织AQP5免疫组化染色结果。结果AQP5蛋白表达阳性部位多在肺泡膜缘;温燥组第12、第18天气道液黏多糖(RS)持续下降时,AQP5蛋白表达阳性率呈平行下降,凉燥组也呈同样趋势,尤以第12天为甚(P0.01),伴肺泡炎性病变并随时间延长而加重。结论外燥致肺部炎性改变同时,与肺泡液体的细胞内外转运相关的AQP5蛋白表达下降,提示与外燥伤肺、耗津的病机相关。     

水通道蛋白1在小鼠脂肪栓塞综合征肺损伤中的作用

目的建立脂肪栓塞综合征(FES)肺损伤模型,探讨水通道蛋白1(AQP1)在FES肺损伤发生、发展过程中的作用。方法 196只健康成年雄性C57BL/6J小鼠按照随机数字表法分为对照组、FES 4 h组、6 h组、12 h组、24 h组和48 h组,每组16只。FES各组小鼠尾静脉注射同种异体小鼠肾周脂肪,对照组给予相同剂量无菌生理盐水。在相应的时间点取小鼠肺组织进行苏木素伊红染色,测量肺湿/干比值(W/D)变化,采用蛋白质免疫印迹法及免疫组织化学法测定AQP1的表达。224只C57BL/6J小鼠按照随机数字表法分为对照组、FES 24 h组和AQP1抑制剂组,每组8只,观察抑制AQP1对FES肺损伤病理过程的影响。结果 1FES 4 h组、6 h组、12 h组、24 h组、48 h组W/D值分别为5.19±0.34、5.53±0.24、5.81±0.54、5.77±0.47、5.35±0.15,均高于对照组的4.30±0.47,差异有统计学意义(P<0.05);对照组和FES组4、6、12、24、48 h的AQP1蛋白表达分别为0.85±0.25、1.00±0.30、0.98+0.39、0.66±0.20、2.02±0.65、1.26±0.35,差异有统计学意义(P<0.05),其中FES 24 h组显著高于对照组(P<0.05)。2FES 24 h组、抑制剂组、对照组肺组织W/D值分别为5.70±0.35、4.71±0.13、4.31±0.37,差异有统计学意义(P<0.05),其中抑制剂组显著低于FES 24 h组(P<0.05),但仍高于对照组(P<0.05)。结论 AQP1可能在FES肺损伤的发生过程中起重要作用,抑制AQP1有助于缓解FES肺损伤导致的水肿。     

慢性哮喘小鼠EGFR的表达及地塞米松对其的影响

目的:探讨表皮生长因子受体(EGFR)在慢性哮喘气道重建中的作用. 方法:建立小鼠慢性哮喘模型,致敏前1 h气道内滴入地塞米松2 mg/kg,最后一次激发24 h后处死动物,常规病理切片观察小鼠肺内炎症情况、气管壁厚度及气道平滑肌厚度,ELISA法测定肺泡灌洗液中TGF-α的浓度,RT-PCR观察小鼠肺部EGFR mRNA的表达,免疫组化及Western Blot观察EGFR蛋白的表达. 结果:慢性哮喘组小鼠气道支气管及血管周围大量炎症细胞聚集、气管壁及气道平滑肌增厚、肺泡灌洗液中TGF-α浓度增高,肺组织EGFR mRNA及EGFR蛋白的表达增高(P<0.01). 哮喘小鼠致敏前使用地塞米松可减轻气道炎症,减少气管壁及气道平滑肌的增厚,肺泡灌洗液中TGF-α浓度、肺组织磷酸化EGFR蛋白的表达较慢性哮喘组均有所下降(P<0.01). 结论:慢性哮喘小鼠出现气道重建,早期使用地塞米松可以预防气道重建,降低BALF中TGF-α的浓度、抑制肺组织EGFR的表达和活化.     

急性肾损伤小鼠肺组织损伤特点及水孔蛋白表达研究

目的研究急性肾损伤小鼠肺组织损伤特点及水孔蛋白(AQP)表达变化。方法 75只雄性C57BL/6小鼠随机分为假手术组(n=25)和急性肾损伤组(n=50),后者分别经缺血再灌注(I/R组,n=25)和双侧肾切除(BNx组,n=25)建立急性肾损伤模型。于造模后即刻(0 h)和2、4、6、24 h时点,分批处死动物留取肺脏组织。HE染色光学显微镜观察肺组织病理学改变,进行中性粒细胞浸润计数;计算肺湿质量与干质量比值(W/D);采用实时荧光定量聚合酶链反应(Real-Time PCR)技术和免疫组织化学方法检测肺组织AQP-1、AQP-5 mRNA和蛋白表达。结果 I/R组和BNx组小鼠分别从造模后2 h和4 h出现肺组织炎症细胞浸润、肺泡内出血和肺间质水肿;BNx组造模后4、6、24 h时点和I/R组造模后2、4、6、24 h时点小鼠肺脏组织中性粒细胞浸润计数均显著高于假手术组(P<0.05)。BNx组和I/R组小鼠造模后4、6、24 h时点的W/D均显著高于假手术组(P<0.05)。BNx组和I/R组小鼠造模后各时点肺组织AQP-1 mRNA和蛋白表达与假手术组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。BNx组...     

哮喘小鼠肺组织中水通道蛋白5和黏蛋白5AC的表达变化及其相关性研究

目的探讨支气管哮喘(以下简称哮喘)小鼠肺组织水通道蛋白5(AQP5)和黏蛋白MUC5AC基因和蛋白的表达变化及其两者的相关性。方法制作小鼠哮喘模型,测定支气管肺泡灌洗液细胞分类及肺组织湿干重比值,应用Real-time PCR法测定哮喘组(OVA组)和对照组肺组织中AQP5和MUC5AC mRNA的表达,应用免疫组化法测定AQP5在肺组织中的分布,免疫印记法、ELISA法测定AQP5和MUC5AC蛋白在肺组织中的表达。结果小鼠哮喘组肺组织中AQP5表达较对照组明显减低(P<0.01),而MUC5AC表达显著升高(P<0.01),两者呈负相关(r=0.901,P<0.01)。结论哮喘时肺组织中AQP5表达的减低可能与气道MUC5AC表达的升高有关,从而促进了气道黏液过度分泌。     

自噬在大蒜素减轻脓毒症小鼠急性肺损伤中的作用

目的：探讨自噬在大蒜素减轻脓毒症小鼠急性肺损伤中的作用及机制。方法：将152只20~25 g的8周龄雄 性Balb/c小鼠随机分为4组：假手术组(S组)、脓毒症组(CLP组)、大蒜素治疗组(Allicin组)及自噬抑制组(3-MA组)。脓 毒症模型采用盲肠结扎穿孔法;Allicin组于术后6和12 h用大蒜素(30 mg/kg,腹膜内注射)干预;3-MA组在大蒜素干预 之后0.5 h加用3-MA(15 mg/kg,腹膜内注射);S组和CLP组于同时间点给予等量生理盐水。每组随机取20只小鼠,观 察术后7 d生存率。每组各取12只小鼠,于术后24 h时收集肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fl uid,BALF)(n=6)及肺组织 (n=6),采用ELISA法测定BALF中TNF-α和IL-6水平;HE染色观察肺部病理变化,免疫组织化学法测定肺组织自噬蛋 白微管相关蛋白1轻链3B(microtubule-associated protein 1 light chain 3,LC3B)和Beclin-1的表达;采用比色法检测肺组织 MDA含量及SOD活性。结果：与S组比较,CLP组7 d生存率降低(P<0.05),BALF中TNF-α及IL-6水平升高(P<0.05),肺 损伤评分增加(P<0.05),肺组织MDA含量增加、SOD活性下降(P<0.05),肺组织LC3B及Beclin-1表达升高(P<0.05);与 CLP组比较,Allicin组7 d生存率升高(P<0.05),BALF中TNF-α和IL-6水平降低(P<0.05),肺损伤评分下降(P<0.05),肺组 织MDA含量下降,SOD活性增加(P<0.05),肺组织LC3B和Beclin-1表达升高(P<0.05);与Allicin组比较,3-MA组小鼠7 d 生存率降低(P<0.05),BALF中TNF-α和IL-6水平升高(P<0.05),肺损伤评分增加(P<0.05),肺组织MDA含量增加、SOD 活性下降(P<0.05),肺组织LC3B和Beclin-1表达降低(P<0.05)。结论：大蒜素可能通过增强自噬水平减轻脓毒症小鼠急 性肺损伤。     

宣肺止咳合剂对LPS诱导的急性肺损伤大鼠AQP1蛋白表达及炎症反应的调节作用

目的 探讨宣肺止咳合剂对LPS诱导的急性肺损伤大鼠AQP1蛋白表达及炎症反应的调节机制。方法 取健康SPF级雄性Wistar大鼠60只,随机分为六组：正常对照组(ig生理盐水,iv生理盐水)、LPS模型组(ig生理盐水,iv LPS 5mg/kg)、宣肺止咳合剂组(7.5、15、30mg/kg,iv LPS 5mg/kg)、阳性对照组(ig地塞米松DEX 0.135mg/kg,iv LPS 5mg/kg),每组10只。HE染色观察肺组织病理改变;免疫组化、Western blot 、qPCR检测肺组织中AQP1的表达;ELISA检测血清中TNF-α、IL-1、IL-4、IL-6、L-10水平。结果 肺组织HE染色结果可见,模型组肺泡间质渗出明显,可见大量炎性细胞浸润;宣肺止咳合剂中、高剂量组及阳性药物组大鼠肺组织肺泡结构可见,损伤明显减轻。免疫组化和Western blot结果显示,与正常组相比,模型组AQP1表达显著降低（P<0.01）,给予宣肺止咳合剂和地塞米松治疗后,AQP1表达较模型组升高,宣肺止咳合剂中、高剂量组和阳性对照组差异有统计学意义（P<0.05或P<0.01）。qPCR结果显示,模型组AQP1mRNA水平较正常组显著下降（P<0.01）,宣肺止咳合剂中、高剂量组和阳性对照组大鼠肺组织中AQP1mRNA水平较模型组有显著升高趋势（P<0.01或P<0.05）。ELISA结果显示,中、高剂量宣肺止咳合剂和阳性药能抑制LPS引起的TNF-α、IL-1、IL-6水平升高,增加IL-4、IL10水平（P＜0.05或P＜0.01）。结论 宣肺止咳合剂对内毒素性ALI的保护作用可能是通过调控AQP1的表达,抑制（TNF-α、IL-1、IL-6等）促炎因子,促进（IL-10、IL-4等）抗炎因子的释放,调节促/抗炎平衡来实现的。     

急性肺损伤大鼠呼吸膜AQP1和AQP5的表达

目的确定水通道蛋白AQP1及AQP5是否在大鼠肺泡毛细血管膜(呼吸膜)表达,进而研究急性肺损伤(ALI)大鼠AQP1和AQP5的表达调节及激素干预的作用。方法采用亲和的抗人AQP1和AQP5抗体,应用免疫组化及免疫电镜的方法研究AQP1及AQP5在呼吸膜的分布。选用肺泡内灌注脂多糖(LPS)制作大鼠ALI动物模型,研究ALI时呼吸膜AQP1及AQP5的变化。结果免疫染色显示AQP1主要表达于正常肺组织的微血管内皮,而AQP5主要表达于肺泡I型上皮细胞。免疫组化分析进一步表明LPS灌注后4h~48h AQP1及AQP5在呼吸膜的表达均下降;AQP1蛋白于LPS灌注后24h及激素干预后有部分恢复(P0.05),而AQP5无这种恢复现象。结论 ALI时AQP1及AQP5在呼吸膜的表达减少,提示ALI时AQP1和AQP5的下降表达可能与其液体转运的异常有关。     

急性肾损伤小鼠肺组织损伤特点及水孔蛋白表达研究

目的 研究急性肾损伤小鼠肺组织损伤特点及水孔蛋白(AQP)表达变化.方法 75只雄性C57BL/6小鼠随机分为假手术组(n=25)和急性肾损伤组(n=50),后者分别经缺血再灌注(I/R组,n=25)和双侧肾切除(BNx组,n=25)建立急性肾损伤模型.于造模后即刻(0 h)和2、4、6、24 h时点,分批处死动物留取肺脏组织.HE染色光学显微镜观察肺组织病理学改变,进行中性粒细胞浸润计数;计算肺湿质量与干质量比值(W/D);采用实时荧光定量聚合酶链反应(Real-Time PCR)技术和免疫组织化学方法 检测肺组织AQP-l、AQP-5 mRNA和蛋白表达.结果 I/R组和BNx组小鼠分别从造模后2 h和4 h出现肺组织炎症细胞浸润、肺泡内出血和肺间质水肿;BNx组造模后4、6、24 h时点和L/R组造模后2、4、6、24 h时点小鼠肺脏组织中性粒细胞浸润计数均显著高于假手术组(P<0.05).BNx组和I/R组小鼠造模后4、6、24 h时点的W/D均显著高于假手术组(P<0.05).BNx组和I/R组小鼠造模后各时点肺组织AQP-1 mRNA和蛋白表达与假手术组比较差异均无统计学意义(P>0.05).BNx组小鼠造模后2、4、6、24 h时点肺组织AQP-5 mRNA和蛋白表达均显著低于假手术组(P<0.05);I/R组小鼠造模后6 h和24 h时点肺组织AQP-5 mRNA和蛋白表达均显著低于假手术组(P<0.05).结论 肺水肿是急性肾损伤后急性肺损伤的典型表现,其发生可能与炎症反应和AQP-5表达的改变有关.     

前列腺素E1对急性肺损伤小鼠水通道蛋白1、5基因表达的影响

目的研究急性肺损伤(ALI)小鼠肺组织中水通道蛋白1(AQP1)、水通道蛋白5(AQP5)基因的表达变化,探讨前列腺素E(PGE1)治疗ALI的机制,为临床治疗ALI提供新的选择靶点和方法。方法 32只昆明小鼠随机分成4组(每组8只),即空白对照组(NS组)、造模组(ALI组)、前列腺素E1治疗组(PGE1组)、地塞米松治疗对照组(Dex组),观察6h后测定肺湿干重比值(W/D),并采用HE染色观察炎症变化,RTPCR检测AQP1mRNA、AQP5 mRNA、TNF-αmRNA、IL-1βmRNA的表达变化。结果 ALI组小鼠的肺部炎症反应显著,以中性粒细胞浸润为主,伴明显的肺泡充血、水肿。前列腺素E及地塞米松治疗后,肺组织炎症、充血明显改善,ALI组的W/D的比值与其他3组比较,差异有统计学意义(P均<0.05);与NS组相比,ALI组AQP1mRNA的表达显著降低(P<0.05),而PGE1组、Dex组的AQP1 mRNA的表达显著高于ALI组(P<0.05)。AQP5 mRNA表达的变化与AQP1mRNA的变化相似。与NS组相比,ALI组TNF-αmRNA的表达显著升高(P<0.05),而PGE1组、Dex组的TNF-αmRNA的表达显著低于ALI组(P<0.05)。IL-1βmRNA表达的变化与TNF-αmRNA的变化相似,肺损伤炎症减轻。结论PGE1可通过上调AQP1、AQP5的表达减轻肺损伤时肺水肿。可能是通过抑制炎症因子TNF-α、IL-1β的表达实现的。     

半夏提取物对小鼠肺水通道蛋白5表达的影响

目的 了解急性肺损伤(ALI)小鼠肺组织中水通道蛋白5(AQP5)的表达变化,探讨半夏提取物(EP)治疗ALI的药理机制,为半夏的临床应用提供理论基础.方法 36只昆明种小鼠随机分成3组,即空白对照组(NS组)、肺损伤造模组(ALI组)和半夏提取物治疗组(EP组),6h后观察测定肺组织湿干重比值(W/D),HE染色光镜下观察肺炎症变化,ELISA法检测小鼠血清TNF-α浓度,RT-PCR检测肺组织匀浆AQP5 mRNA表达情况.结果 ALI组小鼠肺部炎症反应显著,中性粒细胞浸润为主,同时肺泡明显充血水肿.EP组肺组织炎症减轻、充血消退.与NS组和EP组比较,ALI组的W/D值差异有统计学意义(P＜0.05);ALI组肺组织AQP5mRNA的表达,较NS组显著降低,较EP组的表达显著升高(P＜0.05).ALI组血清TNF-α的表达,较NS组显著升高,较EP组的表达显著降低(P＜0.05).结论 半夏提取物可通过上调肺AQP5的表达减轻肺水肿,作用机制可能是通过抑制炎症因子TNF-α的表达实现的.     

CXCR3基因在小鼠急性肺损伤中的作用及与白细胞介素-10的关系

目的:探讨CXCR3在内毒素脂多糖(LPS)所致小鼠急性肺损伤(ALI)发病机制中的作用及与白细胞介素-10(IL-10)的关系。方法:将24只雄性C57BL/6小鼠分为正常组、LPS 2h组及LPS 12h组。HE染色观察肺组织病理改变;流式细胞术检测肺泡灌洗液(BALF)和肺组织CD8+T细胞及CD4+T细胞百分比;酶联免疫吸附试验及实时荧光定量PCR分别检测BALF和肺组织中IL-10和CXCR3的表达。结果:LPS 12h组BALF和肺组织炎症细胞数及CXCR3的表达均较正常组及LPS 2h组增多(P<0.05);IL-10的表达较正常组及LPS 2h组降低(P<0.05),且与CXCR3的表达及CD8+T细胞数呈负相关(P均<0.05)。结论:CXCR3可参与急性肺损伤炎症的发生与发展,且与IL-10的表达呈负相关。重建CXCR3及IL-10的平衡可能会成为治疗ALI的新目标。     

外源性一氧化碳释放分子对脓毒症小鼠肺部炎症反应的抑制作用

目的:研究外源性一氧化碳释放分子(carbon monoxide-releasing molecules-2, CORM-2)干预对脓毒症小鼠肺部炎症反应的抑制作用.方法:18只雄性昆明种小鼠随机分为假手术组、CLP模型组和CORM-2干预组.制作标准盲肠结扎穿孔(cecal ligation and puncture,CLP)模型,用CORM-2进行干预,观察干预前后小鼠肺脏炎症反应的变化情况.分别于CLP术后6 h,12 h,24 h收集血浆、取肺组织,酶联免疫吸附(ELISA)法检测血浆中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)炎症因子的表达;检测肺组织中髓过氧化物酶(MPO)活性,观察中性粒细胞的聚集程度;测定肺组织湿干重比(W/D);苏木精-伊红(HE)染色观察肺组织病理变化;免疫组织化学法观察细胞间黏附分子(ICAM-1)、肺表面活性蛋白-A(SP-A)的表达.结果:与假手术组比较,CLP模型组主要表现为肺组织微血管通透性增加,肺泡壁增厚,间质水肿,白细胞浸润,MPO活性明显增强;炎症因子TNF-α,IL-1β和IL-6的表达水平升高(P<0.05);与CLP模型组比较,CORM-2干预组肺间质水肿程度减轻,白细胞浸润明显减少,以上炎症因子的表达明显受到抑制(P<0.05).结论:CDRM-2可显著抑制脓毒症机体炎症细胞因子和ICAM-1、SP-A的表达,降低MPO活性,减少中性粒细胞的聚集,减轻组织炎症反应,对脓毒症小鼠肺部炎症反应有显著的抑制作用.     

锌指蛋白A20突变体转基因小鼠脓毒症肺损伤的研究

目的了解锌指蛋白A20突变体(A20△)转基因小鼠脓毒症肺损伤的特点,探讨A20△对小鼠脓毒症肺损伤的影响。方法以A20△转基因脓毒症小鼠为动物模型(A20△转基因组),采用流式细胞仪测定肺组织单核巨噬细胞浸润,ELISA测定肺组织A20△、TNF-α、IL-1β水平,结合肺体指数和病理检查对炎症及其损伤程度进行鉴定。实验同时设LPS对照组(LPS组)和生理盐水对照组(对照组)。结果给予LPS后6、12、24h,A20△转基因组小鼠肺体指数较LPS组明显下降(P<0.01,P<0.05);A20△转基因组小鼠肺组织浸润单核/巨噬细胞数较LPS组明显下降(P<0.01)。给予LPS后3、6h,A20△转基因组小鼠肺组织炎症细胞因子TNF-α水平较LPS组明显下降(P<0.01);IL-1β水平也较LPS组明显下降(P<0.05,P<0.01);给予LPS后12、24h,TNF-α和IL-1β水平差异无统计学意义(P>0.05)。病理学观察表明A20△转基因组小鼠肺组织充血程度、肺泡积液及肺间质增厚程度均较LPS组轻。结论A20△转基因小鼠在一定程度上具有抵御LPS诱导性肺损伤的能力,其机制可能是通过抑制单核细胞...     

脂多糖对大鼠肺损伤及肺组织中AQP1和AQP5表达的影响

目的: 探讨大鼠经静脉注射脂多糖(LPS)对急性肺损伤(ALI)及肺组织中水通道蛋白1(AQP1)和水通道蛋白5(AQP5)表达的影响,阐明其作用机制。方法: SPF级2月龄雄性Wistar大鼠48只随机分为对照组和LPS组(n=24),分别经尾静脉注射生理盐水和LPS,每组分别于注射后2、6、12和24 h时间点采集标本,每个时间点6只。HE染色观察肺组织病理学变化;测定大鼠肺湿/干质量(W/D)比、肺渗透指数;ELISA法检测血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)和巨噬细胞炎性蛋白1α(MIP-1α)水平;采用Western blotting、免疫组织化学和Real-Time PCR方法检测大鼠肺组织中AQP1和AQP5蛋白及mRNA表达水平。结果: 与对照组比较,LPS组大鼠血清TNF-α和MIP-1α水平在注射LPS后2、6和12h时间点均明显升高(P<0.05),至24h时逐渐恢复正常。HE染色,注射LPS后2h大鼠肺组织出现水肿和炎性细胞浸润,以12h时间点最明显;LPS组各时间点大鼠肺W/D比、肺渗透指数均较对照组明显升高(P<0.05),12h时间点最明显。与对照组比较,LPS组各时间点大鼠肺组织中AQP1和AQP5 mRNA及蛋白表达水平均明显下降(P<0.01),以12h时间点下降最明显。结论: LPS可导致大鼠ALI和肺组织中AQP1及AQP5表达水平下调,并参与了肺水肿的形成。     

阿托伐他汀对脓毒症大鼠肺组织病理及血清TNF-α、HMGB-1的影响

目的探讨阿托伐他汀对脓毒症大鼠肺组织病理及血清肿瘤坏死因子(TNF-α)、高迁移率族蛋白1(H4MGB-1)表达的影响。方法将75只健康SD大鼠随机分为假手术组、脓毒症组及干预组各25只。每组在术后12、24、36、48、72 h各取大鼠5只处死并取心脏血及肺组织,常规行HE染色观察肺组织病理变化,ELISA法检测血清TNF-α水平,Western Blot法检测HMGB-1表达水平。结果假手术组大鼠肺组织可见少量炎性细胞;脓毒症组肺组织及肺泡内可见水肿,大量炎性细胞浸润及红细胞;干预组大鼠肺组织炎性细胞较脓毒症组明显减轻,肺泡结构尚完整,病理改变明显减轻。脓毒症组、干预组肺组织W/D较假手术组明显升高(P<0.01),其中干预组在36 h后明显降低,且低于脓毒症组(P<0.05)。各时间点干预组和脓毒症组TNF-α及HMGB-1表达水平均较假手术组明显升高(P<0.05),且干预组表达水平较脓毒症组明显降低(P<0.05),36 h后干预组和脓毒症组TNF-α及HMGB-1表达水平有所降低(P<0.05)。结论阿托伐他汀可改善脓毒症大鼠肺组织病理炎性损伤,降低血清TNF-α及HMGB-1表达水平。     

氨溴索对脂多糖-烟雾诱导大鼠水通道蛋白5表达的影响

目的研究脂多糖-香烟烟雾诱导大鼠水通道蛋白5(AQP5)的表达,以及氨溴索(AMB)对其表达的影响。方法21只SD大鼠随机分为AMB干预组、模型组(脂多糖-香烟烟雾诱导组)与对照组。应用ELISA法检测肺组织匀浆、支气管肺泡灌洗液(BALF)和血清中的TNF-α,原位杂交、免疫组化及图像分析法观察并测定各组AQP5的表达水平。结果模型组肺组织匀浆和BALF中的TNF-α显著高于AMB干预组和对照组(P<0.01);模型组支气管上皮AQP5 mRNA与AQP5蛋白的表达水平低于AMB干预组和对照组(P<0.01);BALF中的TNF-α与AQP5 mRNA和AQP5蛋白的表达呈负相关。结论脂多糖-香烟烟雾可降低支气管上皮AQP5的表达;AMB可能通过抑制BALF中的TNF-α释放而上调AQP5的表达。     

氨溴索对脂多糖-烟雾诱导大鼠水通道蛋白5表达的影响

目的 研究脂多糖-香烟烟雾诱导大鼠水通道蛋白5(AQP5)的表达,以及氨溴索(AMB)对其表达的影响.方法 21只SD大鼠随机分为AMB干预组、模型组(脂多糖-香烟烟雾诱导组)与对照组.应用ELISA法检测肺组织匀浆、支气管肺泡灌洗液(BALF)和血清中的TNF-α,原位杂交、免疫组化及图像分析法观察并测定各组AQP5的表达水平.结果 模型组肺组织匀浆和BALF中的TNF-α显著高于AMB干预组和对照组(P<0.01);模型组支气管上皮AQP5 mRNA与AQP5蛋白的表达水平低于AMB干预组和对照组(P<0.01);BALF中的TNF-α与AQP5 mRNA和AQP5蛋白的表达呈负相关.结论 脂多糖-香烟烟雾可降低支气管上皮AQP5的表达;AMB可能通过抑制BALF中的TNF-α释放而上调AQP5的表达.     

受体相互作用蛋白140在脓毒症急性肺损伤大鼠肺泡巨噬细胞中的表达及其作用

目的 探讨受体相互作用蛋白140 (receptor interacting protein140,RIP140)在脓毒症急性肺损伤(acute lung injury,ALI)大鼠肺泡巨噬细胞中的表达及其在炎症反应过程中的作用.方法 36只雄性SD大鼠按随机数字表法分为正常对照组、假手术组和盲肠结扎穿孔术(CLP)致脓毒症肺损伤3、6、12、24 h组.HE染色观察肺组织病理变化;免疫组化检测RIP140在肺组织的表达分布;Western blot及免疫荧光观察肺泡巨噬细胞RIP140的表达变化及定位;RT-qPCR测定肺泡巨噬细胞IL-1β、TNF-α、IL-6 mRNA水平变化.结果 CLP组可见明显肺损伤病理改变且随时间进展逐渐加重.RIP140在脓毒症肺损伤大鼠肺组织中主要表达于炎性渗出细胞,且随时间进展,表达RIP140的细胞数量逐渐增多.CLP术后6h大鼠肺巨噬细胞RIP140蛋白表达水平较正常对照组开始升高(P＜0.05),至12～24 h维持一较高水平,且主要表达于细胞核.CLP术后3h大鼠肺巨噬细胞IL-1β、TNF-α、IL-6 mRNA水平较正常对照组开始升高(P＜0.05),至12～24 h维持一较高水平,下调肺泡巨噬细胞RIP140的表达可明显抑制IL-1 β、TNF-α、IL-6 mRNA的表达.结论 脓毒症肺损伤大鼠肺泡巨噬细胞可通过上调RIP140表达增强肺组织炎症反应,从而参与早期急性肺损伤的炎症应答.     

低剂量辐射对荷S180肉瘤小鼠肿瘤组织HIF-1α和P53表达的影响

目的 探讨低剂量辐射对荷S180肉瘤小鼠肿瘤组织中乏氧诱导因子1α(HIF-1α)、P53表达的影响.方法 昆明种小鼠皮下接种S180肉瘤细胞,待肿瘤形成后(第12天)将小鼠随机分成假照(N)组及低剂量辐射(LDR)组.LDR组小鼠给予一次性75 mGy 60Co射线全身照射,N组小鼠予以无射线假照射.进行小鼠一般状态观察,N组于假照射后6 h处死,LDR组分别于照射后6 h(LDR-6 h组)、12 h(LDR-12 h组)、24 h(LDR-24 h组)、48 h(LDR-48 h组)、72 h(LDR-72 h组)处死.分别取瘤称瘤质量,行免疫组化染色检测肿瘤组织中HIF-1α、P53表达情况.结果 LDR各组瘤质量与N组比较无统计学差异(P>0.05).LDR-24 h组、LDR-48 h组、LDR-72 h组HIF-1α、P53的表达与N组比较均有统计学差异(T=59.000～139.500,P<0.05).结论 荷瘤小鼠低剂量全身照射后72 h内肿瘤质量无明显变化,HIF-1α及P53的表达均降低.一定程度上表明低剂量全身照射一定时间内可降低HIF-1α及P53的表达,从而改善肿瘤乏氧.