健脾柔肝方含药血清诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡及对VEGF表达的影响

目的:探讨健脾柔肝方含药血清诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡及对血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响。方法:以健脾柔肝方低、中、高剂量含药血清培养液作用体外培养SMMC-7721细胞,并设立空白血清及5-FU组。MTT法检测细胞增殖程度,TUNEL法检测细胞凋亡指数,荧光定量PCR检测VEGF-mRNA在细胞中的表达。结果:健脾柔肝方含药血清各组均有一定的抑制人肝癌细胞SMMC-7721增殖的作用,均能不同程度的诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡,抑制VEGF-mRNA的表达;而以化疗药5-FU组作用最强,健脾柔肝汤中、高剂量含药血清组次之,且作用相当。结论:健脾柔肝方含药血清可有效诱导人肝癌细胞SMMC-7721凋亡,其作用机制可能是通过抑制VEGF-mRNA的表达而实现的。     

柔肝消癥饮对肝硬化大鼠肝组织VEGF表达的影响

目的:观察柔肝消癥饮对肝硬化大鼠肝组织血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响,探讨其抗肝硬化的作用机制。方法:采用复合因素造模法建立肝硬化大鼠模型,分为正常对照组、模型对照组、复方鳖甲软肝片组和柔肝消癥饮高、低剂量组。观察柔肝消癥饮对肝硬化大鼠肝组织病理形态学以及肝组织VEGF表达的影响。结果:模型对照组大鼠出现肝小叶损害,纤维组织增生,假小叶形成;肝组织VEGF表达明显增强。各治疗组肝脏病理损害较轻,肝组织VEGF表达明显减少。结论:柔肝消癥饮通过显著抑制肝硬化肝组织VEGF的表达,来发挥抗肝硬化的作用。     

健脾柔肝汤治疗慢性肝炎肝纤维化临床研究

目的：观察健脾柔肝汤治疗慢性肝炎肝纤维化的临床疗效。方法：将60例患者随机均分为治疗组和对照组,两组治疗均采用西药保肝对症疗法。治疗组加用健脾柔肝汤治疗。观察治疗前后肝纤维化血清4项（PCⅢ、HA、Ⅳ—C）及免疫功能变化及不良反应。结果：中医证候疗效比较,治疗组与对照组有效率分别为83．3％、60．0％（P〈0．05）。治疗组对肝纤维化血清4项的治疗后复常率显著优于对照组（P〈0．01）。治疗组治疗后T淋巴细胞亚群比值升高,CD＋8降低（P〈0．05）,对照组治疗前后上述指标比较,差异无显著性（P〉0．05）。结论：健脾柔肝汤能减轻肝组织内部肝纤维化增生,并有促肝细胞再生作用,提高机体免疫功能,从而达到抗纤维化作用。     

柔肝健脾汤治疗原发性骨质疏松症疗效观察

目的观察柔肝健脾汤治疗原发性骨质疏松症的效果。方法将80例原发性骨质疏松症患者随机分为2组:治疗组40例口服柔肝健脾汤,对照组40例给予理疗和罗钙全片、乐力胶囊口服,统计治疗后腰背痛及全身骨痛改善情况及治疗前后骨源性碱性磷酸酶(BAP)及尿脱氧吡啶啉(DPD)变化情况。结果总有效率治疗组为94%,对照组为54%,2组比较有显著性差异(P<0.01)。治疗组BAP及尿DPD于治疗后6个月时均显著降低,对照组治疗前后无明显变化。治疗6个月后治疗组骨密度有一定升高,与治疗前比较有显著性差异,对照组骨密度无明显改变。结论柔肝健脾汤对原发性骨质疏松症具有较好的治疗作用。     

健脾柔肝汤治疗肝硬化80例

近10年来，笔者在临床上采用健脾柔肝汤加减治疗肝硬化患者80例，取得了较好的疗效，现报告如下。1一般资料本组80例中，男性76例，女性4例；年龄最大75岁，最小32岁；病程最长10年，最短半年；全部病例均经西医确诊。病因属急慢性肝炎失治或误治演变而来63例，属药物中毒性肝病5例，属酒精中毒性肝病4例，属其它内科疾病所致6例，属血吸虫性肝病2例。并发症：伴不同程度腹水者51例（其中脾切除后腹水2例），胆红质增高32例，脾脏肿大70例，谷雨转氨酶偏高者50例，并发肾功能不全者3例。全部病例蛋白电泳均接近平值或倒置。2治疗方法健脾柔…     

健脾柔肝汤治疗慢性肝炎肝纤维化30例

目的观察健脾柔汤治疗慢性肝炎肝纤维化的临床疗效。方法将60例患者随机分为治疗组和对照组各30例,两组治疗均采用西药保肝对症疗法,治疗组加用健脾柔肝汤治疗。观察治疗前后肝纤4项(PCⅢ、HA、LN、Ⅳ-C)及免疫功能变化及不良反应。结果中医证候疗效比较,治疗组与对照组总有效率分别为83.3%、60.0%(P<0.05)。治疗组对肝纤维化血清4项的治疗后复常率显著优于对照组(P<0.01)。治疗组治疗后T淋巴细胞亚群比值升高,CD+8降低(P<0.05),对照组治疗前后上述指标比较,差异无显著性(P>0.05)。结论健脾柔肝汤能减轻肝组织内部肝纤维化增生,并有促肝细胞再生作用,提高机体免疫功能,从而达到抗纤维化作用。     

健脾柔肝法在儿科中的应用

健脾柔肝法在儿科中的应用河北省中医学院附属医院（０５００１１）耿少怡小儿脾常不足，肝常有余。二经为病，脾虚为本，脾胃虚而肝木来侮，临床可见惊搐动摇、夜啼不寐、呓怔、惊痫等症，治用健脾和胃，养肝柔肝法，疗效卓著。一、慢惊风赵某某，男，６个月，１９９１年...     

青蒿琥酯对H22小鼠肿瘤VEGF表达的影响

目的：观察青蒿琥酯对H22肝癌小鼠的抑瘤作用及对肿瘤VEGF表达的影响。方法：取H22肝癌细胞接种于小鼠右腋皮下,随机分为模型对照组（Control）、环磷酰胺组（CTX）组及青蒿琥酯15mg/kg组、30mg/kg组、45mg/kg组、60mg/kg组,连续腹腔注射给药两周后,剖瘤称重,计算抑瘤率,免疫组化法检测肿瘤VEGF表达情况。结果：与模型对照组比较,青蒿琥酯各剂量组均不同程度的抑制肿瘤生长（P〈0.01）,其中青蒿琥酯45mg/kg组抑瘤率为65.26%,效果与CTX相当,优于青蒿琥酯其它各剂量组（P〈0.01）;各治疗组能降低肿瘤组织VEGF表达,其中ATS 45mg/kg组与CTX组降低作用明显（P〈0.05）。结论：青蒿琥酯明显抑制肝癌细胞生长,抑瘤机理与抑制肿瘤组织VEGF表达有关。     

生兴化瘀汤对荷H22及荷S180小鼠肿瘤的影响

目的：观察生兴化瘀汤对荷H22（A—S型）及S180（A—S型）小鼠肿瘤的影响。方法：取H22及S180腹水瘤接种于小鼠右腋皮下，随机分为模型对照组、环磷酰胺组（25mg／kg）和生兴化瘀汤26mg／g、13mg／g、6．5mg／g组，连续给药10d后剖瘤称重，计算肿瘤抑制率。     

健脾柔肝清胃汤治疗脂肪肝48例疗效观察

近年来,笔者在临床上采用自拟健脾柔肝清胃汤治疗脂肪肝48例,并与西药治疗的42例作对照观察,疗效满意,现介绍如下。1一般资料90例患者均为本院门诊和住院病人。均根据中华肝病学会脂肪肝和酒精性肝病学组2001年的《非酒精性脂肪肝诊断标准(草案)》确诊。随机分成治疗组和对照组     

十全大补汤对H22肝癌小鼠免疫功能的影响

目的探讨十全大补汤对H22肝癌小鼠免疫功能的影响,为十全大补汤在临床上的应用提供理论依据。方法60只昆明种小鼠(雌雄各半)随机分为6组,分别灌服生理盐水及低、中、高浓度的十全大补汤,腹腔注射5-氟尿嘧啶(5-FU),10d后颈椎脱臼处死。用鸡红细胞法检测H22肝癌小鼠腹腔巨噬细胞(Mφ)吞噬功能;3H-TdR掺入法检测T淋巴细胞转化功能;采用YAC-1为靶细胞的3H-TdR前标法进行NK细胞活性测定。结果十全大补汤中剂量组、高剂量组抑瘤率与模型组比较,差异显著(P<0.01);与正常对照组比较,模型组、5-FU组T淋巴细胞转化功能、NK细胞活性和Mφ吞噬百分率均明显下降,差异显著(P<0.01);十全大补汤高、中剂量组T淋巴细胞转化功能、NK细胞活性与正常对照组比较无显著差异(P>0.05);与模型组比较,各组小鼠的Mφ吞噬率无显著差异(P>0.05)。结论十全大补汤可提高机体的免疫功能,抑制肿瘤的生长。     

华蟾素注射液对H22肝癌小鼠肿瘤组织中Fas、FasL基因表达情况的影响

目的:探讨华蟾素注射液对H22肝癌小鼠肿瘤组织中Fas、FasL基因表达的影响。方法:40只ICR小鼠采用皮下接种H22肝癌细胞株的方法复制小鼠肝癌模型,造模成功后,将小鼠随机分为4组:模型组,顺铂组,华蟾素注射液低、高剂量组。采用荧光定量RT-PCR方法检测华蟾素注射液对H22肝癌小鼠肿瘤组织中Fas、FasL基因表达的影响。结果:华蟾素高剂量组、顺铂(DDP)组的抑瘤率分别为41.35%、53.85%,具有明显的抑制肿瘤生长作用。与模型组比较,华蟾素低剂量组小鼠肿瘤组织中的Fas、FasL mRNA表达无显著性差异(P>0.05)。而华蟾素高剂量组、DDP组能促进肝癌小鼠肿瘤组织中的Fas mRNA表达升高,与模型组比较有显著性差异(P<0.05),同时降低FasL mRNA表达,与模型组比较有显著性差异(P<0.05)。结论:华蟾素注射液抑制肝癌生长的分子机制可能是通过上调Fas基因表达并下调FasL基因表达,从而促进肿瘤细胞发生凋亡,达到抗肿瘤作用。     

补肝强肾壮骨方联合烫熨治疗绝经后骨质疏松症疗效观察

目的:观察补肝强肾壮骨方联合烫熨治疗绝经后骨质疏松症临床疗效.方法:将126例绝经后骨质疏松症患者随机分为对照组和研究组各63例.对照组采用烫熨疗法治疗,研究组在对照组治疗的基础上口服补肝强肾壮骨方治疗,治疗3个月,比较两组患者治疗前后VAS评分、Oswestry功能障碍指数及骨密度.结果:两组患者治疗后VAS评分降低...     

小柴胡汤联合环磷酰胺对腹水瘤细胞株肝癌小鼠肿瘤间质血管生成影响随机平行对照研究

[目的]观察小柴胡汤联合环磷酰胺对腹水瘤细胞株(EAC)肝癌小鼠体重、肿瘤间质血管生成影响。[方法]使用随机平行对照方法,将40只昆明小鼠,采用完全随机化分组方法分为模型组、中药组、西药组、联合组,每组10只。各组皮下注射浓度为2.0×106/ml的EAC肝癌小鼠细胞株0.2ml/只造模,分别给予小柴胡汤、环磷酰胺、小柴胡汤+环磷酰胺灌胃。免疫组化法检测血管内皮生长因子(VEGF)表达、光镜下观察形态学改变,透射电镜观察肿瘤组织血管生成。[结果]中药组、西药组、联合组VEGF阳性表达,瘤组织内的VEGF蛋白表达阳性率和平均染色强度均低于模型组(P<0.01),联合组最明显。光镜下显示:中药组、西药组、联合组肿瘤间质毛细血管数量均减少,联合组最为明显,中药组次之。电镜下显示:中药组、联合组都可以破坏肿瘤组织内新生毛细血管结构,联合组破坏最严重。[结论]小柴胡汤联合环磷酰胺可降低EAC肝癌小鼠瘤组织中VEGF蛋白表达;、抑制肿瘤间质血管生长。     

化痰消瘤方对荷Lewis肺癌小鼠nm-23,VEGF表达的影响

目的:观察化痰消瘤方对Lewis肺癌小鼠瘤质量及肺转移灶的影响,检测瘤组织中血管内皮生长因子(VEGF),nm-23 mRNA表达的情况,探究其作用机制。方法:取雄性C57BL/6J小鼠30只,随机分为空白组,化痰消瘤方组(50 g·kg~(-1)·d~(-1)),环磷酰胺(CTX)组[0.06 g·kg~(-1)·(3,7 d)~(-1)],共3组,每组10只。右腋下注射细胞悬液建立荷Lewis肺癌小鼠模型,造模后观察21 d,处死,剥离瘤组织,计算抑瘤率,摘取肺组织,固定后显微镜下观察肺转移灶个数,计算抗肺转移率,通过实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测瘤组织中nm-23,VEGF mRNA表达情况,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测瘤组织中nm-23,VEGF蛋白的表达情况。结果:与空白组比较,化痰消瘤方组及环磷酰胺组瘤质量、肺转移灶个数均显著降低(P0.01)。与空白组比较,化痰消瘤方及环磷酰胺能显著下调VEGF蛋白和VEGF mRNA的表达水平(P0.01),能显著上调nm-23蛋白和mRNA的表达水平(P0.01)。结论:化痰消瘤方具有抑制Lewis肺癌瘤体生长及转移的作用,其作用机制可能是通过降低VEGF的表达水平,减弱了肿瘤新生血管的生成,同时上调nm23 mRNA表达水平,抑制肿瘤生成与转移来实现的。     

癌痛消胶囊调节小鼠荷H22移植性肝癌细胞VEGF表达的实验研究

目的 :通过观察癌痛消胶囊对小鼠荷H22 移植性肝癌细胞血管内皮细胞生长因子 (vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)表达的调节作用 ,探讨该药抑制肿瘤的作用是否与抑制肿瘤血管生成有关。方法 :于昆明种雄性小鼠前肢右腋皮下接种0 2mlH22 肿瘤细胞悬液(浓度为1×107/ml)进行造模。利用造模动物观察瘤块重量 ,计算肿瘤生长抑制率 ,用免疫组化法检测瘤细胞中VEGF的表达程度。结果 :与阴性对照组相比 ,癌痛消胶囊组有明显的抑瘤作用(P<0 05) ,抑瘤率为36 34 % ;病理检测显示 ,造模各组VEGF阳性表达率为100% ,但程度不同 ,癌痛消胶囊组可使肿瘤组织VEGF的表达明显下调 ,与阴性对照组比较 ,差异有显著性意义(P<0 01)。结论 :癌痛消胶囊对小鼠荷H22 移植性肝癌细胞的生长有抑制作用 ,能减少血管生成调控基因VEGF的表达。     

四君子汤抑制移植性原发性肝癌小鼠肿瘤生长的实验研究

目的 观察四君子汤对移植性原发性肝癌小鼠肿瘤生长的影响.方法 30只移植性原发性肝癌小鼠随机分为模型组、5 - FU组及四君子汤组(简称四君组),每组10只.模型组和四君组小鼠分别给予蒸馏水和四君子汤灌胃,每天1次,连续给药10 d;5 -FU组隔天给予5- FU腹腔注射.观察各组小鼠的体质量、瘤重、脾重、肿瘤细胞凋亡、细胞周期、表观扩散系数( ADC)及血清血管内皮生长因子(VEGF).结果 小鼠体质量和去瘤体质量比较,四君组显著高于其余两组(P＜0.01).比较瘤重和肿瘤指数,四君组显著低于模型组(P＜0.01).抑瘤率比较,5 - FU组(54.67％)＞四君组(17.81％).脾脏重量及脾脏指数比较,四君组显著高于模型组和5 - FU组(P＜0.01).细胞凋亡比较,四君组显著高于模型组(P＜0.01).比较S期细胞,5 - FU组显著低于其余两组(P＜0.01).G0 - G1期比较,四君组显著高于模型组(P＜0.05),低于5 - FU组(P＜0.05).G2 -M期各组比较差异无统计学意义(P＞0.05).肿瘤ADC及血清VEGF比较,四君组低于模型组(P＜0.01),高于5 - FU组(P＜0.01).小鼠肿瘤ADC值与血清VEGF水平呈正相关(r=0.873,P＜0.01),与细胞凋亡呈负相关(r=-0.284,P＜0.05).结论 四君子汤对小鼠移植性原发性肝癌的作用机制在于促进肿瘤细胞的凋亡,影响细胞周期,抑制血清VEGF的表达;肿瘤实质的ADC值与实验室检查存在一定相关性,对于小鼠肝癌模型肿瘤生长情况的评定具有一定指导意义.     

基于IGF/MMP信号通路研究健脾利湿化瘀方有效拆方对前列腺癌细胞侵袭、迁移的影响

[目的] 在健脾利湿化瘀方临床疗效的基础上,结合前期动物实验研究,初步运用前列腺癌细胞增殖实验初筛健脾利湿化瘀方的最佳作用拆方;再基于胰岛素样生长因子（IGF）/基质金属蛋白酶（MMP）信号通路探究作用机制,为进一步研究全方作用机制奠定基础。[方法] 用四甲基噻唑蓝（MTT）法检测健脾利湿化瘀方各拆方组含药血清,包括健脾扶正组（黄芪、刺五加、补骨脂）、化瘀散结组（姜黄、大黄、王不留行）、清热解毒组（白英、蛇六谷、车前草）,对前列腺癌PC3和DU-145细胞的增殖抑制率,并取化瘀散结组药物作为进一步研究用药;通过Transwell、划痕实验评估化瘀散结组药物影响细胞的侵袭、迁移情况;用实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-Time PCR）方法检测前列腺活化间质细胞中基质细胞衍生因子-1（SDF-1）、胰岛素样生长因子-1（IGF-1）、MMP、纤维粘连蛋白（FN）基因的mRNA转录水平的变化情况;用蛋白免疫印迹（Western Blot）法检测化瘀散结组药物对前列腺活化间质细胞系胞SDF-1、IGF-1、MMP、FN蛋白表达的影响。[结果] 不同拆方组中,化瘀散结药物组对PC-3、DU-145抑制率最高,且随着药物浓度增加,分别从18.77%、58.89%增加至87.30%,呈一定剂量依赖性（P<0.05）;细胞迁移实验中化瘀散结组药物与阴性对照组相比,DU-145侵袭细胞数分别为（7.33±2.51）、（22.00±2.65）个（P=0.002）,PC-3侵袭细胞数为（3.67±0.58）、（22.67±7.77）个（P<0.05）,差异均有统计学意义;划痕实验结果显示化瘀散结组药物PC-3、DU-145细胞24 h迁移距离分别为（330.12±13.15）、（453.34±42.74） μm,阴性对照组迁移距离分别为（525.40±6.58）、（759.75±40.88） μm,P值分别为0.01、0.018,差异均有统计学意义。化瘀散结组药物明显降低Vimentin、SM22、SMM的蛋白表达,而Calcyclin的表达与阴性对照组比较差异无统计学意义。化瘀散结组药物对IGF-1、MMP基因相对表达量均在高剂量组中较低,降低SDF-1、IGF、MMP蛋白表达。[结论] 化瘀散结药物组能够有效地抑制前列腺癌细胞的增殖、侵袭、迁移,其机制可能与化瘀散结药物下调IGF/MMP信号通路有关。     

川楝子配伍对一贯煎抑制荷H22小鼠肝癌细胞增殖的影响＊

目的 对比研究一贯煎，一贯煎去川楝子，川楝子对荷H22小鼠肝癌细胞增殖及凋亡相关蛋白B淋巴细胞瘤-2（B-celllymphoma/Leukemia-2，Bcl-2）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）、细胞色素C（Cyt-c）、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3（Caspase-3）蛋白表达的影响。方法 小鼠随机分为模型组，环磷酰胺（cyclophosphamide， CTX）组（50 mg·kg^-1），一贯煎组（23 g·kg^-1），一贯煎去川楝子组（21 g·kg^-1），川楝子组（0.1 g·kg^-1）。雄性KM小鼠每组10只右侧腋下皮下注射H22细胞构建肝癌荷瘤模型，CTX组造模后腹腔注射给药，隔日一次，共7次，余组造模前后14天均灌胃给药，统计各组瘤重。原位末端标记法（TUNEL）检测肿瘤细胞凋亡；蛋白免疫印记法（Western blot）检测Bax、Bcl-2、Cyt-c、Caspase-3蛋白表达。结果 与模型组比较，CTX组，一贯煎组，一贯煎去川楝子组，川楝子组瘤重均降低（P<0.01），肝癌细胞凋亡率均升高（P<0.01），Bax、Caspase-3和Cyt-c蛋白表达均升高（P<0.05或P<0.01），CTX组、一贯煎组Bcl-2蛋白表达降低（P<0.01）；与一贯煎组比较，一贯煎去川楝子组、川楝子组瘤重、Bcl-2蛋白表达升高（P<0.05），肝癌细胞凋亡率和Bax、Caspase-3蛋白表达降低（P<0.05或P<0.01）；与一贯煎去川楝子组比较，川楝子组肝癌细胞凋亡率，Cyt-c、Caspase-3蛋白表达均升高（P<0.01），Bcl-2蛋白表达降低（P<0.01）。结论 一贯煎中川楝子配伍能明显增强该方抑制肝癌细胞增殖的功效，其机理可能与升高Bax、Caspase-3和Cyt-c蛋白表达，降低Bcl-2蛋白表达，进而促进肝癌细胞凋亡有关。