不同成熟度预知子种子对人肝癌细胞恶性增殖的影响实验

目的:观察不同成熟度预知子种子对肝癌SMMC7721细胞恶性增殖的抑制作用与差异。方法:采用乙醇回流提取法提取不同成熟度预知子种子药用成分,MTT检测其对SMMC7721肝癌细胞恶性增殖及观察形态学的影响。结果:不同成熟度预知子种子提取物对人肝癌细胞恶性增殖均存在抑制作用且存在差异,成熟者强于未成熟者;且成熟者诱导细胞内空泡发生的作用强,提示其诱导内质网应激成分得到富集。结论:随着预知子成熟,其种子中抑制肝癌细胞增殖和诱导其内质网应激的成分均得到富集,提示应收获成熟的预知子,提高其药用价值。     

肝癌常用治法复方抑制肝癌细胞恶性增殖的机制研究

目的:观察肝癌常用治法代表方及其拆方联合G418抑制肝癌细胞增殖的作用,及其与金属硫蛋白家族(MTs)的关系。方法:观察全方及其清热、活血、健脾等拆方或联合G418对SMMC7721肝癌细胞及转染MTs iRNA质粒肝癌细胞增殖的抑制作用(MTT法),后者与转染表达绿荧光蛋白质粒对照。结果:中药全方和3个不同拆方具有不同程度的抑制肝癌细胞增殖作用,且存在量效关系;联合G418用药后作用显著增强(P<0.05)。肝癌细胞被转染MTs iRNA载体后,与荧光质粒比较,无论是中药复方单独给药还是联合G418给药,对肝癌细胞增殖抑制的作用均较强(健脾方例外),提示MTs确有抵御药物治疗的作用。G418给药1d后撤药,2d后肝癌细胞出现增殖加速(P<0.05);全方、清热方、活血方、健脾方等联合G418后撤药2d,细胞增殖仍不活跃(P<0.05),提示不同治法中药联合G418用药具有减缓停药后细胞增殖反跳的作用。结论:SMMC7721肝癌细胞中MTs的过表达是该细胞耐药机制之一,临床常用防治肝癌复方及其拆方联合G418具有显著抑制肝癌细胞恶性增殖,并减缓其停药后恶性增殖加速的作用。     

预知子籽对多种肝癌细胞恶性增殖的抑制作用研究

目的:观察预知子籽及其联合G418对SMMC7721、HEPG2、HuH7 3种肝癌细胞恶性增殖的抑制作用。方法:采用MTT法及倒置镜相显微镜技术,观察预知子籽75%乙醇提取物及联合细胞毒抗生素G418用药对3种肝癌细胞恶性增殖的抑制作用,及对细胞形态学影响的异同。结果:预知子籽乙醇提取物对SMMC7721、HEPG2及HuH73种肝癌细胞的恶性增殖均具有显著地抑制作用(P<0.01),及量效关系,其中剂量(1.88 mg生药/m L)与G418(0.45 mg/m L)半量联合用药对肝癌细胞恶性增殖的抑制作用具有明显地减量增效作用(P<0.01)。细胞形态学检查显示,预知子籽小剂量(1.25 mg生药/m L)用药后,SMMC7721、HEPG2及HuH7肝癌细胞内均出现空泡,诱导出严重的内质网应激;中剂量(1.88 mg生药/m L)用药后,内质网应激更为显著,尤以SMMC7721细胞最为突出;至大剂量(2.5 mg生药/m L),3种肝癌细胞均呈现固缩脱胞浆现象。与预知子籽中剂量与细胞毒抗生素G418各自半量联合用药后,所有肝癌细胞均见固缩脱胞浆现象,或凋亡、死亡,尚存活细胞内仍见内质网应激现象。结论:预知子籽乙醇提取物具有选择性地诱导不同肝癌细胞严重的内质网应激,并抑制其恶性增殖,与G418联合用药对肝癌细胞恶性增殖的抑制具有减量增效作用。     

预知子、白花蛇舌草抑制肝癌细胞恶性增殖的研究

目的:在中医药常用治法方药中筛选最具抑制肝癌细胞恶性增殖的药物。方法:采用MTT法和细胞形态学检查,观察中药行气活血方、清热解毒方及其各组成药物乙醇提取物及联合细胞毒抗生素G418对肝癌细胞恶性增殖的抑制作用。结果:清热解毒方及各单味药物对肝癌细胞恶性增殖均具有不同程度的抑制作用,存在量效关系;其中5mg/ml白花蛇舌草对肝癌细胞的增殖抑制作用最强(P<0.05)。行气活血方及各单味药物对肝癌细胞恶性增殖也多具不同程度的抑制作用,存在量效关系;其中5mg/mL预知子的作用尤为突出,强于阳性对照G418 0.6 mg/mL(P<0.01)。2.5mg/mL预知子联合0.3 mg/mL G418用药,其对肝癌细胞恶性增殖的抑制作用接近0.6 mg/mL G418,提示有减量增效作用。无论是单独用药还是联合G418,预知子对肝癌细胞恶性增殖的抑制作用均显著于白花蛇舌草(P<0.01)。结论:预知子、白花蛇舌草是抑癌扶正行气活血方中抑制肝癌细胞恶性增殖的主要药物,其中预知子的作用最显著。预知子联合细胞毒抗生素,具有减少细胞毒抗生素用量且增效的作用。     

蜂王浆冻干粉对人肝癌细胞系SMMC-7721增殖的影响

目的观察蜂王浆冻干粉对人肝癌细胞系SMMC-7721增殖的影响。方法体外培养人肝癌细胞系SMMC-7721,MTT比色法观察蜂王浆冻干粉水溶液及蜂王浆冻干粉含药血清对其增殖的影响。结果蜂王浆冻干粉水溶液能促进人肝癌细胞系SMMC-7721增殖,呈剂量依赖性。而蜂王浆冻干粉含药血清则能抑制该细胞的增殖,其抑制效应亦呈剂量依赖性。结论蜂王浆冻干粉的抗癌效应可能是其代谢产物或刺激机体产生的活性物质所致。     

马红丸含药血清对人肝癌smmc-7721细胞bcl-2和baxmRNA表达的影响

目的 探讨马红丸(马钱子、红娘子、全蝎等)含药血清对人肝癌smmc-7721细胞bcl-2和bax mRNA表达的影响.方法 采用血清药理学方法制备马红丸(MHP)和阿霉素(ADM)含药血清以及对照血清,作用于smmc-7721细胞.MTT 法检测含药血清对srmmc-7721细胞增殖的影响;测定含药血清对smmc-7721细胞乳酸脱氢酶(LDH)的释放量;流式细胞术检测细胞凋亡率;RT-PCR检测含药血清对smmc-7721细胞bcl-2mRNA和bax mRNA表达的影响.结果 30％体积的马红丸和阿霉素含药血清作用于srmmc-7721细胞72 h,明显抑制细胞的增殖(P＜0.01),培养液中LDH的释放量和细胞凋亡率明显高于空白血清组(P＜0.01),bcl-2 mRNA表达下降,bax mRNA表达升高(P＜0.01).结论 30％马红丸含药血清作用于人肝癌smmc-7721细胞72 h,可明显抑制细胞的增殖,并诱导细胞凋亡,其机制可能与抑制细胞中bcl-2mRNA表达,促进bax mRNA表达有关.     

肝癌全方及其不同治法拆方抑制SMMC7721人肝癌细胞增殖的作用

目的:探讨肝癌全方及不同治法拆方抗肿瘤作用的分子机制。方法:体外培养SMMC7721人肝癌细胞,分别给予2.5~100 g·L-1肝癌全方、清热方、活血方、健脾方干预24 h后,采用噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞增殖;分别采用1.25~20 g·L-1肝癌全方,5~20 g·L-1清热方和活血方及20~120 g·L-1健脾方干预24 h后,运用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测相关基因的表达;分别采用20 g·L-1肝癌全方和清热方,10 g·L-1活血方及120 g·L-1健脾方干预SMMC7721细胞24 h后,通过蛋白免疫印迹法检测相关蛋白的表达,通过碘化丙啶(PI)/RNase staining solution试剂染色检测细胞周期的改变。结果:与空白组比较,肝癌全方及其不同治法拆方能抑制SMMC7721细胞的增殖,并呈现量效关系(P0.05)。与空白组比较,5~20 g·L-1清热方呈现量效抑制细胞周期依赖性激酶阻滞基因1B(CDKN1B)基因表达(P0.05),20~120 g·L-1健脾方也呈现量效抑制CDKN1B基因表达(P0.05);5~20 g·L-1肝癌全方明显抑制糖皮质激素调节蛋白激酶1(SGK1)基因表达(P0.05),且量效显著;5~20 g·L-1清热方量效抑制SGK1基因表达(P0.05);20~120 g·L-1健脾方也抑制SGK1基因表达(P0.05),同时肝癌全方及清热、活血治法方可抑制SGK1磷酸化蛋白的表达(P0.05);1.25,20 g·L-1肝癌全方可促进叉头框蛋白O3(FOXO3)基因表达(P0.05);15,20 g·L-1清热方明显促进FOXO3基因表达(P0.05);20 g·L-1活血方促进FOXO3基因表达(P0.05)。与空白组比较,全方组G2期细胞数增加(P0.05),清热组和健脾组G2期细胞数增加更明显(P0.05);肝癌全方及不同治法拆方能够抑制细胞周期蛋白E1(Cyclin E1)蛋白的表达,其中以健脾组抑制效果最显著。结论:肝癌全方及其不同治法拆方通过改变细胞增殖和周期,从而发挥抑制肝癌的作用。     

复方斑蝥胶囊抑制人肝癌细胞SMMC-7721的增殖和诱导凋亡的实验研究

复方斑蝥胶囊是以斑蝥为君药,内含多种中药组分,根据部颁标准(第17册)生产的纯中药胶囊制剂,临床上用于治疗多种癌症,以原发性肝癌为主,显示出了较好的疗效。其抗肝癌作用的机制目前在国内外尚未见报道。本课题采用血清药理学方法,观察复方斑蝥胶囊对人肝癌细胞SMMC-7721的增殖和细胞周期、细胞凋亡以及凋亡相关蛋白的影响,探讨复方斑蝥胶囊抗肝癌的作用以及可能的机制,以期为临床应用提供理论依据。1材料与方法1.1材料1.1.1细胞株和实验动物人肝癌细胞SMMC-7721由本校基础医学院病理生理教研室惠赠。新西兰大耳白兔6只,体重为(2.5±0.2…     

积雪草酸对人肝癌SMMC-7721细胞增殖、迁移及凋亡的影响

目的:观察积雪草酸对人肝癌SMMC-7721细胞增殖、迁移及凋亡的影响。方法:用不同浓度的积雪草酸处理人肝癌SMMC-7721细胞;MTT法检测积雪草酸对人肝癌SMMC-7721细胞增殖的影响;流式细胞术检测积雪草酸对人肝癌SMMC-7721细胞凋亡的影响;Transwell小室法检测积雪草酸对肝癌细胞迁移的影响;Western blot法检测积雪草酸对凋亡相关基因Bcl-2和Bax及上皮间质转化标志基因E-cadherin表达的影响。结果:与对照组比较,25、50、100μmol/L的积雪草酸对人肝癌SMMC-7721细胞增殖均有明显的抑制作用,差异均有统计学意义(P0.01)。流式细胞术结果显示,50μmol/L的积雪草酸处理后,肝癌细胞凋亡率显著增加,与对照组比较,差异有统计学意义(P0.01)。Transwell小室法检测结果发现,TGF-β能显著促进人肝癌SMMC-7721细胞迁移,与对照组比较,差异有统计学意义(P0.01)。1、10μmol/L的积雪草酸处理能够显著抑制TGF-β诱导的肝癌细胞迁移。积雪草酸处理后,人肝癌SMMC-7721细胞Bcl-2蛋白水平显著下降,Bax蛋白水平显著上调。TGF-β处理24 h后,SMMC-7721细胞E-cadherin表达水平显著降低,而不同浓度的积雪草酸均能抑制TGF-β诱导的E-cadherin表达水平下调。结论:积雪草酸能显著抑制人肝癌SMMC-7721细胞增殖和迁移,诱导细胞凋亡。     

不同中医治法对不同肝癌细胞株的作用比较

目的 :比较不同中医治法对不同肝癌细胞株增殖的抑制作用。方法 :将不同治法的中药常规水煎醇沉后 ,采用不同浓度中药制剂直接加入培养液的给药方式 ,以MTT法测定人原发性肝癌SMMC772 1细胞株、Bel74 0 2细胞株细胞的增殖情况。结果 :①清热解毒法对两种不同人肝癌细胞株增殖的抑制作用都很明显 ,且随用药剂量的增大 ,呈量效关系 ;②活血化瘀法对SMMC772 1细胞株增殖也有较好抑制作用 ,而对Bel74 0 2细胞株增殖却作用不明显 ;③健脾理气法对SMMC772 1细胞株增殖无抑制作用 ,而对Bel74 0 2细胞株增殖却有较好作用 ;④清热解毒法与其它两治法配伍后 ,其对SMMC772 1细胞株增殖的抑制作用都不如单一清热解毒法。结论 :清热解毒法对不同肝癌细胞株增殖具有较强的抑制作用 ,支持临床大剂量使用这类中药 ,活血化瘀法与健脾理气法具有选择性的抑制作用 ,说明临床辨证论治的重要性     

中医治疗肿瘤转移概况

肿瘤转移是癌症患者死亡的直接原因,主要病机为正气亏虚,正不抑邪,癌毒扩散。治疗以扶正固本为主,配以活血化瘀、清热解毒、化湿利水为辅。     

益气法对SMMC-7721和Hepa1-6肝癌细胞体外抑瘤作用和细胞周期影响的实验研究

目的:观察中医益气法对SMMC-7721和Hepa1-6肝癌细胞的体外抗癌作用;从细胞周期揭示扶正抗癌的作用机制;为采用中西结合治疗肝癌提供理论与实验依据,为肝癌的防治开辟新的研究领域。方法:运用细胞培养技术,采用现代药理学方法,MTT法从细胞水平评价益气法对肝癌细胞增殖的抑制作用。并采用流式细胞术(FCM)检测细胞周期变化,从细胞周期角度观察中医扶正治法对肝癌细胞周期的影响。结果:体外研究提示益气法对肝癌细胞具有不同程度的抑制作用,且这种抑制作用在一定范围内呈浓度依赖性,与空白组比较在50mg/mL浓度以上有统计学意义(P<0.05),益气各浓度组对两种不同的肝癌细胞有不同程度的G2/M期阻滞作用。结论:益气法在体外对肝癌细胞有抑制作用,益气法有G2/M阻滞作用。     

从热毒湿瘀虚辨治小儿IgA肾病

IgA肾病病理机制复杂,热邪为IgA肾病诱发和加重的始动因素,湿毒内蕴是IgA肾病关键病机,瘀血为IgA肾病病理基础,气阴两虚为IgA肾病的根本病机。设立总治则为祛邪扶正,常用治疗方法有清热解毒、清热利湿、活血化瘀、益气养阴。     

活血化瘀和清热解毒方药对家兔膝关节炎IL-8的影响

观察急性痛风性膝关节炎家兔模型白细胞介素 8(IL 8)的变化及活血化瘀和清热解毒方药的干预作用。采用McCartyD .J[1] 方法建立家兔急性痛风性膝关节炎模型 ,应用酶联免疫试验 (ELISA)法 ,于造模后 2、6、9、12h测定其膝关节液中IL 8的水平。结果 ,中药干预组的IL 8水平显著低于模型对照组 ,差异显著 (P <0 0 5 )。结论 ,活血化瘀和清热解毒方药能显著降低急性痛风性膝关节炎家兔模型膝关节液的IL 8水平 ,对急性痛风性关节有较好的防治作用     

中西医结合治疗中风病气虚血瘀证72例

2005年6月～2007年3月，笔者采用中西医结合的方法治疗中风病气虚血瘀证患者72例，并与同期单纯西药治疗的36例进行对照观察，疗效满意，现报告如下。     

充血性心力衰竭的中医药治疗

充血性心力衰竭是指在有适量静脉回流的情况下,由于心脏收缩及/或舒张功能障碍,心排血量不足以维持组织代谢需要的一种病理状态。中医辨证心衰为本虚标实之证,心肺、气阴亏虚为其病本,气虚血瘀为基础病机。故治以益气温阳、活血化瘀、化气利水为基本治法。早期治疗宜以益气活血为主,中晚期治疗宜以温阳利水为主,阴虚明显者可合滋阴之法。     

自拟清肝泻浊化瘀汤治疗青年慢性细菌性前列腺炎46例

目的：评价清肝泻浊化瘀汤治疗青年慢性细菌性前列腺炎临床效果。方法：采用自拟清肝泻浊化瘀汤口服治疗青年慢性细菌性前列腺炎46例作为治疗组,并同期采用盐酸左氧氟沙星胶囊及克拉霉素胶囊口服治疗青年慢性细菌性前列腺炎43例作为对照组,观察两组治疗前后慢性前腺炎症状积分指数（NIH-CPSI）评分及有关症状的改善情况,EPS中WBC及SPL的评分改善情况,伴随神经官能症及阳痿的改善情况。结果：治疗组总有效率95.7%,对照组总有效率72.1%,差异统计学有意义（P〈0.05）。NIH-CPSI评分观察：对疼痛,排尿情况及生活质量的改善。治疗组明显优于对照组,差异统计学有意义（P〈0.05）。EPS中WBC及SPL量化评分改善情况：治疗组明显优于对照组,差异统计学有意义（P〈0.05）。对神经官能症及阳痿改善情况：治疗组明显优于对照组,差异统计学学有意义（P〈0.05）。结论：自拟清肝泻浊化瘀汤治疗青年慢性细菌性前列腺炎有较好的疗效。     

中药配合耳穴治愈胃石症1例

胃石症多因空腹进食柿子、山楂、黑枣等引起,采用消积行气,活血散结并配合中医传统耳疗疗法的方法治疗,效果确切。