昆布多糖硫酸酯抑制BxPC-3细胞增殖的实验研究

目的探讨LAMS对BxPC-3细胞增殖的抑制作用. 方法以MTT法分别测定不同浓度LAMS对BxPC-3细胞增殖的抑制作用,对以LAMS处理前后的BxPC-3细胞分别用TUNEL(POD)法测定凋亡细胞、免疫组化法测定其凋亡,Bcl-2、BaX基因蛋白含量. 结果 LAMS可使BxPC-3细胞增殖抑制,细胞Bcl-2基因蛋白表达下降、BaX基因蛋白表达增加.结论 LAMS可有效地抑制BxPC-3细胞增殖.     

富含组氨酸糖蛋白的纯化及促凝活性的初步研究

采用硫酸铵分段盐析，肝素－葡聚糖亲和层析和ＤＥＡＥ－交联葡聚糖Ａ－５０离子交换层析等方法从人血浆中分离纯化出富含组氨酸糖蛋白，经双向免疫扩散和ＳＤＳ－ＰＡＧＥ鉴定，表明待鉴定样品为单一区带，分子量６６Ｋｄ的富含组氨酸糖蛋白纯品，富含组氨酸糖蛋白通过同ＡＴ－Ⅲ竞争肝素结合而具有较强的促凝活性，其同肝素间的相互作用依赖于Ｃａ＾２＋的存在，ＥＤＴＡ，枸椽酸盐对此具有浓度依赖性的抑制作用     

981208冲剂抑制二乙基亚硝胺诱导的大鼠肝癌细胞增殖活性

目的：探讨中药981208冲剂对二乙基亚硝胺（DEN）诱癌过程中肝细胞增殖活性的影响。方法：建立DEN诱肝癌大鼠模型，采用免疫组化染色方法及计算机图像分析技术检测了981208冲剂对诱癌过程中肝细胞阳性表达细胞增殖核抗原（PCNA）、H－ras蛋白及诱癌后期溴化脱氧尿嘧啶（Brd-U)细胞标记指数的影响。结果：DEN诱肝癌过程中，PCNA、H-ras阳性表达呈逐渐增加趋势，两表达显正相关。981208冲剂可明显抑制诱癌过程中两蛋白的阳性表达，显降低诱癌后期Brd-U细胞标记指数。结论：中药981208冲剂可抑制大鼠肝癌形成过程中肝细胞增殖活性，从而延缓肝细胞癌变的过程。     

甲胎蛋白促人肝癌Bel7402细胞增殖的机制研究

目的:观察甲胎蛋白促肿瘤细胞增殖的信号转导方式。方法:用从人脐带血清中提取的甲胎蛋白,作用于体外培养的人肝癌Bel7402细胞,运用MTT染色计数法,流式细胞仪测定细胞周期和3H-脱氧胸腺嘧啶核苷(3H-TdR)参入法等指标检测细胞增殖状况;放射受体分析细胞膜上甲胎蛋白受体存在和数目;免疫结合法检测细胞内cAMP浓度;Westernblot分析P21ras蛋白的表达。结果:甲胎蛋白(10～80mg·L-1)作用24h后,人肝癌Bel7402细胞有不同程度的促增殖作用;在人肝癌Bel7402细胞膜上存在2种不同的解离平衡常数(Kd)的甲胎蛋白受体,Kd分别为Kd1=1.3×10-9mol·L-1(89400位点/细胞)和Kd2=9.9×10-8mol·L-1(582000位点/细胞)。AFP能显著提高Bel7402细胞内的cAMP浓度,对P21ras的表达也有明显的促进作用。甲胎蛋白的单克隆抗体能阻断这种作用。结论:甲胎蛋白具有促人肝癌Bel7402细胞增殖的作用,这种作用是由受体介导的cAMP信号转导途径实现的。     

昆布多糖硫酸酯的抑制血管生成和抗肿瘤作用

昆布多糖硫酸酯是碱性成纤维细胞生长因子附着和ｂＦＧＦ依赖性细胞增殖的抑制剂,能够抑制内皮细胞形成管状结构,抑制鸡绒毛膜尿囊膜的形成,并具有抗鼠ＲＩＦ－１肿瘤生长活性。     

儿茶素抑制肝癌细胞增殖、诱导凋亡作用研究

目的观察表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)对肝癌HepG2细胞Cyclin D1,Bcl-2表达的影响,探讨EGCG抗肿瘤的作用机制。方法采用MTT法观察EGCG对肝癌细胞HepG2增殖的影响,免疫细胞化学法、Western blot法分别检测EGCG作用后Cyclin D1,Bcl-2的表达。结果 EGCG呈浓度依赖性抑制肝癌HepG2细胞增殖(P<0.05),免疫细胞化学和Western blot的结果均显示EGCG作用后Cyclin D1和Bcl-2的表达下调。结论 EGCG可能通过下调Cyclin D1,Bcl-2的表达,抑制HepG2细胞增殖的同时诱导细胞凋亡,从而发挥抗肿瘤的作用。     

一期凝固法测定尿液组织因子促凝活性的方法学建立

目的 建立一种简便检测尿液组织因子促凝血活性的方法.方法 以owren-koller稀释液5倍稀释尿液后,在STAGO全自动凝血仪检测凝固时间,通过兔脑粉不同浓度及其对应的凝固时间确定相应的标准曲线,计算出尿液组织因子(TF)的促凝血活性(TF-PCA),并对该方法进行评价.结果 通过owren-koller稀释液处理...     

胃癌端粒酶活性与肿瘤细胞增殖活性的研究

目的：研究胃癌端粒酶活性和肿瘤细胞增殖活性的关系。方法：用端粒重复扩增-酶联免疫吸附法（TRAP-ELISA）检测40例胃癌及癌旁组织的端粒酶活性。用流式细胞术（FCM）检测肿瘤细胞的增殖指数（PI）和S期细胞比率（SPF）。结果：肿瘤端粒酶阳性率为87.5%,癌旁组织阳性率为5.0%。胃癌端粒酶表达阳性者较阴性者PI和SPF明显升高。结论：胃癌端粒酶活性是判断肿瘤恶性程度的指标。与肿瘤细胞增殖活性有关。     

白藜芦醇上调BATF2表达及抑制肝癌细胞增殖的研究

目的 初步探讨白藜芦醇对BATF2表达的调控作用及对肝癌细胞(HepG2)增殖能力的影响.方法 用不同剂量的白藜芦醇(终浓度分别为20、40、80 μmol/L)处理HepG2细胞,进行逆转录PCR (RT-PCR)、实时定量PCR (Real-time PCR)、Western blot检测碱性亮氨酸拉链转录因子2(BATF2) mRNA和蛋白水平表达的变化,并采用细胞增殖检测试剂(CCK-8)实验检测对细胞增殖能力的影响.结果 在HepG2细胞中,白藜芦醇能剂量依赖性地诱导BATF2在转录和翻译水平的表达,并抑制细胞的增殖(P＜0.05);基因检测发现白藜芦醇显著诱导BATF2启动区活性,-244～-152区域存在白藜芦醇的可能结合位点.结论 白藜芦醇能增强HepG2细胞中BATF2的表达并抑制细胞的增殖,提示上调BATF2的表达可能是白藜芦醇抑制肝癌细胞增殖的机制之一.     

炎症及促凝活性指标在2型糖尿病动脉粥样硬化中的意义

目的 观察血浆炎症及促凝活性相关指标的水平变化在2型糖尿病动脉粥样硬化患者诊治评价中的意义。方法采用免疫比浊法、酶联免疫吸附双抗体夹心法和血凝分析仪，分别检测单纯糖尿病组60例、糖尿病合并大血管病变组74例和正常对照组46例血浆hsCRP、PAI—1、t—PA和Fbg浓度。结果2型糖尿病血管病变组的hsCRP、PAI—1和Fbg水平均高于无血管病变组和正常对照组（P〈0．05，P〈0．01），但t—PA在各组间差异无显著性。结论hsCRP、PAI—1和Fbg等水平的升高，可能与2型糖尿病动脉粥样硬化和血栓形成有关。     

LAMS对肝癌细胞株Bcl-2、BaX基因蛋白的影响

目的：研究ＬＡＭＳ对肝癌细胞株的Ｂｃｌ－２、ＢａＸ基因蛋白影响。方法：用ＭＴＴ法测定不同浓度ＬＡＭＳ对肝癌细胞株增殖的抑制作用；用ＴＵＮＥＬ法和免疫组化法测定不同抑制程度下凋亡细胞量和Ｂｃｌ－２、Ｂａｘ基因蛋白的变化。结果：ＬＡＭＳ浓度与肝癌细胞增殖的抑制程度、凋亡细胞数、Ｂｃｌ－２基因蛋白表达减少及ＢａＸ基因蛋白表达增加呈正相关。结论：　ＬＡＭＳ可通过影响Ｂｃｌ－２、ＢａＸ基因蛋白的表达促使肝癌细胞凋亡。     

结直肠癌原发灶和肝转移灶组织中蛋白质组差异表达及临床意义

目的探讨结直肠癌发生和肝转移相关蛋白及其与肝转移的关系。方法采用等电聚焦／SDS聚丙烯酰胺双向凝胶电泳法,对比分析结直肠癌原发灶、癌旁肠黏膜和肝转移灶中蛋白质组表达差异,经质谱分析、鉴定差异蛋白点;采用细胞转染方法,将差异蛋白基因导入到结直肠癌细胞,观察细胞生物学行为改变。结果结直肠癌原发灶、肝转移灶与正常肠黏膜蛋白质组分在PH7．0—9．5范围内有明显差别。分析13个差异蛋白点,其中2个蛋白点在癌原发灶组织中表达下调,5个蛋白点在原发灶组织中表达上调,6个蛋白点在肝转移组织中表达上调。经质谱鉴定,碳酸酐酶Ⅱ（CAⅡ）在癌组织中表达下调,磷酸甘油酸激酶Ⅰ、延胡索酸水合酶、醛缩酶A在原发灶中表达上调。精氨酸酶,谷胱甘肽S-转移酶A3在肝转移灶中表达上调。将碳酸酐酶ⅡcDNA克隆转染HR-8348细胞后,癌细胞侵袭、趋化运动能力及耐药性均明显减弱。结论结直肠癌原发灶和肝转移灶蛋白质组表达有显著差异,碳酸酐酶Ⅱ表达下调和精氨酸酶、谷胱甘肽S-转移酶A3增强表达可使结直肠癌细胞生物学行为发生改变并促进肝转移发生。     

肝癌细胞分泌物对凝血系统的直接影响

目的：探讨肝癌细胞分泌物对凝血系统的直接影响。方法：以一期法测定肝癌细胞分泌物对APTT、PT、TT及Ⅷ、Ⅴ因子活性的影响。结果：肝癌细胞分泌物使正常血浆APTT缩短、TT延长、Ⅷ因子活性增加、V因子活性降低。异常血浆PT、TT延长。结论：肝癌细胞分泌物可直接改变血浆凝血像。     

肝星状细胞对肝癌SMMC-7721细胞增殖、侵袭的影响及作用机制研究

目的观察人肝星状细胞LX-2对人肝癌SMMC-7721细胞增殖、侵袭能力的影响,并探讨其可能的作用机制。方法人肝星状细胞LX-2条件培养基（HSC-CM）与肝癌SMMC-7721细胞共培养,设为HSC-CM组;人正常肝细胞LO2条件培养基(LO2-CM)与肝癌SMMC-7721细胞共培养,设为LO2-CM组（阴性对照）;1%FBS培养基与肝癌SMMC-7721细胞共培养,设为1%FBS组（空白对照）。采用CCK-8法检测3组肝癌SMMC-7721细胞增殖能力;Transwell侵袭实验检测培养48h后细胞侵袭能力;Westernblot检测增殖细胞核抗原（PCNA）、血管内皮生长因子（VEGF）、核因子资B（NF-资B）、基质金属蛋白酶2（MMP-2）蛋白表达水平。结果HSC-CM组、LO2-CM组、1%FBS组肝癌SMMC-7721细胞增殖能力、侵袭能力、PCNA、VEGF、NF-资B、基质金属蛋白酶２（MMP-2）蛋白表达水平比较差异均有统计学意义（均P＜0.05）;与LO2-CM组、1%FBS组比较,HSC-CM组肝癌SMMC-7721细胞增殖能力、侵袭能力均增强（均P＜0.05）;PCNA、VEGF、NF-资B、MMP-2蛋白表达水平均上调（均P＜0.05）。结论肝星状细胞可促进肝癌SMMC-7721细胞增殖、侵袭等生物学行为,其作用机制可能与上调PCNA、VEGF、NF-资B、MMP-2表达水平有关。     

氧化苦参碱对大鼠肝星状细胞增殖的影响

研究氧化苦参碱地大鼠肝星状细胞增殖的影响,探讨其抗肝纤维化的机制。方法用链霉蛋白酶和胶原酶原位灌流,Ｎｙｃｏｄｅｎｚ密度梯度离心分离大鼠肝星状细胞,并以氮蓝四唑试验比色法观察氧化苦参碱对肝星状细胞增殖效应。     

安体维康诱导肝细胞凋亡实验研究及临床观察

目的 :评价中药制剂安体维康 ( Antivirus Compound,ATVC)诱导人肝癌细胞凋亡的作用及临床疗效。方法 :采用 MTT(细胞毒 )实验培养人肝癌细胞株 BEL - 740 2细胞 ,加入不同浓度安体维康药液进行培养与对照组进行比较。临床给原发性肝癌 1 0例服用安体维康胶囊 3个月。结果 :安体维康能抑制人肝癌细胞株 BEL- 740 2细胞生长 ,有诱导肝细胞凋亡的作用。其作用强弱在一定程度上存在剂量和时间效应。服用安体维康的肝癌患者临床症状明显改善。结论 :安体维康可诱导人肝癌细胞调亡 ,对原发性肝癌有一定临床疗效     

瘤内注射MAA和32P胶体治疗肝癌的实验研究

目的 :比较肿瘤内直接注射3 2 P胶体和先向肿瘤内注入MAA再注射3 2 P胶体两种给药方法的3 2 P的体内分布及其治疗作用。方法 :6 0只荷肿瘤小鼠随机分为 4组 ,第 1组只注射3 2 P胶体 1.85MBq ;第 2组先注入 1× 10 4 颗粒的MAA ,再注入3 2 P胶体 1.85MBq ;第 3组先注入 1× 10 5颗粒MAA ,再注入3 2 P胶体 1.85MBq ;第 4组先注入 1× 10 5颗粒MAA ,再注入3 2 P胶体 18.5MBq。注射后第 30min、2 4h、4 8h、8d和 16d ,从各组随机取出 3只小鼠 ,测定肿瘤直径 ,采血后处死 ,取出肿瘤、心、肝、脾、肾、肺和脊椎骨 ,称重并计数放射性。对第 4组小鼠的肿瘤做病理切片并计算抑瘤率。结果 :3 2 P自肿瘤向血液中的扩散主要发生在用药后的早期阶段 ,MAA可以阻止3 2 P的扩散 ,增加其瘤内滞留率。MAA的阻滞作用与注入的MAA颗粒数量成正相关 ,而与3 2 P胶体的注入量则成负相关关系。对于直径约 1cm的肝肿瘤 ,注入 1.85MBq的3 2 P胶体不能抑制肿瘤的生长 ,18.5MBq3 2 P胶体可使肿瘤缩小 2 0 % ,对外周血红细胞和白细胞计数无明显影响作用。结论 :直接向肿瘤内注入一定数量的MAA ,再注入所需剂量的3 2 P胶体 ,是治疗晚期肝癌安全有效的方法。     

还原型谷胱甘肽对大鼠肝星状细胞增殖及活化的影响

目的探讨还原型谷胱甘肽对大鼠肝星状细胞（HSC）=T6增殖及活化的影响。方法选择脂多糖（LPS）活化HSC—T6的最适作用浓度及作用时间;分别采不同浓度的还原型谷胱甘肽（GSH）作用于经LPS活化的大鼠HSC—T6,24h后进行如下实验：噻唑兰（MTT）比色法检测HSC—T6增殖;化学发光免疫法检测细胞上清液中透明质酸（HA）、Ⅳ型胶原的含量;免疫细胞化学染色图像分析HSC—T6中a—SMA的表达。结果0．1gg／mlLPS在作用24h时HSC—T6活化明显;GSH能够抑制HSC—T6的增殖及活化（P〈O．05）,减少其细胞外基质（ECM）HA和Ⅳ型胶原的表达（P〈0．05）,作用呈剂量依赖性。结论GSH可能通过抑制HSC—T6的增殖及活化,减少其ECM的产生,进而减缓肝纤维化的进展。     

沙培林经动脉灌注联合栓塞治疗大鼠肝癌的实验研究

①目的观察沙培林联合碘化油乳剂经肝动脉灌注对实验性大鼠晚期肝癌的治疗作用。②方法建立31只二乙基亚硝胺（DEN）诱发大鼠晚期原发性肝癌模型,随机分为对照组、常规组和实验组,经胃十二指肠动脉至肝固有动脉分别灌注生理盐水、MMC（0．2mg／Kg）＋表柔吡星（1mg／Kg）＋适量超液化碘油以及沙培林（O．25mg／Kg）＋适量超液化碘油。③结果术后实验组大鼠在治疗效果、肝功能、生存率等都优于常规组,且实验组的病理性肝功能损害轻。④结论经肝动脉灌注沙培林联合碘化油乳剂对诱发性实验性大鼠晚期肝癌具有较好的治疗作用。