细胞外信号调节激酶在高血糖加重脑缺血性损伤中的作用

目的探讨ERK1/2在高血糖加重大鼠脑缺血再灌注损伤中的作用。方法采用双侧颈总动脉管阻断加低血压法建立脑缺血再灌注模型,大鼠缺血前30min注射25%葡萄糖,使之处于高血糖状态。两侧颈总动脉结扎并放血,使血压下降到45~50mmHg。脑缺血30min后再灌注(解除颈总动脉结扎同时回输血液),分别观察再灌注后30min、1h、3h、6h。另设正常血糖组和对照组,用免疫组化和Western blot比较3组大鼠ERK1/2的表达状态和脑组织病理改变。结果正常血糖组和高血糖组大鼠,再灌注后0~1h,海马CA1区未见明显的ERK1/2表达。而在纹状皮质和海马CA3区,ERK1/2的表达有明显的区别。正常血糖组大鼠在再灌后30min,可见ERK1/2轻度升高,高血糖组大鼠再灌注后30min,ERK1/2升高。ERK1/2在再灌注1h达到高峰并且持续到再灌注3、6h,高于正常血糖组(P<0.05)。用Western blot方法检测皮质和海马的ERK1/2含量,正常血糖组在缺血再灌注30min、1h、3h、6h ERK1/2含量逐渐升高,而高血糖组又高于正常血糖组(P<0.05)。结论高血糖可加重脑缺血再灌注损伤,其机制可能与激活ERK1/2有关。     

磷酸化细胞外信号调节蛋白激酶加重糖尿病大鼠脑缺血性损伤

目的探讨高血糖加重脑缺血性损伤的分子机制。方法采用大鼠全脑缺血模型,通过免疫组化、末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP原位切口末端标记方法和Western blot技术,对比研究Streptozotoein诱导的糖尿病大鼠脑缺血时神经元细胞外信号调节蛋白激酶1／2（ERK1／2）磷酸化和神经元凋亡的关系。结果糖尿病组脑缺血30min和再灌注1、3、6h后,扣带皮质和海马CA3区ERK1／2阳性细胞数和神经元凋亡明显高于正常血糖组（P〈0．05）。ERK1／2抑制剂U0126可明显减少ERK1／2的磷酸化和凋亡神经元的数量。Western blot分析可见,在缺血脑组织中磷酸化ERK1／2明显增高,再灌注3和6h糖尿病组显著高于正常血糖缺血组（P〈0．05）。结论糖尿病高血糖加重缺血性脑损伤与MAPK家族激活有关,特别是ERK1／2参与了脑细胞的损伤。     

细胞外信号调节激酶在局灶性脑缺血中的作用

目的 研究细胞外信号调节激酶(ERK)在局灶性脑缺血中的作用。方法 线栓法制作小鼠大脑中动脉栓塞(MCAO)模型。通过Westem blot和免疫组织化学方法研究磷酸化ERK1／2的活性特征。静脉内应用ERK通路阻滞剂U0126，测定缺血小鼠的神经系统损害和脑梗死体积的改变。结果 MCAO后30min，磷酸化ERK1／2在局灶缺血小鼠脑组织中显著升高，2h达到最高峰，6h恢复。免疫组化研究显示磷酸化ERK1／2阳性细胞在梗死基底节和周围皮质大量出现。荧光双染提示磷酸化ERK1／2阳性的细胞为神经元和星形细胞。与对照组相比，注射U0126的脑缺血小鼠神经损伤评分降低44．6％，梗死体积降低54．4％。结论 ERK在小鼠局灶性脑缺血中起着重要的作用，阻断ERK通路对缺血性脑损伤有一定保护作用，并可能成为脑缺血治疗的新途径。     

细胞外信号调节激酶在乳腺癌中的表达及意义

目的:研究细胞外信号调节激酶(ERK)在乳腺癌中的表达及在乳腺癌发生发展中的作用。方法:采用Westernblot技术和免疫组化方法,研究ERK1和ERK2蛋白在60例乳腺癌,10例乳腺良性肿瘤,10例正常乳腺组织中的表达。结果:ERK1和ERK2在乳腺癌中有过度表达,与正常乳腺及乳腺良性肿瘤相比,其差异有显著性(P<0.01),乳腺癌Ⅲ～Ⅳ期表达高于Ⅱ期和Ⅰ期,差异有显著性(P<0.05);有腋窝淋巴结转移者表达高于无腋窝淋巴结转移者,差异有显著性(P<0.05)。ERK1和ERK2在高、中、低分化乳腺癌中无显著差异,与乳腺癌病理类型无关。结论:ERK的过度表达在乳腺癌的发生发展及淋巴结转移中起重要作用。     

细胞外信号调节激酶及其不同作用

丝裂原活化蛋白激酶(mitogen activated pro tein kinase, MAPK)是生物体内重要的信号转导系统之一,参与介导生长、发育、分裂、分化、死亡以及细胞间的功能、同步等多种细胞过程,普遍存在于多种生物,包括酵母和哺乳动物细胞。MAPK家族本身又是蛋白激酶级联反应的下游激酶,是多条信号通路的汇总点。迄今为止已发现 MAPK 家族有4个成员:(1)细胞外信号调节激酶(extrallular sig nal regulated protein kinase, ERK),又称为P42/44MAPK; (2) c Jun氨基末端激酶(c Jun N terminalkinase, JNK),又称为应激激活蛋白激酶( stressacti…     

细胞外信号调节激酶在应激性溃疡发病中的作用

目的:探讨细胞外信号调节激酶1/2(extracellular signal-regulated kinase 1/2,ERK1/2)在实验性应激性溃疡发病中的作用.方法:采用浸水束缚(water-immersion restraint,WIR)应激实验复制大鼠应激性溃疡模型.检测WIR应激5 min、15 min、30 min、1 h、2 h和3.5 h各时间点的胃黏膜ERK1/2活化情况,并观察特异性ERK1/2抑制剂PD98059预处理(1 mg/kg,iv.)对胃黏膜损伤的影响.采用Western印迹检测ERK1/2和caspase-3表达,激酶活性分析方法检测ERK1/2活性,电泳迁移率变动分析(EMSA)检测转录因子活化蛋白1(AP-1)和核因子κB(NF-κB)DNA结合活性,Northern印迹检测TNF-α和IL-1β mRNA表达,采用溃疡指数(UI)计分和病理学检查评价胃黏膜病变程度, TUNEL技术检测和定量细胞凋亡.结果:正常大鼠胃黏膜仅检测到极微弱的磷酸化ERK1/2表达,WIR应激15 min后胃黏膜ERK1/2即发生活化并于3.5 h后达到峰值.PD98059抑制ERK活化后,胃黏膜AP-1和NF-κB活性及TNF-α和IL-1β mRNA表达显著下调,胃黏膜损伤程度也明显减轻,同时伴有胃黏膜caspase-3活化和凋亡轻度增加.结论:ERK1/2活化在浸水束缚应激诱导的胃黏膜损伤中发挥了重要作用.     

细胞外信号调节激酶在人纤维化肝组织中的表达

目的:研究细胞外信号调节激酶(ERK)在人纤维化肝组织中的表达及其与肝纤维化发生的相关性。方法:收集肝手术标本(纤维化肝组织和远癌的纤维化肝组织,以正常的肝组织做对照),以逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测正常肝和不同程度纤维化肝组织中ERK的表达情况,对结果进行统计分析。结果:人肝纤维化的发生发展过程中,ERK的表达增加。结论:ERK参与并介导其中的RAS/RAF/MEK/ERK信号通路,可能与肝纤维化的发生密切相关。     

细胞外信号调节激酶-2在结肠癌中的表达及临床意义

目的研究细胞外信号调节激酶-2（ERK-2）在结肠癌组织中的表达及临床意义。方法选取山东省临朐县人民医院2008年1月~2010年12月经手术病理证实的结肠癌患者79例,采用免疫组化链霉菌抗生物素蛋白-过氧化酶（streptavidin-peroxidase,SP）法检测正常结肠组织、癌旁组织和结肠癌组织中ERK-2蛋白阳性表达情况;分析ERK-2蛋白表达与结肠癌临床病理特征及预后的关系。结果①结肠癌组织中ERK-2蛋白阳性表达率[75.9%（60/79）]高于癌旁组织[51.9%（41/79）]及正常组织[13.9%（11/79）],差异均有统计学意义（P〈0.05或P〈0.01）。②ERK-2蛋白阳性表达率在不同年龄（〈60岁、≥60岁）[77.5%（31/40）、74.4%（29/39）]、性别（男/女）[70.7%（29/41）、68.4%（26/38）]、Dukes分期（A、B、C、D期）[73.3%（11/15）、76.7%（23/30）、71.4%（10/14）、70.0%（14/20）]、癌胚抗原水平（〈5μg/L、≥5μg/L）[68.2%（15/22）、64.9%（37/57）]因素间进行比较,差异均无统计学意义（P〉0.05）;ERK-2蛋白阳性表达率在不同分化程度（高、中分化/低分化）[82.8%（48/58）、57.1%（12/21）]、浸润深度（未穿透肌层/浆膜或浆膜外）[46.2%（6/13）、72.7%（48/66）]和淋巴结转移（阳性/阴性）[76.5%（26/34）、53.3%（24/45）]因素间比较,差异有统计学意义（P〈0.05）。③ERK-2蛋白阳性表达患者12个月生存率（58.2%）与ERK-2蛋白阴性表达患者（60.4%）比较,差异无统计学意义（P〉0.05）;ERK-2蛋白阳性表达患者24个月生存率（38.7%）低于ERK-2蛋白阴性表达患者（58.6%）,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论 ERK-2蛋白阳性表达与结肠癌多种临床病理因素有关,检测ERK-2蛋白对结肠癌的诊疗有一定意义。     

细胞外信号调节激酶与缺血性脑卒中

细胞外信号调节激酶1/2（extracellular signal-regulated kinase1/2,ERK1/2）是丝裂原活化蛋白激酶家族中的一员。脑缺血缺氧后,细胞外各种刺激因素通过三级级联反应激活ERK。磷酸化的ERK在脑缺血后升高,其在脑缺血中的作用是多方面的,一方面通过炎症和反应性氧族加重缺血性脑损伤,另一方面又通过减少细胞内钙超载而减轻缺血后脑损伤。     

细胞外信号调节激酶蛋白在肺癌中的表达及意义

目的：检测细胞外信号调节激酶（ERK）在人肺癌和肺良性病变组织中的表达,探讨ERK蛋白与肺癌的组织类型、分化程度和淋巴结转移的关系。方法：选取77例肺癌标本和20例肺良性病变的组织,通过常规石蜡包埋行免疫组织化学染色,检测ERK2蛋白表达。结果：肺癌组和对照组ERK2蛋白表达的阳性率分别为51.9%和20.0%,两组间具有显著性差异（P〈0.05）。ERK2蛋白表达在肺癌不同病理类型即鳞癌和腺癌中无显著性差异（P〉0.05）。在高分化、中分化和低分化肺癌之间比较,ERK2表达阳性率有显著性差异（P〈0.05）。ERK2在有无淋巴结转移中有显著性差异（P〈0.05）。结论：肺癌组织中存在ERK2蛋白的高表达;ERK2蛋白的高表达与肺癌组织类型无关,而与分化程度和淋巴结转移有密切关系。因此,ERK2的表达与肺癌发生及发展的生物学行为和预后可能有关。     

细胞外信号调节激酶在不同转移性人前列腺癌细胞中被激活的调节机制

目的　探讨不同转移潜能的人前列腺癌细胞中与增殖分化密切相关的细胞外信号调节激酶（ERK）信号传导途径被激活的机制。方法　用细胞计数及MTT法检测外源性P2嘌呤受体激动剂ATP对人前列腺癌细胞PC-3M亚系1E8（高转移）和2B4（低转移）体外生长的影响。用特异性识别双磷酸化ERK1/2（p44/p42）的抗体及蛋白质印迹方法,检测细胞经ATP作用后ERK1/2的活化情况并研究其调节机制。结果　ATP可明显抑制1E8和2B4细胞的体外生长,第6和第8天的抑制率分别为1E854％和59％;2B467％和39％。ATP可激活1E8和2B4细胞内的ERK1/2激酶。ATP诱导的ERK1/2活化可被P2嘌呤受体拮抗剂苏拉明抑制,抑制率1E882%±9％;2B481%±6％。ERK1/2上游激酶MEK抑制剂PD98059可有效抑制ATP对ERK1/2的激活,抑制率1E894%±4％;2B491%±4％。ATP对ERK的激活受到G蛋白活性调节剂PTX的抑制,抑制率1E850%±3％,2B451%±4％。ATP对1E8细胞ERK1/2的激活水平高于2B4细胞。两种细胞对蛋白激酶C活性调节剂TPA作用的反应性不同。结论　不同转移性的人前列腺癌细胞亚系对外源性ATP激活ERK1/2信号传导通路的反应性间存在差异,提示肿瘤转移受到不同信号传导机制调节。     

细胞外信号调节激酶1/2在心血管系统疾病中的作用

丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号转导通路是细胞内的重要信息传递系统,细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)作为MAPK家族的重要组成部分,是将信号从细胞表面受体转导至细胞核的关键。ERK1/2磷酸化参与了心肌细胞肥厚、凋亡的过程以及血管平滑肌细胞增殖等多种生物学反应。然而,对于ERK1/2在心血管系统疾病发生、发展过程中所起的作用仍有争议,且未阐明在具体的病理生理过程中其上游激活物及下游作用靶点。     

中医药对细胞外信号调节激酶通路的影响

细胞外信号调节激酶(extracellular signal-reg-ulated kinase,ERK)通路是20世纪80年代末期发现的一类丝/苏氨酸蛋白激酶,是传递丝裂原信号的信号转导蛋白,属于丝裂原活化蛋白激酶(mitogenactivated protein kinase,MAPK)信号传导通路[1]。     

细胞外信号调节激酶在缺血大鼠各脑区的表达及干预的实验研究

目的:通过研究大鼠局灶性脑缺血再灌注(CIR)后细胞外信号调节激酶(ERK)在不同时间大脑各区的表达特点,采用人尿激肽原酶(Hk-1)干预后ERK在不同时间大脑缺血区的表达变化及特点,探讨ERK与脑缺血的关系。方法:通过线拴法制作大鼠大脑中动脉缺血(MCAO)再灌注模型,采用免疫组化方法观察急性缺血不同时间脑区及干预后的ERK阳性神经元的动态改变。结果:①在纹状体平面,CIR 6 h后梗死中心ERK阳性神经元数量急剧下降,CIR24 h组中完全消失。半暗带皮质和海马平面,ERK阳性神经元均有先升后降的趋势。②Hk-1干预后从CIR 6 h始ERK活性均较同期CIR组高。结论:CIR的ERK早期活性升高与随后的下降在用药干预后其ERK活性均较模型组高,可能与人尿激肽原酶促进了ERK生存通路有关。     

细胞外信号调节激酶的过表达在胃癌发生机制中的作用研究

目的 :研究ERK1表达在胃癌发生中的作用。方法 :采用SABC免疫组织化学方法 ,检测 11例正常胃粘膜组织、2 3例胃癌组织、2 6例肠上皮化生及 2 1例不典型增生组织中ERK1的表达及分布。结果 :ERK1的表达在正常胃粘膜、肠上皮化生、不典型增生、胃癌组织中呈逐级递增的趋势 (P <0 0 1)。结论 :ERK1及其介导的信号通路的过度活化可能与胃癌的发生密切相关     

细胞外信号调节激酶在大鼠胰腺纤维化中作用的研究

目的研究细胞外信号调节激酶（ERK1/ERK2）在大鼠胰腺纤维化中的作用。方法通过对大鼠胰管内注射2%三硝基苯磺酸（TNBS）的方法制备大鼠胰腺纤维化模型。采用免疫组化技术检测第四周胰腺组织中α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、血小板衍化生长因子（PDGF）、磷酸化细胞外信号调节激酶1、2（P-ERK1/P-ERK2）的含量。结果 PDGF、P-ERK1/P-ERK2、α-SMA在模型组的表达均强于对照组（P〈0.01）。α-SMA与PDGF、P-ERK1、P-ERK2定量分析成正相关（P〈0.05）。结论 ERK1/ERK2信号传导通路在慢性胰腺炎发生纤维化过程中具有重要作用。     

细胞外信号调节激酶及蛋白激酶Cγ亚型在慢性染铅小鼠脑海马中的异常表达

目的:观察和探讨铅对小鼠脑海马蛋白激酶Cγ(PKC-γ)及细胞外信号调节激酶(ERK)蛋白表达的影响。方法:小鼠出生1d,染铅组母鼠开始通过饮水饲以不同浓度醋酸铅2.4,4.8,9.6mmol/L。幼鼠出生后,先通过哺乳接触铅,断乳后则自行饮用与母鼠饮用浓度相同的含铅水。分别在14,21,28,35d处死小鼠,用蛋白免疫印迹法观察各组小鼠海马区PKC-γ蛋白表达状况;分别在7,14,21,28d处死小鼠,用蛋白免疫印迹法观察各组小鼠海马区ERK蛋白表达状况。结果:慢性铅暴露对小鼠脑海马PKC-γ蛋白表达总体上呈现下降趋势,各染铅组中,PKC-γ蛋白表达与相应期对照组相比差异均有统计学意义(P<0.05)。低浓度铅2.4mmol/L使ERK表达升高,但此后随铅浓度升高ERK表达量逐渐降低,铅浓度升高至9.6mmol/L时随着铅浓度升高ERK表达量不再降低相反有所回升。结论:铅扰乱小鼠脑海马中PKC-γ及ERK蛋白正常表达。     

磷酸化细胞外信号调节激酶在卵巢浆液性癌中的表达和意义

目的研究卵巢浆液性癌组织中P—ERK的表达特点及与其发生发展的关系。方法采用免疫组织化学方法对56例卵巢浆液性肿瘤（其中良性卵巢浆液性肿瘤11例,交界性卵巢浆液性肿瘤12例,卵巢浆液性癌33例）和10例正常卵巢组织进行p—ERK蛋白检测。结果卵巢浆液性癌组织的过表达率为75．6％（25／33）,交界性卵巢浆液性肿瘤的过表达率为41．7％（5／12）,均明显高于正常卵巢组织和良性卵巢浆液性肿瘤,它们之间比较差异有统计学意义（P〈0．05）;卵巢浆液性癌组织过表达率高于交界性卵巢浆液性肿瘤（P〈0．05）;卵巢浆液性癌患者不同临床分期（Ⅰ／Ⅱ期与Ⅲ／Ⅳ期）、病理分级及有无腹水、有无淋巴结转移间比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论p—ERK与卵巢浆液性癌发生发展的生物学行为和预后可能有关,可作为重要的生物学标记物。     

细胞外信号调节激酶1/2信号转导通路与细胞凋亡的研究进展

细胞外信号调节激酶1/2(extracellular-signa1regulated kinase,ERK1/2)是广泛存在于真核细胞内的一类丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,属丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)家族成员.从信号转导角度看,活化后的ERK1/2作用于胞浆或胞核内的底物蛋白,引起特定蛋白的表达或活化,调控细胞的增殖、分化、凋亡等.目前关于ERK1/2信号通路在神经细胞凋亡的研究尚处在起步阶段.本文对ERK1/2信号转导通路在细胞凋亡中的作用机制进行综述.