IFN-β基因诱导裸鼠胶质瘤Fas表达上调及细胞调亡的实验研究

目的研究β干扰素基因对人脑胶质瘤的诱导凋亡作用,以及能否诱导胶质瘤细胞Fas表达上调,并探讨了β干扰素基因诱导细胞凋亡及Fas表达上调之间的联系.方法建立裸鼠SHG44胶质瘤模型,用脂质体包埋法将IFN-β基因的真核表达载体pSV2IFNβ注入裸鼠皮下SHG44脑胶质瘤,观察肿瘤生长情况并计算肿瘤体积,通过免疫组化、TUNEL染色,了解IFN-β基因诱导人脑胶质瘤细胞凋亡的作用以及胶质瘤细胞Fas表达情况.结果 IFN-β在荷瘤裸鼠瘤体内获得表达,裸鼠皮下胶质瘤生长受到抑制,并诱导SHG44胶质瘤细胞凋亡,胶质瘤细胞Fas表达明显高于对照组.结论 IFN-β基因能够抑制人脑胶质瘤生长,并诱导胶质瘤细胞凋亡;IFN-β基因诱导胶质瘤细胞凋亡可能是Fas表达上调的结果.     

外源性IFN-β基因对裸鼠SHG44胶质瘤的诱导凋亡研究

目的:探讨β干扰素基因对人脑胶质瘤的诱导凋亡作用,以及人β干扰素裸DNA治疗人脑胶质瘤的可行性和作用机制.方法:建立裸鼠SHG44胶质瘤模型,用脂质体包埋法将IFN-β基因的真核表达载体pSV2IFNβ注入裸鼠皮下SHG44脑胶质瘤,观察肿瘤生长情况并计算肿瘤体积,通过免疫组化、TUNEL染色以及电镜,了解IFN-β基因诱导人脑胶质瘤细胞凋亡的作用.结果:IFN-β在荷瘤裸鼠瘤体内获得表达,裸鼠皮下胶质瘤生长受到抑制,并诱导SHG44胶质瘤细胞凋亡.结论:IFN-β裸DNA能够抑制人脑胶质瘤生长并诱导胶质瘤细胞凋亡,该实验为IFN-β基因治疗人脑胶质瘤的应用奠定了初步基础.     

PTEN基因诱导人脑胶质瘤SHG-44细胞凋亡及bcl-2蛋白表达下调

目的　探讨PTEN基因对人脑胶质瘤SHG 44细胞凋亡及凋亡相关基因bcl 2表达的影响 ,阐明PTEN基因抑制肿瘤细胞增殖的机理。方法　PTEN基因体外转染SHG 44细胞 ,筛选阳性细胞克隆 ,以原位杂交、免疫组化方法检测PTEN基因的表达情况采用透射电镜、流式细胞仪和核DNA琼脂糖凝胶电泳检测细胞的凋亡情况以免疫荧光法检测bcl 2基因的表达。结果　PTEN基因转染的SHG 44细胞有PTEN基因和蛋白的表达。透射电镜下可见转染PTEN基因后细胞核染色质浓缩边集、胞浆浓缩、核碎裂及凋亡小体形成等典型的凋亡表现 ;流式细胞仪示细胞周期从G1 期到S期发生抑制 ,并且在G1 期峰前出现一明显的凋亡峰 (1 2 .9% ) ;细胞核DNA琼脂糖凝胶电泳呈现凋亡细胞特有的梯状条带 ;bcl 2的表达也显著下调。转染空载体和未转染的SHG 44细胞无明显的凋亡表现。结论　PTEN基因可诱导SHG 44细胞凋亡 ,并下调bcl 2蛋白的表达 ,这可能是PTEN基因抑制肿瘤细胞增殖的分子机制之一     

姜黄素对人脑胶质瘤细胞凋亡作用及其对Bcl-2与Caspase8诱导表达的影响

背景与目的:人脑胶质瘤是主要的颅内恶性肿瘤,其死亡率高且暂无有效的治疗和预防手段.姜黄素是从姜黄属植物根茎中提取的一种多酚类物质,前期研究发现其具有抗氧化、抗突变等药效.本研究中药姜黄素对人脑胶质瘤细胞SHG44中Bcl-2与Caspase 8差异性表达和促进其凋亡的分子机制.方法:体外培养人脑胶质瘤细胞SHG44:利用MTT比色法检测姜黄素对于SHG44的增殖抑制影响;利用流式细胞术(flowcytometry,FCM)分析药物处理前后SHG44的细胞周期变化;利用吖啶橙染色法鉴定药物处理前后SHG44形态学上的差异及凋亡程度;提取药物处理前后SHG44细胞总蛋白,利用Western印迹法检测Bcl-2与Caspase 8蛋白的表达情况.结果:姜黄素对SHG44细胞体外增殖抑制呈明显的剂量依赖性[IC50为(13.6±2.2)nmol/L,P<0.01];FCM分析SHG44细胞在姜黄素处理前后细胞周期均呈现明显的差异,并且药物组细胞表现为G0/G1期阻滞,其中药物组G0/G1>期比例为(57.2±0.8)%,空白对照组为(64.6+0.6)%,sub-G0峰明显(25.9±0.2)%(P<0.01).A0染色表明药物组细胞有明显凋亡迹象,并伴少量细胞坏死现象,而在阴性对照组中细胞形态完好.Western印迹法检测发现(13.6±2.2)nmol/L(IC50剂量)的姜黄素处理SHG44细胞前后,Caspase 8的表达量为(96±23)%明显高于对照组(P=0.001 3),而Bcl-2的表达量为(33±8)%,则低于对照组(P=0.001 4),提示药物组细胞有进入凋亡途径的现象.结论:中药姜黄素可以调控体外培养的人脑胶质瘤细胞SHG44的周期进程,诱导Bcl-2及Caspase 8的差异性表达,并且具有显著抑制肿瘤细胞增殖及促凋亡的作用.     

siRNA沉默β-catenin对人胶质瘤细胞系SHG44增殖和凋亡的作用

目的:探讨siRNA(small interferingRNA,siRNA)干扰β-catenin对人胶质瘤细胞系SHG44体外增殖和凋亡的影响。方法:利用脂质体将β-catenin siRNA干扰片段转染SHG44细胞,免疫印迹和免疫荧光共聚焦技术观察β-catenin表达及分布的变化;通过MTT法观察细胞增殖的变化;集落形成试验观察细胞增殖能力的改变;Annexin V/PI双染流式细胞术观察细胞凋亡情况。结果:β-catenin siRNA转染SHG44细胞可以有效抑制β-catenin的表达,并抑制其向核内的转移和聚集。与对照组相比,β-catenin siRNA转染组能够抑制细胞增殖,抑制细胞的集落形成能力,增加了细胞的凋亡,且均具有统计学意义,P<0.01。结论:通过β-catenin siRNA抑制SHG44细胞β-catenin的表达,可以抑制细胞增殖,促进其凋亡,表明β-catenin在胶质瘤的发生发展中发挥重要作用。     

白细胞介素24基因抑制体内胶质瘤生长的机制研究

目的:探讨人白细胞介素24(interleukin-24,IL-24)基因抑制胶质瘤生长的作用机制.方法:建立人胶质瘤裸鼠动物模型,瘤内注射含有IL-24基因的重组腺病毒Ad5F35-IL24,观察肿瘤生长情况, TUNEL 法检测肿瘤细胞凋亡率, Western印迹法检测肿瘤组织中IL-24、双链RNA激活的蛋白激酶(double-stranded RNA activated protein kinase,PKR)、p-PKR、p38-MAPK和p-p38-MAPK蛋白的表达情况.结果:Ad5F35-IL24重组腺病毒感染裸鼠胶质瘤组织后,IL-24蛋白呈现高表达,胶质瘤的生长受到明显抑制(P＜0.01);TUNEL法检测发现肿瘤细胞凋亡率明显升高(P＜0.05);Western印迹法检测发现Ad5F35-IL24感染后PKR和p38-MAPK的蛋白表达及其磷酸化均较对照组显著升高(P＜0.01).结论:IL-24具有抑制胶质瘤生长和诱导其细胞凋亡的作用,其机制与上调并激活PKR和p38-MAPK蛋白途径有关.     

周期蛋白依赖性激酶1在胶质瘤组织中的表达及其沉默对胶质瘤细胞恶性表型的影响

目的探讨周期蛋白依赖性激酶1(CDK1)在胶质瘤组织中的表达及其沉默对胶质瘤细胞恶性表型的影响。方法利用自建的人脑胶质瘤体外细胞系SHG44及其移植瘤组织、脑肿瘤干细胞、神经干细胞、不同恶性程度的胶质瘤手术标本构建组织芯片,免疫组化染色检测其CDK1蛋白表达;应用RNA干扰技术使CDK1在SHG44细胞及其移植瘤组织中沉默,观察其随后发生的表型变化。结果CDK1在临床标本中随胶质瘤恶性程度升高表达强度增加,Ⅰ-Ⅳ级的阳性表达率分别为22.2%、40.0%、69.6%和78.6%(P=0.01)。体外培养的人脑胶质瘤SHG44细胞球体和裸小鼠皮下移植瘤CDK1表达强度均较高,而神经干细胞和脑肿瘤干细胞球体表达强度低,在细胞增殖活性高的人胚胎脑组织和裸小鼠骨髓中CDK1亦高表达,但在正常成人脑组织低表达。C1和C3体外转染SHG44细胞后,将细胞周期阻滞在G2/M期,而且诱导了凋亡,细胞凋亡率分别上升至27.8%和36.5%。CDK1沉默的裸鼠皮下移植瘤瘤重明显降低,细胞凋亡率为57.1%,明显高于对照组(8.5%)。结论CDK1的高表达呵促进胶质瘤的发生和发展,CDK1沉默后的肿瘤细胞恶性表型可得到控制,CDK1可作为胶质瘤病因分子行进一步研究。     

靶向Survivin基因的短发卡RNA在体内对U251细胞移植瘤的影响

Surivin基因属于凋死蛋白抑制因子（inhibitor of apoptosis,IAP）家族，具有抗细胞凋亡、促细胞增殖和促血管形成等多种生物学活性，其在脑胶质瘤发生和发展过程中的作用尚不完全明确，本研究结盟在观察稳定转染靶向Survivin基因的特异性短发卡RNA（shRNA）真核表达载体对人脑胶质母细胞瘤U251细胞裸鼠体内肿瘤生长和血管形成的影响。方法：将U251细胞，稳定转染Survivin基因shRNA真核表达载体pWHI-SR的U251-SR细胞，以及稳定转染空载体pWHI的U251-P细胞，分别接种于裸鼠背部皮下，建立人脑胶质瘤裸鼠皮下移植瘤模型，定期观察肿瘤生长情况，测定肿瘤体积、绘制肿瘤生长曲线，观察45天后处死动物、称瘤重，采用免疫组化SABC法检测Survivin、增殖细胞核抗原（proliferating cell muclear antigen，PCNA）以及八因子相关抗原（factor Ⅷ related antigen,FⅧRAg）在各组肿瘤标本中的表达，采用TUNEL法检测凋亡细胞，分别计算各组肿瘤标本的增殖指数（proliferative index,PI），凋亡指数（apoptotie index,AI）以及微血管密度（microvessel density,MVD）。结果：与U251、U251-SR组肿瘤标本，U251-SR组裸鼠肿瘤形成时间延迟，肿瘤生长缓慢，肿瘤体积及瘤重均明显减小（P〈0.01）；U251-P组裸鼠相丝，U251-SR组肿瘤标本Survivin蛋白表达明显下调：PI和MVD明显减少，AI明显升高（P〈0.001）。结论：靶向Survivin基因的sbRNA能够在体内明显抑制U251细胞的肿瘤生长和血管形成，Survivn基因可作为脑胶质瘤基因治疗的一个良好靶点，而RNA干涉（RNA interference,RNAi）技术可为脑胶瘤基因治疗的一个良好靶点，而RNA干涉（RNA interference，RNAi）技术可为脑胶质瘤的基因治疗提供新的重点手段。     

依曲替酸诱导皮肤鳞状细胞癌细胞系SCL-1凋亡及其机制的初步研究

目的:探讨依曲替酸通过上调Fas基因表达诱导皮肤鳞状细胞癌(鳞癌)细胞系SCL-1细胞凋亡的作用.方法:以体外培养的人皮肤鳞癌细胞系SCL-1为研究时象,MTT法观察依曲替酸对SCL-1细胞的生长抑制作用,AnnxinV-FITC/PI法检测早期凋亡,流式细胞仪检测细胞膜表面Fas的表达情况,实时荧光定量RT-PCR方法检测Fas mRNA的表达.结果:依曲替酸能显著抑制SCL-1细胞的生长,并具有浓度及时问依赖性.浓度为1×10-5mol/L的依曲替酸能诱导凋亡,上调细胞膜表面Fas表达水平及Fas mRNA水平.结论:依曲替酸能抑制皮肤鳞癌细胞生长及诱导凋亡,上调Fas抗原表达可能是其分子机制之一.     

顺铂增加人脑胶质瘤细胞U251对TRAIL敏感性的实验研究

目的 研究顺铂在增加人脑胶质瘤细胞U251对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)敏感性的作用,并探讨其分子机制.方法 通过倒置荧光显微镜下观察重组腺病毒载体携带的绿色荧光蛋白的表达确定最适感染复数MOI;运用MTT法检测细胞增殖活性;倒置荧光显微镜下观察Hoechst33342染色细胞凋亡形态;PI染色后通过流式细胞术检测诱导凋亡作用,RT-PCR法检测凋亡相关基因.结果 感染后TRAIL基因的表达明显上调.顺铂增敏TRAIL组与单独组相比,有显著抑制细胞增殖作用(P<0.05),Hoechst33342染色观察有明显的核固缩,核碎裂.流式细胞术检测细胞有凋亡峰的出现,增敏组与单独组有显著性差异(P<0.05).RT-PCR检测到TRAIL、DB5、caspase-3基因上调,survivin基因下调,DB4表达无明显变化.结论 顺铂可以增加人脑胶质瘤细胞U251对TRAIL的敏感性,其分子机制可能与DR5、caspase-3基因上调,survivin基因下调有关.     

VES诱导HER-2高表达乳腺癌细胞MDA-MB-453凋亡及其与Fas及TGF-β 1表达的相关性分析

目的:研究维生素E琥珀酸酯(VES)诱导HER-2高表达乳腺癌细胞MDA-MB-453凋亡,以及Fas和TGF-β1表达的变化.方法:MTT法和Anhexin V法分别用于检测不同浓度VES处理人乳腺癌MDA-MB-453细胞后生长情况和细胞凋亡情况,流式细胞术检测凋亡率;免疫组化比较凋亡前后Fas及TGF-β1表达变化.结果:不同浓度VES处理的细胞在不同时阃均受到不同程度的抑制,随VES剂量的增加,抑制作用增强.其中20 mg/LVES处理组在24 h后受到明显抑制,第4天抑制率即接近100%;10 mg/L VES处理组7 d后细胞生长被抑制89.87%.经VES处理后,Fas及TGF-β1表达率差异有统计学意义,P<0.001.结论:VES可诱导 HER-2 高表这乳腺癌细胞MDA-MB-453凋亡,其机制可能与Fas和TGF-β1上调有关.     

探讨bcl-2下调后对胶质瘤细胞系的增殖、凋亡和侵袭能力的影响

目的 研究下调bcl-2基因表达后对神经胶质瘤细胞增殖、凋亡和侵袭能力的影响。方法 利用小分子RNA干扰（Small interfering RNA,siRNA）技术人工合成bcl-2靶向siRNA,转染神经胶质瘤细胞系SHG44和TJ905细胞,特异性沉默神经胶质瘤细胞SHG44和TJ905细胞bcl-2基因表达。通过蛋白质印迹（Western blot）分析、噻唑蓝（MTT）实验、Transwell实验和流式细胞仪（FCM）检测,观察bcl-2 siRNA对转染细胞bcl-2基因抑制效果、增殖能力的变化、侵袭能力的改变和细胞凋亡的影响。结果 bcl-2 siRNA可特异性下调神经胶质瘤细胞系SHG44和TJ905细胞bcl-2基因表达。bcl-2下调的神经胶质瘤细胞增殖能力在不同时间点都受到抑制,侵袭能力也明显下降,但实验中未见细胞明显凋亡。结论 下调bcl-2基因表达可有效抑制神经胶质瘤细胞生长,降低细胞增殖和侵袭能力。     

米非司酮对子宫内膜癌裸鼠移植瘤细胞凋亡调控的研究

目的探讨抗孕激素米非司酮对人子宫内膜癌HHUA细胞裸鼠移植瘤细胞凋亡的调控作用。方法体外培养人子宫内膜癌HHUA细胞,裸鼠皮下接种HHUA细胞建立裸鼠移植瘤动物模型,随机分为2组,分别应用米非司酮、精制花生油治疗4周,应用流式细胞术(FCM)检测各组裸鼠移植瘤细胞周期时相和凋亡率;免疫组化技术检测凋亡基因bcl2、Fas和FasL蛋白的表达情况。结果米非司酮治疗组裸鼠移植瘤细胞G0/G1期比例升高,S期细胞比例(SPF)降低(P<0.05),移植瘤细胞凋亡率为15.03%±2.19%,明显高于对照组(3.06%±1.13%)(P<0.01);移植瘤细胞bcl2蛋白表达水平明显下降,而Fas蛋白表达水平升高,与对照组比较,均有显著性差异(P<0.05)。结论抗孕激素米非司酮通过调节移植瘤细胞周期分布和凋亡基因,抑制肿瘤细胞增殖,诱导细胞凋亡。     

血管抑素抑制胶质瘤的实验研究

背景与目的:近年来血管抑素在胶质瘤治疗中的意义倍受关注。本研究探讨血管抑素重组表达质粒对裸鼠皮下胶质瘤血管生成、细胞凋亡和肿瘤生长的影响,以寻求治疗胶质瘤的有效方法。方法:取Balb/c裸小鼠22只,建立裸鼠皮下胶质瘤模型,6～9天左右皮下肿瘤平均直径达到4mm,随机分为对照组和As治疗组,每组11只,分别注入100μl纯化pcDNA3和As重组质粒,注射2天后各组随机取5只处死取肿瘤作检测。分别做HE染色,As蛋白免疫组化染色,并行血管内皮细胞标记物CD31检测,观察肿瘤血管化的情况,并行TUNEL法检测肿瘤细胞的凋亡。剩余每组6只每隔3天测量肿瘤长、短径,绘制肿瘤生长曲线图。结果:As基因治疗可抑制肿瘤的生长,对照组基因注射后15天肿瘤体积为(1519.88±256.54)mm3,As治疗组肿瘤体积为(1148.03±191.51)mm3,两者差异有显著性(P<0.05)。As治疗组与对照组相比血管密度明显减小。两组凋亡指数差异亦有显著性(P<0.05),凋亡细胞集中在肿瘤坏死区周围,细胞核固缩呈圆形或椭圆形团块,典型者染色质呈新月形或蚕豆状浓染。结论:As具有抑制血管生成的作用,并可诱导肿瘤细胞的凋亡,对裸鼠皮下胶质瘤的生长具有延缓作用。     

VES诱导HER-2高表达乳腺癌细胞MDA-MB-453凋亡及其与Fas及TGF-β1表达的相关性分析

目的：研究维生素E琥珀酸酯（VES）诱导HER-2高表达乳腺癌细胞MDA-MB-453凋亡,以及Fas和TGF-β1表达的变化。方法：MTT法和Annexin V法分别用于检测不同浓度VES处理人乳腺癌MDA-MB-453细胞后生长情况和细胞凋亡情况,流式细胞术检测凋亡率;免疫组化比较凋亡前后Fas及TGF-β1表达变化。结果：不同浓度VES处理的细胞在不同时间均受到不同程度的抑制,随VES剂量的增加,抑制作用增强。其中20 mg/LVES处理组在24 h后受到明显抑制,第4天抑制率即接近100%;10 mg/L VES处理组7 d后细胞生长被抑制89.87%。经VES处理后,Fas及TGF-β1表达率差异有统计学意义,P〈0.001。结论：VES可诱导HER-2高表达乳腺癌细胞MDA-MB-453凋亡,其机制可能与Fas和TGF-β1上调有关。     

反义microRNA-221与反义microRNA-222抑制人脑胶质瘤细胞的体外与体内生长

目的 探讨敲低microRNA(miR)-221和miR-222表达以抑制人脑胶质瘤U251细胞生长的作用及其机制.方法 脂质体介导转染反义寡聚核苷酸(AS-miR-221和AS-miR-222)于人脑胶质瘤细胞U251.采用Northern blot鉴定转染后U251细胞的miR-221和miR-222表达水平;四甲基偶氮唑蓝(MTT)法评价AS-miR-221和AS-miR-222抑制U251细胞生长的作用;Transwell实验检测细胞侵袭能力;流式细胞术检测细胞周期的分布和凋亡;Western blot检测转染后U251细胞相关蛋白表达的变化,并用AS-miR-221和AS-miR-222治疗裸鼠皮下移植瘤,观察其在活体内对肿瘤生长的抑制作用.结果 Northern blot检测结果 显示,AS-miR-221和AS-miR-222共转染后,肿瘤细胞miR-221和miR-222表达明显下降,细胞生长速度降低,细胞穿过率为14.5%,细胞周期出现G0/G1期阻滞,凋亡率(13.7%)增高,并可见connexin43、p27、PUMA、caspase-3、PTEN、TIMP3和Bax等相关蛋白表达增高,而bcl-2表达降低,p53无明显变化.经AS-miR-221和AS-miR-222治疗后,裸鼠皮下移植瘤生长明显受抑.结论 AS-miR-221和AS-miR-222共转染可抑制U251细胞的增殖与侵袭,miR-221和miR-222可以作为人脑胶质瘤基因治疗的侯选靶点.     

IL-23基因转染小鼠乳腺癌细胞的体内外促凋亡作用研究

目的:将小鼠IL-23基因转染小鼠乳腺癌细胞MA-891,检测该细胞在体内外的凋亡变化,探讨IL-23抗肿瘤作用机制.方法:应用逆转录病毒载体(LXSN)将含 IL-23 基因质粒经ψ2(亲嗜性)和PA317(双嗜性) 2种细胞包装,G418筛选获得携带 IL-23 基因的病毒,后者转染MA-891细胞,经G418筛选后获得IL-23/MA-891阳性克隆.用ELISA法检测IL 23/MA-891细胞分泌IL-23的能力,用MTT比色法检测细胞体外增殖能力.小鼠皮下接种转染IL-23/MA-891细胞,观察其体内致瘤性变化;用流式细胞术及TUNEL法检测肿瘤细胞凋亡情况;用RT-PCR和Western 印迹法检测肿瘤组织Fas和survivin的表达.结果: IL-23 基因成功转染MA-891细胞,获得了IL-23高表达细胞IL-23/MA-891.转染 IL-23 基因不影响MA-891细胞的体外生长和细胞凋亡,但体内 IL-23 基因转染组肿瘤生长明显受到抑制,肿瘤组织细胞凋亡率增高( P <0.01),细胞表面Fas的表达水平明显增加( P <0.01),survivin表达水平明显降低( P <0.01).结论:转染小鼠 IL-23 基因后对小鼠乳腺癌细胞MA-891的体外凋亡无影响,但在体内 IL-23 可能通过降低survivin表达和上调Fas表达,诱导细胞凋亡而产生抗肿瘤作用.     

雷公藤红素对荷SHG44胶质瘤裸鼠的抑瘤试验

背景与目的：胶质瘤是颅内常见恶性肿瘤，治疗效果一直不令人满意，本文探讨雷公藤红素治疗人脑胶质瘤的丌丁行性。方法：建立BALB／c裸小鼠SHG-44胶质瘤同种移植动物模型，将34只荷瘤裸鼠随机分为5组，空白对照组、高、中、低剂量雷公藤红素作用组、阳性对照组，采用腹腔内注射给药方法。雷公藤红素按三种浓度4mg／kg、2mg／kg、1mg／kg分组给药，每日1次，每周5天；阳性对照顺铂组按2mg／kg给药，每周两次；空白对照组只喂养不做任何处理。共给药四周。全部荷SHG44胶质瘤裸鼠于给药后第28天断颈处死并剔出肿瘤，将肿瘤组织分块处置。定期观察肿瘤生长情况测量肿瘤体积，绘制肿瘤生长曲线并计算抑瘤率。结果：5组荷SHG44胶质瘤裸鼠的移植瘤体积（处死后测量）比较，差异显著（F=5．519，P=0．002）；与空白对照组相比。雷公藤红素4mg／kg组、雷公藤红素2mg／kg组均能抑制肿瘤生长（P〈0．05），其体积抑瘤率分别为35％、26．9％。结论：雷公藤红素能明显抑制荷SHG44胶质瘤裸鼠的移植瘤生长，并存在剂量依赖性。     

干扰素-β对不同胶质瘤细胞系的生长抑制及对其他细胞因子表达调节作用的研究

目的:研究干扰素β(IFNβ)对胶质瘤细胞系的生长抑制和诱导凋亡作用,及其对细胞因子表达的调节作用。方法:分别用IFNβ基因和蛋白刺激胶质瘤细胞系SKMG1和T98,通过MTT方法检测细胞增殖情况,运用流式细胞技术检测细胞凋亡情况,用实时定量PCR法检测细胞因子的表达变化。结果:IFNβ基因和蛋白可明显抑制SKMG1细胞增殖,诱发细胞凋亡,但对T98细胞系的作用很弱。SKMG1细胞的对照组不能检测出白细胞介素1β(IL1β)的表达,在48h达到42.8±8.3;肿瘤坏死因子α(TNFα)在IFNβ基因刺激后24h其表达达到10±2.1,P=0.001;IFNβ基因刺激后白细胞介素IL6的表达在12h一过性降低(0.2±0.1),P=0.001,在48h其表达升高(9.7±1.3),P=0.000。T98细胞的对照组不能检测出肿瘤坏死因子α(TNFα)的表达,在刺激48h达到5.7±2.7;白细胞介素1β(IL1β)在IFNβ基因刺激后12h表达达到6.8±1.1,P=0.002;白细胞介素6(IL6)表达在IFNβ基因刺激后,24h升高(2.8±0.4),P=0.030。结论:IFNβ基因和蛋白可以抑制胶质瘤细胞的增殖,诱发细胞的凋亡,可以调节其他细胞因子的表达。但是在不同的细胞系中有不同作用。