LY294002对胃癌细胞株生长增殖及侵袭能力的影响

目的探讨LY294002（P13K／Akt信号通路特异性阻断剂）对胃癌细胞生长增殖、凋亡和侵袭转移的影响。方法采用不同浓度LY294002处理胃癌AGs细胞,MTT法检测胃癌AGS细胞经LY294002作用后生存率的变化;流式细胞术检测细胞周期和凋亡的变化;TransweU实验和划痕实验分析细胞侵袭、转移能力的改变。结果MTT法显示一定浓度的LY294002可抑制AGS细胞生长,并随着浓度的增加和作用时间的延长而明显增强（P〈0．05）。流式细胞术显示AGS细胞经LY294002作用48h后,细胞周期阻滞于G1期,G1期细胞比例上升,S期细胞比例下降,细胞有明显凋亡,并呈现浓度依赖性（p〈0．05）。Transwell试验和划痕试验显示AGS细胞经LY29400作用后,其侵袭和转移的能力受到抑制。结论LY294002可抑制胃癌AGS细胞的生长增殖,且呈时间和剂量的依赖性,其机制可能是阻滞细胞周期及诱导细胞凋亡;LY294002可抑制胃癌AGS细胞的侵袭和转移能力。     

CD40配体激活抑制胃癌细胞生长机制的实验研究

目的 探讨CD40配体激活对胃癌细胞生长、增殖和凋亡的影响。方法MTT法检测不同浓度sCD40L作用后AGS胃癌细胞株存活率，选定最佳干预浓度；流式细胞术检测sCD40L最佳干预浓度作用后胃癌细胞株AGS、BGC-823细胞周期和凋亡的变化。结果sCD40L的最佳干预浓度为2μg／ml；与胃癌细胞株AGS、BGC-823共育48h，sCD40L可使高表达CD40的AGS细胞生长抑制，细胞周期阻滞在G1期。而对CD40低表达的BGC-823细胞生长无明显影响，并且AGS、BGC-823细胞均无明显的凋亡变化。结论sCD40L可明显抑制CD40高表达胃癌细胞的生长。其机制是使细胞周期阻滞。     

CD40配体激活抑制胃癌细胞生长机制的实验研究

目的 探讨CD40配体激活对胃癌细胞生长、增殖和凋亡的影响。方法 MTT检测不同浓度sCD40L作用后AGS胃癌细胞株存活率，选定最佳干预浓度：流式细胞术检测sCD40L最佳干预浓度作用后胃癌细胞株AGS、BGC-823细胞周期和凋亡的变化。结果 sCD40L的最佳干预浓度为2μg／ml；与胃癌细胞株AGS、BGC-823共育48h，sCD40L可使高表达CD40的AGS细胞生长抑制，细胞周期阻滞在G1期，而对CD40低表达的BGC-823细胞生长无明显影响，并且AGS、BGC-823细胞均无明显的凋亡变化。结论 sCD40L可明显抑制CD40高表达胃癌细胞的生长，其机制是使细胞周期阻滞。     

汉黄芩素体外对胃癌SGC-7901细胞增殖、迁移和侵袭的实验性研究

目的探讨汉黄芩素对胃癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响以及可能分子机制。方法不同浓度(20、50、100μmol/L)汉黄芩素分别作用于人胃癌SGC7901细胞24、48、72 h,空白对照不进行任何处理。采用MTT法检测细胞增殖能力;采用划痕实验观察细胞迁移能力;采用Transwell法观察细胞侵袭能力;采用流式细胞仪检测细胞周期与凋亡情况; RT-qPCR和Western blot分别对细胞基质金属蛋白酶2、9(MMP2、MMP9)、细胞间黏附分子-1(ICAM-1)以及金属蛋白酶抑制剂2(TIMP2)的mRNA和蛋白表达水平进行检测。结果 MTT实验结果显示,不同浓度的汉黄芩素抑制人胃癌SGC7901细胞呈浓度和时间依赖性;作用48 h后,汉黄芩素s期比例上升,诱导细胞凋亡(P0. 05); Transwell实验结果显示,汉黄芩素呈浓度依赖性抑制人胃癌SGC7901细胞侵袭; RTq PCR和Western blot检测结果显示,汉黄芩素能够抑制SGC7901细胞中ICAM-1、MMP9、MMP2的mRNA和蛋白表达水平,但上调TIMP2 mRNA和蛋白表达(P0. 05)。结论汉黄芩素能够抑制人胃癌SGC7901细胞增殖、迁移和侵袭,阻滞细胞在S周期,诱导其凋亡。     

当归贝母苦参丸含药血清对胃癌细胞SGC-7901侵袭转移能力和周期的影响

目的:探讨不同浓度的当归贝母苦参丸含药血清抑制胃癌SGC-7901、MKN-45细胞增殖作用及其相关机制。方法:不同浓度含药血清处理SGC-7901细胞后,(1)MTT法测定细胞活力;(2)流式细胞术检测细胞周期;(3)Transwell侵袭实验及划痕实验观察侵袭能力和转移能力。结果:不同浓度的当归贝母苦参丸含药血清均能抑制细胞增殖,在10%浓度时抑制作用达最大值;侵袭及划痕实验示:含药血清干预后细胞侵袭及转移能力减弱;流式细胞术检测显示:含药血清干预后细胞S期比例下降,G0~G1期比例上升。结论:当归贝母苦参丸含药血清可以抑制SGC-7901细胞增殖,减弱其侵袭转移能力,其机制可能与其干预细胞周期有关。     

珍珠舌草胶囊全方对胃癌细胞增殖与凋亡的影响及机制研究

目的 珍珠舌草胶囊是对慢性萎缩性胃炎癌前病变具有良好临床疗效的中药复方制剂。通过珍珠舌草胶囊干预胃癌AGS细胞,观察其对细胞增殖和凋亡的影响,并对可能的作用机制进行初步探究,从而证实珍珠舌草胶囊的抗肿瘤活性,为临床更好地应用珍珠舌草胶囊提供理论和实验依据。方法 应用MTT法检测珍珠舌草胶囊对胃癌AGS细胞生长的影响;应用流式细胞仪检测药物对胃癌AGS细胞周期和凋亡的影响;比色法测定肿瘤细胞中Caspase-3活性水平;药物干预期间观察细胞数量及形态变化。结果 珍珠舌草胶囊全方能显著抑制胃癌细胞AGS的生长,并呈剂量和时间依赖性;阻滞细胞周期于G2/M期,明显促进胃癌细胞凋亡,上调Caspase-3的活性水平。结论 珍珠舌草胶囊全方能够抑制AGS细胞增殖,阻滞细胞周期于G2/M期,促进细胞凋亡,促凋亡作用可能通过提高Caspase-3的活性实现。     

鸦胆子油乳注射液对喉癌Hep-2细胞抑制作用研究

目的 探讨鸦胆子油乳注射液对喉癌Hep-2细胞增殖活性、凋亡水平、细胞周期及侵袭迁移的影响.方法 不同浓度鸦胆子油乳注射液作用Hep-2细胞后,利用MTT法检测鸦胆子油乳注射液作用后细胞增殖抑制情况;利用Hoechst33258观察细胞的凋亡现象;流式细胞仪检测分析细胞周期分布、凋亡情况;Transwell实验分析细胞侵袭迁移能力的变化情况.结果 经鸦胆子油乳注射液处理后,Hep-2细胞的增殖能力明显受到抑制(P＜0.05),且在一定浓度范围内,呈时间和剂量依赖性;细胞核出现致密的固缩形态及颗粒状荧光,鸦胆子油乳注射液诱导了细胞凋亡;细胞周期都被阻滞在G2/M期;鸦胆子油乳注射液呈剂量依赖性的抑制Hep-2细胞侵袭迁移能力(P＜0.05).结论 鸦胆子油乳注射液可抑制喉癌Hep-2细胞的增殖及侵袭迁移能力,可能与其引起肿瘤细胞周期阻滞,诱导细胞凋亡有关.     

姜黄素通过上皮-间质转化过程对口腔鳞癌细胞株HN4侵袭转移的影响

旨在探讨姜黄素对口腔鳞癌细胞株HN4 的增殖、侵袭和凋亡效应及其分子机制。方法0～60μmol/L 姜黄素作用于口腔鳞癌细胞株HN4,24 h后应用MTT 法检测细胞的生长活性;划痕实验检测细胞迁移作用;Transwell 实验测定对细胞的侵袭作用;流式细胞仪检测细胞凋亡;Western blot测定P53、E-cadherin和Snail 蛋白表达水平。结果MTT 检测结果显示各浓度姜黄素对癌细胞生长有抑制,其中,20μmol/L姜黄素有明显抑制。随着姜黄素浓度的增加,对细胞凋亡有明显作用。姜黄素处理后细胞周期生长阻滞于G0/G1期。Snail的蛋白表达量随着姜黄素的浓度增加而减少。P53 和E-cadherin的表达量随着姜黄素的浓度增加而增加。结论姜黄素能显著抑制口腔鳞癌细胞株HN4 的体外生长,上调P53 蛋白表达诱导细胞凋亡可能是其作用机制之一。     

双氢青蒿素促胃癌细胞凋亡的作用

目的 研究双氢青蒿素(dihydroartemisinin,DHA)对人胃癌细胞(SGC-7901、HGC-27)生长抑制和促凋亡的作用.方法 用WST-1方法检测DHA处理后的胃癌细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞周期和凋亡情况,细胞划痕实验检测细胞的迁移能力.结果 不同浓度的DHA可以抑制胃癌细胞(SGC-7901、HGC-27)的增殖,且呈现浓度依赖性增长趋势.DHA作用48 h后,胃癌细胞的周期阻滞在S期,同时有诱导胃癌细胞凋亡的作用;DHA作用24 h和48 h后,对胃癌细胞的迁移能力有抑制作用.结论 DHA可有效地抑制胃癌细胞的增殖,并促进其凋亡.     

小檗碱对胃癌AGS细胞增殖和凋亡影响的初步研究

目的初步探讨小檗碱对胃癌细胞系AGS细胞增殖和凋亡的影响。方法采用MTT的方法检测不同浓度小檗碱作用48h后对AGS细胞的抑制率,并计算半抑制浓度（50％inhibitingcon—centration,IC50）值;采用流式细胞技术检测不同浓度小檗碱作用48h后胃癌细胞系AGS凋亡的发生率和细胞周期的变化。结果小檗碱对胃癌细胞AGS生长的抑制作用呈现出剂量依赖性,48hIC。。为39．15umol／L。IC50浓度小檗碱干预48h后,AGS凋亡率发生率明显增加,与对照组比较差异有统计学意义（23．18％±3．47％vs10．05％±2．96％,P〈0．05）;IC50浓度的小檗碱作用后,AGS胃癌细胞GO／G1期细胞比例较对照组明显升高,两组比较差异具有统计学意义（P〈0．05）,而S期细胞及G2／M期比例减少,但无明显统计学意义。结论小檗碱对胃癌细胞系AGS细胞具有浓度依赖性的抑制作用,抑制作用与阻滞细胞周期于G0／G1期有关,其作用机制可能与抑制DNA合成和诱导凋亡有关。     

莪术醇对人卵巢癌SKOV3细胞增殖、迁移、侵袭及凋亡的影响

目的：探讨莪术醇对人卵巢癌SKOV3细胞增殖、迁移、侵袭及凋亡的影响。方法：采用CCK-8法检测不同浓度（5、10、25、50、100 μmol/L）莪术醇,0 μmol/L莪术醇为对照组,干预SKOV3细胞24 h、48 h的增殖抑制率,并计算IC50值;划痕实验和Transwell小室法分别检测细胞的迁移和侵袭能力,流式细胞术检测细胞凋亡率;Western blot法检测莪术醇及PI3K/AKT通路阻断剂LY294002对细胞PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT蛋白表达的影响。结果：莪术醇对SKOV3细胞的增殖有明显抑制作用,呈浓度依赖性但不呈现时间依赖性,IC50值为48 μmol/L;莪术醇能明显抑制SKOV3细胞的迁移与侵袭,促进其凋亡（均P＜0.01）,降低细胞PI3K、AKT总蛋白表达（均P＜0.05）,显著降低其活化形式p-PI3K、p-AKT的表达（均P＜0.01）;莪术醇与LY294002联用后表现出良好的协同作用,较单独用莪术醇时下调p-PI3K、p-AKT蛋白更为显著（P＜0.05）。结论：莪术醇能抑制SKOV3细胞增殖、迁移及侵袭,并诱导其凋亡,其作用机制与抑制PI3K/AKT通路有关。     

巨噬细胞移动抑制因子（MIF）对血管内皮细胞增殖、迁移的调控作用

目的明确氧化低密度脂蛋白（OX-LDL）对血管内皮细胞中巨噬细胞移动抑制因子（MIF）表达的调控作用,检测MIF对血管内皮细胞增殖、迁移的可能调控作用。方法用不同剂量的OX-LDL处理人脐静脉血管内皮细胞（HUVECs）,Western-blot检测MIF蛋白的表达。利用腺病毒介导MIF在HUVECs中的表达,分别通过Trans-well细胞穿膜实验和细胞划痕实验检测MIF对HUVECs迁移的调控作用。分别通过EdU染色、MTr细胞增殖检测和流式细胞术检测细胞周期,分析MIF对HUVECs增殖的影响。用荧光定量PCR检测MIF对HUVECs中MMP2和CXCR4表达的影响。结果Ox-LDL可特异调控HUVECs中MIF的表达。Trans-well细胞穿膜实验和细胞划痕实验表明,利用腺病毒介导MIF高表达可显著抑制I-IUVECs的迁移。EdU染色、M1Tr和细胞周期检测结果显示MIF对HUVECs增殖无明显作用。定量PCR结果显示过表达MIF可显著抑制HUVECs中CXCR4的表达（P〈0．01）。结论MIF通过降低CXCR4表达来抑制血管内皮细胞的迁移,但对血管内皮细胞的增殖没有影响。     

氯化两面针碱对前列腺癌细胞PC-3增殖与凋亡的影响

目的 探讨氯化两面针碱对前列腺癌细胞PC-3增殖及凋亡的影响作用。方法 采用MTT、细胞划痕和Transwell侵袭实验评估氯化两面针碱对人前列腺癌细胞PC-3增殖与侵袭的影响;流式细胞术检测氯化两面针碱对PC-3细胞凋亡的影响;免疫印迹检测AKT/mTOR及细胞凋亡蛋白B细胞淋巴瘤基因-2相关X蛋白(Bax)和B细胞淋巴瘤基因-2(Bcl-2)的表达,应用PI3K通路抑制剂LY294002探讨抑制AKT通路对前列腺癌细胞PC-3的影响。结果 氯化两面针碱能抑制PC-3细胞的增殖与侵袭,且具有剂量依赖性(P<0.01)。氯化两面针碱可下调Bcl-2、而上调Bax的蛋白表达,Bax/Bcl-2比例明显上升(P<0.01),抑制AKT和mTOR通路的磷酸化,诱导前列腺癌细胞PC-3凋亡。联合应用LY294002发现,抑制AKT通路可增强氯化两面针碱对前列腺癌细胞PC-3增殖和侵袭的抑制作用。结论 氯化两面针碱能够抑制前列腺癌细胞PC-3的增殖与侵袭,诱导其凋亡,并通过抑制AKT/mTOR磷酸化发挥其抗前列腺癌作用,可作为一种潜在治疗前列腺癌的药物。     

人参皂苷Rh2通过调控GSK-3β/Wnt双信号通路影响骨肉瘤细胞增殖和凋亡

目的：探讨人参皂苷Rh2（Rh2）对骨肉瘤细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响,并进一步研究Rh2在骨肉瘤中抗肿瘤作用的机制。方法：分别以不同浓度的Rh2 处理骨肉瘤细胞,用MTT法检测骨肉瘤细胞活性的变化;用基质凝胶（Matrigel）侵袭和孔膜法（Transwell）迁移实验检测骨肉瘤细胞的侵袭和迁移能力的变化;用Annexin V-FITC/PI调亡检测试剂盒及流式细胞仪检测骨肉瘤细胞的调亡变化;用Western blot法检测细胞侵袭、凋亡相关蛋白的表达情况。结果：骨肉瘤细胞经过不同浓度的Rh2处理后,MTT实验结果表明Rh2在一定浓度范围内可以显著抑制骨肉瘤细胞的生长（P ＜0.05）。Matrigel侵袭和Transwell迁移实验结果表明Rh2可以有效抑制骨肉瘤细胞的侵袭与迁移（P ＜0.05）。Annexinv-FITC/PI凋亡检测试剂盒及流式细胞仪检测结果表明,Rh2可以促进骨肉瘤细胞的凋亡反应（P ＜0.05）。Western blot实验结果则显示Rh2 可以上调Bax、E-cadherin蛋白的表达,并抑制Bcl-2、PARP、MMP2、MMP9 蛋白的表达。Rh2 还可以通过激活GSK-3β并抑制β-catenin、Cyclin D1和C-myc相关蛋白来达到调控骨肉瘤细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭反应的作用。结论：Rh2可以抑制骨肉瘤细胞的增殖并诱导其凋亡,这种作用可能是通过激活GSK-3β并抑制Wnt/β-catenin信号通路来实现的。     

EGFR单链抗体-力达霉素融合蛋白抑制人乳腺癌MCF-7细胞增殖与侵袭的研究

目的 研究EGFR单链抗体-力达霉素融合蛋白ER（Fv-LDP-AE）对人乳腺癌MCF-7细胞增殖和侵袭的抑制作用,探讨其作用机制.方法 采用噻唑蓝（MTT）法测定ER（Fv-LDP-AE）对MCF-7细胞增殖的影响.流式细胞术、Hoechst 染色和Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞周期的变化以及细胞凋亡.Transwell实验测定ER（Fv-LDP-AE）对MCF-7细胞迁移和侵袭的影响.采用RT-PCR检测细胞EGFR mRNA的表达水平,Western blot分析ER（Fv-LDP-AE）对EGFR细胞信号通路的影响.明胶酶谱实验测定细胞基质金属蛋白酶（MMPs）的活性.结果 ER（Fv-LDP-AE）能显著抑制MCF-7细胞的体外增殖,其半数抑制浓度（IC50）为1.5 x10-12 mol/L.ER（Fv-LDP-AE）可引起细胞周期G2/M期阻滞,诱导细胞凋亡,抑制细胞的迁移和侵袭,阻碍EGFR的表达,干扰EGFR细胞信号通路,降低MMPs的活性.结论 ER（Fv-LDP-AE）通过抑制EGFR及其细胞信号通路、干扰细胞周期循环和诱导细胞凋亡,抑制乳腺癌MCF-7细胞的体外增殖,通过降低迁移能力和调节MMPs活性,阻碍肿瘤细胞的侵袭转移.     

4’O-甲基补脂查尔酮B的体外抗胃癌活性

目的：研究4’O-甲基补脂查尔酮B的体外抗胃癌活性。方法：4’O-甲基补脂查尔酮B孵育胃癌细胞系AGS后,采用MTT和集落克隆形成实验检测细胞生长,划痕实验检测细胞迁移,流式细胞实验检测细胞周期和凋亡,Western blot实验检测双特异性酪氨酸磷酸化调节激酶1A（DYRK1A）蛋白表达。结果：4’O-甲基补脂查尔酮B对胃癌细胞AGS的IC50为（7.7±1.3）μmol/L,并能浓度依赖性地抑制集落克隆形成以及抑制迁移,诱导周期阻滞及凋亡,并抑制DYRK1A的表达（P ＜0.05）。结论：4’-O-甲基补骨脂查尔酮B能够通过抑制DYRK1A产生显著的体外抗胃癌活性。     

黏蛋白1C亚基对食管癌细胞生物学行为的影响

目的 探讨黏蛋白1 C亚基(MUC1-C)在食管鳞癌中的表达定位及在肿瘤细胞恶性生物学行为中的作用。 方法 Western blotting检测MUC1-C在食管鳞癌组织及正常组织细胞核内的表达;运用穿膜肽Go-201抑制MUC1-C入核后,集落实验及CCK-8实验检测食管鳞癌细胞的活性、生长和增殖能力;划痕实验及Transwell小室实验检测食管鳞癌细胞迁移及侵袭能力;流式细胞术检测食管鳞癌细胞凋亡率。 结果 MUC1-C在食管鳞癌组织细胞核内的表达高于正常组织,抑制MUC1-C入核后食管鳞癌细胞活性、生长、增殖、迁移、侵袭能力均降低,凋亡率增高。 结论 MUC1-C通过入核发挥作用,能诱导和促进食管鳞癌细胞的恶性生长、增殖、迁移、侵袭,抑制肿瘤细胞的凋亡。     

西瑞香素对人肝癌HepG2细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响

目的 探讨西瑞香素对人肝癌HepG2细胞增殖、凋亡及细胞周期的影响.方法 用不同浓度的西瑞香素作用于体外培养的HepG2细胞,采用四甲基偶氮唑蓝法（MTT）检测西瑞香素对HepG2细胞增殖抑制能力;采用AnnexinV/PI双染流式细胞术测定西瑞香素对HepG2细胞凋亡的影响;采用PI单染流式细胞术检测西瑞香素对HepG2细胞周期的影响.结果 西瑞香素可抑制HepG2细胞的增殖,且存在明显的浓度和时间依赖关系;流式细胞术检测显示西瑞香素作用48 h后,实验组细胞未出现明显的早期凋亡细胞群.但实验组处于S期的细胞数较对照组明显减少（P＜0.05）,G0/G1期的细胞较对照组明显增多（P＜0.05）.结论 西瑞香素对人肝癌HepG2细胞的体外增殖具有抑制作用,可能与阻滞细胞周期有关.     

吉西他滨联合索拉非尼对胆囊癌细胞生长侵袭的抑制作用

目的评估吉西他滨和索拉非尼联合用药对胆囊癌细胞株SGC996,生长、凋亡、辽移和侵袭的影响、方法 采用吉西他滨和索托非尼单独或联合处理SGC996细胞,吉西他滨雌独处坪组浓度分别为0．1、1．0、2．0、4．0和10．0μg/mL;索拉非尼单独处理组浓度分别为0．1、1．0、2．5、5．0、10．0和20．0μmol／1．;两药联合处理组：索拉非尼浓度分别为2．5、5．0、10,0和20．0μmol／L,吉西他滨浓度分别为2．0、4．0和10．0μg／mL。未经药物处理的SGC996细胞作为空白对照组。采用MTT法检测SGC996细胞的生长状况;应用Transwell实验检测SGC996细胞的迁移和侵袭能力应用FITC—AnnexinV／PI双染法检测SGC996细胞的凋亡率。结果 索拉非尼可抑制SGC996细胞生长,并且这种抑制作用具有浓度和时间依赖性（P〈0．05）;同时还可抑制SGC996细胞的迁移和侵袭（P〈0．05）,但不诱导细胞凋亡（P〉0．05）。吉西他滨对SGC996细胞的生长和辽移并无显著抑制作用（P〉0．05）．但可以抑制细胞的侵袭,并诱导细胞凋亡（P〈0．05）,索托非尼和吉西他滨联合用药可以抑制SGC996细胞的生长、迁移和侵袭,并诱导细胞凋亡（P〈0．05）、结论 吉西他滨和索托非尼联合用药对胆囊癌细胞的抑制作用显著强于单独用药,可能成为治疗胆囊癌的有效化疗方案。