肺特灵Ⅵ号对博莱霉素诱导的小鼠肺纤维化的干预作用及其机制

目的观察肺特灵Ⅵ号对博莱霉素诱导的小鼠肺纤维化的干预作用。方法采用气管内注入博莱霉素法制备小鼠肺纤维化模型。给药28d后处死,计算肺系数;观察肺脏病理形态学改变,并对肺泡炎和肺纤维化程度进行评分;测定小鼠肺组织中超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、总抗氧化能力（T-AOC）与羟脯氨酸（HYP）等生化指标。结果与模型组相比,肺特灵Ⅵ号各剂量组可明显增加小鼠体质量,降低肺系数,减轻肺泡炎与肺纤维化程度,提高肺组织SOD活性与T-AOC,降低MDA与HYP含量（P〈0.05或〈0.01）。结论肺特灵Ⅵ号对博莱霉素诱导的小鼠肺纤维化有一定的防治作用。     

表没食子儿茶素没食子酸酯对博莱霉素致小鼠肺纤维化的干预作用及其机制探讨

目的探讨表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）对博莱霉素（BLM）所致小鼠肺纤维化的干预作用及其相关机制。方法 32只昆明种小鼠随机分为假手术组、模型组、EGCG治疗组和醋酸泼尼松阳性对照组,每组8只。采用气管内注射博莱霉素复制小鼠肺纤维化模型。造模后,治疗组分别灌服相应的受试药物,假手术组和模型组灌服等量的生理盐水。28d后观察肺组织肺系数、羟脯氨酸（HYP）含量、丙二醛（MDA）和谷胱甘肽（GSH）含量的变化;取固定部位肺组织做病理组织学检查;免疫组织化学技术测定肺组织中α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、转化生长因子-β1（TGF-β1）和I型胶原（ColⅠ）蛋白的表达。结果给药治疗28d后,EGCG能明显降低肺系数（P〈0.01）、肺组织HYP含量（P〈0.01）和MDA含量（P〈0.05）,明显升高肺组织中GSH含量（P〈0.01）;病理组织学检查结果显示,EGCG组肺组织肺泡炎程度和肺组织纤维化程度明显减轻（P〈0.01,P〈0.05）;EGCG能明显抑制肺组织中α-SMA、TGF-β1和ColⅠ蛋白的表达（P〈0.01）。结论 EGCG对博莱霉素所致小鼠肺纤维化具有一定的干预作用,其机制可能与抗氧化作用和降低TGF-β1蛋白的表达进而抑制肺肌成纤维细胞的活化有关。     

复方虫草提取物对实验性肺纤维化大鼠的影响

目的探讨复方虫草提取物对实验性肺纤维化大鼠的影响及其相关机制。方法采取大鼠气管内注入博莱霉素的方法制备肺纤维化模型,分别在给予复方虫草提取物后第7、14、28天处死大鼠后测定肺系数、肺组织羟脯氨酸（HYP）含量、谷胱甘肽（GSH）的活力、总抗氧化能力（T-AOC）水平及α-平滑肌动蛋白（α-SMA）、转化生长因子βl（TGF-βl）蛋白和mRNA表达水平;取固定部位肺组织做病理组织学检查。以泼尼松作为阳性药对照观察。结果复方虫草提取物能明显改善纤维化病变,降低肺系数、肺组织HYP含量及TGF-β1 mRNA、TGF-β1、α-SMA蛋白表达水平,尤其第28天显著（P〈0.01或〈0.05）,且能明显升高GSH活力、T-AOC水平（P〈0.01或0.05）。结论复方虫草提取物可减轻肺泡炎症和肺纤维化的范围及程度,其作用机制可能与抗氧化作用和降低TGF-β1的表达进而抑制肺肌成纤维细胞的活化有关。     

两个品系小鼠肺纤维化模型的比较观察

目的采用气管内注射博莱霉素（Bleomycin,BLM）的方法,比较观察两个品系小鼠肺纤维化程度,确定适用的肺纤维化小鼠模型。方法BALB／c小鼠和C57BL／6小鼠分别分成模型组和对照组,模型组气管内注射博莱霉素（5mg／kg）,对照组气管内注射相同体积生理盐水。所有小鼠于造模后第28日处死,观察肺系数、肺组织病理学改变及羟脯氨酸含量的变化。结果光镜下各模型组肺组织呈不同程度纤维化,其中以C57BL／6小鼠最为明显;模型组的羟脯氨酸（HYP）含量均显著高于对照组;C57BL／6小鼠模型组肺系数及HYP明显高于BALB／c小鼠模型组。结论通过气管内注射博莱霉素,BALB／c及C57BL／6小鼠均能复制肺纤维化模型,以C57BL／6小鼠肺纤维化程度最高,获得的肺纤维化模型较为理想。     

N-乙酰半胱氨酸下调NOX4表达抑制博莱霉素诱导纤维化小鼠的氧化损伤

目的观察活性氧清除剂N-乙酰半胱氨酸（NAC）对博莱霉素诱导的肺纤维化小鼠的影响,探讨NAC抑制肺纤维化的可能机制。方法将45只SPF级雌性昆明小鼠随机分为3组：对照组（气管内雾化生理盐水）、纤维化组（气管内博莱霉素3mg／kg溶于100μL生理盐水内雾化）、NAC处理组（气管内雾化博莱霉素后,NAC400mg·kg-1·d-1溶于100μL生理盐水内灌胃）。处理后第28d收集样本。小鼠左肺置于10％中性甲醛固定,石蜡包埋切片后行HE与Masson染色;右肺碱水解法检测肺组织羟脯氨酸的含量;比色法检测血清丙二醛（MDA）的浓度和总抗氧化能力（T-AOC）;提取肺组织总蛋白和总RNA,分别采用Westernblot和RT—PCR法检测NADPH氧化酶1（NOX1）、NOX2及NOX4的基因和蛋白表达水平。结果NAC处理组小鼠肺组织病理损伤较纤维化组减轻,气道上皮下胶原沉积及肺组织羟脯氨酸含量明显减少（P〈0．05）,血清MDA浓度较纤维化组显著降低（P〉0．05）,血清T—AOC较纤维化组升高（P=0．029）。纤维化组NOX1／2／4基因及蛋白表达较对照组显著增强（P〈0．05）,NAC干预后NOX1／2／4基因及蛋白表达水平均有所下调,NOX4蛋白表达明显低于纤维化组（P=0．001）。与对照组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论NAC能显著改善博莱霉素诱导的小鼠肺纤维化,其机制与抑制NOX4蛋白表达、下调氧化应激损伤有关。     

肺纤方抗博莱霉素肺纤维化大鼠氧化损伤的研究

目的观察肺纤方与强的松对照抗大鼠肺纤维化氧化损伤的作用。方法用气管内注入博莱霉素的方法制做大鼠肺纤维化模型,检测造模后14,28,45d模型组、假手术组、肺纤方组、强的松组大鼠肺组织匀浆液的氧化损伤物丙二醛（MDA）、谷胱甘肽（GSH）。结果14,28,45d各时间点模型组、强的松组、肺纤方组的MDA比假手术组明显升高,GSH明显降低;45d肺纤方组MDA含量较强的松组减少,GSH明显增加。结论肺纤方具有抗氧化损伤作用。     

阿魏酸乙酯对博莱霉素诱导大鼠肺纤维化的保护作用

目的：观察阿魏酸乙酯（EF）对博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化的保护作用.方法：将60只SD大鼠,随机分为5组,对照组、模型组、3个不同EF剂量给药组.大鼠博莱霉素气管给药建立肺纤维化模型后,采用EF灌胃给药进行治疗,于第1,2周后处死动物,肺组织匀浆进行超氧化物歧化酶（SOD）活力、丙二醛（MDA）、谷胱甘肽（GSH）、肿瘤坏死因子（TNF-α）含量检测,同时对肺组织进行病理学检查,以比较不同组别肺纤维化程度.结果：与模型组相比,EF治疗组中肺组织匀浆MDA,TNF-α含量降低,而SOD活力及GSH含量显著增高,且具有一定的剂量效应关系,病理学显示EF治疗组肺纤维化程度较未治疗组明显减轻.结论：阿魏酸乙酯对博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化具有一定的保护作用.     

布洛芬对小鼠肺纤维化的保护作用

  目的 研究布洛芬对博莱霉素诱导的肺纤维化的治疗保护作用。方法 通过气管内滴注博莱霉素复制小鼠肺纤维化模型,实验分为正常对照组、模型组、布洛芬5 mg/kg治疗组、布洛芬10 mg/kg治疗组和布洛芬20 mg/kg治疗组。采集血清行一氧化氮（NO）化学法检测小鼠血清中NO含量;收集肺泡灌洗液行ELISA方法测定肿瘤坏死因子（TNF-α）和白细胞介素6（IL-6）含量;留取肺组织行HE染色观察各组小鼠肺组织形态变化,制备肺组织匀浆测定匀浆中丙二醛（MDA）含量;采用RT-PCR和Western blot方法检测肺组织中转化生长因子β1（TGF-β1）、Smad2和p-Smad2的表达水平。结果 与正常对照组比较,肺纤维化模型组肺组织中发生炎性细胞浸润、肺泡间隔增厚情况,同时血清中NO含量和肺泡灌洗液中炎性因子TNF-α和IL-6含量显著增加,小鼠肺组织中MDA含量也有所增加,TGF-β1和p-Smad2的表达显著升高。经布洛芬给药治疗后,各项生化指标有所下降,同时肺纤维化损伤得以缓解。结论 布洛芬可缓解由博莱霉素诱导的肺纤维化,其作用机制可能与下调NO含量、TNF-α和IL-6等炎性因子含量及调控TGF-β信号通路有关。     

人工冬虫夏草菌液对大鼠肺纤维化早期抗氧化作用的研究

[摘要] 目的 探讨人工冬虫夏草菌液（虫草菌液）对博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化早期抗氧化的作用。方法 48只SD大鼠,随机分为6组：正常对照组,模型组,强的松治疗组,虫草菌液低剂量1.5 g∕(kg·d）,中剂量5 g∕(kg·d）,高剂量10 g∕(kg·d）治疗组。采用气管内注射博莱霉素建立模型,次日起分别给予生理盐水、生理盐水、强的松、虫草菌液（低、中、高剂量）灌胃治疗,第14天处死动物,肺组织标本进行病理形态学观察及肺泡炎评分,肺组织免疫组化检测诱导型一氧化氮合酶(iNOS),肺泡灌洗液（BALF）检测肿瘤坏死因子α(TNF-α) 、谷胱甘肽（GSH）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛(MDA) 含量。结果 虫草菌液和强的松能够减轻肺组织肺泡炎,降低BLAF中TNF-α、MDA含量,提高GSH、SOD含量,下调肺组织iNOS蛋白表达水平。结论 虫草菌液对博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化早期肺泡炎有治疗作用,机制可能是通过下调TNF-α、iNOS等细胞因子的表达、减少脂质过氧化物的释放而达到抗氧化作用。     

泛素特异性蛋白酶7在博莱霉素诱导的小鼠炎症及肺纤维化过程中的表达及作用

目的:观察和评价泛素特异性蛋白酶7（USP7）在博莱霉素诱导的小鼠炎症及肺纤维化过程中的作用。方法:正常野生型成年小鼠36只,随机分为空白组及博莱霉素组。博莱霉素组采用博莱霉素气管内滴注复制小鼠肺纤维化模型,空白组用同等方法注入同样体积的0.9%氯化钠注射液制备对照模型。造模后第7、14、21天处死小鼠,取小鼠肺组织进行肺系数测定、羟脯氨酸含量测定、HE染色、Masson染色、免疫组织化学染色,观察博莱霉素诱导的小鼠炎症及肺纤维化过程,肺组织中USP7表达水平的动态变化及其与肺胶原蛋白含量的关系。结果:在各时间点博莱霉素组肺系数显著高于空白组（P<0.01）。博莱霉素组羟脯氨酸含量在各时间点的差异均有统计学意义（P<0.01）,在第14天和第21天均显著高于空白组（P<0.01）。肺组织病理切片HE染色、Masson染色结果表明博莱霉素气管内给药能诱导的小鼠炎症及肺纤维化过程。免疫组织化学观察半定量USP7结果显示,USP7弱表达于正常肺组织中。在各时间点,博莱霉素组USP7表达差异均有统计学意义（P<0.01）,且均较空白组明显增强（P<0.05~P<0.01）,并随着时间的延长,表达逐渐减弱（P<0.01）。结论:USP7在博莱霉素诱导的小鼠炎症及肺纤维化过程中呈现明显的动态变化,可能在肺纤维化的发生、发展各个环节中起着一定作用。     

N-乙酰半胱氨酸和川芎嗪对博莱霉素诱导的肺纤维化和TGF-β的影响

目的:探讨抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)和川芎嗪对博莱霉素所致小鼠肺间质纤维化的治疗作用及机制。方法:博莱霉素(BLM)制成小鼠肺间质纤维化模型。各组动物处死后提取肺组织和支气管肺泡灌洗液(BALF),进行病理半定量分析,检测谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)含量、BALF中转化生长因子-β(TGF-β)水平。结果:NAC和川芎嗪治疗组肺泡炎、纤维化病变均较模型组减轻,7 d时肺组织GSH量较模型组高(P<0.05),MDA含量较模型组低(P<0.05),7、14 d时TGF-β蛋白水平较模型组低(P<0.05)。结论:NAC和川芎嗪可提高肺组织GSH含量,降低MDA生成,使肺泡炎和肺纤维化病变减轻。NAC和川芎嗪通过抗氧化作用,减少TGF-β产生,是其治疗肺纤维化的机制之一。     

黄芩总黄酮对博莱霉素致大鼠肺纤维化的干预作用及其机制研究

目的 观察黄芩总黄酮对博莱霉素致大鼠肺纤维化的影响及其作用机制。方法 SD大鼠随机分为5组：对照组、模型组、泼尼松龙阳性对照（3.34 mg/kg）组、黄芩总黄酮高剂量和低剂量（50、25 mg/kg）组。大鼠气管内注射博莱霉素制备肺纤维化模型后,各给药组ig给予相应药物,每天给药1次。28 d后处死动物,观察大鼠血清中总抗氧化能力（T-AOC）、还原性谷胱甘肽（GSH）、髓过氧化物酶（MPO）的水平;取固定部位肺组织分别行HE、Masson染色,进行病理组织学检查; RT-PCR法检测黄芩总黄酮对大鼠肺组织中TGF-β1、Smad2、Smad7、α-SMA、胶原I的mRNA表达水平。结果 与模型组相比,黄芩总黄酮给药组大鼠血清中T-AOC、GSH水平均升高,MPO水平显著降低;肺泡炎和肺纤维化程度明显减轻（P＜0.05、0.01）;TGF-β1、Smad2、α-SMA、胶原I基因表达显著降低,Smad7表达显著升高（P＜0.05、0.01）。结论 黄芩总黄酮对博莱霉素所致大鼠肺纤维化具有一定的治疗作用,其机制可能与抗氧化损伤、抑制炎症细胞的浸润活化及调控TGF-β1/Smad信号通路有关。     

氧化苦参碱对肺纤维化大鼠肺内Th1/Th2平衡的影响

目的：观察博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化肺内Th1/Th2状态,以及氧化苦参碱（OMT）对肺纤维化大鼠的干预作用。方法：气管内注射博来霉素制作大鼠肺纤维化模型。将72只雄性SD大鼠分组为正常对照组、模型组、氧化苦参碱治疗组。治疗组于造模后第2天起予腹腔注射氧化苦参碱注射液,直至处死。每组在造模后第3、7、14、28天随机处死6只,观察肺组织病理变化,计算机图形自动分析系统（C IAS）评估肺纤维化程度;检测肺组织羟脯氨酸（HYP）含量及肺组织匀浆γ-干扰素（IFN-γ）及白介素-4（IL-4）。结果：与正常组比较,模型组表现为明显肺泡炎,炎性细胞浸润、严重肺纤维化。治疗组与模型组比较,肺泡炎和肺间质的纤维胶原组织增生均减轻（P〈0.05）。模型组第14、28天肺HYP含量高于同期正常组（P〈0.05）;治疗组第28天肺HYP含量明显低于同期模型组（P〈0.05）。与正常组比较,模型组IFN-γ均降低（P〈0.05）,但治疗组各时间点IFN-γ水平较模型组升高（P〈0.05）,且与正常组比较无统计学差异（P〉0.05）。正常组、治疗组和模型组各时间点IL-4含量均无统计学差异（P〉0.05）。结论：博莱霉素肺纤维化大鼠体内存在Th1反应不足现象,氧化苦参碱能减轻博莱霉素导致的大鼠肺纤维化程度,其可能与纠正肺纤维化大鼠Th1/Th2的失衡有关。     

润肺治纤汤对实验性肺纤维化大鼠肺微血管和心脏影响的观察

目的：探讨润肺治纤汤对实验性肺纤维化大鼠的治疗作用。方法24只Wistar大鼠分为正常组、模型组、治疗组各8只,给药28d后做肺系数测定和肺组织羟脯氨酸（HYP）含量检测,肺组织苏木精-依红（HE）染色观察肺微血管变化并做心脏系数分析。结果模型组肺系数和肺组织HYP含量较对照组显著增加（P〈0.05）,肺组织肺纤维化病理变化明显,肺泡间隔厚度较对照组显著增加（P〈0.05）;治疗组肺系数、HYP含量、心脏系数与模型组比较显著降低（P〈0.05）,肺组织微血管减少程度轻于模型组。结论润肺治纤汤能够减轻实验性肺纤维化大鼠肺组织微血管密度的进行性减少,对心脏具有一定的保护作用。     

经鼻滴入博莱霉素致小鼠肺纤维化模型的建立及其病理演变

目的 经鼻快速滴人博莱霉素复制小鼠肺纤维化模型,观察肺纤维化模型小鼠的病理形态学改变及其羟脯氮酸含量变化,鉴定肺纤维化模型的成功建立.方法 经鼻滴人博莱霉素建立小鼠肺纤维化模型.分别于造模第14天和第28天后,取肺组织行HE染色和天狼猩红染色,取心、肝、脾、肾、脑组织行HE染色,光镜下观察组织病理学变化;造模第28天后用样本碱水解法检测肺组织中羟脯氨酸(HYP)的含量.结果 ①肺组织病理形态学改变:造模第14天和第28天后模型组小鼠肺泡炎及纤维化程度均明显高于阴性对照组,并且在造模第28天后肺纤维化程度进一步加重;②肺组织中HYP含量:与阴性对照组比较,模型组显著升高(P<0.05).结论 经鼻滴入博莱霉素可以成功复制小鼠肺纤维化模型,肺纤维化模型小鼠HYP含量升高.     

地塞米松对大鼠肺纤维化及其肺组织ET-1的影响

目的探讨地塞米松对实验性大鼠肺纤维化肺组织内皮素-1（Endothelin-1,ET-1）的影响。方法实验分为博莱霉素组、地塞米松组和正常对照组。博莱霉素组和地塞米松组给以博莱霉素（5mg/kg）气管内注射复制大鼠肺纤维化模型,正常对照组以生理盐水替代。气管内注药,次日地塞米松组给以腹腔注射地塞米松（1mg/kg）隔日1次,博莱霉素组和正常对照组以生理盐水替代。造模后第28d处死大鼠,测定肺组织ET-1和羟脯氨酸（HYP）含量,并进行组织病理学观察。结果博莱霉素组肺组织内羟脯氨酸（790.530±131.930μg/g）高于正常对照组（570.964±62.411μg/g）和地塞米松组（584.447±51.921μg/g）（P〈0.01）,病理为肺纤维化改变。博莱霉素组肺组织中的ET-1水平（61.001±2.722pg/mL）高于正常对照组（57.618±2.731pg/mL）和地塞米松组（56.083±3.379pg/mL）（P〈0.01）。结论ET-1可能参与肺纤维化的形成,地塞米松可能通过降低ET-1水平抑制肺纤维化形成。     

丹参总酚酸对博莱霉素致肺纤维化小鼠的治疗作用

目的 观察丹参总酚酸对博莱霉素致肺纤维化小鼠的治疗作用.方法 通过气管内注射博莱霉素复制小鼠肺纤维化模型,给予丹参总酚酸ig治疗后,以肺指数、肺组织病理形态及羟脯氨酸(Hyp)水平的测定,观察丹参总酚酸对小鼠肺纤维化形成的影响.结果 丹参总酚酸治疗后肺泡炎和肺纤维化明显减轻,Hyp水平比模型组明显降低(P<0.05、0.01).结论 丹参总酚酸能减轻博莱霉素致小鼠肺纤维化程度,有一定的治疗作用.     

软坚护肝片对四氯化碳所致小鼠急性肝损伤的保护作用

目的观察软坚护肝片（RJHGT）对四氯化碳（CCl4）所致小鼠急性肝损伤的保护作用,并探讨其作用机制。方法腹腔注射CCl4制备小鼠急性肝损伤模型,检测血清谷丙转氨酶（AST）、谷草转氨酶（ALT）、碱性磷酸酶（AKP）活性及总抗氧化能力（T—AOC）;检测肝组织丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽（GSH）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）活性。结果RJHGT各组能够减轻肝细胞损伤程度,与模型组比较,RJHGT能降低血清ALT、AST、AKP的活性及肝组织中MDA、GSH的含量（P〈0．01或〈0．05）;提高T-AOC能力及SOD、GSH．PX的活力（P〈0．01或〈0．05）。结论RJHGT对CCl4所致小鼠急性肝损伤具有明显的保护作用,其机制可能与其抗脂质过氧化作用有关。     

血红素加氧酶-1参与博莱霉素致大鼠肺纤维化机制

目的 观察血红素加氧酶-1(HO-1)对博莱霉素(BLM)致大鼠肺纤维化模型病理生理改变的影响,探讨HO-1参与BLM致大鼠肺纤维化发病机制.方法 通过BLM复制大鼠肺纤维化模型,同时设立生理盐水(NS)组和HO-1抑制剂锌原卟啉(Znpp)组.检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞计数及中性粒细胞百分比、转化生长因子-禾β(TGF-β)和总胆红素含量;检测肺组织中还原型谷胱甘肤(GSH)和羟脯氨酸 (HYP)含量.结果 HO-1水平被抑制后,不能改善炎症细胞浸润肺组织,但可以有效抑制TGF-β、总胆红素和HYP水平,减少GSH耗竭.结论 HO-1通过其氧化损伤和促纤维化机制促进BLM致大鼠肺纤维,但不参予早期炎症反应.     

苦胆草对博来霉素致大鼠肺纤维化的防治作用

［摘要］目的　探讨苦胆草对博莱霉素致大鼠肺纤维化的防治作用．方法　健康成年SD大鼠40只（200±20）g随机分为4组:正常对照组（未做处理）、生理盐水组（气管滴入生理盐水）、模型组（气管滴入博莱霉素5 mg/kg）和苦胆草干预组［灌胃给予苦胆草片混悬液0.705 g/(100 g.d),2次/d、共5次,末次给药1 h,气管滴入博莱霉素5 mg/kg］．分别于气管内滴注后14 d和28 d处死动物,检测各项指标．采用碱水解法测定肺组织中羟脯氨酸（HYP）含量,HE染色和银染观察肺组织病理变化．结果　与正常对照组和生理盐水组比较,模型组大鼠肺组织HYP含量明显升高（P＜0.01）;与模型组比较,苦胆草干预组大鼠肺组织HYP含量明显降低（P＜0.01）;病理检查发现,模型组大鼠肺组织有明显肺纤维化样改变,苦胆草干预组可明显减轻肺纤维化程度．结论　苦胆草能降低博莱霉素致肺纤维化大鼠肺组织羟脯氨酸含量,减轻肺纤维化程度,有望成为防治肺纤维化的候选药物．