Cyclopamine对人乳腺癌细胞Bcap-37生长和增殖的影响

目的:研究Hedgehog信号通路特异性抑制剂Cyclopamine对人乳腺癌细胞Bcap-37生长和增殖的影响。方法:培养Bcap-37细胞系,加入Hedgehog(Hh)信号通路特异性抑制剂Cyclopamine作用72 h,观察光镜下细胞形态学的变化;采用单四唑(MTT)和溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)掺入的方法,检测Cyclopamine对Bcap-37细胞系生长和DNA合成的影响;再用流式细胞仪检测Cyclopamine对Bcap-37细胞周期的影响。结果:与对照组相比,加入5×10-6mol/L的Cyclopamine后在倒置显微镜下可见细胞立体感消失,细胞内空泡增多;5×10-6mol/L的Cyclopamine使Bcap-37细胞的生长曲线下移,10-7~10-5mol/L的Cyclopamine可剂量依赖性地抑制Bcap-37细胞的生长;Bcap-37细胞系的DNA合成被Cyclopamine明显抑制,S期细胞比例降低,并出现了明显的G2期阻滞。结论:Cyclopamine可以有效地抑制Bcap-37细胞的生长和增殖,提示Hh信号通路可能在乳腺癌中被异常激活,抑制Hh信号通路的活性可能对乳腺癌的治疗起到一定的作用。     

冬凌草甲素对Raji细胞的增殖抑制作用及其机制

目的探讨冬凌草甲素对B淋巴细胞白血病细胞株Raji细胞的增殖抑制作用及其机制。方法以不同浓度的冬凌草甲素作用于体外培养的Raji细胞，MTT法检测细胞生长抑制率，应用流式细胞仪、Hoechst 33258荧光染色法观察细胞凋亡，TRAP-PCR-ELISA法检测细胞凋亡前后的端粒酶活性。结果冬凌草甲素可显著降低Raji细胞的端粒酶活性，抑制细胞的生长，诱导细胞发生凋亡，并呈现出明显的剂量-效应与时间-效应关系。结论冬凌草甲素对B淋巴细胞白血病具有明显的体外抗白血病作用，降低细胞端粒酶活性，诱导细胞发生凋亡，可能是其重要作用机制。     

冬凌草甲素对人乳腺癌细胞侵袭的抑制作用及机制

目的检测冬凌草甲素对人乳腺癌细胞MDA-MB231侵袭的影响并探讨其作用的分子机制。方法用Transwell实验检测冬凌草甲素对人乳腺癌细胞MDA-MB231侵袭的影响;明胶酶谱实验检测冬凌草甲素对基质金属蛋白酶-2（MMP-2）和基质金属蛋白酶-9（MMP．9）酶活性的影响;荧光素酶报告基因实验检测冬凌草甲素对MMP．2和MMP-9启动子活性的影响。结果冬凌草甲素明显抑制MDA-MB231细胞的侵袭,且明显下调MMP-2和MMP-9的启动子活性和酶活性（P〈0．05或〈0．01）。结论冬凌草甲素能显著抑制乳腺癌细胞的侵袭,且这种抑制作用可能通过下调MMP-2和MMP-9的启动子活性和酶活性而实现。     

冬凌草甲素对人白血病HL-60细胞抑制作用的研究

为研究冬凌草甲素对人白血病细胞系ＨＬ－６０细胞的生长抑制作用,以不同浓度的冬凌草甲素处理体外培养ＨＬ－６０细胞２４ｈ,以噻唑蓝（ＭＴＴ）法测定细胞生长曲线,以光学显微镜和流式细胞仪分析细胞凋亡,结果冬凌草甲素６～２４μｍｏｌ／Ｌ明显显著抑制ＨＬ－６０细胞生长,４～１２μｍｏｌ／Ｌ可诱导细胞凋亡,为冬凌草甲素治疗白血病提供了依据。     

苦参碱对人乳腺癌Bcap-37细胞增殖的影响 及其作用机制探讨

目的:观察苦参碱对人乳腺癌Bcap-37细胞增殖的影响,并探讨其作用机制。方法:用MTT法检测苦参碱对Bcap-37细胞的抑制率,流式细胞仪检测细胞凋亡率,Western blot法检测Caspase-3、Bax、Bcl-2蛋白表达。结果:苦参碱对Bcap-37细胞增殖具有明显抑制作用,且具有剂量和时间依赖性。与对照组比较,药物作用24、48、72h后,苦参碱组的凋亡率均明显增高(P<0.01),并以作用48h最明显。Caspase-3、Bax蛋白表达增高,Bcl-2蛋白降低。结论:苦参碱对Bcap-37细胞生长具有明显抑制作用,其作用机制可能与上调Caspase-3、Bax蛋白,下调Bcl-2蛋白表达,促进细胞凋亡有关。     

冬凌草甲素对人红白血病细胞系K562细胞生长的抑制作用

冬凌草甲素（oridonin）是从冬凌草中提取的一种有效抗肿瘤成分,属四环二萜类化合物,分子式为C20H28O6,相对分子量为364,42。曾有研究显示冬凌草甲素具有抗肿瘤作用[1],我们发现该物质在体外可有效地抑制白血病细胞增殖,并诱导细胞调亡,报道如下。1材料与方法1．1细胞人红白血病细胞株K562细胞,用含10％灭活小牛血清的RPMll640培养体系培养,2～3d传代一次,取对数生长期细胞进行试验,分别用各种浓度的冬凌草甲素处理细胞,细胞数为2XIO‘几,并设对照组。1．2药物冬凌草甲素按文献方法提取［‘j,用少量二甲基亚巩（DMSO）…     

冬凌草甲素对急性白血病HL-60细胞的增殖抑制作用及其作用机制

目的探讨冬凌草甲素对急性白血病HL-60细胞的增殖抑制作用及其作用机制。方法以不同浓度的冬凌草甲素作用于体外培养的HL-60细胞,MTT法检测细胞生长抑制率,应用流式细胞仪检测细胞凋亡情况,瑞氏染色法观察细胞凋亡时的形态学变化。应用PCR-ELISA及RT-PCR法检测细胞凋亡前后端粒酶活性及端粒酶hTERTmRNA表达水平的变化。结果冬凌草甲素可显著的抑制HL-60细胞的生长,诱导细胞发生凋亡,并呈现出明显的量-效与时-效关系。冬凌草甲素作用48～60h后在瑞氏染色图片上可见核浓缩及核碎裂等典型的细胞凋亡特征,同时端粒酶hTERTmRNA的表达水平及端粒酶活性均明显降低。结论冬凌草甲素能抑制HL-60细胞的生长及诱导细胞发生凋亡;降低端粒酶hTERTmRNA的表达水平及端粒酶活性可能是其重要作用机制之一。     

冬凌草甲素对急性白血病原代细胞的增殖抑制作用

目的研究冬凌草甲素对急性白血病原代细胞的增殖抑制作用。方法以人急性早幼粒细胞白血病(APL)患者的骨髓原代细胞为研究对象,以不同浓度的冬凌草甲素作用于体外培养的白血病细胞,MTT法检测细胞生长抑制率,应用流式细胞仪、台盼蓝染色及Hoechst33258荧光染色法观察细胞凋亡。结果冬凌草甲素体外可明显地抑制白血病原代细胞的增殖,并能诱导细胞发生凋亡,而且呈现出明显的量-效与时-效关系。结论冬凌草甲素能有效地抑制APL细胞的生长及诱导细胞发生凋亡,是一种潜在的抗白血病药物。     

冬凌草甲素对人软骨肉瘤SW-1353细胞的增殖和凋亡的影响及其机制探究

目的 探究冬凌草甲素对人软骨肉瘤细胞增殖、凋亡及p38 MAPK信号通路的调控作用。方法 体外培养人软骨肉瘤SW-1353细胞,分为对照组(等量体积DMSO溶剂),5、10、15μmol/L冬凌草甲素组(5、10、15μmol/L冬凌草甲素)、10μmol/L冬凌草甲素+抑制剂组(10μmol/L冬凌草甲素+20μmol/L p38 MAPK通路抑制剂SB203580)和阳性药物组(6μmol/L阿霉素)。用倒置显微镜、活细胞计数(CCK-8)、5-乙炔基-2′脱氧尿嘧啶核苷(EdU)、Hoechst 33258染色、RT-qPCR及蛋白免疫印迹(WB)法对细胞形态、增殖活性、增殖率、凋亡情况、相关因子表达水平进行分析。结果 与对照组比较,实验组、10μmol/L冬凌草甲素+抑制剂组和阳性药物组SW-1353细胞增殖活性、增殖率、cyclin D1及p-p38 MAPK表达水平显著降低,而细胞凋亡数量和caspase-3表达水平增加,且浓度越高变化越显著(P<0.05),与10μmol/L冬凌草甲素组相比,抑制剂的加入使各指标变化更显著。结论 冬凌草甲素可通过抑制p38 MAPK通路抑制人软骨肉瘤SW-1353细胞的增殖诱其凋亡。     

冬凌草甲素对甲状腺癌BCPAP细胞增殖的抑制作用

目的 研究冬凌草甲素对甲状腺癌BCPAP细胞增殖的抑制作用.方法 使用0、0.5、1、2、5、10、20、50、100μmoL/L浓度的冬凌草甲素处理甲状腺癌细胞株BCPAP 48 h后,用CCK8测定细胞增殖率,绘制增殖曲线,计算细胞半数抵制率(IC50).实验组加入接近IC50浓度(10 μmol/L)的冬凌草甲素,对照组细胞正常培养36 h后,采用流式细胞术检测细胞凋亡,利用Western blot检测凋亡基因PARP、Erk1/2和p-Erk1/2蛋白的表达.结果 冬凌草甲素能显著抑制BCPAP细胞增殖,在2～20 μmol/L时,具有明显的量效关系.流式细胞术检测发现,与对照组相比,实验组细胞早期凋亡率(2.83±0.70)％,晚期凋亡率(1.43±0.31)％,总凋亡率(4.27±1.01)％,均明显升高(P＜0.05).Western blot发现,剪切后的PARP及p-Erk蛋白的表达水平分别上调了1.5倍和1.8倍,上调显著(P值均＜0.05).结论 冬凌草甲素可抑制甲状腺癌细胞株BCPAP增殖,其可能与诱导细胞凋亡有关.     

As_2O_3联合~（89）SrCl_2对人乳腺癌细胞株MCF-7细胞周期和凋亡的影响

目的探讨三氧化二砷（As2O3）联合氯化锶（89SrCl2）对人乳腺癌细胞株MCF-7细胞周期与凋亡的影响。方法采用MTT比色法检测As2O3对MCF-7细胞的增殖抑制作用,求出细胞半数抑制浓度（ID50）。选择20%ID50以下两个不同浓度的As2O3联合89Sr照射,随机设置对照组、89SrCl2照射组、As2O3处理组,As2O3＋89SrCl2联合处理组（联合组）,并于处理后24h采用流式细胞术检测各组细胞周期分布及凋亡。结果 As2O3能明显抑制MCF-7细胞增殖,给药24h的ID50为11.7μmol/L。细胞流式术检测结果表明,与89SrCl2照射组相比,联合组G2/M期细胞明显增多（P〈0.05或0.01）,早期凋亡和死亡细胞数显著增高（P〈0.05）。结论 As2O3能够促进89Sr照射诱导的MCF-7细胞周期阻滞与凋亡。     

电化学疗法对人乳腺癌MCF-7细胞凋亡及细胞周期的影响

目的探讨电化学疗法对人乳腺癌MCF-7细胞凋亡及周期的影响。方法将等量人肿瘤细胞接种于培养板中,随机分为对照组和治疗组,治疗组按电量不同又分4组,对照组不通电。电化学治疗后培养6h和24h后用流式细胞仪分别检测各组细胞周期变化及凋亡率。结果电化学治疗后6h和24h MCF-7细胞凋亡率治疗组比对照组增加明显（P〈0.05）;治疗各电量组随电量的增加处于G0/G1期的细胞比例先逐渐增高,但至20C时反降低;而S期细胞比例有随电量增加下降至20C时升高的趋势。结论电化学疗法可抑制体外培养的人乳腺癌MCF-7细胞株的生长,其机制与诱导肿瘤细胞凋亡及影响其细胞周期有关。     

c-erbB-2多克隆抗体的制备及特性分析

目的　制备针对表皮生长因子受体 (c erbB 2 )细胞表面受体的抗体 ,不仅可阻止生长信号的传递 ,从而抑制肿瘤生长 ,还可通过抗体介导的细胞毒作用杀伤肿瘤细胞 ,具有重要的临床治疗应用价值。方法　通过重组表达获得了纯化的c erbB 2基因产物———融合蛋白GST c erbB 2 ,用此抗原制备兔抗血清 ,经rProteinGAgarose和GlutathioneSepharose 4B亲和层析柱纯化获得IgG型抗c erbB 2蛋白的多克隆抗体。对此抗体进行了细胞表面特异识别、体外肿瘤细胞生长抑制等方面的功能研究。结果　抗体可特异性识别重组表达蛋白、细胞表面c erbB 2抗原 ,并与之结合 ;抗体对c erbB 2阳性的人乳腺癌细胞SK BR 3有特异性的杀伤作用 ,且呈剂量相关 ,而对c erbB 2阴性的人乳腺癌细胞MCF 7则无明显作用。结论　c erbB 2抗体通过其对c erbB 2阳性细胞的特异识别和生长抑制 ,有广阔的临床应用前景。     

临床乳腺癌细胞周期蛋白非时相性表达的初步探讨

目的 初步探讨临床乳腺癌细胞的细胞周期蛋白(Cyclin)表达规律并予以归类，为进一步研究肿瘤的细胞周期机制提供依据。方法 采用Cyclin／DNA双参数流式细胞术对临床上获取的乳腺癌细胞的Cyclin(Cyclin D1、E、A和B1)和DNA表达进行检测。结果 在16例乳腺癌标本中，细胞周期蛋白的非时相性表达可以归类如下：①Ⅰ型Cyclin D1、E、A和B1均呈非时相性过表达(5例)。②Ⅱ型Cyclins D1、E、A和B1均呈低表达或不表达(3例)。②Ⅲ型Cyclin D1呈过表达并贯穿于整个细胞周期，而Cyclins E、A和B1呈低表达成不表达(3例)．④Ⅳ型Cyclins E、A和B1呈不同程度的非时相性过表达，而Cyclin D1呈低表达成不表达(5例)。结论 Cyclins在乳腺癌细胞中的非时相性表达存在着一定的规律，而每一种表达类型则显示了某一特定的细胞周期破坏机制。     

人UHRF1基因对乳腺肿瘤细胞BT-549生长的影响

目的 探讨人UHRF1(hUHRF1)基因对乳腺癌细胞BT-549生长的影响.方法 将全长hUHRF1 cDNA克隆至真核表达载体pcDNA3中,通过脂质体介导办法转染入乳腺癌细胞BT-549,筛选出hUHRF1基因高表达的细胞株.采用MTT法测定hUHRF1基因转染后对细胞生长的影响.结果 与BT-549母细胞和转染了peDNA3"空"质粒的BT-549/pcDNA3对照细胞相比,hUHRF1基因高水平表达的BT-549/hUHRF1细胞生长明显加快.结论 提高hUHRF1基因表达可促进乳腺癌细胞BT-549的生长,为研究hUHRF1作为乳腺癌新基因提供了基础和依据.     

低毫安的电化学疗法对人乳腺癌MCF-7细胞的细胞周期及c-myc和cyclin E蛋白表达的影响

目的探讨低毫安(10 m1A)的电化学治疗对体外人乳腺癌MCF-7细胞的细胞周期分布及c-myc和cyclin E表达的影响。方法电化学治疗后培养6h和24h的细胞用MTT法、流式细胞术、免疫组化法测定细胞抑制率、细胞周期分布及细胞c-myc和cyclin E蛋白的表达。结果与对照组相比,治疗组人乳腺癌MCF-7细胞抑制率均随电量增加依次增高(P<0.05);治疗组随电量的增加处于G0/G1期的比例逐渐增高,而S期细胞比例逐渐下降(P<0.05),G2/M期变化不明显(P>0.05);治疗组c-myc和cyclin E表达随电量的增加阳性细胞数逐渐减少。电化学治疗后培养24h比6h各组指标变化显著。结论电化学治疗能通过调节人乳腺癌MCF-7细胞c-myc和cyclin E蛋白的表达,促使细胞G0/G1期阻滞,从而抑制细胞生长。     

长春瑞滨联合外照射对人乳腺癌MCF-7细胞作用的研究

目的　研究长春瑞滨联合外照射对人乳腺癌MCF - 7细胞的抗肿瘤机制。方法　采用MTT法检测长春瑞滨对MCF - 7细胞毒作用 ,流式细胞仪检测各组细胞周期分布、细胞凋亡指数 ,电子显微镜观察MCF - 7细胞凋亡的形态学特征。结果　MTT检测表明 ,长春瑞滨给药 2 4h的IC50 为 7.2 0 μg/ml。流式细胞仪细胞周期分析显示 :C组细胞大多处于G1～S期 ,V组G2 相细胞明显高于对照组 ,V组G2 相细胞与C组及R组相比均差异显著 (均P <0 .0 5 )。流式细胞仪检测各组MCF - 7细胞凋亡结果显示 :R组、V组、V +R组在不同时间内的平均凋亡指数分别为 2 .98± 3 .90 %、8.0 1± 1.87%、15 .5 7± 5 .2 3 % ,(V +R)组与V组及R组相比均差异显著 (均P <0 .0 5 )。透射电镜观察到MCF - 7细胞凋亡的形态学表现为染色质边集 ,胞浆浓缩 ,核固缩 ,可见有膜包绕的凋亡小体脱落。结论　长春瑞滨对乳腺癌MCF - 7细胞具有显著的细胞毒作用。它可诱导乳腺癌MCF - 7细胞生长阻止在G2 期 ,并能诱导它的凋亡。在照射前使用 ,能增强放疗对MCF - 7细胞凋亡的诱导作用     

姜黄素对人卵巢癌细胞株skov3生长的影响

目的 探讨姜黄素对人卵巢癌细胞株skov3体外生长的的影响.方法 采用MTT法测定姜黄素不同浓度及不同时间对人卵巢癌细胞株skov3生长的抑制作用,计算细胞生长抑制率;光镜和电镜下观测细胞形态学及超微结构的改变;流式细胞仪检测细胞的凋亡率.结果 姜黄素具有诱导人卵巢癌细胞株skov3细胞凋亡的作用,呈剂量和时间依赖性....     

亚硒酸钠对人乳腺癌细胞增殖的影响

目的　观察亚硒酸钠（Ｎａ２ＳｅＯ３）对人乳腺癌细胞生长的影响。方法　通过细胞培养观察随着培养液中亚硒酸钠浓度增加和培养时间的延长,Ｂｃａｐ － ３５ 人乳腺癌细胞生长情况的改变。结果　３μｍｏｌ 的Ｎａ２ＳｅＯ３ 对于肿瘤细胞的生长有抑制作用,１５μｍｏｌ、４５μｍｏｌ 的Ｎａ２ＳｅＯ３ 对于肿瘤细胞还表现出一定的细胞毒性。结论　硒对于肿瘤细胞的生长具有抑制作用。