USPIO增强MRI在兔动脉粥样硬化斑块模型的观察研究

目的 探讨单纯高脂饮食建立兔动脉粥样硬化模型的可行性以及超小顺磁性氧化铁(USPIO)增强磁共振成像(MRI)在兔动脉粥样硬化(AS)斑块研究中的价值.方法 挑选30只健康的雄性新西兰大白兔作为研究对象,使用随机分组法分为两组,其中实验组20只,对照组10只.实验组通过单纯高脂饲料饲养的方法建立兔AS模型,对照组不作其他干预.观察USPIO增强前后动脉斑块的MRI表现,与病理结果进行比较和分析.结果 实验组成功建立兔AS模型,其中14例形成AS斑块,USPIO增强T2W1序列表现为斑块中央信号减低,血管壁信噪比值在96 h降低最低,较增强前信号差异有统计学意义(P＜0. 05),而对照组在增强前后管壁信号无变化.USPIO增强PJN 2D-TOF序列表现为管壁点状充盈缺损.病理检查显示USPIO颗粒主要沉积在内膜下.结论 单纯高脂饮食可以建立兔AS模型,USPIO增强MRI能反映出兔AS斑块情况,有助于对AS病变诊断作出评估.     

超顺磁性氧化铁MR成像检测兔动脉粥样硬化斑块的实验研究

目的探讨超顺磁性氧化铁(SPIO)作为磁共振成像(MRI)示踪剂使动脉粥样斑块成像的可行性。方法采用高脂饲养结合球囊损伤颈动脉血管内皮的方法,建立兔颈动脉粥样硬化模型。10只动脉粥样硬化模型兔分为2组,实验组(A)5只,经外周静脉注射SPIO(1 mmol/kg);对照组(B)5只,经外周静脉注射等量生理盐水。分别于24 h、48 h及72 h后行MRI扫描检查,然后行损伤颈动脉的病理组织学检查。结果在外周静脉注射超顺磁性氧化铁24 h后,A组中3只兔的T2*WI显示损伤的血管壁呈明显低信号区,血管腔明显呈"管腔扩大样"改变;B组则无明显异常信号改变;病理学检测显示A组5只MR信号改变实验兔的损伤血管内膜及斑块组织中有Perl’s蓝染色阳性颗粒;B组粥样斑块组织中则无该染色阳性颗粒,2组间Perl’s蓝染色阳性颗粒差异有统计学意义(P<0.05)。结论超顺磁性氧化铁可以靶向动脉粥样硬化斑块中的巨噬细胞,可作为MRI示踪剂使活体兔的动脉粥样硬化斑块成像,为动脉粥样硬化斑块的临床分子成像提供了实验依据。     

超微超顺磁性氧化铁纳米粒及其在肿瘤磁共振成像中的应用

超微超顺磁性氧化铁纳米粒是一种新型的磁共振对比剂,具有血浆半衰期长及易被巨噬细胞吞噬摄取等特点,在磁共振血管成像、肝脏骨髓肿瘤的鉴别、淋巴结的良恶性鉴别、肿瘤病灶的显示及肿瘤免疫成像等方面有着良好的应用前景。随着在基础及临床方面研究的深入,其必将使现有的一些肿瘤磁共振成像模式发生深刻的变革。     

超顺磁性氧化铁增强MRI检测转移性淋巴结的实验研究

目的：探讨超顺磁性氧化铁粒子（SPIO）增强MRI检测转移性淋巴结的价值。方法：取新西兰兔12只，6只于后腿肌肉接种VX2癌细胞，用于建立肿瘤转移性淋巴结模型；6只作为正常对照组。皮下间隙注射SPIO（每肢10μmol Fe），在注射前和注射后12h行MRI扫描，序列包括自旋回波（SE）T1WI、SE T2WI和梯度回波（GRE）T2WI，并与病理结果对照。结果：平扫时，正常淋巴结和VX2转移淋巴结在三个序列图像上均表现出相似的信号特点。在增强SE T1WI上，两组淋巴结的信号强度均未见变化；在增强SE T2WI上，正常淋巴结的信号强度不均匀降低，VX2转移组淋巴结的信号强度未见明显变化；在增强GRE T2WI上，正常淋巴结的信号强度明显地均匀降低，而VX2转移组有4个淋巴结信号强度未见降低，2个淋巴结不均匀降低。结论：SPIO增强MR成像可用于检测转移性淋巴结。     

超顺磁性氧化铁增强MRI检测转移性淋巴结的实验研究

目的探讨超顺磁性氧化铁粒子(SPIO)增强MRI检测转移性淋巴结的价值。方法取新西兰兔12只,6只于后腿肌肉接种VX2癌细胞,用于建立肿瘤转移性淋巴结模型;6只作为正常对照组。皮下间隙注射SPIO(每肢10 μmol Fe),在注射前和注射后12 h行MRI扫描,序列包括自旋回波(SE )T1WI、SE T2WI和梯度回波(GRE)T2WI,并与病理结果对照。结果平扫时,正常淋巴结和VX2转移淋巴结在三个序列图像上均表现出相似的信号特点。在增强SE T1WI 上,两组淋巴结的信号强度均未见变化;在增强SE T2WI上,正常淋巴结的信号强度不均匀降低,VX2转移组淋巴结的信号强度未见明显变化;在增强GRE T2WI上,正常淋巴结的信号强度明显地均匀降低,而VX2转移组有4个淋巴结信号强度未见降低,2个淋巴结不均匀降低。结论SPIO增强MR成像可用于检测转移性淋巴结。     

超顺磁性氧化铁标记大鼠骨髓间充质干细胞的磁共振成像研究

目的:探讨超顺磁性氧化铁纳米粒子(Superparamagnetic iron oxide,SPIO)体外标记大鼠骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)的适当浓度和不同标记浓度对细胞的生物学活性影响,以及经MR成像的特征等.方法:选取第5代细胞进行不同浓度SPIO标记,运用光学显微镜观察铁颗粒在细胞内的位置、分布及标记率;选取适当浓度标记量,使用1.5T磁共振进行T1wI、T2WI、T2*WI扫描,测量不同扫描序列标记细胞管的信号强度改变,并进行统计学分析.结果:标记后的铁颗粒均位于细胞质内;含量在25～50μg Fe/ml的培养液是SPIO标记干细胞的安全浓度,在此浓度阈值标记后孵育24 h即可有效标记细胞97%～100%;SPIO标记的MSCs在T1WI,T2WI及T2*WI序列信号均降低.结论:SPIO可以简便标记MSCs.并且在适当浓度下对MSCs的生物学活性没有影响,MR T2WI和T2*WI序列可有效显像磁性标记的干细胞,为下一步活体试验奠定基础.     

超顺磁性氧化铁纳米粒子标记成肌细胞方法研究

目的:使用超顺磁性氧化铁纳米粒子(SPIO)对成肌细胞进行体外标记,探讨SPIO标记方法及SPIO对细胞的影响.方法: 常规方法进行成肌细胞培养,应用脂质体包被的SPIO标记成肌细胞,用光镜及电镜观察标记效率及对细胞增殖的影响,台盼蓝染色及JC-1观测SPIO对细胞活力的影响.结果: 普鲁士蓝染色证实了每个标记细胞胞质内有多少不等的蓝染铁颗粒,单纯SPIO标记有效率为50%,脂质体包被的SPIO标记有效率为100%,电镜也观测到细胞内的SPIO颗粒.SPIO标记对细胞无毒性,不影响细胞的增殖及活性.结论: 脂质体包被SPIO标记成肌细胞方法简单、高效、无毒,可用于磁共振对标记细胞进行活体内外无创动态示踪研究.     

超小超顺磁性氧化铁增强MRA联合炎症因子检测兔动脉粥样硬化易损斑块

目的探讨超小超顺磁性氧化铁（USPIO）增强MRA联合IL-6、IL-I0 检测兔动脉粥样硬化（AS）易损斑块的可行性及价
值。方法健康雄性新西兰大白兔24只,分为A、B、C 3组。A组采用球囊导管损伤主动脉内膜结合高脂饲养建立AS模型,B组
采用高脂饲养,空白C组不做干预。12 周于耳缘静脉采血5 ml 比较各组间血脂及IL-6、IL-10 的变化情况。行MRA平扫、
USPIO增强扫描,与病理检查结果行对照研究。结果A、B两组比较血脂水平无统计学意义（P>0.05）,IL-6水平（167±21.3）pg/
ml vs（116±14.3）pg/ml P<0.05,IL-10无差异（P>0.05）。A vs C、B vs C（TC、TG、LDL）P<0.01,HDL无差别。IL-6、IL-10有显著
性差异（P<0.01）。MRA连续扫描中,管壁信噪比（SNR）在不同组间存在差异（P<0.05）。结论USPIO通过标记巨噬细胞引起
T2WI信号下降,结合SNR峰值变化可以预测兔动脉粥样硬化血管整体的炎症程度。USPIO增强MRA联合IL-6、IL-IO检测兔
AS易损斑块具有可行性。
     

超微超顺磁性氧化铁在中枢神经系统疾病磁共振影像诊断中的应用

超微超顺磁性氧化铁(USPIO)作为磁共振对比剂具有血浆半衰期长、能够特异性结合巨噬细胞两个重要特性。相对于目前临床普遍使用的钆螯合物对比剂,USPIO对部分中枢神经系统疾病的诊断具有一些独特的优势,但仍有待进一步的临床研究确证。本文就近年来USPIO在部分中枢神经系统疾病磁共振影像诊断中的应用研究进展作一综述。     

超微超顺磁性氧化铁纳米粒的制备及性能研究

目的：制备超微超顺磁性氧化铁纳米粒,并研究其物理、磁学性质及传递特性,探讨其作为磁共振阴性对比剂的可能性。方法：共沉淀一步法制备葡聚糖包被的四氧化三铁纳米粒,采用X射线粉末衍射法（XRD）分析其内部晶体结构,傅立叶红外光谱仪（FT-IR）分析其表面结构,透射电镜（TEM）及动态激光粒度仪测量其大小,振动样品磁强计（VSM）检测磁化率等参数。此外,采用原子吸收光谱仪检测家兔血和不同脏器中的样品铁含量,MRI观察注射样品后肝、淋巴结的增强效果。结果：所得样品核心为四氧化三铁晶体,表面包覆葡聚糖,核心粒径6～8nm,整体颗粒直径为33nm,样品铁含量为0.2mmol/L。磁化曲线表现为超顺磁性,饱和磁化强度为48.1emu/g。样品在家兔体内血循环时间较长（〉6h）,主要分布至脾、肝、肺、心、淋巴等网状内皮系统,注射样品后肝、淋巴结在T2WI信号明显降低。结论：实验表明,制备的样品可作为一种新型的磁共振阴性造影剂,广泛用于肝脾、淋巴结等多种疾病的诊断和治疗。     

超敏明胶酶靶向超小超顺氧化铁纳米粒子的合成及其检测胃癌的实验研究

目的合成明胶酶靶向的超小超顺氧化铁纳米粒子,探讨其作为磁共振成像(MRI)特异性显影剂用于检测胃癌的效果。方法两性共聚物聚乙二醇(PEG)-聚己内酯(PCL)中间被插入了1个6个氨基酸肽段(PVGLIG),该肽段可以被肿瘤组织局部高浓度的明胶酶Ⅳ(MMP2/MMP9)所降解。该共聚物(PEG-Pep-PCL)通过纳米沉淀法负载超小超顺氧化铁纳米粒子(USPIO),最后形成PEG-Pep-PCL-USPIOs。通过调节PCL的长度,使PEG-Pep-PCL-USPIOs粒子直径控制在95 nm左右,使其可以更好地利用肿瘤组织的渗透增强滞留效应(EPR)。结果体外摄取实验证明胃癌肿瘤细胞对PEG-Pep-PCL-USPIOs的摄取明显大于对照组的PEG-PCL-USPIOs和常规纳米氧化铁粒子Resovist(P<0.01)。体内试验中,相同铁剂量的PEG-Pep-PCL-USPIOs、PEG-PCL-USPIOs和Resovist通过尾静脉注射于皮下负载胃癌细胞株SGC-7901的裸鼠,经7.0T的小动物核磁检测,PEG-Pep-PCL-USPIOs的T2-WI信号衰减程度明显大于PEG-PCL-USPIOs组和Resovist组(P<0.01),肿瘤组织的病理切片检测亦证实上述结果。结论 PEG-Pep-PCL-USPIOs具有作为胃癌早期检测的MRI特异性显影剂的潜力。     

粥样硬化性肾动脉狭窄缺血兔模型的制作

目的探讨粥样硬化性肾动脉狭窄缺血兔模型的制作方法。方法将健康新西兰大耳白兔14只,随机分为模型组和空白组。模型组采用左肾动脉银夹缩窄术和高脂饲料喂养,空白组每天喂饲普通饲料,12周后观察两组实验兔胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白（HDL）、低密度脂蛋白（LDL）水平及病理学变化。结果模型组家兔TC、LDL均升高（p〈0.01）,病理切片显示典型的AS变化,肾动脉狭窄程度和肾动脉壁内、中膜的增厚明显（p〈0.05）。结论本方法能复制粥样硬化性肾动脉狭窄缺血兔模型。     

兔重症肌无力模型的建立

目的:探讨兔重症肌无力模型(MG)的建立方法。方法:采用亲和柱层析法从电鳐电器官中提取乙酰胆碱受体(AChR),给16只日本大耳白兔分两次注射200μg AChR与等量的弗氏完全佐剂混合液,两次注射相隔3周,采用自行设计的评分标准评定其症状的严重性。结果:12只日本大耳白兔出现重症肌无力表现,积分12.83±6.19分。结论:从电鳐电器官中提取AChR,并主动免疫日本大耳白兔能够复制出重症肌无力模型。     

锰增强磁共振示踪移植神经干细胞在大脑内的功能

背景：在前期研究中,我们已成功用SPIO标记成人神经干细胞（NSCs）,移植到开放性脑外伤患者脑内,并用MRI观察到其在脑内的迁徙和分布,实现了无创性观察移植NSCs在体内的分布。但是这一方法无法评估移植NSCs是否参与大脑功能活动。在本实验中,我们利用锰增强磁共振（ME-MRI）技术在体观察移植NSCs在动物脑损伤区的功能活动。 方法：40只脑损伤SD大鼠随机分为四组,每组10只大鼠。第1组大鼠脑损伤后不行NSCs移植,然后行ME-MRI扫描。静脉输注MnCl2.4H2O,甘露醇开放一侧血脑屏障,电刺激其对侧前肢,采用3D-SPGR序列ME-MRI扫描。第2组大鼠脑损伤一周后行SPIO标记NSCs立体定向移植,两周后行ME-MRI扫描,方法同前。第3组大鼠脑损伤一周后行SPIO标记NSCs立体定向移植,两周后行ME-MRI扫描,方法同前,但在电刺激阶段静脉注射钙通道阻滞剂地尔硫卓。第4组脑损伤大鼠局部注射PBS,然后行ME-MRI扫描,方法同前。 结果：第2组脑损伤大鼠ME-MRI扫描后发现相应的皮层有高信号,表明局部存在神经细胞电活动,并为ME-MRI所反映。第3组脑损伤大鼠加入地尔硫卓后其相应位置的高信号消失,表明这一电活动是钙通道依赖性的。而第1组和第4组脑损伤大鼠脑损伤区无高信号出现。 结论：我们利用ME-MRI可初步检测到移植NSCs在大脑局部的电活动,为今后进一步研究NSCs在宿主脑内的功能奠定了基础。     

Specific targeting of angiogenesis in lung cancer with RGD-conjugated ultrasmall superparamagnetic iron oxide particles using a 4.7T magnetic resonance scanner

Background Angiogenesis is an essential step for tumor development and metastasis. The cell adhesion molecule αvβ3 integrin plays an important role in angiogenesis and is a specific marker of tumor angiogenesis. A novel αvβ3 integrin-targeted magnetic resonance (MR) imaging contrast agent utilizing Arg-Gly-Asp (RGD) and ultrasmall superparamagnetic iron oxide particles (USPIO) (referred to as RGD-USPIO) was designed and its uptake by endothelial cells was assessed both in vitro and in vivo to evaluate the angiogenic profile of lung cancer.

Methods USPIO were coated with ?NH3+ and conjugated with RGD peptides. Prussian blue staining was performed to evaluate the specific uptake of RGD-USPIO by human umbilical vein endothelial cells (HUVECs). Targeted uptake and subcellular localization of RGD-USPIO in HUVECs were confirmed by transmission electron microscopy (TEM). The ability of RGD-USPIO to noninvasively assess αvβ3 integrin positive vessels in lung adenocarcinoma A549 tumor xenografts was evaluated with a 4.7T MR scanner. Immunohistochemistry was used to detect αvβ3 integrin expression and vessel distribution in A549 tumor xenografts.

Results HUVECs internalized RGD-USPIO significantly more than plain USPIO. The uptake of RGD-USPIO by HUVECs could be competitively inhibited by addition of free RGD. A significant decrease in T2 signal intensity (SI) was observed at the periphery of A549 tumor xenografts at 30 minutes (P <0.05) and 2 hours (P <0.01) after RGD-USPIO was injected via the tail vein. Angiogenic blood vessels were mainly distributed in the periphery of tumor xenografts with positive αvβ3 integrin expression.

Conclusions RGD-USPIO could specifically label αvβ3 integrin and be taken up by HUVECs. This molecular MR imaging contrast agent can specifically evaluate the angiogenic profile of lung cancer using a 4.7T MR scanner.

     

兔食管静脉曲张模型的建立

目的 建立新西兰大白兔的食管静脉曲张模型,为下一步的临床研究提供可靠的小动物型模型。方法 采用门静脉左支完全夹闭法造模,并通过外观、超声、胃镜等检查检验手段对造模结果加以评估。结果 术后8周100%存活动物可见食管静脉曲张。结论 通过门静脉左支夹闭法,基本可以建立兔食管静脉曲张模型。     

实验性动脉粥样硬化家兔脂蛋白与血小板的相关性研究

通过复制家兔动脉粥样硬化(AS)模型,测定血浆脂蛋白、前列腺素水平、血小板聚集(PMAR)及主动脉组织 Ch、AppB 含量和粥样病变面积,探讨血浆脂蛋白与血小饭的相关性及与二者与主动脉粥样病变的相关性。结果显示:PMAR 与血浆总胆固醇(TC、r=0.727)、血浆甘油三脂(TG,r=0.502)、血浆低密度脂蛋白胆固醇(LDL-Ch,r=0.705)、血浆载脂蛋白 B(ApoB,r=0.751)均呈直线正相关(P 均<0.01),与 HDL_2-Ch(r=-0.444),HDL-Ch/TC(r=-0.584)均呈直线负相关(P 均<0.01),主动脉组 Ch、ApoB 含量及粥样病变面积各自与血浆 ApoB,PMAR 呈正相关(P 均<0.05～0.0),而与血浆 HDL_2-Ch 里负相关(P 均<0.05～0.01)。结果提示:血浆 TC、TG、LDL-Ch、ApoB 升高具有激活血小板致 AS 作用.而 HDL_2-Ch,HDL-Ch/TC 升高再有抑制血小板抗 AS 作用     

兔下颌骨临界骨缺损人工材料植入实验动物模型的建立

目的建立兔下颌骨临界骨缺损人工材料植入的动物模型。方法选用30只健康成年日本大耳白兔,雌雄各半,在双侧下颌骨体部分别制造13mm×6mm的矩形全层临界骨缺损,左侧植入实验材料泡沫状碳化硅(SiC),右侧植入羟基磷灰石(HA)作自身对照,予以适当的术后护理,待取材观察。结果1只动物因麻醉意外死亡,1只因拒食术后1个月死亡,另有2只因术前分别有感冒和腹泻症状,分别于术后1d和2d死亡。其余26只动物在术后4,8,12,24周均能正常进食,创口未见感染征象,健康状况良好。结论本实验运用的建立兔下颌骨临界骨缺损人工材料植入实验动物模型的方法是可行的。