基质金属蛋白酶活性与新生鼠窒息后心肌损害的相关性研究

目的探讨基质金属蛋白酶3、9(MMP-3、MMP-9)与新生鼠窒息后心肌损害的相关关系。方法建立新生鼠常压窒息模型,观察心肌组织病理改变、免疫组化法测定心肌组织MMP-3、 MMP-9的活性及氯胺T法测定心肌胶原含量。结果窒息后心肌组织MMP-3、MMP-9的活性表达较对照组明显增高(P均<0．05),MMP-3活性以7 d时为最高,MMP-9的活性则逐渐增高。窒息组心肌胶原含量于7、14 d逐渐增高(P均<0．05)。MMP-3、MMP-9的表达与心肌病理积分、胶原含量均呈正相关(P均<0．05)。结论新生鼠窒息后心肌组织MMP-3和MMP-9被激活,与心肌病理损害密切相关,继发胶原含量增高,可能是导致心肌间质的重构、影响心功能的因素之一。     

基质金属蛋白酶对新生鼠窒息后心肌重塑的影响

目的探讨新生鼠窒息后心肌组织基质金属蛋白酶(MMPs)表达对心肌重塑的影响。方法将7~10日龄Wistar小鼠60只,随机分成窒息A、B、C 3组(分别为窒息复氧后1、7、14 d,各组15只)、对照组(D组,n=15)。模拟新生鼠常压窒息模型。免疫组织化学法测定心肌组织MMP-3、MMP-9活性;氯胺T法测定心肌胶原水平。结果心肌组织MMP-3活性为一过性增高,以B组最高(P<0.05),且MMP-3活性表达早于MMP-9;MMP-9活性窒息后逐渐增高(P<0.05);心肌胶原水平窒息后逐渐增高,d14时最高;MMP-3、MMP-9与胶原水平呈正相关(r=0.482,0.679 P均<0.05)。结论新生鼠窒息后心肌MMP-3、MMP-9激活,继发胶原水平增高,可能是导致心肌间质重塑的因素之一。     

新生鼠窒息后心肌基质金属蛋白酶活性与心肌损害的相关性

目的探讨新生鼠窒息后心肌组织心肌基质金属蛋白酶（MMPs）表达与心肌损害的相关性。方法60只7—10日龄Wistar鼠,随机分成对照组（D组）、窒息组（A、B、C3组,分别为窒息复氧后1、7、14d）,每组15只。窒息组模拟新生鼠常压窒息模型,测定cTnI水平;心肌组织MMPs-3、9活性;心肌病理积分及胶原含量。结果cTnI（ng／m1）A组（0．3680±0．40）明显高于D组（0．0783±0．06）P〈0．05,B组下降（0．1889-i-0．15）P仍〈0．05,C组降至正常（0．1338±0．07）P〉0．05;心肌组织MMPs-3活性A组（0．1847±0．04）,B组最高（O．2780±0．05）,C组（0．2014±0．05）,与D组（0．1213±0．03）比较P均〈0．05;MMPs-9活性A、B、C组逐渐增高（0．1502±0．01、0．1715±0．01、0．1868±0．03、P均〈0．05）;心肌胶原含量A、B、C组逐渐增高（35．59±1．09、38．94±0．67、40．69±0．75ng／ml分别为P〉0．05、P〈0．05、P〈0．05）;MMPs-3、9表达与心肌病理积分呈正相关（r分别为0．669、0．667,P均〈0．05）,与胶原含量呈正相关（r分别为0．482、0．679,P均〈0．05）。结论新生鼠窒息后心肌MMPs-3、9过度激活,继发胶原含量增高,MMPs-3、9活性与心肌病理损害密切相关。提示MMPs参与了窒息后心肌损害,可能是心肌间质重塑的因素之一。     

新生儿窒息后心肌损害与基质金属蛋白酶

心肌中的基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinase，MMPs）能降解所有的心肌细胞外基质（extra-cellular matrix，ECM），通常与其组织抑制因子呈动态平衡状态，在心脏严重病变时被激活，表达上调，是心肌基质重塑的始动因素。新生儿窒息后由于机体血流动力学发生明显变化，造成机体各脏器缺氧缺血性损伤，其中心肌损害发生率是28％-44％，甚至高达65．5％，病情严重者可发生心力衰竭或心脏扩大，这一过程中可能存在着心肌坏死后修复、愈合及间质重构问题。因此研究窒息后心肌损害与MMPs之间的相关性有着重要意义。     

病毒性心肌炎小鼠心肌基质金属蛋白酶-9的动态变化及意义

目的：探讨基质金属蛋白酶-9（MMP-9）在病毒性心肌炎（VMC）小鼠发病过程中的动态变化及意义。方法：以柯萨奇病毒 B3 感染 BALB/C 小鼠建立 VMC 模型,腹腔注射 0.1 mL不含病毒的培养液的小鼠作为对照组。造模后 7 d、14 d、21 d、28 d取心肌组织作石蜡切片,行苏木精-伊红和 Masson 染色观察病理改变,免疫组化（SABC法）检测心肌MMP-9及Ⅰ、Ⅲ型胶原表达。结果：模型组 MMP-9 于 7 d 可见表达,14 d 达高峰（P<0.05）,各时间点 MMP-9 表达均高于对照组（P<0.05）;Ⅰ型胶原于 21 d 表达上调,28 d 表达最高（P<0.05）,21 d 和 28 d 表达高于对照组（P<0.05）;Ⅲ 型胶原于28 d 表达上调并高于对照组（P<0.05）;MMP-9 与心肌病理积分呈正相关（r=0.832,P<0.05）,与 Ⅰ 型胶原呈负相关（r=-0.791,P<0.05）。结论：VMC 小鼠心肌 MMP-9 在早期即表达增高;MMP-9 可能通过介导 Ⅰ 型胶原的降解代谢而参与 VMC 的病理过程,是导致 VMC 胶原重构和心肌纤维化的重要因素之一。     

基质金属蛋白酶及其抑制剂与心肌纤维化的研究进展

心肌纤维化是心肌重构的关键,由心脏基质成分代谢失衡所致。近年研究发现,基质金属蛋白酶(MMPs)在心肌组织中大量表达,能特异地降解细胞外基质(ECM),同时MMPs又为其组织抑制剂(TIMPs)及一些细胞因子所调控,MMPs/TIMPs比例失调是导致心肌纤维化的重要因素。     

病毒性心肌炎心肌基质金属蛋白酶活性的动态变化及其与心功能和心肌胶原的关系

目的 探讨病毒性心肌炎(viral myocarditis,VM)心肌基质金属蛋白酶(matrixmetalloproteinases,MMPs)活性的动态变化及其与心功能、心肌胶原的关系。方法 50只6周龄雄性DBA/2小鼠腹腔接种0.14 ml的CVB3建立VM模型,15只同周龄同品系小鼠腹腔接种0.14 ml的Eagle's液作为对照组。VM组于接种后3、7、10、21、30 d,对照组于30 d均采用酶谱法测定心肌基质金属蛋白酶2(MMP-2)和9(MMP-9)的活性;超声心动图测定心脏收缩功能:主动脉血流峰值流速(Vp)、主动脉血流速度积分(Vi);心脏石蜡切片HE染色计算病理积分以及氯氨T法测定心肌的胶原含量。结果 VM小鼠心肌MMP-2、MMP-9的活性表现为一过性增高,以10 d时为最高,并且10 d时Vp、Vi亦明显低于对照组(P<0.05);心肌胶原含量在21 d、30 d时显著增高(P<0.05);MMP-2、MMP-9与病理积分均呈正相关(r分别为0.801,0.821,均P<0.05)、与Vp、Vi呈负相关(r分别为-0.649,-0.683和-0.711,-0.755,均P<0.05)。结论 VM小鼠心肌MMPs过度激活并伴有继发的胶原含量升高,且MMPs活性与心肌病理损害、心功能下降密切相关。MMPs参与了心肌炎的病理改变,可能是导致间质改变、心功能异常的因素之一,提示心肌MMPs是VM心脏间质病变的关联因素,可用来作为判断VM小鼠心肌间质损害程度及估计心脏功能的     

婴幼儿重症肺炎血清中基质金属蛋白酶9与基质金属蛋白酶抑制物1的表达及意义

目的 探讨婴幼儿重症肺炎急性期外周血中基质金属蛋白酶9(MMP-9)及其基质金属蛋白酶抑制因子1(TIMP-1)的表达及临床意义.方法 选取2015年10月至2016年5月于郑州大学第三附属医院儿童重症监护病房住院的婴幼儿重症肺炎20例(重症肺炎组)和同期在本院呼吸病区住院的婴幼儿轻症肺炎25例(轻症肺炎组),依据病原学分为病毒性肺炎组(24例)和非病毒性肺炎组(21例),20例同期健康体检儿童为对照组.采用酶联免疫吸附法测定外周血中MMP-9和TIMP-1水平,并行潮气肺功能检查.结果 所有肺炎患儿血清MMP-9、TIMP-1和MMP-9/TIMP-1水平均显著高于对照组,重症肺炎组高于轻症肺炎组,病毒性肺炎组高于非病毒性肺炎组(均P<0.05);重症肺炎组和轻症肺炎组患儿恢复期肺功能达峰时间比(TPTEF/TE)和达峰容积比(VPTEF/VE)均明显低于对照组,重症肺炎组明显低于轻症肺炎组,病毒性肺炎组低于非病毒性肺炎组(均P<0.05);但患儿潮气量(VT/kg)的组间比较差异无统计学意义.外周血清中MMP-9水平及MMP-9/TIMP-1比值与肺功能TPTEF/TE、VPTEF/VE均呈负相关(r1=-0.459、-0.376;r2=-0.413、-0.327;均P<0.05).结论 急性期血清中MMP-9及 MMP-9/TIMP-1与婴幼儿肺炎严重程度和恢复期肺功能损伤有关,在病毒性肺炎中表现的尤为突出,可作为判断预后的监测指标.     

谷氨酰胺对脓毒症幼年大鼠心肌基质金属蛋白酶及其组织抑制因子的影响

目的 探讨谷氨酰胺对脓毒症大鼠心肌胶原的保护机制。方法 选健康18日龄Wistar大鼠121只,每个时间点随机取11只按腹腔注射药物不同分为：（1）生理盐水对照组（0h）;（2）内毒素（LPS）;（3）谷氨酰胺治疗（Gln）组。后两组又分为2、4、6、24及72h时点。在各时点分离心脏,8只用逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法测定基质金属蛋白酶组织抑制因子3（TIMP-3）mRNA表达,另3只用于石蜡切片,用免疫组化方法测定金属心肌基质蛋白酶3（MMP-3）及其TIMP-3,以及用原位杂交方法测定MMP-3mRNA表达。结果 （1）LPS组各时点MMP-3及其mRNA表达较0h组增强,在6h达高峰,到72h虽然有所下降仍高于对照组,P〈0．01;Gln组各时点MMP-3mRNA及其蛋白质表达也较0h组增强,但较LPS组各时点为弱,最高点在24h,P〈0．01;（2）LPS组各时点TIMP-3以及mRNA表达较0h组明显减弱,在6h最低,P〈0．01;Gln组各时点TIMP-3以及mRNA表达也较0h组减弱,但较LPS组为强,最低点在24h,P〈0．01。（3）脓毒症组比Gln组心脏,超微结构改变明显。结论 （1）在脓毒症时MMP-3及其mRNA表达增强,而TIMP-3及其mRNA表达受抑制。（2）谷氨酰胺可以减轻这种影响,而且使这种损伤作用时间向后推迟。     

基质金属蛋白酶-9及基质金属蛋白酶组织抑制物-1在心内膜弹力纤维增生症患儿心室重构中的作用

目的 探讨基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及基质金属蛋白酶组织抑制物-1(TIMP-1)在心内膜弹力纤维增生症(EFE)患儿心室重构发病中的作用.方法　选择2007年3月-2008年5月首都医科大学附属北京儿童医院心脏中心收治的20例EFE患儿(EFE组),同期选择门诊26例健康体检婴幼儿作为健康对照组.根据预后将EFE患儿分组,死亡及病情无缓解者为危重组(n=5),病情缓解者为普通组(n=15).采用ELISA法测量各组血清MMP-9及TIMP-1水平.应用SPSS 11.5软件对数据进行统计学分析.结果　EFE组和健康对照组年龄、性别构成比较差异均无统计学意义,体质量比较差异有统计学意义[(9.00±2.27) kg vs (10.03±1.92) kg,P＜0.01].EFE组与健康对照组血清MMP-9[(568.1±349.2) μg·L-1 vs (446.4±239.8) μg·L-1]、TIMP-1[(342.6±114.2) μg·L-1 vs (313.3±60.5) μg·L-1]水平及MMP-9/TIMP-1比值[(1.8±1.3) vs (1.5±0.8)]比较差异均无统计学意义(Pa＞0.05).健康对照组、普通组和危重组MMP-9[(446.40±239.80) μg·L-1 vs (552.11±404.12) μg·L-1 vs (559.59±205.35) μg·L-1]、TIMP-1[(313.30±60.50) μg·L-1 vs (323.30±118.37) μg·L-1 vs (381.87±121.06) μg·L-1]水平及MMP-9/TIMP-1比值[(1.5±0.8) vs (1.9±1.5) vs (1.5±0.3)]比较差异均无统计学意义(Pa＞0.05).结论　MMP-9/TIMP-1在EFE心室重构的发病机制中可能无明显作用.     

川崎病患儿血清中hs-CRP与基质金属蛋白酶及抑制剂联合检测的临床意义

目的：检测基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、基质金属蛋白酶抑制剂(TIMP)-1及hs-CRP在川崎病患儿血清中的表达,并探讨其与冠状动脉损伤的关系。方法：选取151例川崎病患儿作为观察组（无冠状动脉损伤40例,有冠状动脉损伤111例）,60例健康儿童作为对照组,采用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测血清中MMP-2、MMP-9和TIMP-1含量,应用终点散射比浊法检测血清hs-CRP的含量。结果：MMP-2,MMP-9及hs-CRP含量在冠脉损伤组及无冠脉损伤组与对照组比较差异均有显著性,在冠脉损伤组量最高（P<0.05）;川崎病患儿中MMP-2、MMP-9及TIMP-1之间的检测量呈正相关（P<0.05）。结论：MMP-2、MMP-9、TIMP-1及hs-CRP在川崎病的发生发展中可能起重要作用,MMP-2、MMP-9及hs-CRP的联合检测可能对判断病变程度有重要帮助。［中国当代儿科杂志,2009,11（12）：989-991］     

NICU新生儿败血症心肌损害与出生状况的相关性研究

目的研究新生儿败血症心肌损害的发生与其出生时状况的相关关系,以改善新生儿败血症的预后。方法采用前瞻性临床观察研究方法,对郑州大学第三附属医院NICU2005-11-15—2006-05-31收治的112例败血症新生儿心肌损害的发生与其出生时胎龄、体重、性别、产式及有无窒息史等状况的关系进行了相关性分析。结果112例患儿中发生心肌损害者57例(50.9%)。23例早产儿心肌损害的发生率为78.3%,显著高于足月儿(43.4%),早产与新生儿败血症心肌损害的发生有显著的正相关性(r=0.288,P<0.05);28例低出生体重儿心肌损害的发生率为67.9%,显著高于正常出生体重儿(45.2%),低出生体重与新生儿败血症心肌损害的发生有显著的正相关性(r=0.196,P<0.05);新生儿败血症合并窒息者34例,心肌损害的发生率为85.3%,显著高于无窒息者(35.9%),窒息与新生儿败血症心肌损害的发生有显著的正相关性(r=0.454,P<0.05)。而不同性别及分娩方式对患婴心肌损害的发生率无影响。结论早产、低体重、窒息是新生儿败血症发生心肌损害的3个高危因素,对于这些新生儿发生败血症时,更要关注其心肌损害的发生以降低病死率。     

窒息新生鼠心肌线粒体膜通透性转换孔开放度的变化

目的 观察新生鼠窒息后心肌组织缺血损伤情况以及心肌细胞线粒体膜通透性转换孔(mitochondrial permeability transition pore,MPTP)开放度的变化,以期揭示MPTP开放在窒息后心肌缺氧缺血及再灌注损伤的作用机制.方法 成年SD母鼠妊娠第21天行剖宫产,随机分为正常分娩组及动脉夹闭组,正常分娩组不夹闭子宫动脉,所分娩新生鼠为对照组;以夹闭动脉夹闭组孕鼠子宫动脉方法制作宫内窒息新生大鼠模型,为窒息组,每组各30只,于出生24 h处死新生鼠.以ELISA法检测血清心肌肌钙蛋白Ⅰ(cardiac troponin Ⅰ,cTn Ⅰ),以荧光分光光度法检测MPTP开放度;以TTC染色法检测心肌缺血面积;以HE染色法观察心肌细胞形态变化.结果 HE染色观察发现,窒息组心肌细胞排列紊乱、细胞肿胀、部分细胞溶解.对照组、窒息组新生鼠血清cTn Ⅰ分别为(0.08 ±0.04) μg/L、(0.40±0.29) μg/L,窒息组明显升高,差异有统计学意义(P＜0.01).对照组、窒息组新生鼠TTC染色心肌缺血面积分别为(8.01±3.48)％、(42.50±15.90)％(P ＜0.01).窒息组出现心肌点状坏死,缺血面积增大.对照组、窒息组新生鼠MPTP相对荧光单位分别为118.10±19.10、79.40±10.57 (P＜0.01),窒息组心肌MPTP开放度增大.各组新生大鼠血清cTn Ⅰ值与MPTP开放度呈正相关(r=-0.384,P＜0.01).结论 窒息新生大鼠出现心肌损伤,表现为血清cTn Ⅰ升高、心肌缺血及坏死.窒息后心肌MPTP开放度增大是导致心肌损伤的重要原因.     

轻度窒息新生儿动态心电图及心肌酶变化的临床研究

目的 探讨轻度窒息新生儿动态心电图（AECG）、心肌酶变化特点及其临床意义.方法 选取2011年6月至2013年8月我院新生儿科收治的轻度窒息新生儿为窒息组,同期选择本院分娩的30例健康新生儿为对照组,均于生后24h内行AECG检查,于出生18 ～24 h内抽取静脉血测定血清肌酸磷酸激酶（CK）、血清肌酸磷酸激酶同工酶（CK-MB）、血清乳酸脱氢酶（LDH）、血清谷草转氨酶（AST）、心肌肌钙蛋白（cTnI）.结果 窒息组（46例）与对照组（30例）新生儿AECG窦性心律指标（最慢心率、最快心率、平均心率）差异均无统计学意义（P＞0.05）;窒息组ST段改变及心律失常等其他几项综合指标（包括房早、房速、室早、Q-T间期延长、交界性逸搏）异常发生率高于对照组（65.2％比16.7％,89.1％比13.3％,P均＜0.01）.窒息组心肌酶指标及cTnI值均高于对照组[CK（604.7±275.4）比（162.0±95.1）,CK-MB（87.9±61.0）比（28.3±27.1）,LDH（686.0±383.5）比（310.7±133.5）,AST （95.0±63.1）比（35.2±13.9）,cTnI（0.12±0.11）比（0.02±0.01）,P均＜0.01].窒息组CK、CK-MB、LDH、AST异常发生率高于对照组（63.0％比16.7％,82.6％比6.7％,95.7％比20.0％,32.6％比6.7％,P均＜0.01）.结论 轻度窒息新生儿AECG监测可发现各种心律失常、ST段改变,其心肌酶亦明显高于正常新生儿,ST段改变及CK-MB的升高是诊断轻度窒息新生儿心肌损伤的可靠依据.     

危重症患儿胰岛素抵抗与心肌损害的临床相关性研究

目的：危重症患儿多伴明显的胰岛素抵抗和心肌损害。本研究探讨危重症患儿胰岛素抵抗与心肌损害的关系。方法：选取2010年3月至2011年6月住院治疗的危重症患儿63例为病例组,测定空腹血糖、血清胰岛素及心肌酶、肌钙蛋白I（CTnI）水平,同时计算胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）。HOMA-IR>1.0 者归入胰岛素抵抗组（30例）,HOMA-IR≤1.0者归入非胰岛素抵抗组（33例）。同时选取健康儿童30例作为对照组。结果：胰岛素抵抗组患儿的HOMA-IR、乳酸脱氢酶（LDH）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、肌酸激酶（CK）、肌酸激酶同工酶（CK-MB）、α-羟丁酸脱氢酶（α-HBDH）、CTnI水平均明显高于非胰岛素抵抗组及对照组,差异有统计学意义（均P<0.05）;非胰岛素抵抗组患儿的LDH、AST、CK、CK-MB、α-HBDH、CTnI水平明显高于对照组,差异有统计学意义（均P<0.05）。胰岛素抵抗组患儿的HOMA-IR与LDH、CK、CK-MB、AST、α-HBDH、CTnI水平呈正相关（分别r=0.697,0.739,0.781,0.642,0.381,0.792,均P<0.05）。结论：胰岛素抵抗可以加重心肌损害,HOMA-IR可以作为心肌损害程度的预测指标。     

N端脑钠肽原和糖原磷酸化酶同工酶BB在新生儿窒息合并心肌损伤中的变化

目的：探讨N端脑钠肽原(N-terminal pro-brain natriuretic peptide, NT-proBNP )和糖原磷酸化酶同工酶BB (glycogen phosphorylase isoenzyme BB , GPBB)在新生儿窒息合并心肌损伤中的变化及其临床意义。方法：随机选择64例窒息患儿为研究对象（轻度窒息39例,重度窒息25例,其中心肌损伤30例,非心肌损伤34例）,以25例正常新生儿为对照组。采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定血浆NT-proBNP 和GPBB水平,同时检测心肌酶、肌钙蛋白I、心电图、X线胸片等。结果：心肌损伤组血浆NT-proBNP 和GPBB水平均明显高于非心肌损伤组和对照组（P<0.01）。重度窒息组血浆NT-proBNP 和GPBB水平明显高于轻度窒息组和对照组（P<0.01）。Spearman秩相关分析显示,窒息患儿血浆NT-proBNP 水平与GPBB、CK-MB、CK、LDH呈显著正相关（P<0.01）;GPBB水平与CK-MB、CK、LDH呈显著正相关（P<0.01）。结论： NT-proBNP 和GPBB均可作为窒息新生儿早期心肌损害的生化标志物,联合检测NT-proBNP 和GPBB对于早期发现窒息合并心肌损伤、判断病情程度、指导治疗具有重要的临床意义。［中国当代儿科杂志,2010,12（4）：252-255］     

缺氧缺血性脑损伤新生大鼠脑组织MMP-9和TIMP-1表达的动态变化研究

目的 探讨新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)的发生机制.方法 建立新生大鼠HIBD模型,随机分为假手术组及HIBD 6 h、12 h、24 h、48 h、72 h组,每组6只.观察脑组织大体病理学改变.采用Real-time Q-PCR方法测定大鼠脑组织MMP-9 mRNA和TIMP-1 mRNA表达.结果 (1)新生大鼠HIBD后12～48 h脑水肿明显,可见点状软化坏死灶.(2)假手术组大鼠MMP-9 mRNA表达水平极低,HIBD组大鼠在缺氧缺血6 h表达开始增高,24 h达高峰,此后渐渐下降,但72 h仍维持较高的水平,与假手术组相比差异有非常显著性(P＜0.01).(3)假手术组大鼠TIMP-1 mRNA表达水平极低,HIBD组大鼠在经历缺氧缺血6、12、24h,TIMP-1 mRNA表达水平有微弱升高,与假手术组相比差异有显著性(P＜0.05),但48 h后TIMP-1 mRNA表达下降到假手术组水平(P＞0.05).(4)MMP-9 mRNA/TIMP-1 mRNA比值在假手术组接近1:1,HIBD组缺氧缺血12 h后比值升高,在48 h达到高峰,72 h有所下降,但仍高于假手术组(P＜0.01).结论 新生大鼠HIBD后可诱导MMP-9 mRNA表达,而MMP-9 mRNA和TIMP-1 mRNA表达的失衡可能参与了HIBD的发病过程.