外周血CD34 +细胞计数对外周血干细胞采集时机选择及结果的影响

目的:探讨外周血造血干细胞动员过程中外周血CD34 +细胞计数的变化趋势及其对采集时机选择和采集结果的影响。 方法:收集2012年4月至2017年3月在山西省肿瘤医院行自体外周血造血干细胞动员的62例血液病患者临床资料,采用化疗联合粒细胞集落刺激因子（G-CSF）的动员方案,监测外周血及采集物中白...     

外周血造血祖细胞检测对外周血干细胞动员采集的预测意义

 目的　通过血细胞分析仪检测外周血造血祖细胞（HPC）含量,探寻一种快速预测采集物干细胞含量、判断外周血造血干细胞采集时机的手段,并评价其应用意义。方法　对27例化疗联合粒细胞集落刺激因子（G-CSF）进行外周血造血干细胞动员采集者及17例单用G-CSF动员的采集者,利用血细胞分析仪检测外周血HPC计数,血液治疗和移植工程国际组织（ISHAGE）法检测外周血及采集物CD+34 细胞计数,并进行相关回归分析。对外周血HPC计数预测采集物CD+34 含量进行受试者工作曲线（ROC）分析。结果　无论化疗组或非化疗组,外周血HPC计数与CD+34 计数均具有线性相关性（r＝0.711,P＝0.000及r＝0.656,P＝0.004）。化疗组外周血CD+34 计数＝-0.829+0.648×外周血HPC计数;非化疗组外周血CD+34 细胞计数＝45.033+0.460×外周血HPC计数。化疗组患者外周血HPC计数与采集物CD+34 细胞量呈线性相关（r＝0.602,P＝0.001）,采集物CD+34 计数＝1.106+0.046×外周血HPC计数。以HPC≥85／μl预测采集物CD+34 计数≥5×106／kg的灵敏度为78 %,特异度为82 %。结论　在自体干细胞移植动员患者中,外周血HPC计数可部分替代外周血CD+34 计数预测采集效果,HPC≥85／μl为较好的预测阈值。     

自体外周血CD_(34)~ 造血干细胞移植治疗多发性骨髓瘤

[目的]探讨自体外周血CD 造血干细胞移植治疗多发性骨髓瘤的可行性。[方法]应用CliniMACS系统分选纯化患者外周血CD 造血干细胞 ,用流式细胞仪检测分选纯化结果。选马法兰200mg/m2 作为预处理方案。[结果]分选纯化结果 ,单个核细胞数为3.7136×108,活性率96.6% ,CD 细胞数3.68018×108,即5.52×106/kg。移植后患者骨髓像获得完全缓解。移植相关并发症少且易于控制。[结论]自体外周血CD 造血干细胞移植治疗多发性骨髓瘤是安全、有效、可行的。     

自体外周血造血干细胞的采集和衡量

自体外周血造血干细胞移植后血液系统的重建与采集和保存的ＰＢＳＣ的质量和数量有密切关系，在１５名病人的７６次ＰＢＳＣ的采集和保存中，发现ＰＢＳＣ的质量和数量有明显的个体差异，与疾病的类型和化疗方案有密切关系，ＮＨＬ中ＣＤ３４＾＋细胞与ＣＦＵ＝ＧＭ的比例平均为２５％，ＣＭＬ为６７％，ＭＭ最低为１３９％，这可能是因为ＭＭ病人的血清中存在白细胞分化的抑制因子，ＣＭＬ病人中ＣＤ３４＾＋／ＣＤ３３＾－细胞中的     

细胞因子扩增脐带血CD_(34)~+细胞中LTC-IC的变化

目的 :探讨脐带血造血干细胞的体外扩增及移植最佳时机。方法 :免疫磁珠法分离纯化脐带血 CD+ 3 4细胞 ,在细胞因子 FL T3配体、血小板生成素作用下 ,进行体外扩增 ,流式细胞仪检测培养体系中 CD+ 3 4 细胞数量的变化 ,甲基纤维素法检测 CFU - GM、长期培养起始细胞 ( L TC- IC)。结果 :经过 2周的培养 ,有核细胞扩增 ( 2 1± 5 )倍 ,CD+ 3 4 细胞扩增 ( 9± 3 )倍 ,CFU- GM扩增 ( 164± 5 1)倍 ,L TC- IC扩增 ( 6.5± 3 .1)倍 ,随着体外培养时间的延长 ,有核细胞、CD+ 3 4 细胞和 CFU- GM得到进一步扩增 ,但培养体系中已缺少 L TC- IC。结论 :FL T3配体联合血小板生成素能扩增具有造血干细胞特征的 L TC- IC细胞 ,培养时间以 2周为佳     

rhTPO对CD_(34)~+细胞增殖及形成CFU-MK作用的研究

目的研究重组人TPO（rhTPO）单独及与rhIL-3、rhIL－6、rhSCF协同体外对巨核系的增殖效应。方法采用纯化的CD+34细胞,进行求固体巨核细胞集落培养和液体悬浮培养,研究TPO及与IL－3、IL－6、SCF协同体外对CD+34细胞增殖及向巨核系空向分化的特性,和形成CFU－MK的作用。结果rhTPO可以诱导CD+34细胞形成CFU－MK,增加巨核细胞集落数,这种作用可以被rhIL－3、rhIL－6、rhSCF增强。液体培养中,rhTPO促进CD+34变细胞分化／成熟为表达GPⅡb／Ⅱa的细胞,增加体系中CD+34。细胞,rhIL-3、rhIL－6、rhSCF可以协同TPO的作用。结论TPO作为一种促增殖因子,促进巨核系祖细胞的增殖及分化。     

自体外周血造血干细胞的采集和衡量

自体外周血造血干细胞（ＰＢＳＣ）移植后血液系统的重建与采集和保存的ＰＢＳＣ的质量和数量有密切关系。在１５名病人的７６次ＰＢＳＣ的采集和保存中，发现ＰＢＳＣ的质量和数量有明显的个体差异，与疾病的类型和化疗方案有密切关系。ＮＨＬ中ＣＤ＋３４细胞与ＣＦＵ－ＧＭ的比例平均为２５％，ＣＭＬ为６７％，ＭＭ最低为１３９％，这可能是因为ＭＭ病人的血清中存在白细胞分化的抑制因子。ＣＭＬ病人中ＣＤ＋３４／ＣＤ－３３细胞在总的ＣＤ＋３４细胞中的比例很低，提示此类病人的早期造血干细胞很少。ＮＩＣＯＯＬ程控降温仪与－８０℃冰箱在细胞的冷冻保存中没有明显的差异。认为单一项目的检测不能全面评价ＢＰＳＣ的质量和数量，应该同时进行单个核细胞计数、ＣＦＵ－ＧＭ数和ＣＤ＋３４细胞数的评估。     

CD_(30)和CD_(15)在霍奇金病R-S细胞的表达及其临床意义

应用免疫组织化学技术，用ＣＤ３０和ＣＤ１５单克隆抗体对３３例霍奇金病（ＨＤ）进行标记检测。结果显示，３３例ＨＤ中ＣＤ３０阳性率为７８．８％，ＣＤ１５阳性率为８１．８％，两者之间以及ＨＤ各亚型之间阳性率无明显差异（Ｐ＞０．０５），其阳性表达部位均位于Ｒ－Ｓ细胞浆内。但ＣＤ３０除了ＨＤ外，还在大细胞间变性淋巴瘤中的大细胞及Ｒ－Ｓ样细胞等表达。结果提示，用免疫组织化学对ＨＤ的诊断，鉴别诊断以及判断肿瘤的组织学来源有一定价值，ＣＤ１５的特异性强于ＣＤ３０，而ＣＤ３０和ＣＤ１５的双阳性表达对诊断ＨＤ的临床意义更大。     

肿瘤骨转移对外周血造血干细胞采集影响的初步观察

目的:探讨肿瘤骨转移对接受外周血造血干细胞采集的影响。方法:选择2004年4月至2006年6月接受自体外周血造血干细胞移植的患者共36例,根据有无肿瘤骨转移分为两组,A组合并肿瘤骨转移;B组无肿瘤骨转移。两组均采用泰素帝120mg/m²联合G-CSF5μg/kg/日动员外周造血干细胞,血细胞分离机采集单个核细胞。检测采集前外周血CD34⁺细胞比例和采集物单个核细胞、CD34⁺细胞数量,评价两组在动员效果和采集物质量方面的差异。结果:A、B两组动员后外周血单个核细胞分别为39.3±14.7%、41.1±12.4%;CD34⁺细胞比例分别为0.16±0.07%、0.17±0.10%。A、B两组采集物的单个核细胞数量分别为3.47±1.16×10⁸/kg、4.02±1.31×10⁸/kg;CD34⁺细胞数量分别为2.52±1.43×10⁶/kg、2.73±1.87×10⁶/kg。经检验A、B两组动员后外周血和采集物的CD34⁺细胞数量间无统计学差异。结论:肿瘤骨转移作为单因素可能对自体外周血造血干细胞的动员和采集质量无影响。     

MCS+血细胞分离机在自体外周血造血干细胞采集中的应用

目的探讨MCS+血细胞分离机在外周血干细胞采集中的使用和故障处理。方法总结我科自2002年1月至2004年12月共收治81例患者,采用MCS+血细胞分离机进行165次外周血干细胞采集,分析采集成功率、不良反应发生率和故障处理等情况。结果81例病人中90%为使用G-CSF后3~4天开始采集。68例患者进行股静脉插管采集,占84.0%;13例经肘正中静脉穿刺采集,占16.0%。采集过程最长6.3小时,最短4.2小时,平均4.8小时。按照累计采集物CD34+细胞总数>2.0×106/kg为采集成功标准,81例患者中78例需要连续2次采集,另有3例患者3次连续采集。单次采集处理血量为7326±627.3m l,采集物为87±18.4m l。81例患者165次采集中有10次出现ACD-A过敏反应(6.1%)。采集中1例患者出现终产品袋出口处被血凝块堵塞,2例患者出现插管血流不畅,血流速度低于20m l/m in,机器无法进行正常运转,故障发生率1.82%,上述情况经及时处理,未造成严重不良反应,均顺利完成采集。结论采用MCS+血细胞分离机进行外周血干细胞采集方法可靠,平均2次采集可达到临床治疗要求。     

CD+4 CD+25 调节性T细胞与急性髓细胞白血病关系的研究

 目的　探讨CD+4 CD+25 调节性T细胞（CD+4 CD+25 Treg细胞）在急性髓细胞白血病（AML）患者化疗前后外周血中的表达水平及其临床意义。方法　采用流式细胞术检测AML初发组（A组）、缓解3年内组（B组）、缓解3年以上组（C组）及正常对照组外周血中CD+4 CD+25 CDlow127 T细胞所占比例。结果　A组和B组外周血中CD+4 CD+25 Treg细胞比例均高于对照组（P＜0.05）;C组外周血CD+4 CD+25 Treg细胞比例与对照组相比差异无统计学意义（P＞0.05）;B组外周血中CD+4 CD+25 Treg细胞比例高于C组（P＜0.05）;A组外周血中CD+4 CD+25 Treg细胞比例明显高于B、C两组（P＜0.05）。结论　CD+4 CD+25 Treg细胞与AML发生有关,尤其与3年内容易复发密切相关。     

CD34+ CD90+ cells and late hematopoietic reconstitution after autologous peripheral blood stem cell transplantation

Autologous peripheral blood stem cell transplantation (PBSCT) has been demonstrated to result in rapid, stable long-term engraftment. However, there has been considerable debate concerning the cells responsible for early and late hematopoietic reconstitution after PBSCT. Recently, CD34⁺ hematopoietic stem and progenitor cells have been clearly divided into two subpopulations by flow cytometry; namely undifferentiated pluripotent stem cells and differentiated committed progenitor cells. However, only a few studies have defined which subset contained in graft products might be the most predictive for late hematopoietic reconstitution after PBSCT. In this review, we present updated information regarding the relationships between the number of infused CD34⁺ cells or their immature subsets such as CD34⁺CD90⁺ cells and the late hematopoietic reconstitution after PBSCT, and discuss the threshold dose of CD34⁺CD90⁺ cells required for sustained long-term engraftment.     

白血病bcl-2、CD_(34)表达的临床意义

目的探讨白血病bcl-2、CD34表达的临床意义和相关性。方法用ABC免疫细胞化学方法检测77例急性白血、23例慢性粒细胞白血病bcl-2、CD34的表达。结果复发／难治急性白血病bcl-2、CD34的表达高于初治者;慢粒白血病加速期／急变期组高于慢性期组。bcl－2、CD34高表达的急性白血病完全缓解率低,早期复发率高.bcl-2与CD34的表达呈轻度正相关（r＝0．367,P＜0．001）。结论bcl－2、CD34高表述可能与急性白血病预后不良有关。bcl－2的表达增高可能是CD34高表达的急性白血病预后不良的原因之一。     

自体CD34~+细胞移植治疗晚期肿瘤

目的　采用CD34+ 细胞体外分选技术对晚期肿瘤患者进行自体CD34+ 细胞移植 ,以降低自体移植后肿瘤复发率。方法　对 15例Ⅲ～Ⅵ期肿瘤患者 (多发性骨髓瘤 11例 ,乳癌 2例 ,非霍奇金淋巴瘤和髓母细胞瘤各 1例 )采用CliniMACS临床型细胞富集仪 ,利用磁性分选技术收集CD34+和CD34-细胞组分 ,患者于预处理后 ,输注分选后的CD34+ 细胞。结果　CD34+ 细胞体外纯化富集可使CD34-细胞获得 2 .0～ 5 .0个对数的去除 ;回输CD34+ 细胞中位数为 2 .4× 10 6/kg,CD34+ 细胞回收率为 6 4 % ,纯度为 98.2 % ;移植后白细胞恢复至 >1.0× 10 9/L和血小板 >2 0× 10 9/L的天数 (中位数 )分别为 14d和 13d。患者总体生存率 6 6 .7% (10 / 15 ) ,无疾病生存率 5 3.3% (8/ 15 )。结论　CD34+ 细胞移植后获得迅速、稳定的造血重建。体外CD34+ 细胞纯化富集后移植可望提高晚期肿瘤患者自体移植疗效。     

Effect of cell determinant (CD)34+ cell dose on the cost and consequences of peripheral blood stem cell transplantation for non-Hodgkin's lymphoma patients in front-line therapy

The aim of this study was to assess the effect of cell determinant (CD)34+ cell dose on the cost and consequences of peripheral blood stem cell transplantation for non-Hodgkin's lymphoma (NHL) patients in front-line therapy. Resource utilisation, length of aplasia, overall (OS) and event-free survival (EFS) were assessed for 63 patients. Economic data were calculated taking into account harvest, hospitalisation, blood product requirements and drugs required until discharge. The point of view of the Hospital Institution was chosen. A significantly earlier haematopoietic engraftment was achieved in patients with a count of more than 5×10⁶ CD34+/kg. There were no differences for OS and EFS. A high CD34+ cell content resulted in a total cost saving of $4210. This was principally related to a significant reduction in the length of hospitalisation (−$3010) and platelet and red blood cell transfusions (−$815), although the latter was not significant. Several sensitivity analyses showed the robustness of our results. A CD34+ cell dose higher than 5×10⁶/kg appeared to be optimal for clinical and economic considerations in NHL patients undergoing transplantation in front-line therapy.     

以逆转病毒介导对人脐血CD34+造血细胞进行人MDR1基因转染的实验研究

目的：探讨逆转录病毒介导的MDR1基因转导入脐血CD34^ 细胞的最佳方法，为MDR1基因转导的临床应用打基础。方法：用磷酸钙沉淀法将含有人全长MDR1cDNA的逆转录病毒载体pHaMDR1/A转到包培育细胞PA317中，建立产病毒细胞系，以人脐血中分离的CD34^ 造血干/祖细胞为靶细胞，在体外进行基因转染，转导的条件为：与含病毒的上清液共培养12天，每天更换病毒上清液，上清液中加入IL-3，IL-6和SCF三种造血生长因子（HGF），转染后用集落培养法测定对COL的耐药性，用PCR检测14-17天所形成集落的MDR1 cDNA，计算转染率，用免疫组化法检测P170的阳性程度，并观察不同时间间隔加HGF对脐血CD34^ 细胞的扩增和转染的影响。结果：脐血CD34^ 细胞转染阳性为86.4％，P170的阳性率为77.0％，77.1％的集落对6ng/ml的COL耐受，57.4％的集落对7ng/ml的COL耐受。结论：此转染系统既能有较好的转导效果，也有较好的扩增效果，有一定的临床实用价值。