黄连素通过重塑肠道菌群和调节PI3K/AKT信号通路改善多囊卵巢综合征小鼠的作用机制研究

目的 探究黄连素(BBR)对多囊卵巢综合征(PCOS)小鼠肠道菌群的调节作用及其治疗机制。方法 于2021年6月—2022年6月在复旦大学附属上海市第五人民医院实验动物中心进行实验。清洁级健康雌性C57BL/6J小鼠24只,随机选取6只作为正常对照组,其余18只应用来曲唑灌胃制备PCOS模型。造模成功后,将造模小鼠随机分为模型(PCOS)组、阳性药达英-35(0.2 mg·kg^-1·d^-1)组和BBR(100·kg^-1·d^-1)组,每组6只,给予相应药物治疗14 d。收集小鼠结肠内粪便,采用16S rDNA测序检测肠道菌群;称小鼠体质量,观察小鼠阴道脱落细胞形态学改变;检测血清性激素和胰岛素水平;HE染色观察卵巢病理结构;免疫组化检测小鼠结肠Claudin-1、Occludin表达;Western-blot检测卵巢组织PI3K/AKT通路相关蛋白表达。结果 16S rDNA测序结果显示,PCOS组肠道菌群多样性较正常对照组发生变化。在属水平,与正常对照组比较,PCOS组布劳特氏菌属、韦永氏球菌属、孪...     

PI3K/AKT/mTOR信号传导通路在胃癌中的研究进展

胃癌的形成是一个十分复杂的过程,不但涉及到基因的突变,还涉及到细胞内信号传导通路的改变.PI3K/AKT/mTOR通路是细胞内重要的信号传导通路之一,该通路活化可以抑制多种刺激诱发的胃癌细胞凋亡,促进细胞周期进展,促进血管形成,参与胃癌的侵袭和转移[1-2].现就PI3K/AKT/mTOR通路的结构特点及在胃癌发生、发展中作用的研究进展进行综述.     

结肠癌组织中PTEN蛋白表达与PI3K/AKT信号通路的关系

目的 探讨抑癌基因PTEN与结肠癌发生发展的关系及其与PI3K/AKT信号传导通路的相关性.方法 应用Western blot蛋白印迹技术和免疫组织化学方法检测 32例结肠癌及癌旁正常组织中 PTEN和p-AKT蛋白的表达.结果 PTEN蛋白在结肠癌中表达的阳性率 (31.25%)低于癌旁正常组织 (96.87%) (P＜0.01);而p-AKT蛋白在结肠癌中表达的阳性率(87.5%)高于癌旁正常组织 (15.62%) (P＜0.01);两种蛋白的表达呈负相关(r=-0.872,P＜0.01),且表达水平与肿瘤的分化程度、Duke's分期、有无淋巴结转移及远处器官转移有关(P＜0. 05).结论 PTEN蛋白表达缺失导致AKT信号传导通路持续活化可能在结肠癌的发生发展过程中起着重要作用.     

RGFP966通过PI3K/AKT通路抑制胃癌细胞增殖

目的：探讨组蛋白去乙酰化酶3特异性抑制剂RGFP966对胃癌细胞增殖能力和细胞周期的影响及其作用机制。方法：采用CCK-8法检测RGFP966处理MKN-45和MGC-803细胞后各组细胞的活力;细胞克隆形成实验检测RGFP966对胃癌细胞集落形成能力的影响;流式细胞术检测细胞周期;Western blot 实验检测细胞增殖和周期相关蛋白 Ki-67、c-Myc、Cyclin A2、Cyclin D1以及PI3K/AKT 信号通路相关蛋白的表达情况。结果：与对照组相比,RGFP966可显著抑制胃癌细胞MKN-45 和MGC-803的增殖能力、集落形成能力。与对照组相比,流式细胞术显示RGFP966诱导胃癌细胞阻滞在G0/G1期。与对照组相比,RGFP966处理后细胞增殖和周期相关蛋白Ki-67、c-Myc、Cyclin A2、Cyclin D1表达均下降,RGFP966可显著降低PI3K和 AKT的磷酸化水平。结论：RGFP966抑制胃癌细胞的增殖能力并诱导胃癌细胞阻滞在G0/G1期,其作用机制可能与RGFP966 抑制PI3K/AKT信号通路有关。     

基于PI3K/AKT/mTOR通路探讨葆青颗粒改善卵巢储备功能下降大鼠卵巢功能的机制研究

目的 观察葆青颗粒对卵巢储备功能下降(diminished ovarian reserve, DOR)模型大鼠卵泡发育的影响,探讨葆青颗粒通过PI3K/AKT/mTOR信号通路治疗DOR的作用机制。方法 纳入动情周期正常的雌性SD大鼠60只,使用随机数字表法选取10只作为正常组,其余50只大鼠采用一次性腹腔注射环磷酰胺75 mg/kg诱导DOR模型。按随机数字表法将造模成功的50只大鼠分为模型组(等剂量生理盐水,灌胃)、葆青颗粒低剂量组(3 g/kg, 1次/d,灌胃)、葆青颗粒中剂量组(6 g/kg, 1次/d,灌胃)、葆青颗粒高剂量组(9 g/kg, 1次/d,灌胃)及补佳乐组(0.21 mg/kg, 1次/d,灌胃),每组各10只,连续灌胃21 d。HE染色观察卵巢及子宫形态学变化,ELISA检测血清雌二醇(estradiol, E₂)、卵泡刺激素(follicle stimulating hormone, FSH)、抗苗勒管激素(anti-Mullerian hormone, AMH)水平;Western Blot及免疫组化法检测大鼠卵巢组织磷脂酰肌醇3-...     

中药基于PI3K/AKT/mTOR信号通路治疗膝骨关节炎

磷脂酰肌醇3激酶(phosphatidylinositiol 3 kinase, PI3K)/蛋白激酶B(protein kinase B,PKB,又称AKT)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin, mTOR)信号通路在膝骨性关节炎(knee osteoarthritis, KOA)的形成、发展和治疗中起着关键作用,其在软骨增殖与凋亡、软骨下骨重塑和滑膜炎症中扮演重要角色。抑制PI3K/AKT/mTOR信号传导,能够促进自噬,减轻关节炎症反应,恢复关节稳态;激活PI3K/AKT/mTOR信号传导,可以促进软骨细胞增殖分化,减少凋亡。以中药单体和中药复方为研究对象,依据中药基于PI3K/AKT/mTOR信号通路分析其促进软骨细胞增殖、减少凋亡、抑制炎症反应、增强软骨细胞自噬、恢复关节稳态、减轻关节损伤等方面的机制,以期为KOA的临床治疗及基础研究提供思路。     

基于PI3K/AKT信号通路的中药单体治疗肺癌的研究进展

肺癌是一种发病率较高的恶性肿瘤,是威胁人类生命健康的重大疾病.中药单体是从中药材中提取出的主要有效成分.近年来,有多篇文献报道中药单体通过调控PI3K/AKT信号通路抑制肺癌细胞增殖、侵袭和迁移,并诱导肺癌细胞凋亡.PI3K/AKT信号通路在肺癌发生和发展的过程中扮演着一个重要的角色,PI3K/AKT信号通路的异常激活...     

PI3K/AKT/mTOR信号通路调控Th17细胞的研究进展

CD4⁺ T细胞是一类在免疫反应中发挥重要作用的免疫细胞,它在激活后可分化为Th1、Th2、Th17和Treg等细胞亚群。其中Th17细胞是一类新型CD4⁺ 效应T细胞,在宿主防御各种病原体和炎症发病机制中发挥重要作用。PI3K/AKT/mTOR信号通路可以调控细胞的新陈代谢、增殖、分化和生存等生命过程,并参与肿瘤、自身免疫性疾病等的发生。本文针对PI3K/AKT/mTOR信号通路调控Th17细胞的研究进展进行综述。     

脑胶质瘤中IMP3的表达与PI3K/AKT信号通路相关性及靶向干预

目的 探讨胰岛素样生长因子II mRNA结合蛋白3（insulin-like growth factor-II mRNA-binding protein 3,IMP3）、磷酸肌醇三磷酸激酶-丝氨酸（phosphatidylinsitol 3-OH kinase-RAC-alpha serine,PI3K）、苏氨酸蛋白激酶（threonine-protein kinase,AKT）蛋白在人脑胶质瘤组织及细胞中的表达及相关性。 方法 采用免疫组织化学方法检测53例人脑胶质瘤组织及20例非瘤脑组织中IMP3,PI3K及AKT蛋白的表达情况;采用Westen-Blot及RT-PCR方法检测瞬时干扰IMP3基因后的胶质瘤U138细胞株IMP3、PI3K的蛋白及基因表达情况;检测抑制剂LY294002抑制U138细胞株的PI3K/AKT信号通路后相关蛋白IMP3、PI3K的表达情况。 结果 人脑胶质瘤组织中IMP3（P均=0.000）, PI3K（P均=0.000）和AKT（P均=0.000）蛋白的表达均高于非瘤脑组织中的表达,且表达程度（中重度阳性表达率,P均=0.000）随肿瘤病理级别升高而增高。胶质瘤U138细胞株干扰IMP3基因后,IMP3蛋白（P=0.038）及基因（P=0.031）的表达均降低,PIK3蛋白（P=0.019）及基因（P=0.023）的表达均降低,LY294002抑制U138细胞株的PI3K/AKT信号通路后,PI3K蛋白（P=0.039）及基因（P=0.035）的表达均降低,而IMP3的蛋白（P=0.907）及基因（P=0.102）表达没有明显变化。 结论 IMP3、PI3K、AKT蛋白的表达与胶质瘤的组织病理分级、肿瘤细胞增殖密切相关,IMP3与PI3K/AKT具有相关性,且有望成为治疗胶质瘤的一个新靶点。     

PI3K/AKT信号转导通路与肿瘤转移及其机制的研究进展

PI3K/AKT信号转导通路与肿瘤的发生发展关系密切,本文概述PI3K、AKT的结构特征、PI3K/AKT信号转导通路的活化及其与恶性肿瘤转移的关系及机制。     

PTEN/PI3K/AKT在溃疡性结肠炎炎症-肿瘤序列演进中的作用

目的 观察抑癌基因第10号染色体缺失的磷酸酶和张力蛋白同源物基因(PTEN)与磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(AKT)信号通路在溃疡性结肠炎(UC)炎症-肿瘤序列演进过程中的表达变化,为阐明UC的发生及其癌变机制提供依据,并探讨其可能的临床意义.方法 收集65例UC的石蜡包埋标本、25例结直肠癌石蜡包埋标本、25例正常组织石蜡包埋标本,采用免疫组织化学染色法检测UC、结直肠癌及正常组织中PTEN及AKT的蛋白表达,并分析它们之间的相关关系.结果 ①UC组织中PTEN蛋白的表达明显低于正常组织,高于结直肠癌组织(P<0.01).②UC组织中AKT蛋白的表达明显高于正常组织,低于结直肠癌组织(P<0.01).③随着UC病程的增加,PTEN蛋白的表达逐渐降低,AKT蛋白的表达逐渐增强(P<0.01).④PTEN蛋白和AKT蛋白在UC、结直肠癌组织中的表达呈显著负相关(相关系数分别为r=-0.542、-0.674,P<0.01).结论 在UC炎症-肿瘤序列演进过程中,抑癌基因PTEN蛋白表达的降低及原癌基因AKT蛋白表达的增强,可能是UC发生及癌变的重要原因之一.PTEN蛋白表达的明显降低和AKT蛋白表达的明显增强有可能成为早期监测UC癌变的一个辅助指标.     

Carvacrol Promotes Cell Cycle Arrest and Apoptosis through PI3K/AKT Signaling Pathway in MCF-7 Breast Cancer Cells

Objective: To examine the role of carvacrol in modulating PI3K/AKT signaling involved in human breast cancer pathogenesis using in vitro experimental model MCF-7 cells. Methods: MTT and lactate dehydrogenase assays were performed with cells treated with different doses of carvacrol (0–250 μ mol/L) at different time points (24 and 48 h). The nuclear morphology was assessed in MCF-7 cells with propidium iodide (PI) and acridine orange/ethidium bromide (AO/EB) staining and analyzed by fluorescence microscopy. Events like cell cycle arrest and apoptosis were observed by flow cytometric analysis and expressions of p-Rb, cyclin D1, cyclin-dependent kinase 4 (CDK4), CDK6, Bax, Bcl-2, PI3K/p-AKT were analyzed by immunoblot. Results: Carvacrol significantly reduced cell viability with the half maximal inhibitory concentration value of 200 μ mol/L at 24 and 48 h (P<0.05). importantly, there was a significant increase in the accumulation of the G0/G1 phase upon treatment with carvacrol in MCF-7 cells (P<0.05 or P<0.01). A remarkable decrease in protein expressions of p-Rb, cyclin D1, CDK4 and CDK6 denoted cell cycle arrest (P<0.05 or P<0.01). In addition, carvacrol treatment significantly inhibited PI3K/p-AKT protein expressions leading to induction of apoptosis mediated by decreased Bcl2 and increased Bax protein expressions. Further, Annexin V/PI staining by FACS analysis, dual staining by AO/EB and PI staining studies suggested induction of apoptosis by carvacrol through PI3K/Akt signaling pathway in MCF-7 cells. Conclusion: Carvacrol significantly inhibited the breast cancer MCF-7 cell proliferation and induced apoptosis via suppressing PI3/AKT signaling pathway.     

不同危险分组ALL细胞PI3K／AKT磷酸化激活的初步研究

目的观察磷脂酰肌醇-3激酶／蛋白激酶通路(P13K／AKT)在不同危险分组的白血病细胞中磷酸化激活的程度，初步了解急性白血病细胞P13K／AKT激活与急淋白血病危险分组的关系。方法使用蛋白印记分析法(Western Blot)检测正常健康儿童、初发白血病患儿、缓解后患儿以及难治性白血病患儿白血病骨髓细胞中PI3K／AKT磷酸化激活程度。结果正常健康儿童骨髓单个核细胞中无PI3K／AKT磷酸化激活，10例初发患儿中3例、10例缓解后患儿1例有PI3K／AKT磷酸化激活，6例难治患儿中4例有PI3K磷酸化激活。结论PI-3K/AKT信号传导通路激活与否在淋巴细胞白血病危险分组和疾病转归的生物学过程中可能起着较重要作用，需进一步深入研究。     

姜黄素对HL60细胞PI3K/AKT信号传导通路的影响

目的研究姜黄素诱导白血病HL-60细胞凋亡与PI3K/AKT信号传导通路的相关性,为AML的靶向治疗提供新思路。方法 MTT实验检测姜黄素对HL-60细胞增殖的抑制作用;经姜黄素处理后,用倒置显微镜进行细胞形态学观察,并用Western blot检测CAV-1、AKT、p-AKT蛋白水平。结果 MTT实验证明了姜黄素对HL60细胞增殖具有抑制作用,且随作用浓度的增强而增强;姜黄素作用HL-60细胞,用倒置显微镜观察细胞出现了凋亡形态学改变;并且Western blot检测显示CAV-1蛋白水平增高,而AKT、p-AKT蛋白水平降低。结论姜黄素可通过上调HL-60细胞中CAV-1的表达,而抑制PI3K/AKT信号通路,进而抑制HL-60细胞增殖并促进其凋亡。     

黄芩素通过抑制PI3K/AKT/mTOR通路诱导膀胱癌细胞凋亡

目的 研究黄芩素对膀胱癌细胞的作用及机制。 方法 膀胱癌细胞T24和5637经黄芩素(处理组)或二甲基亚砜(对照组)处理后,3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)以及胸腺嘧啶核苷类似物(EdU)插入实验检测细胞增殖和DNA复制速率;划痕实验和Transwell实验检测细胞的迁移和侵袭能力;流式细胞技术检测细胞周期和细胞凋亡水平;Western blotting检测PI3K/AKT/mTOR信号通路蛋白、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)和B淋巴细胞瘤-2相关X蛋白(Bax)等蛋白的表达水平;裸鼠成瘤实验检测黄芩素对于体内膀胱癌细胞增殖能力的影响。 结果 黄芩素可以在体内和体外抑制膀胱癌细胞的增殖速率,高浓度黄芩素体外抑制率可达80%以上,体内抑制率约50%。黄芩素可以减缓DNA复制并降低肿瘤细胞的迁移和侵袭能力,诱导细胞停滞在G₀/G₁期,发生细胞凋亡,与对照组相比差异有统计学意义。黄芩素处理后,PI3K的表达以及AKT和mTOR的磷酸化水平降低,Bax/Bcl-2的比值升高。 结论 黄芩素通过抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路抑制膀胱癌细胞增殖,发生周期阻滞,诱导细胞凋亡。     

Effects of Electroacupuncture on Expression of PI3K/Akt/Foxo3a in Granulosa Cells from Women with Shen (Kidney) Deficiency Syndrome Undergoing in vitro Fertilization-Embryo Transfer

Objective: To observe the effects of electroacupuncture(EA) on reproductive outcomes in women with Shen(Kidndy) deficiency syndrome after in vitro fertilization-embryo transfer(IVF-ET),and explore the underlying molecular mechanism.Methods: Sixty-six infertile patients with Shen de?ciency syndrome undergoing IVF-ET were divided into EA or control groups according to a random table,33 cases in each group.Before undergoing IVF,patients in the EA and control groups received EA therapy and placebo needle puncture,respectively,for 3 menstrual cycles.Shen de?ciency syndrome scores were assessed.Other outcome measures included the number of retrieved oocytes and fertilization,high-quality embryo and clinical pregnancy rates.Follicular ?uid was collected on the day of oocyte retrieval,and granulosa cell expression of phosphatidylinositide3-kinases(PI3 K),serine-threonine kinase(Akt) and forkhead box O3(Foxo3 a) m RNA were measured by reverse transcribed and quantitative real-time polymerase chain reaction.Results: Syndrome scores for pre-versus post-treatments decreased significantly(16.53±1.75 to 8.67±1.61) in the EA group(P0.05),but showed no signi?cant change in the control group(17.18±1.58 to 14.74±1.58).A signi?cant difference in score change was found between the EA and control groups(P0.05).High-quality embryo and clinical pregnancy rates were both increased in the EA group compared with the control group [69.15%(195/282) vs.60.27%(176/292) and 66.67%(22/33) vs.42.42%(14/33),respectively,P0.05].The fertilization rate was equivalent in EA and control groups.No difference was found in the number of retrieved oocytes between the two groups.Granulosa cell expression levels of PI3 K and Akt m RNA were signi?cantly increased in the EA group compared with the control group,while the expression of Foxo3 a was reduced(all P0.05).Conclusions: For infertile patients with Shen de?ciency syndrome undergoing IVF,EA for tonifying Shen as an adjunct treatment may alleviate clinical symptoms and improve the high-quality embryo rate.The EA-induced mechanism may involve regulation of PI3 K/Akt/Foxo3 a expression in granulosa cells to improve the developmental microenvironment of oocytes and inhibit granulosa cell apoptosis,possibly contributing to the improved clinical pregnancy rate(Registration No.Chi CTR 1800016217).     

PI3K/AKT/mTOR途径在慢性阻塞性肺疾病大鼠骨骼肌萎缩中的作用

目的研究PI3K/AKT/mTOR信号通路在慢性阻塞性肺疾病（简称慢阻肺）大鼠骨骼肌萎缩中的作用。方法采用单纯熏香烟法复制慢阻肺大鼠动物模型。采用Western blot技术检测慢阻肺大鼠趾长伸肌中PI3K/AKT/mTOR信号通路中PI3K、总的及磷酸化的mTOR（t-mTOR,p-mTOR）、总的及磷酸化的GSK-3β（t-GSK-3β,p-GSK-3β）、总的及磷酸化的4E-BP1（t-4E-BP1,p-4E-BP1）、总的及磷酸化的p70S6K1（t-p70S6K1,p-p70S6K1）蛋白表达变化。结果 Western blot分析结果显示,大鼠趾长伸肌组织中PI3K的蛋白表达在两组间差异不显著（P〉0.05）;t-mTOR、p-mTOR、t-GSK-3β和p-GSK-3β的蛋白表达慢阻肺组显著高于对照组（P〈0.05,其中p-GSK-3β两组对照P〈0.01）;t-4E-BP1和t-p70S6K1的蛋白表达在两组间差异不显著（P〉0.05）,p-4E-BP1和p-p70S6K1的蛋白表达慢阻肺组显著高于对照组（P〈0.05）。结论慢阻肺大鼠趾长伸肌组织内PI3K/AKT/mTOR信号通路被激活,可能是骨骼肌萎缩的代偿机制之一。