改良的一步热酚法及Trizol试剂盒提取组织中RNA的比较

目的：比较改良的一步热酚法及Trizol试剂盒提取组织中RNA的差别。方法：应用两种方法分别提取20例兔肝脏的总RNA,对所提RNA的产率=纯度及完整性进行鉴定。结果：对比两种方法所提的RNA的产率、纯度及完整性,均无显著性差异,且RT-PCR产生均扩增出了β-actin的目的的条带。结论：采用改良一步热酚法较之Trizol试剂盒更具有简便经济的特点。特别适宜大量样品的处理。     

Trizol与RNA Fast1000试剂盒提取外周抗凝血总RNA的方法比较

目的比较传统Trizol法和试剂盒法提取血液中总RNA的效果。方法我们将100份人体新鲜血液标本随机分为2组,每组各50份,分别用Trizol法和RNA Fast1000试剂盒法两种方法从外周血中提取RNA测定其纯度和完整性,通过两独立样本的t检验统计分析2组OD值比值数据的差异性。结果试剂盒提取的总RNA的纯度（1.904±0.15）优于传统的Trizol方法（1.727±0.42）。结论与Trizol法相比,试剂盒法具有简便、快速、高纯度等特点,且提取的RNA样品质量较高,可直接用于RT-PCR合成、Northern杂交等分子生物学操作。     

Trizol与RNA Fast1000试剂盒提取外周抗凝血总RNA的方法比较

目的 比较传统Trizol法和试剂盒法提取血液中总RNA的效果.方法 我们将100份人体新鲜血液标本随机分为2组,每组各50份,分别用Trizol法和RNA Fast1000试剂盒法两种方法从外周血中提取RNA测定其纯度和完整性,通过两独立样本的t检验统计分析2组OD值比值数据的差异性.结果 试剂盒提取的总RNA的纯度(1.904±0.15)优于传统的Trizol方法(1.727±0.42).结论 与Trizol法相比,试剂盒法具有简便、快速、高纯度等特点,且提取的RNA样品质量较高,可直接用于RT-PCR合成、Northem杂交等分子生物学操作.     

改良酚-氯仿法提取及不同试剂盒扩增检测陈旧性人骨DNA

目的：探讨改良酚-氯仿法提取及不同试剂盒扩增对陈旧性人骨DNA检测的效果。方法：用传统和改良的酚-氯仿法对30例陈旧性人骨进行DNA提取,用Identifiler-plus试剂盒、Minifiler试剂盒和GodeneyeTM 20A试剂盒行荧光标记和复合扩增,Genetic Analyzer软件对基因位点进行检测和分析。结果：改良酚-氯仿法提取及3种试剂盒对陈旧性人骨DNA基因位点检出469、262、588个,高于传统法的307、175、436个。结论：改良酚-氯仿法、3种试剂盒PCR复合扩增能对陈旧性人骨DNA进行有效提取和检测。     

冷酚法提取RNA及质量鉴定

用改良的冷酚法从大鼠心房中提取总RNA,经紫外分光光谱、变性琼脂糖凝胶电泳及分子杂交放射自显影检测表明,RNA制备物纯度高、未降解。此方法简便不需特殊试剂和设备。     

改良酸性硫氰酸胍-酚-氯仿一步法提取动物组织RNA

提取组织中的ＲＮＡ是分子生物学实验的基本操作 ,高质量的ＲＮＡ是许多分子生物学研究成功与否的关键。我们实验室在实验过程中 ,对目前最常采用的ＲＮＡ酸性硫氰酸胍 酚 氯仿一步提取法[1] 进行了改良 ,从而建立起一种较为简便、高效、经济的提取组织ＲＮＡ的方法 ,其ＲＮＡ的完整性、纯度及ＲＴ ＰＣＲ结果均令人满意。现介绍如下 ,供大家参考。1　材料和方法1.1　组织标本　ＳＤ大鼠的胃粘膜。1.2　主要试剂　硫氰酸胍、十二烷基肌酸钠及二硫基乙醇为Ｆｌｕｋａ产品 ,焦碳酸二乙酯 (ＤＥＰＣ)为Ｓｉｇｍａ产品 ,其余试剂均为国产分析纯…     

一种椎间盘组织总RNA提取的改良方法

目的改进传统常规法在椎间盘组织中总RNA提取,获得高质量的椎间盘组织总RNA。方法健康成年Newsland白兔,完整取出椎间盘组织,随机分RNA传统方法组和酶消化改良组。传统组,按Trizol法提取总RNA;酶消化改良组,加入0.2%Ⅱ型胶原酶,置于细胞培养箱消化数小时,加入含小牛血清的PBS液终止,离心收集细胞。余步骤同传统组。结果传统组,电泳结果未见28S和18S条带,5S条带部分可见;A260/280比值在1.5左右,蛋白多糖污染重。而酶消化组,电泳结果可见清晰的28S、18S和5S条带,且28S条带的亮度约是18S的两倍;A260/280比值在1.8～2.0之间,无蛋白污染,此法提取的RNA,逆转录后可用于扩增β-actin基因。结论酶消化改良法可望成为椎间盘组织总RNA提取的好方法。RNA片断完整,纯度高,无蛋白污染,不影响后续基因表达（RT-PCR）的分析,并且重复性好,可以推广。     

两种核酸提取方法对小鼠诺如病毒RNA提取效能的比较

目的 比较两种核酸提取方法对小鼠诺如病毒RNA的提取效能.方法 用Trizol提取法和QIAamp Viral RNA Mini Kit提取法分别提取感染小鼠诺如病毒(Murine Norovirus,MNV)的小鼠小肠组织样品RNA和细胞培养物RNA,测定RNA浓度;用MNV特异的引物对分离的核酸样品进行一步法RT-PCR扩增.结果 Trizol提取法提取小肠组织的RNA浓度高于QIAamp Viral RNA Mini Kit提取法;QIAamp Viral RNA Mini Kit提取得到的细胞培养物RNA浓度高于Trizol提取法.经QIAamp Viral RNA Mini Kit提取的两种核酸样品均能扩增出特异条带,而Trizol提取的核酸样品未见特异条带.结论 在MNV的检测中,QIAamp Viral RNA Kit更适合组织样品中MNV病毒核酸的提取.     

用改良的盐洗法与酚-氯仿法提取基因组DNA效果比较

目的:探索更为安全可靠的基因组DNA提取方法.方法:采用改良盐洗法提取人外周血白细胞基因组DNA,与传统的酚-氯仿抽提法在提取效果、DNA纯度等方面加以比较.结果:通过对15份不同静脉血标本与酚-氯仿抽提法同步对比研究显示:改良盐洗法提取模板DNA无污染、无害,所提DNA质量好、纯度高,达到酚-氯仿抽提法所获DNA的水平;操作简单、快速,方法稳定可靠,无一例失败.结论:该方法提取的DNA可用于实验以及临床上DNA分型等研究.     

用层析和改良的酸酚法提取和纯化质粒

本文用过Sepharose 4B除去质粒粗提物中RNA,然后用改良的酸酚法除去开环型质粒。用0.8％琼脂糖凝胶电泳、紫外荧光薄层扫描和pst Ⅰ限制性内切酶消化质粒法鉴定。此方法可制备出足够的高纯度质粒。     

改良酚－胍法提取大鼠肝组织总RNA

改良酚－胍法提取大鼠肝组织总ＲＮＡ纪徐淮，潘卫，崔晓红，戴晓晶，李石提取组织细胞中总ＲＮＡ是进行点印迹（Ｄｏｔｂｌｏｔ）、Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹（Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ）杂交的必经步骤。常用的方法为胍－氯化铯离心法与盐酸胍－有机溶剂提取法，尽管这两种...     

一步快速胶体金法与联苯胺法粪隐血试验的对比

粪便隐血试验是消化道出血、肿瘤的主要筛选指标。即往粪便隐血试验多采用化学法为主,但受到灵敏度低、特异性差、干扰因素多、有致癌性等缺点的影响逐渐被淘汰。一步快速胶体金法运用单克隆和多克隆的双抗体夹心胶体金显色技术,具有方便快捷、灵敏度高、抗干扰能力强的优点。本文对一步快速胶体金法、联苯胺法检测粪隐血的灵敏度、特异性、抗干扰能力进行了比较,并进行了临床验证,证明该方法明显优于联本胺法,有广泛的应用前景。1 材料和方法材料　一步法胶体金试纸条:美国迪生生物技术有限公司ChemTrueTmFOB检测试纸条,由广州威瑞康科…     

不同试剂盒对乙脑病毒RNA提取效能的比较

目的比较常见的3种商售RNA提取试剂对乙脑病毒检测的相对效率、耗时和成本,为实验室应用及检测结果的评价提供依据。方法对乙脑病毒参考株悬液作10-1～10-4系列稀释,选用QIAGEN公司的QIAamp Viral RNA MiniKit、Sangon生物公司的RNA提取试剂盒和Invitrogen公司的Trizol试剂3种核酸提取方法提取上述样本RNA,用TaqMan实时荧光定量反转录聚合酶链反应对其提取效率进行评价,并比较3种试剂(盒)的耗费时间和价格。结果对不同稀释度乙脑病毒样本的检测,均以QIAGEN公司QIAamp Viral RNA MiniKit检测的敏感度最高。以该试剂盒的提取效率为100%,则Invitrogen和Sangon生物公司RNA提取试剂(盒)的提取效率分别为77.4%～86.8%和64.2%～74.1%。3种试剂(盒)对cDNA起始模板量的估计也有明显的影响,差别达到1～3个数量级,以QIAGEN公司的试剂盒最敏感。3种试剂(盒)提取RNA耗时分别为60min、100min和70min,价格效率比分别为46元、23元和20元。结论RNA提取试剂可影响JEV荧光定量PCR检测的结果,...     

两种提取人参水煎液miRNA方法的比较

目的 筛选获取新鲜人参水煎液中高质量miRNA的提取方法.方法 选择改良Trizol法和通用植物miRNA提取试剂盒法提取新鲜人参水煎液miRNA,所得miRNA经DNaseⅠ处理后进行琼脂糖凝胶电泳和Agilent 2100生物分析仪检测,比较两种方法所得miRNA的纯度和质量.结果 改良Trizol法步骤简单、快捷省时、成功率较高但纯度较低;通用植物miRNA提取试剂盒法步骤较多耗时较长,但miRNA纯度高质量好.结论 通用植物miRNA提取试剂盒法更适用于提取人参水煎液中miRNA,提取的miRNA完整性好、纯度高,可以满足荧光定量PCR、建库测序等后续研究的需要.     

经典酚/氯仿抽提法和纯化试剂盒法提取全血基因组DNA的比较

目的 比较经典酚/氯仿法和纯化试剂盒法抽提全血基因组DNA的差异.方法 分别对两种方法抽提的全血DNA产物进行紫外分光光度仪、琼脂糖凝胶电泳和体外聚合酶链锁反应（PCR）扩增.结果 两种方法DNA的提取效率相似,TaKaBa试剂盒法提取的纯度[光密度（OD）260nm/280nm]较常规酚/氯仿法明显提高.结论 TaKaBa试剂盒法较传统酚/氯仿提取基因组DNA法快速、简便、经济,可用于PCR模板DNA的制备.     

运用Identifiler试剂盒对硅珠法提取石蜡包埋组织DNA质量的评估

目的:运用硅珠法从石蜡包埋的组织中提出DNA,Identifiler试剂盒评估DNA质量?方法:南京医科大学第一附属医院病理科2009~2011年石蜡包块49例,运用硅珠法提取石蜡包埋组织DNA,通过紫外分光光度计测定DNA纯度和Identifiler试剂盒PCR后3130型毛细管电泳仪分析提取DNA片段的完整性?结果:经紫外分光光度计测定胃癌组织D(260 nm)/D(280 nm)均值为1.84 ± 0.02,肺癌组织为1.85 ± 0.02,甲状腺癌组织为1.82 ± 0.02,3组间比较P > 0.05,因此硅珠法提取石蜡包埋组织DNA不会因组织差异而影响提取效果;Identifiler试剂盒PCR后毛细管电泳显示其提取效果,46例(93%)得出完整的16个基因座STR峰型?结论:硅珠法可应用于多种组织的DNA提取,并保证提取DNA样品的纯度和完整度?     

一步制粒法(marumcrbation)成球的动力学(英文)

采用“混合材料-挤压成粒-滚转成球”的一步法制粒机(marumerizer)制备了扑热息痛微球,观察到软材在机中停留时间越长,大球粒子(直径大于14目)形成的比例越高。根据两细粒碰撞聚集成球的假说,认为可按二级速度方程式,推算出剩余细粒的倒数1/(s-x)与机中停留时间(t)呈线性关系,实验证实了这种关系(r=0.999)。实验还证明了滚转时间越长,球粒中药物的释放速度越慢。溶出速率试验表明,这种球粒中药物的释放符合Higuch的平方根函数关系。