透明质酸在小鼠下颌第一磨牙牙胚不同发育时期的表达

目的:检测透明质酸在小鼠下颌第一磨牙牙胚不同发育时期的表达,探讨其在小鼠牙胚发育过程中的作用。方法:取不同胎龄的ICR胎鼠,制备小鼠下颌第一磨牙不同发育时期切片,用免疫组织化学实验方法检测透明质酸在下颌第一磨牙牙胚组织中的表达情况。结果:透明质酸在小鼠下颌第一磨牙牙胚的不同发育阶段表达各异。在小鼠磨牙开始发生时,透明质酸即在增厚的牙板上皮中表达,随后在蕾状期牙蕾中央的上皮细胞间可见透明质酸的表达,而在深层的牙源性间充质表达则不明显。自帽状期至钟状晚期,透明质酸在牙胚星网状层细胞间以及牙源性间充质细胞的表达逐渐增强,而在基底膜、内外釉上皮细胞、成釉细胞以及成牙本质细胞所在区域不表达。结论:透明质酸在牙胚发育过程中呈现时间-空间特异性表达。特别是其在星网状层细胞以及牙乳头间充质细胞中的表达随着牙胚的发育逐渐增强提示其可能与牙胚的形态发生密切相关。     

Smad1在人牙胚发育过程中的表达变化

观察骨形成蛋白特异的细胞内信号转导分子Ｓｍａｄ１在人牙胚发育过程中的表达变化,探讨Ｓｍａｄ１在牙齿发育过程中的作用,方法制备人牙发育各期标本,免疫组化方法观察Ｓｍａｄ１在人牙胚发育过程中的表达情况。结果：Ｓｍａｄ１在牙胚发育的不同时期均见不同的时表达模式。     

尼古丁对体外培养鼠磨牙牙胚发育的影响

目的:探讨尼古丁对体外鼠磨牙牙胚发育的影响.方法:采用RPMI-1640半固态培养基,在培养基中加入不同浓度的尼古丁,将15d胎龄的胎鼠的下颌第一磨牙牙胚分别置于各浓度组RPMI-1640半固态培养基表面培养4、8d,每48h更换培养基一次.结果:实验组与对照组相比较,主要表现在实验组发育中的牙胚体积缩小,成牙本质样细胞的分化程度不足、数量和速度均低于对照组,前期牙本质样基质形成减少或不能形成,并且呈时间、浓度依赖性.结论:尼古丁对体外培养胎鼠牙胚的形态、细胞的增殖和分化有抑制作用.     

Shh在鼠磨牙牙胚发育晚期的基因表达

目的：观察信号分子Sonic hedgehog(Shh)在小鼠下颌第一磨牙牙胚发育晚期的基因表达，探讨其在成釉细胞、成牙本质细胞分化中的作用。方法：制备昆明小鼠磨牙牙胚发育晚期(E16．5—P1．5)标本，用原位杂交法分析Shh mRNA在牙胚中的表达和分布。结果：Shh mRNA在牙胚发育晚期的前成釉细胞和中间层细胞呈阳性表达，在成牙本质细胞层表达较弱。结论：在牙胚发育晚期，Shh可能通过自分泌途径和旁分泌途径，参与了成釉细胞和成牙本质细胞分化。     

转化生长因子β2 mRNA在小鼠磨牙牙胚发育过程中表达的研究

目的：探讨转化生长因子β2（transforminggrowthfactor-β2，TGFβ2）mRNA在小鼠磨牙牙胚发育过程中的表达及其意义。方法：制备小鼠磨牙各发育阶段标本，用原位杂交分析TGFβ2mRNA在牙胚中的表达与分布。结果：TGFβ2mRNA在小鼠磨牙牙胚不同发育阶段呈时间一空间特异性模式表达。结论：TGFβ2mRNA在牙形态发生过程中可能通过自分泌和旁分泌机制协同调控上皮一间充质相互作用及成牙本质细胞和成釉细胞的分化。     

ADAM28在小鼠牙胚发育中的时空表达

目的:研究ADAM28在小鼠牙胚发育中的时空分布。方法:采用免疫组织化学方法和图像分析技术观察ADAM28在小鼠牙胚发育各期的表达分布及差异。结果:ADAM28在牙胚发育各时期均有不同程度的表达。帽状期开始即在口腔上皮及成釉器星网层细胞、基底膜、牙乳头细胞和牙囊细胞表达强阳性,到钟状晚期,成釉细胞、釉基质、上皮根鞘和牙乳头细胞阳性表达;至冠根硬组织发育期,成釉细胞、成牙本质细胞、上皮根鞘、成牙骨质细胞、牙乳头细胞、牙囊细胞阳性表达。结论:ADAM28作为上皮和间充质间重要的信号分子,参与了从蕾状期到钟状晚期、从基质分泌到硬组织形成的牙冠、牙根形态发生过程,它可能在牙源性间充质细胞的早期形成、增殖与分化启动中发挥重要作用。     

C-Met在ICR小鼠下颌第一磨牙牙胚中的表达

目的探讨c-Met在小鼠下颌第一磨牙牙胚发育中的表达情况。方法采用孕12d、13d、14d、16d、18d ICR胎鼠及出生后2d ICR仔鼠的头部制作冰冻切片,以抗小鼠c-Met多克隆抗体对冰冻切片进行免疫荧光实验,激光共聚焦显微镜观察。结果 c-Met在牙胚蕾状期、帽状期的上皮、钟状期的内釉上皮、成釉细胞和成牙本质细胞中有表达;牙胚和口腔黏膜连接区域两侧的间充质中、牙乳头及蕾状早期颊侧下方下颌的间充质中c-Met也有表达。结论 C-Met对于牙齿的形态发生,成釉细胞和成牙本质细胞的分化,牙乳头细胞的发育可能具有重要作用。     

TRAF6在大鼠牙胚发育过程中的表达

目的 :研究肿瘤坏死因子受体相关因子 6(TRAF6)在大鼠牙胚发育过程中的表达并探讨其意义。方法 :制备大鼠牙胚发育各阶段标本 ,进行TRAF6的免疫组化研究。结果 :TRAF6在牙胚发育中呈动态时空表达。结论 :TRAF6可能是新发现的一种参与调控牙胚细胞的增殖分化和牙齿发育矿化的胞内信号转导分子。     

釉质溶解素在人和大鼠牙胚发育过程中的表达

目的：检测釉质溶解素（enamelysin)mRNA在人和大鼠牙胚发育不同时期的表达,探讨其在牙齿发育过程中的作用。方法：采用原位杂交法。结果：人牙胚钟状早期未见釉质溶解素mRNA;钟状晚期,成釉细胞和成牙本质细胞表达阳性。釉质溶解素mRNA在大鼠牙齿发育早期表达阴性,在钟状晚期成釉细胞和成牙本质细胞表达阳性。结论：釉质溶解素m RNA在牙齿发育过程中的表达有时空特异性,提示它可能参与釉质和牙本质的形成。     

Smad4在人牙胚发育各期的表达与分布

目的：观察转化生长因子β超家族（transforming growthfactor-βsuperfamily,TGF-β superfamily)细胞因子细胞内共同的信号转导分子Smad4在人牙胚发育过程中的表达与分布变化,探讨Smad4在牙齿发育过程中的作用。方法：制备人牙胚发育各期标本,免疫组化方法观察。结果：Smad4在牙胚发育的各个时期在特异的时空分布模式。结论：首次观察到Smad4信号分子在人牙胚发育过程中的表达,Smad4作为TGF－β超家族细胞内信号分子,可能参与上皮间充质的相互作用,同时也参与成釉细胞和成牙本质细胞的分化以及牙釉质和牙本质的形成。     

Versican对牙根发育影响的动物实验研究

目的:检测Versican有小鼠牙根发育期牙髓组织中的表达,探讨其在牙根发育过程中的作用。方法:制备小鼠磨牙牙根各发育阶段标本,用免疫组织化学方法检测Versican核心蛋白及其硫酸软骨素多糖链有牙根发育期间牙髓组织中的表达与分布。结果:Versican在小鼠磨牙上皮根鞘、切牙根尖牙乳头区域的牙髓细胞增生活跃区表达明显;在牙本质、前期牙本质以及已分化的成牙本质细胞所在区域无表达,而在其深层具有分化潜能的牙髓细胞则强表达;同时其在牙髓组织中的表达随着小鼠牙根发育的成熟而逐渐减少。结论:Versican在牙根发育期间的牙髓组织中呈时间-空间特异性模式表达,它可能与牙根的发育与成熟有关。     

The development of mandibular molar tooth germs isografted in the mouse spleen

Tooth germs taken from 13-day-old embryonic mice and isografted in the spleen of adult mice were examined by light and electron microscopy. Well-organized tooth structures from the early cap stage to fully developed and mineralized mature teeth were obtained up to day 60 after transplantation. Germs on day 2 were similar to those prior to the onset of grafting but reached the late cap stage of development on day 4. On day 6, enamel and dentine formation were initiated and inner enamel epithelium and dental papilla cells were polarized. On days 10-15, enamel-matrix secretion was completed and almost all ameloblasts had become resorptive enamel epithelium. India ink injected from the recipient caudal vein accumulated to the capillaries within the pulp throughout the newly-formed vessels. On day 20, defined root formation had begun but occasionally irregular and cellular osteodentine was formed in root areas. On day 30, transplants were covered with reduced enamel epithelium and acellular cementum was formed at the root areas together with rudimentary periodontal ligament fibres. Cellular cementum became thicker up to day 40. There was little evidence of cellular infiltration from recipient tissue up to day 60. The spleen seems to be a suitable site for transplantation of tooth germs.     

Expression, localisation and synthesis of versican by the enamel organ of developing mouse molar tooth germ: An in vivo and in vitro study

Objective

Versican is a large, aggregating chondroitin sulphate proteoglycan. In dental tissue, versican expression occurs primarily in mesenchymal tissue but rarely in epithelial tissue. We investigated the expression, localisation and synthesis of versican in the enamel organ of the developing tooth germ.

Design

To elucidate versican localisation in vivo, in situ hybridisation and immunohistochemistry were conducted in foetal ICR mice at E11.5–E18.5. Epithelium and mesenchyme from the lower first molars at E16.0 were enzymatically separated and versican mRNA expression was investigated by semi-quantitative RT-PCR. Organ culture of the separated samples combined with metabolic labelling with [³⁵S], followed by gel filtration, was performed to analyse secreted proteoglycans.

Results

Versican mRNA was first expressed in the thickened dental epithelium at E12.0 and continued to be expressed in the enamel organ until the bell stage. Versican immunostaining was detected in the stellate reticulum areas from the bud stage to the apposition stage. The enamel organ at E16.0 expressed versican mRNA at a level comparable to that in dental mesenchyme. Furthermore, when compared to dental mesenchyme, about 1/2–3/4 of the [³⁵S]-labelled versican-like large proteoglycan was synthesised and released into tissue explants by the enamel organ.

Conclusions

The dental epithelium of developing tooth germ is able to synthesise significant amounts of versican.     

Notch1在小鼠下颌第一磨牙牙胚发育中的表达

目的探讨Notch1在小鼠下颌第一磨牙胚胎发育过程中的组织学分布。方法制作ICR小鼠下颌第一磨牙不同发育阶段的冰冻组织切片,对小鼠下颌第一磨牙自牙胚发育起始期至出生后2天不同发育阶段组织的Notch1分布情况进行免疫组织化学染色。结果 Notch1在小鼠下颌第一磨牙牙胚发育起始期和蕾状期牙板上皮上方或其包绕的口腔上皮中表达,在牙板上皮中没有表达。自帽状期至钟状期,Notch1在牙胚的中间层表达,而在内釉上皮中无表达。至牙釉质和牙本质分泌期,Notch1仍在颈环部位的中间层表达。此外,Notch1还在牙胚发育不同时期的间充质、牙乳头和早期牙髓中表达。结论 Notch1可能在小鼠下颌第一磨牙发育过程中的牙上皮特别是内釉上皮的细胞分化,以及牙囊和牙乳头细胞分化及分化完成后的牙髓干细胞的稳定性方面有重要作用。     

Notch1蛋白在小鼠下颌切牙发育中的表达

目的探讨Notch1在小鼠下颌切牙牙胚发育过程中的组织学分布。方法制作ICR小鼠下颌切牙不同发育阶段的冰冻组织切片,对小鼠下颌切牙牙胚自牙胚发育起始期至钟状晚期不同发育阶段组织Notch1的分布情况进行免疫组织化学染色。结果 Notch1在小鼠下颌切牙发育蕾状期牙胚的口腔侧上皮中表达,而在和间充质相邻的牙胚上皮中没有表达。从帽状期至钟状期,Notch1在牙胚的中间层表达,而在内釉上皮中没有表达。钟状期的唇侧颈环部位星网状层和部分牙上皮细胞也表达Notch1。此外,Notch1还在牙胚发育不同时期的间充质、牙乳头和早期牙髓中表达。结论 Notch1可能在小鼠下颌切牙发育过程中的牙上皮,特别是内釉上皮的细胞分化,以及牙囊和牙乳头细胞分化及分化完成后的牙髓干细胞的稳定性方面有重要作用。     

出生后小鼠第一磨牙牙胚不同发育阶段的Notch1的表达

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Differential expression of LAR tyrosine phosphatase in the rat developing molar tooth germ

OBJECTIVE: This study examined the molecules implicated in the cytodifferentiation of dental hard tissue cells. METHODS: Rat pups at postnatal days 4, 7 and 10 were used. Differential display-polymerase chain reaction (DD-PCR), Western blot and immunofluorescent localisation were performed to search differentially expressed genes in tooth development. RESULTS: Leukocyte-common antigen-related tyrosine phosphatase (lar-tp) was differentially detected between the rat maxillary 2nd and 3rd molar germs on postnatal day 10, which were at the dental hard tissue formation and cap/early bell developmental stages, respectively. Both the mRNA and protein expression levels of lar-tp were higher in the 3rd molar germs than in the 2nd. In addition, the levels in the 2nd molar germs at postnatal days 4, 7 and 10, which corresponded to the early/late bell, crown and root stages, respectively, decreased in a time dependent manner. The immunoreactivity against intracellular P-subunit of lar-tp was detected in the ameloblasts and odontoblasts as well as in the undifferentiated inner enamel epithelia and dental papilla cells. However, strong immunoreactivity against extracellular E-subunit was observed only in the undifferentiated inner enamel epithelia and dental papilla cells in the 3rd molar germs and in the stratum intermedium in the 2nd molar germs. CONCLUSION: This is the first identification of lar-tp in the molar tooth development and suggests that this molecule may be involved in the cytodifferentiation of dental hard tissue cells.     

小鼠牙胚发育过程中PHEX基因的时空表达模式研究

目的:研究PHEX在Balb/c小鼠牙胚发育过程中的时空表达模式,探讨其在牙齿发育过程中的作用.方法:采用免疫组织化学方法检测小鼠牙胚发育各时期中PHEX蛋白的表达.结果:PHEX在蕾状期无表达;帽状期的内、外釉上皮细胞和牙囊细胞中,PHEX有零星的弱阳性表达;钟状早期,PHEX主要表达在内釉上皮细胞和牙囊细胞,外釉上皮层、中间层细胞和靠近基底膜的牙乳头细胞中也有少量表达.钟状晚期,PHEX在成釉细胞和成牙本质细胞中的表达随着牙胚的发育而增强.釉结中成釉细胞的阳性表达程度比其他部位的成釉细胞更强.颈环处的内釉上皮细胞有PHEX的表达,而邻近的牙乳头细胞和外釉上皮细胞中无表达.结论:PHEX在牙胚的发育中有特定的时空表达模式,提示其参与了牙胚的形成发生和矿化.