良性增生前列腺组织中TGF_(β1)mRNA和蛋白的表达

目的 :在转录和翻译水平探讨转化生长因子 β1(TGFβ1 )在良性前列腺增生症 (BPH)前列腺组织中的表达及意义。方法 :应用原位杂交和免疫组织化学法对 2 2例 BPH和 10例正常前列腺 (NP)组织标本中 TGFβ1的表达进行定性、定位检测。结果 :BPH前列腺和 NP组织的上皮和间质都有明显的 TGFβ1 m RNA表达 ,其表达在 BPH和 NP间差异无显著性意义 (P >0 .0 5 ) ;在两组内 ,基质细胞 TGFβ1 m RNA表达明显高于上皮细胞 (P<0 .0 1)。 BPH前列腺和 NP的上皮组织中 TGFβ1 蛋白表达较弱 ,且两者之间差异无显著性意义 (P >0 .0 5 ) ;间质中 TGFβ1 表达均为阳性 ,BPH前列腺间质中阳性表达显著强于 NP的间质 (P <0 .0 1) ,以基质为主要成分的增生结节中表达更高。结论 :TGFβ1 是导致 BPH前列腺间质增生的重要物质 ,启动 BPH发生发展的因素在转录后水平调控 TGFβ1 的表达。     

雄激素和转化生长因子β1协同调节前列腺基质细胞增殖和分化

目的：探讨双氢睾酮（DHT）和转化生长因子β1（TGF－β1）对体外培养的前腺基质细胞增殖和分化的影响及前列腺基质增生的机制。方法：体外培养人前列腺基质细胞，加入DHT和TGF－β1，采用MTT法检测细胞增殖，免疫组化、RT－PCR方法检测平滑肌细胞特异性标记蛋白的表达。结果：对平顶期的前列腺基质细胞，单独应用DHT或TGF－β1无显著刺激增殖作用（P＞0．05）；DHT和TGF－β1联合应用时，可显著刺激基质细胞增殖（P＜0．01），TGF－β1可使前列腺基质细胞中平滑肌细胞特异性标记蛋白的表达增加（P＜0．05），与DHT联合应用时这种作用更强。结论：DHT和TGF－β1具有协同促进前列腺基质细胞增殖和分化的作用。TGF－β1和雄激素可能是前列腺基质增生和平滑肌细胞过度增殖的重要诱因。     

化瘀解毒汤对TGF-β1及MMP1mRNA表达作用的探讨

目的：探讨化瘀解毒汤抑制肾间质纤维化的可能作用机制。方法：采用单侧输尿管梗阻（UUO）法诱导肾间质纤维化动物模型,以免疫组化和原位杂交方法分别检测大鼠肾间质组织ECM成分（Ⅰ、Ⅲ型胶原）、TGF－β1mRNA及MMP1mRNA表达,并作尿α1－MG检测以及相关肾组织学检查。结果：模型组和各治疗组大鼠肾组织Ⅰ、Ⅲ型胶原、TGF－β1mRNA的面积比显增加（P＜0．05）,MMP1mRNA面积比显降低（P＜0．05）;各治疗组大鼠Ⅰ、Ⅲ型胶原、TGF－β1mRNA面积比较模型组减少（P＜0．05）,MMP1mRNA面积比较模型组增加（P＜0．05）;治疗组中以中药预防组鼠Ⅰ、Ⅲ型胶原、TGF－β1mRNA面积比最低、MMP1mRNA面积比最高（P＜0．05）。经治疗后肾脏组织病理检查有明显改善。结论：化瘀解毒汤通过下调TGF－β1mRNA表达、上调MMP1mRNA表达、以抑制肾间质ECM的增生和积聚,防止肾间质的纤维。此外还可减轻肾小管病理性损伤。     

前列腺组织中EGF、bFGF的表达

目的：研究EGF、bFGF在前列腺组织中的表达。方法：应用mRNA斑点杂交、原位杂交、免疫组织化学及原位杂交与免疫组织化学双染法检测6例正常前列腺（NP）、27例良性前列腺增生症（BPH）前列腺组织中EGF及bFGF的表达。结果：BPH前列腺组织和NP组织中无均无EGF mRNA表达,EGF蛋白表达呈弱阳性,两组间差异无显著性意义（P＞0.05）;NP组织上皮细胞有较多bFGF mRNA表达,但无bFGF翻译,基底基质细胞有少量mRNA及蛋白表达,二者表达水平基本一致;BPH前列腺组织上皮细胞无bFGF mRNA表达,但局灶性增殖上皮细胞细胞膜上有bFGF,基底基质细胞有大量bFGF mRNA转录及蛋白质翻译,以局灶性增殖区最为明显。结论：NP及BPH的前列腺组织中无EGF分泌细胞;bFGF在前列腺基底基质细胞过度表达,以自分泌、旁分泌方式促进了基质和上皮的非均一性增殖。     

生长调控因子异常与良性前列腺增生的关系

目的：探讨多种生长调控因子在良性前列腺增生症（BPH）中的发病机制。方法：采用免疫组织化学SP法检测15种细胞增殖和调亡的生长调控因子,结合计算机图像分析处理系统进行定量测定;同时对BPH的组织构成中间质、上皮和腺腔各因子所占面积百分比进行图像定量分析测定。结果：碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）、转化生长因子β（TGFβ）、纤维连结蛋白（FN）和Ⅳ型胶原表达与BPH的间质增生之间比较差别有显著性意义（r=0.323、0.278、0.235、0.241,P＜0．05）;而表皮生长因子受体（EGFR）、胰岛素样生长因子－Ⅰ、神经生长因子（NGF）以及调亡诱导因子bax和ICE表达与BPH的上皮增生之间比较差别有显著性意义（r=0.315、0.277、0.246、-0.294、-0.252,P＜0．05）。结论：BPH的发生、发展与多种生长调控因子异常有关,其中bFGF是间质增生的主要作用因子,EGFR和bax是上皮增生的主要作用因子。β     

糖肾方对糖尿病肾病大鼠肾组织TGF-β1及MMP-9表达的影响

目的：研究糖肾方对糖尿病肾病大鼠肾组织TGF-β1、MMP-2、MMP-9及Ⅳ型胶原表达的影响,探讨糖肾方对糖尿病肾病大鼠肾脏的保护机制。方法：50只Wistar大鼠随机分为空白组、模型组、蒙诺组（0．833mg／kg）、糖肾方大剂量组（2．67g／kg）、糖肾方小剂量组（1．33g／kg）,每组10只,利用单侧肾切除加腹腔注射链脲佐菌素造成糖尿病肾病大鼠模型,连续给药20周。动态检测血糖和尿蛋白／肌酐水平;取肾组织进行病理组织学观察并对肾小球硬化和肾小管间质纤维化程度进行评分;RT-PCR方法检测TGF-β1、MMP-2及MMP-9 mRNA表达,免疫组化方法检测肾组织TGF-β1及Ⅳ型胶原表达。结果：大剂量糖肾方能显著降低糖尿病肾病大鼠尿蛋白／肌酐（P〈0．05）,降低肾小球硬化指数（P〈0．01）和肾小管间质纤维化指数（P〈0．01）,减少TGF-β1mRNA与蛋白表达（P〈0．05）,增加MMP-9mRNA表达（P〈0．05）,减少Ⅳ型胶原蛋白表达（P〈0．05）。结论：糖肾方可减轻实验大鼠肾小球硬化和肾小管间质纤维化,其作用机制可能与抑制TGF-β1表达和提高MMP-9mRNA水平有关。     

柴芩肾安方对IgA肾病大鼠肾组织TGF-β1和Smad 7的影响

目的：探讨柴芩肾安方对IgAN大鼠肾组织TGF-β1和Smad 7表达的影响。方法：采用灌服并定时静脉注射BSA复合感染SEB的方法制成大鼠IgAN模型,并用柴芩肾安方治疗,以氯沙坦为对照。第15周末,观察肾组织形态学变化和免疫复合物的沉积情况;采用免疫组化和RT—PCR的方法,分别检测肾组织TGF—β1和Smad 7蛋白及其mRNA的表达。结果：与正常组相比,模型组大鼠肾小球系膜细胞和系膜基质轻度增生,伴见弥漫的IgA和少量IgG沉积;TGF—β1和Smad 7蛋白及其mRNA表达均明显升高（P〈0．01）。柴芩肾安方治疗后上述指标均明显减轻（P〈0．01）,且作用效果与氯沙坦类似。结论：抑制肾组织TGF—β1和Smad 7蛋白及其mRNA的表达,可能是柴芩肾安方延缓IgAN肾脏病变进展的机制之一。     

17β-雌二醇对大鼠肝纤维化门静脉压力的作用

目的观察17β-雌二醇（E2）对四氯化碳（GEl4）诱导大鼠肝纤维化中门静脉压力变化的作用。方法40只Wistar雄性大鼠随机分为A、B、C和D共4组，均采用CCl4诱导肝纤维化12周。另外，A组同时采用肌注E2（2mg／kg体重），2次／周；B组采用肌注E2（1mg／kg体重），2次／周；C组作为对照组；D组采用每日口服他莫昔芬6mg／kg体重。第13周将全部大鼠麻醉后测定门静脉压力（PVP）、并采用实时荧光定量（Real—Time）聚合酶链反应（PCR）技术测量大鼠肝脏组织中核转录因子p65（NF-kappaBIN55）mRNA和转化生长因子-β1（TGF-β1）mRNA的表达，采用Massion染色检测大鼠肝组织中胶原纤维（CF）含量情况，并将不同组别大鼠肝组织中NF-kappaBIN55mRNA值、TGF-β1mRNA值、CF含量以及PVP作相关性分析。结果（1）各组大鼠PVP高低为：A〈B〈C〈D，各组比较差异有统计学意义（F=54．712，P〈0．05）；（2）各组大鼠肝组织中NF-kappa Bp65 mRNA的表达情况为：A〈B〈C〈D，各组比较差异有统计学意义（F=109．024，P〈0．05）；（3）各组大鼠肝组织中TGF．1mRNA表达高低比较：A〈B〈C〈D，组间比较差异有统计学意义（F=224．969，P〈0．01）；（4）各组大鼠肝组织CF含量比较：A〈B〈C〈D，组间比较差异有统计学意义（F=6．929，P〈0．01）；（5）各组大鼠肝组织中NF-kappa Bp65 mRNA值和TGF-1mRNA值呈直线相关（r=0．724，P〈0．05），TGF-β1 mRNA值和cF含量呈直线相关（r=-0．871，P〈0．05），CF含量和PVP也呈直线相关（r=0．902，P〈0．05）。结论E2通过抑制大鼠肝纤维化肝组织中NF-kappa Bp65 mRNA的表达，减弱了TGF-β1 mRNA的表达，使得肝组织中CF含量减少，以致PVP降低。     

不同免疫抑制剂对大鼠血管平滑肌细胞转化生长因子-β1和Smads信号通路的影响及意义

目的研究不同免疫抑制剂对大鼠血管平滑肌细胞（VSMC）转化生长因子（TGF）-β1和Smacks信号通路的影响，探讨其在慢性移植肾肾病发生、发展中的作用。方法应用大鼠胸主动脉平滑肌细胞体外原代培养技术，分别用CsA（3mg／L）、FK506（1mg／L）、MMF（0．3mg／L）与RPM（10mg／L）处理6、12h。用免疫组织化学和实时荧光定量聚合酶链反应检测TGF—β1、Smacks蛋白和mRNA在平滑肌细胞中的表达及定位。结果CsA组和FK506组TGF—β1、Smad2的蛋白和mRNA表达水平高于对照组、MMF组和RPM组（P〈0．01），Smad7蛋白和mRNA表达低于对照组、MMF组和RPM组（P〈0．01）；MMF组和RAPA组TGF-β1、Smad2蛋白和mRNA表达低于对照组（P〈0．01），而Smad7的表达高于对照组（P〈0．01）。CsA组和FK506组，以及MMF组和RPM组的组间差异无统计学意义（P〉0．05）。结论不同免疫抑制剂可能通过影响血管平滑肌细胞TGF—β1和Smacks信号通路，导致移植物动脉硬化，从而影响慢性移植肾功能丧失的进程。     

实时荧光定量聚合酶链反应检测前列腺癌中Id1 mRNA的表达及意义

目的 检测Id1 mRNA在人前列腺癌（PCa）组织中的表达，探讨Id1 mRNA的表达与临床意义。方法 用SYBR Green Ⅰ嵌合荧光法进行实时逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR），检测Id1 mRNA在人正常前列腺、前列腺良性增生（BPH）和PCa组织中的相对定量，分析Id1 mRNA的相对含量与PCa临床病理参数间关系。结果 Id1 mRNA在PCa组织中的含量明显高于BPH组织（P〈0．01）。Id1 mRNA表达量与PCa的Gleason评分有明显相关性（r=0．9995，P〈0．05）。Id1 mRNA表达量高者，2年内发生浸润和转移的机率提高。结论 PCa组织中Id1 mRNA表达明显增高，与肿瘤分化程度成负相关，Id1 mRNA的高表达从转录水平反映了其与前列腺癌病情进展的关系；Id1 mRNA的实时定量检测有助于从转录水平对前列腺癌进行早期诊断并初步指导预后。