浅蓝菌素对人结肠癌裸鼠移植瘤bcl-2及bax基因表达水平的影响

目的 :通过观察人结肠癌LoVo细胞裸鼠移植瘤bcl 2及bax基因表达水平 ,探讨脂肪酸合酶抑制剂浅蓝菌素选择性的抑瘤途径和机制。方法 :建立人结肠癌裸鼠移植瘤模型 ,浅蓝菌素每公斤体重 160mg腹腔注射 ,1次·d-1,连续10d ,第 17天处死并解剖动物 ,瘤组织作免疫组织化学检测bcl 2及bax基因表达水平。结果 :浅蓝菌素处理组结肠癌LoVo细胞移植瘤bcl 2基因蛋白表达率为 68.5 % ;对照组bcl 2蛋白阳性表达率为 87.8% ,阳性细胞弥漫分布。两组间有显著性差异 (P <0 .0 1)。bax基因蛋白在浅蓝菌素组移植瘤组织阳性表达率为 75 .4% ,主要呈强阳性表达 ;对照组阳性表达率为 9.5 %。两组间比较有统计学差异 (P <0 .0 1)。结论 :浅蓝菌素可使结肠癌LoVo细胞移植瘤的bcl 2基因表达下调 ,bax基因表达增强 ,提示bcl 2及bax基因在浅蓝菌素诱导的人结肠癌LoVo细胞凋亡中可能起着重要的调控作用。     

雷帕霉素对人肝癌裸鼠皮下移植瘤生长的影响

目的探讨雷帕霉素对人肝癌裸鼠皮下移植瘤生长的影响及可能机制。方法建立人肝癌裸鼠皮下移植瘤模型,随机分组后给予雷帕霉素常规剂量(1.5mg/kg.d-1)、低剂量(0.15mg/kg.d-1)、高剂量(4.5mg/kg.d-1)腹腔注射,对照组给予相同体积生理盐水。用药21d后处死动物,称量鼠重、瘤重,计算抑瘤率;CD34标记血管内皮细胞后行肿瘤微血管密度(MVD)计数;ELISA法检测血清中血管内皮细胞生长因子(VEGF)表达水平。结果与对照组比较,常规剂量雷帕霉素明显抑制了肿瘤生长,并降低了肿瘤MVD及血清VEGF水平(P<0.05),低剂量、高剂量组皮下移植瘤、MVD、VEGF水平均受到一定程度抑制,但是无统计学意义(P>0.05),实验中还发现高剂量组裸鼠体重明显下降(P<0.05)。结论常规剂量雷帕霉素可抑制肿瘤血管生成,从而抑制肿瘤生长,这为肝癌肝移植术后免疫抑制剂选择提供实验依据。     

改性载顺铂磁性纳米药物联合放疗靶向治疗鼻咽癌裸鼠移植瘤的研究

目的 探讨载顺钔磁性纳米靶向药物对荷人鼻咽癌裸鼠的治疗作用并初步研究同时放化疗对移植瘤细胞增殖的影响.方法 以人鼻咽癌细胞CNE2接种干36只Balb/C裸鼠背部建屯移植瘤模型.按照肿瘤体积大小随机分成对照组、单纯放疗组、顺铂治疗组、顺铂联合放疗组、纳米靶向药物治疗组、纳米靶向药物联合放疗组,每组6只,分别进行放疗、化疗和同时放化疗干预,给药量按顺铂计算3 mg/kg,每天1次,共3次,裸鼠尾静脉注入,给药前0.5 h均予以0.5 ml牛理盐水灌胃水化,对照组给生理盐水.放疗为直线加速器,每次2 Gy.隔天1次,共照射3次.观察各组荷瘤鼠肿瘤生长情况,计算肿瘤体积和抑瘤率,测量治疗后荷瘤鼠体质量及肿瘤重量,观察肿瘤组织PCNA的阳性指数.结果 药物治疗各组裸鼠体质量均不同程度下降,肿瘤增长明显减慢,除顺铂组外,其他各治疗组疗效较对照组差异有显著性(P<0.05),顺铂联合放疗和纳米靶向药物联合放疗治疗效果最好,与顺铂组比较差异有显著性(P<0.05),但与单纯放疗组比较差异无显著性(P>0.05).结论 改性载顺铂磁性纳米药物靶向治疗或联合放疗对鼻咽癌均有良好疗效,且毒副反应并无增加.     

蜂毒素对人肝癌细胞裸鼠移植瘤生长的影响及其部分机制

目的 探讨蜂毒素对人肝癌HepG-2细胞株裸鼠移植瘤的抑制作用.方法 建立人肝癌HepG-2细胞裸鼠皮下移植瘤模型,随机分为模型组、蜂毒素组(1、2、4 mg/kg)和氟尿嘧啶 (5-FU,2 mg/kg) 组,各组腹腔注射给药10 d,用药结束后隔天处死动物.观察蜂毒素腹腔注射对人肝癌细胞在裸鼠体内生长的的影响,计算...     

裸鼠肝癌移植瘤模型体内微量蛋白谱分析

目的 采用Bel-7402人肝癌细胞悬液接种裸鼠构建肝癌裸鼠移植瘤模型,探讨模型体内微量差异蛋白的表达情况.方法 在裸鼠皮下接种浓度为1×107/mL的肝癌细胞悬液构建肿瘤模型,剂量为每只0.1 mL,对照组接种相同剂量无血清培养液,观察肿瘤生长情况.在不同时间点取血,用表面增强激光解吸电离飞行时间质谱(SELDI-TOF-MS)技术检测分析裸鼠血清中的小分子蛋白.利用Ciphergen ProteinChip 3.0和Ciphergen Biomaker Wizard 3.1软件进行蛋白质数据采集和分析,筛选与肝癌相关的差异蛋白.结果 筛选出115个差异表达蛋白(P＜0.01),其中有5个差异蛋白表达规律性较强,质荷比(M/Z)分别为2 016、3 309、3 442、3 745、2 747 Da.结论 Bel-7402人肝癌细胞在裸鼠体内生长过程中能够表达与肝癌相关的微量蛋白质,经进一步蛋白鉴定和试剂开发可用作肝癌早期诊断的标志物.     

不同转移特性人肺癌裸鼠移植瘤整合蛋白表达及其对移植瘤转移的影响

目的：观察人肺癌裸鼠移植瘤整合蛋白表达与其转移的相关性。方法：以ＡＢＣ免疫组化染色，对转移力由低到高依次为ＰＬＡ－８０１Ｃ、Ａｎｉｐ９７３、ＰＬＡ－８０１Ｄ、ＰＬＡ－８０１ＤＬ四株人肺癌裸鼠移植瘤作整合蛋白亚单位表达的观察，并在裸鼠体内观察整合蛋白β１抗体及其配体ＲＧＤ多肽对移植瘤生长及转移的影响。结果：四株移植瘤均呈α２、α５、α６Ｂ阴性。β１的表达除Ａｎｉｐ９７３呈强阳性、ＰＬＡ－８０１ＤＬ呈弱阳性外，也均呈阴性。但四株移植瘤除ＰＬＡ－８０１Ｃ外，其余３株均呈α６Ａ强阳性。β１抗体及ＲＧＤ多肽对ＰＬＡ－８０１ＤＬ移植瘤的转移不见明显影响。结论：４株人肺癌移植瘤总体上呈β１亚族整合蛋白低表达，表达水平与其转移无显著相关。     

紫杉醇温敏纳米胶束对人胃癌裸鼠移植瘤的靶向治疗作用

目的：探讨紫杉醇温敏纳米胶束靶向治疗人胃癌裸鼠移植瘤的疗效。方法：建立裸鼠BGC-823胃腺癌动物模型48只,随机分为紫杉醇热疗和非热疗组、紫杉醇温敏纳米胶束热疗和非热疗组、温敏纳米胶束热疗和非热疗组、单纯热疗组和等渗盐水组,每组6只,采用尾静脉给药方式,并43℃恒温对热疗组肿瘤部位进行热导向化疗,动态观察并测定肿瘤的生长。结果：紫杉醇温敏纳米胶束热疗组对人胃癌的移植瘤有显著抑制作用,肿瘤体积和瘤重抑瘤率分别为83.9%和81.3%,显著高于紫杉醇温敏纳米胶束非热疗组（43.6%和39.5%）和紫杉醇注射液组（49.6%和54.2%）（P〈0.05）,而且对正常组织的毒副反应明显减轻。结论：温敏纳米胶束具有良好的肿瘤抑制效果,作为一种新型的药物载体,显示出良好的应用前景。     

载顺铂磁性纳米药物在鼻咽癌裸鼠移植瘤组织内的分布及靶向性研究

目的研究载顺铂磁性纳米药物(CDDP-MNP)在鼻咽癌裸鼠移植瘤组织内的靶向性分布。方法将20只BALB/c雌性裸鼠接种人鼻咽癌细胞CNE-2建立鼻咽癌裸鼠移植瘤模型,按照肿瘤体积随机分成单纯移植瘤对照组、顺铂治疗组、载顺铂磁性纳米药物治疗组、载顺铂磁性纳米药物联合靶向治疗组,分别用生理盐水及相应药物干预。最后一次用药后第3天行裸鼠MR活体检测,MR检测后处死裸鼠,取下肿瘤,分别进行电镜检测、原子吸收光谱和铁染色检测。结果 MR显示,载顺铂磁性纳米药物联合磁靶向治疗组与其他3个组比较,在T2W I时相肿瘤组织的信号明显降低。电镜检查在3个治疗组均可见肿瘤组织大片坏死,在载顺铂磁性纳米药物联合磁靶向治疗组肿瘤细胞胞质中可见大量纳米颗粒。应用石墨炉原子吸收光谱法在3个治疗组肿瘤组织均可检测到铂,其中载顺铂磁性纳米药物联合磁靶向治疗组铂含量最高,明显高于其他两个治疗组(P<0.05)。铁染色检测载顺铂磁性纳米药物联合磁靶向治疗组肿瘤组织普鲁士染色呈弱阳性,其余3个组呈阴性。结论载顺铂磁性纳米药物在体外磁场的引导下能聚集于肿瘤组织,发挥良好的抗肿瘤生物学效应。     

苦参素及Mir-181a对人肝癌细胞耐药株HepG2/ADM裸鼠移植瘤中耐药蛋白P-gp的影响

目的探讨苦参素(oxymatrine,OM)及Mir-181a在体内环境中对人肝癌细胞耐药株HepG2/ADM裸鼠移植瘤中耐药蛋白P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)的影响。方法选用人肝癌细胞耐药株HepG2/ADM细胞在裸鼠腋下接种,创建裸鼠皮下移植瘤模型。将42只雌性裸鼠随机分成6组(每组7只):miR-181amimic组、苦参素组、苦参素+miR-181amimic组、阿霉素组、mirna mimic NC组、空白对照组。药物干预18d后,取出瘤体,用公式计算肿瘤体积。HE染色法观察组织的细胞病变情况,免疫组化及Western blot法检测耐药指标P-gp蛋白的表达,实时荧光定量PCR检测P-gp对应耐药基因ABCB1表达的情况。结果药物干预18d后,与空白对照组相比,miR-181amimic组的P-gp蛋白及ABCB1基因的表达提高,而苦参素组的P-gp蛋白及ABCB1基因的表达降低;与miR-181amimic组相比,苦参素+miR-181amimic组P-gp蛋白及ABCB1基因的表达降低。结论苦参素在体内环境中不仅可以抑制人肝癌耐药移植瘤的生长,还可提高人肝癌耐药细胞对化学药物的敏感性,而miR-181a在体内环境中可以促进人肝癌耐药移植瘤的生长,提高人肝癌耐药细胞的多药耐药性。     

The Effect of Targeted Magnetic Nanopaticles on Hepatoma and the Expression of bcl-2/bax Protein

The effect of targeted magnetic nanoparticles on hepatoma and the underlying mechanism were examined. Nude mice transplanted with a human hepatoma cell line （HepG2 cells） were randomized into 5 groups, including： （1） group A, receiving normal saline, （2） group B, receiving 5-fluorouracil （5-Fu）, （3） group C, receiving magnetic nanoparticles containing 5-Fu, （4） group D, consisting of treatment with magnetic nanoparticles containing 5-Fu and inside magnetic field and （5） group E, receiving pure magnetic nanoparticles and inside magnetic field. Morphological features of transplanted tumors in mice in each group were observed under transmission electron microscope （TEM）. The expression of bcl-2/bax protein was immunohistochemically detected by SABC method. The results showed that a large number of apoptotic tumor cells were found in group B and group D under TEM. The expression of bcl-2 protein was significantly decreased and the expression of bax protein increased significantly in both group B and D as compared with those in group A, C and E （P〈0.01 for all）. The decrease in bcl-2 and the increase in bax were more in group D as compared with group B （P〈0.01）. It is concluded that the targeted magnetic nanoparticles containing 5-Fu can improve the chemotherapeutic effect of 5-Fu by decreasing bcl-2 expression, increasing bax expres- sion and inducing apoptosis of the liver cancer cells.     

癃闭康对实验性大鼠前列腺增生组织bax/bcl-2表达的影响

[目的]观察实验性大鼠前列腺组织bax/bcl-2的表达及癃闭康对其的影响.[方法]雄性SD大鼠,随机分为对照组、模型组、前列康组、癃闭康低、中、高不同剂量组.去势加丙酸睾丸酮注射法复制前列腺增生模型,干预后观察前列腺湿重、前列腺指数、bax/bcl-2的表达及病理变化.[结果]bax在对照组大鼠前列腺组织中表达呈强阳性,在模型组表达呈弱阳性;各治疗组bax表达均强于模型组;bcl-2蛋白在对照组大鼠前列腺组织中表达呈弱阳性,在模型组表达呈阳性,各治疗组bcl-2蛋白均为弱阳性表达;光镜下组织结构接近对照组.[结论]癃闭康可能通过调节bax/bcl-2的表达促进前列腺增生的上皮细胞凋亡而抑制前列腺组织增生.     

前列腺癌组织中bcl-2和bax蛋白表达的临床病理意义

目的检测bcl-2和bax蛋白在前列腺癌组织中的表达情况,并探讨其与前列腺癌临床病理特征的关系。方法采用免疫组化检测bcl-2和baX蛋白在32例前列腺癌及癌旁组织中的表达情况。结果bcl-2和bax蛋白在前列腺癌组织中的阳性表达率分别为53．1％和43．6％（17／32和14／32）,而在癌旁组织中的阳性表达率分别为6．3%和100％（2／32和32／32）,两者比较有显著性差异（P〈0．05）。bcl-2蛋白的表达与前列腺癌分化程度及临床分期密切相关（P〈0．05）。bcl-2蛋白的表达与前列腺癌患者年龄无显著相关性（P〉0．05）。结论bcl-2和bax蛋白可能参与前列腺癌的发生发展,有望成为前列腺癌诊断和判断预后的分子标志物。     

外源bax基因表达对人视网膜色素上皮细胞bcl-2表达的影响

０引言视网膜色素上皮（ｒｅｔｉｎａｌｐｉｇｍｅｎｔｅｐｉｔｈｅｌｉｕｍ，ＲＰＥ）细胞是视网膜重要的功能细胞之一，其异常增生或退行性变，都会引起感光细胞结构或功能障碍而致盲，详细机制尚不清楚［１，２］．我们的前期实验证实，ｂａｘ表达增强、或ｂｃｌ－２／...     

大剂量孕激素治疗对子宫内膜腺癌细胞凋亡和bcl-2、bax蛋白表达的影响

目的探讨大剂量孕激素治疗对子宫内膜腺癌组织细胞凋亡及其调控基因bcl-2、bax蛋白表达的影响.方法选取2000～2005年收住院手术治疗、资料完整的子宫内膜腺癌患者病理标本30例,应用原位细胞凋亡检测技术(TUNEL)检测孕激素治疗前后子宫内膜腺癌组织细胞凋亡指数,其中16例采用免疫组化S-P法检测bcl-2和bax蛋白表达.结果孕激素治疗前后子宫内膜腺癌组织细胞凋亡指数、bcl-2和bax蛋白表达率分别为(6.00士5.68)和(27.67±2.41)、87.50%和75.00%、100.00%和93.75%.孕激素治疗后子宫内膜腺癌组织中细胞凋亡指数较治疗前明显增加(P＜0.01),其变化与bcl-2及bax蛋白表达无关.结论大剂量孕激素治疗通过促进细胞分化、增加细胞凋亡而达到治疗子宫内膜腺癌的目的.     

通脑灵对缺氧条件下培养的神经细胞bcl-2和bax基因表达的影响

目的 :观察通脑灵对缺氧条件下培养的神经细胞 bcl- 2和 bax基因表达的影响。方法 :采用原位杂交检测 bcl- 2 m RNA和 bax m RNA。结果 :通脑灵组 bcl- 2的表达在复氧后 6 h出现 ,2 4h及 48h阳性信号逐渐增强 ,而对照组在复氧 6 h出现 bcl- 2阳性信号 ,但随复氧时间的延长逐渐下降。通脑灵组和对照组 bax的表达均于复氧后6 h出现阳性信号 ,2 4h达高峰 ,48h逐渐下降。结论 :通脑灵的神经保护作用可能部分地与调控缺氧损伤神经细胞内 bcl- 2和 bax基因的表达有关     

bcl-2和bax在三氧化二砷诱导HL-60细胞凋亡过程中的变化

目的:探讨bcl-2和bax在三氧化二砷(arsenic trioxide,As₂O₃)诱导HL-60细胞凋亡过程中的变化。方法:7.5μmol/L的As₂O₃作用HL-60细胞12、24 h,RT-PCR和Western-blot分别检测bcl-2和bax基因mRNA表达及相应的蛋白表达变化。结果:7.5μmol/L的As₂O₃作用HL-60细胞12、24 h后,bcl-2 mRNA相对表达分别为(65.02±4.69)%、(40.70±3.94)%,baxmRNA相对表达分别为(46.71±4.26)%、(95.65±5.57)%,Western-blot检测bcl-2蛋白相对表达分别为(56.34±6.45)%、(42.01±3.01)%,bax蛋白质表达分别是(50.65±4.50)%、(66.78±5.05)%,对照组与实验组差异均有统计学意义(P<0.01)。结论:As₂O₃诱导HL-60细胞凋亡过程中,下调bcl-2 mRNA和蛋白质表达,同时上调bax mRNA和蛋白质表达,可能是As₂O₃诱导细胞凋亡信号传导通路之一。     

促红细胞生成素对大鼠脑缺血再灌注神经元凋亡、bcl-2和bax表达的影响

目的观察促红细胞生成素(Epo)对大鼠局灶性脑缺血再灌注神经细胞凋亡及凋亡相关蛋白bc l-2、bax表达的影响。方法60只SD大鼠随机分为6组,缺血再灌注治疗A组、B组、C组、D组(分别在缺血前30 m in及再灌注后2 h、6 h、12 h腹腔注射Epo 3 000 IU.kg-1)、缺血再灌注组(E组)和假手术组(F组)。观察Epo对大鼠脑缺血再灌注后脑组织的病理变化,Epo、bc l-2、bax的表达及神经细胞凋亡情况。结果(1)A组、B组、C组及F均未见明显病理性改变,D组及E组显示梗死区神经元缺血改变;(2)各组均可见不同程度Epo阳性表达细胞,且A组、B组、C组较D组、E组表达明显增多(P<0.05);(3)TUNEL法见A组、B组、C组、F组凋亡阳性细胞较D组、E组明显减少(P<0.05);(4)A组、B组、C组bc l-2蛋白表达较D组、E组、F组明显增多(P<0.05),而bax蛋白表达较D组、E组及F组明显减少(P<0.05)。结论Epo通过调控凋亡相关基因bc l-2/bax的比率而发挥抗神经元凋亡的脑保护作用。     

Survivin在子宫内膜异位症的表达及其与bcl-2、bax相关性的研究

目的 探讨凋亡抑制基因survivin在子宫内膜异位症的表达,及其与bcl-2、bax的相关性. 方法应用免疫组织化学S-P法,检测40例子宫内膜异位症异位内膜组织中survivin、bcl-2、bax蛋白的表达,并与正常在位子宫内膜组织25例进行对照.结果 子宫内膜异位症异位内膜组织中survivin蛋白阳性表达率为67.5%,明显高于正常在位内膜组织的表达率4.2%(P＜0.05),并且异位内膜组织中survivin蛋白表达与月经周期无相关性(P＜0.05);survivin蛋白表达与bcl-2蛋白呈正相关(P＜0.05),而与bax蛋白呈负相关(P＜0.05). 结论 survivin可通过抑制异位内膜细胞凋亡,对子宫内膜异位症的发生、发展起作用;survivin与bcl-2、bax在子宫内膜异位症的发生、发展中分别起协同和拮抗作用.     

乳化异氟醚对缺氧复氧乳鼠心肌细胞的保护作用及bcl-2、bar表达的影响

目的 观察乳化异氟醚(8%体积分数)对培养乳鼠心肌细胞模拟缺血再灌注损伤后心肌细胞凋亡及凋亡相关基因bcl-2、bax的mRNA与蛋白水平表达的影响.方法 利用原代培养的Wistar乳鼠心肌细胞建立模拟心肌缺血再灌注模型,分正常培养组、模型组、脂肪乳组、乳化异氟醚(终浓度0.28 mmol/L).各组心肌细胞做相应分组处理后,利用倒置显微镜观察心肌细胞的生长状态和搏动频率,并用透射电镜观察细胞超微结构改变;流式细胞仪检测心肌细胞凋亡率;RT-PCR检测心肌细胞凋亡基因bcl-2 mRNA、box mRNA的表达.Western blot定量检测Bcl-2、Bax蛋白表达.结果 乳化异氟醚组和脂肪乳组均可显著降低细胞凋亡率(P＜0.05),但乳化异氟醚组与脂肪乳组比较降低更明显(P＜0.05).乳化异氟醚可显著上调Bcl-2表达(P＜0.05)、下调Bax表达(P＜0.05);脂肪乳对Bcl-2和Bax表达无影响(P>0.05).结论 乳化异氟醚及其其中的成分之一脂肪乳可抑制模拟缺血再灌注损伤心肌细胞的凋亡;乳化异氟醚对缺氧复氧损伤的抗凋亡作用与其心肌细胞Bcl-2表达上调和Bax表达下调有关.