CD8和Ⅰ类MHC分子介导的细胞-细胞粘附

CD4和CD8是不同T 细胞亚群表达的细胞表面糖蛋白。表达CD4的T 细胞具有特异性的Ⅱ类MHC 分子呈递的抗原的T 细胞抗原受体,而表达CD8的T 细胞则具有特异性的Ⅰ类MHC 分子呈递抗原的受体。现认为,CD4和CD8可能与T 细胞抗原受体相关,能与抗原和MHC 分子形成高亲和力的复合     

阿托伐他汀对实验性自身免疫性心肌炎MHCⅡ类分子表达的调节作用

目的探讨阿托伐他汀对实验性自身免疫性心肌炎（experimental autoimmune myocarditis,EAM）的作用及对心肌MHCⅡ类分子表达的影响.方法以纯化猪心肌肌球蛋白免疫Lewis大鼠诱导EAM模型.随机分为阿托伐他汀治疗组和未治疗组.治疗组给予阿托伐他汀每天10 mg/kg,未治疗组给予等体积饮用水,分别以灌胃器给药,连续用药3周.以未免疫的同周龄Lewis大鼠为正常对照组.用药21 d后,检测超声心动图,脾T淋巴细胞增殖试验、HE染色观察心肌组织炎症浸润程度,免疫组化检测心肌内CD4＋或CD8＋T细胞的浸润及心肌组织MHCⅡ类分子的表达.RT-PCR检测心肌Ⅰ型、Ⅲ型及Ⅳ型MHCⅡ类分子转录活化因子（classⅡ transactivator,CⅡTA）启动子转录.结果阿托伐他汀显著改善EAM大鼠心功能,治疗组心肌组织炎症浸润减轻,MHCⅡ类分子表达减少,抗原诱导的T淋巴细胞增殖显著受抑制.Ⅳ型CⅡTA启动子表达下调,而Ⅰ、Ⅲ型CⅡTA启动子表达与未治疗组比较差异无统计学意义.结论阿托伐他汀显著改善EAM大鼠心功能及组织病理学表现,其机制可能通过下调Ⅳ型CⅡTA启动子转录,抑制心肌非专职性APC MHCⅡ类分子表达.表明他汀类对EAM具有免疫调节效应,从而在器官特异性自身免疫性心肌损伤的治疗中具有应用前景.     

整合素CD11a、CD11b和CD11c在大鼠心脏发育中的表达变化

目的 探讨整合素CD11a、CD11b和CD11c在大鼠心脏发育中的表达变化。方法 利用免疫组织化学和RT-PCR方法,检测胚胎18d(E18d)、生后5d(P5d)、P19d、P40d及生后1年（P1y）大鼠心肌组织的CD11a、CD11b和CD11c的基因和蛋白表达。结果 免疫组织化学结果显示,大鼠心肌
组织CD11a、CD11b和CD11c表达部位在心肌细胞质内;从E18d到P1y大鼠心肌组织CD11a、CD11b和CD11c的表达逐渐减弱。 RT-PCR显示,CD11a、CD11b、CD11c各组均呈阳性表达。其中CD11a在P5d和P40d间,P5d和 P19d间比较（P>0.05）差异无统计学意义,其他各组间比较差异均有统计
学意义;CD11b在E18d、P5d、P19d和P40d分别比较（P>0.05）差异无统计学意义,其他各组差异均有统计学意义;CD11c各组间差异有统计学意义（P<0.01）。结论 CD11a、CD11b和CD11c在大鼠心肌的发育过程中出现表达量的变化,不同结构的整合素分子在心脏发育过程表现出相似的
表达规律,它们可能对心肌细胞的发育起重要的调控作用。     

孕早期干预CD80/CD86协同刺激信号对自然流产模型免疫活性细胞协同刺激分子表达的影响

目的 :探讨孕早期干预协同刺激信号对自然流产模型孕鼠免疫活性细胞MHC Ⅱ类抗原和协同刺激分子的调控作用。方法 :建立自然流产模型组CBA×DBA 2和协同刺激信号干预组CBA×DBA 2 (CBA小鼠在孕 4天腹腔注射CD80及CD86mAb各 0 1mg)。分别于孕第 14天计数两组的胚胎吸收率 ,于孕第 9天采用流式细胞技术分析孕鼠脾细胞MHC Ⅱ类抗原与协同刺激分子CD80 (B7 1)、CD86 (B7 2 )、CD2 8和CD15 2 (CTLA 4 )的表达。结果 :孕早期干预协同刺激信号后 ,孕第 14天的胚胎吸收率显著下降 (P <0 0 5 ) ;孕第 9天免疫活性细胞CD80、CD86和CD2 8的表达显著下降 (P <0 0 1) ;CTLA 4的表达则显著升高 (P <0 0 5 ) ;而MHC Ⅱ类抗原的表达无显著改变 (P >0 0 5 )。结论 :孕早期体内干预协同刺激信号使免疫活性细胞协同刺激分子CD80、CD86、CD2 8表达下调和CTLA 4表达上调 ,及母胎界面Th2型免疫偏离 ,从而诱导系统性母 胎免疫耐受     

CART肽抑制NMDA诱导海马神经元凋亡的机制

目的：探讨可卡因－苯丙胺调节转录肽（CART）对兴奋性氨基酸N-甲基-D-天冬氨酸（NMDA）诱导海马神经元凋亡的作用和机制。方法：18 d SD大鼠胚胎（E18）海马神经元原代培养8 d,用MTT吸光度值、DNA ladder、Hoechst染色、Western blotting方法观察NMDA引起的神经元凋亡,以及CART肽对NMDA诱导的细胞凋亡的影响,分析CART肽的作用机制。结果：CART肽预处理组海马神经元存活率明显高于NMDA组（P<0.05）;DNA ladder和核形态Hoechst染色证明,CART肽明显抑制NMDA诱导的海马神经元凋亡（P<0.01）。CART肽预处理明显促进NMDA组海马神经元中Bcl-2表达（P<0.01）,增加Bcl-2/Bax比值,抑制caspase-9及caspase-3活化（P<0.01）;但CART肽对Bax的表达及caspase-8活化无显著影响。结论： CART肽抑制NMDA诱导的海马神经元凋亡,呈明显的神经保护作用,其神经保护机制主要是提高抗凋亡分子Bcl-2表达,抑制线粒体凋亡途径启动分子caspase-9和执行分子caspase-3的活化。     

恒河猴(Macaca mulatta)主要组织相容性复合体及其与SIV/SAIDS疾病进程关系的研究进展

主要组织相容性复合体（Major histocompatibility complex，MHC）是脊椎动物染色体上一组紧密连锁的基因群，人MHC位于6p21．3上，恒河猴MHC定位在6q24上。MHC可分为三大基因群，分别称为Ⅰ类、Ⅱ类和Ⅲ类基因。MHC编码的糖蛋白称MHC分子，典型的MHCI类分子几乎表达于所有类型的细胞，主要与内源性抗原肽结合并递呈给CD8^＋杀伤性T细胞，导致靶细胞死亡；MHCⅡ类分子主要表达于免疫系统细胞，能够结合外源抗原肽并呈递给CD4^＋辅助性T细胞。它们在针对病原生物的免疫应答中发挥着重要的作用。     

实验性蛛网膜下腔出血后海马CA1区神经元凋亡的研究

目的探讨实验性蛛网膜下腔出血（SAH）后海马CA1区神经元凋亡及CD95（Fas）分子启动的死亡信号转导机制.方法枕大池二次注血法制备蛛网膜下腔出血模型,HE染色和激光扫描共焦显微镜观察海马CA1区神经元细胞形态学改变,应用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测SAH后海马CA1区CD95（Fas）分子启动的死亡信号转导通路蛋白Fas、FasLmRNA的表达变化.结果蛛网膜下腔出血后6 h海马CA1区神经元凋亡细胞开始出现,3～7 d呈典型凋亡细胞形态学改变.Fas、FasLmRNA的表达在蛛网膜下腔出血后呈上升趋势,3 d时达最高,7 d时仍显著高于正常组,14 d时趋于正常. 结论 CD95（Fas）分子启动的死亡信号转导通路在SAH后海马CA1区神经元凋亡中可能起重要作用.     

维吾尔族妇女宫颈病变组织中HLA-Ⅰ类抗原、CD3和CD8的表达

目的通过检测维吾尔族妇女子宫颈病变组织中人类白细胞抗原Ⅰ(human leukocyte antigen classⅠ,HLA-Ⅰ)、CD3和CD8分子的表达,探讨子宫颈病变中HLA-Ⅰ类抗原与CD3和CD8分子表达的关系。方法采用免疫组织化学方法检测HLA-Ⅰ蛋白、CD3和CD8分子在慢性子宫颈炎、子宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia,CIN)和子宫颈鳞癌(cervical squamous cell carcinoma,CSCC)患者石蜡包埋组织中的表达水平。结果 HLA-Ⅰ蛋白在子宫颈炎、CIN和子宫颈癌组织中的阳性表达率分别为96%、70.3%和50.6%,并且随着子宫颈癌病理分级和临床分期的增加其阳性表达率减少(P0.05)。CD3和CD8分子在子宫颈炎、CIN和子宫颈癌组织中的阳性表达率分别为96%、78.1%、66.7%和96%、84.4%、55.6%;CD8分子在子宫颈病变中的表达趋势与HLA-Ⅰ蛋白表达相似,并且与FIGO分期进展和肿瘤分化程度以及淋巴结转移密切相关(P0.05);HLA-Ⅰ类抗原与CD3在CIN和子宫颈癌中表达呈正相关(r=0.422,P0.001;r=0.421,P0.001),HLA-Ⅰ类抗原与CD8分子在子宫颈病变中的表达呈正相关(r=0.422,P0.001;r=0.410,P0.001)。结论 HLA-Ⅰ类抗原、CD3和CD8分子在子宫颈病变中的表达减少可能与子宫颈癌的发生、发展有关。     

七氟烷对老年大鼠认知功能及海马CA1区胰岛素样生长因子Ⅰ表达的影响

目的探讨不同剂量七氟烷对老年大鼠认知功能及海马CA1区胰岛素样生长因子Ⅰ（IGF-Ⅰ）表达的影响。方法选取12月龄SD大鼠40只,雌雄不限,随机分为5组（n=8）：对照组（A组）吸入空气,B、C组吸入1．5％七氟烷2h,D、E组吸入3．0％七氟烷2h。B、D组1d后进行认知功能测试,C、E组7d后进行认知功能测试。所有大鼠在实验结束后行Y型迷宫测试．认知功能测试完毕后立即处死大鼠．取海马组织,左侧海马用RT—PCR方法测定CA1区IGF—Ⅰ mRNA的表达,右侧海马用免疫组织化学法检测IGF-Ⅰ蛋白的表达。结果与对照组相比,高浓度七氟烷1d组（D组）认知功能下降,IGF—Ⅰ蛋白和IGF—Ⅰ mRNA表达明显减少．其他七氟烷组与对照组相比认知功能无明显变化．IGF—Ⅰ蛋白和IGF—Ⅰ mRNA表达的差异无统计学意义（P〉0．05）。结论高浓度七氟烷可在短时期内降低老年大鼠认知功能,可能与海马CA1区IGF—Ⅰ含量降低有关．内源性IGF—Ⅰ的表达减少可能在老年大鼠认知功能障碍的发生、发展过程中起到重要作用。     

乳鼠角朊细胞分离表达共刺激分子CD80/CD86

以往研究认为角朊细胞不表达共刺激分子CD80／CD86，无法提供淋巴细胞增殖过程中关键的共刺激信号，但培养的角朊细胞膜片移植后，最终供者细胞被完全排斥，具体机理不明。本实验使用近交系小鼠，有和无血清两种体系培养角朊细胞1、4、7d，采用流式细胞技术、激光共聚焦技术，RT-PCR方法检测角朊细胞在培养过程中MHCⅠ类、Ⅱ类抗原，及CD80、CD86的表达。证实培养的细胞中不含郎格罕氏细胞，首次发现乳鼠角朊细胞在培养过程中表达CD80，但不表达CD86，可刺激异基因淋巴细胞增殖，执行抗原递呈细胞功能。本研究结果为角朊细胞膜片移植排斥提出另一种可能的解释：MHCⅠ／Ⅱ类分子和CD80的表达，使培养的异体角朊细胞兼具外来抗原和抗原递呈细胞的功能，刺激受体淋巴细胞增殖，参与排斥反应。     

电针对慢性应激大鼠海马神经元型一氧化氮合酶表达的影响

目的探讨电针（electroacupuncture,EA）对慢性应激海马神经元型一氧化氮合酶（nNOS）表达的影响。方法30只雌性SD大鼠随机分成3组：模型组、电针组和对照组。每组10只。模型组大鼠连续接受21d各种不同的应激,平均每种应激使用2～3次。电针组模型建立后中止刺激,给予电针“三阴交”穴和“百会”穴．连续电针21d。对照组不给予刺激和电针。第42天将3组大鼠处死取脑。利用免疫组织化学方法检测海马区nNOS的表达情况。结果模型组大鼠海马nNOS阳性神经元的数量减少（P〈0．05）,染色变淡;电针后海马nNOS阳性神经元的数量有所增加（P〈0．05）。结论电针可上调nNOS在大鼠海马内的表达。     

异丙酚对大鼠脑缺血再灌注海马细胞周期因子变化及神经元凋亡的影响

目的： 探讨大鼠局灶性脑缺血再灌注后海马神经元细胞周期蛋白1（cyclin D1）和细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶4（cyclin-dependent kinase 4,CDK4）的表达与神经元凋亡的关系及异丙酚的脑保护作用。方法: 采用大脑中动脉内栓线阻断法（middle cerebral artery obstruction,MCAO）造成局灶性脑缺血再灌注模型。用免疫印迹法（Western blotting）观察cyclin D1和CDK4蛋白的表达;采用流式细胞仪检测海马神经元凋亡。再灌注48 h时进行大鼠神经功能缺陷比较。结果: （1）异丙酚可以改善大鼠脑缺血再灌注后的神经功能缺陷（P＜0.01）;（2）与假手术组比较,脑缺血再灌注48 h后缺血侧海马神经元cyclin D1、CDK4表达明显升高、凋亡细胞数明显增多（P＜0.01）。与缺血再灌注组比较,异丙酚组海马神经元cyclin D1、CDK4的表达和凋亡率明显降低（P＜0.05）。结论: 脑缺血再灌注后缺血侧海马cyclin D1、CDK4表达增强,这可能是介导脑缺血再灌注后神经元凋亡的机制之一;异丙酚可下调神经元cyclin D1、CDK4的表达,抑制神经元凋亡,减轻缺血再灌注对大鼠海马神经元的损伤。     

脱氢表雄酮对鼠成骨细胞及CD4+T细胞协同刺激分子表达的影响

目的探讨脱氢表雄酮（DHEA）对成骨细胞（osteoblasts，OB）及CD4^＋T细胞表达协同刺激分子的调控作用。方法颅骨酶解法培养鼠OB，体外模拟雌激素撤退；免疫磁珠细胞分选（rnagnetic cell soaing，MACS）法分离CD4^＋T细胞；将OB或CD4^＋T细胞分为对照组、E2及DHEA处理组，并以LPS刺激；以流式细胞术分析OB表面CD80、CD86以及CD4^＋T细胞表面CD28、CTLA-4的表达。结果经E2及DHEA处理后，OB表达CD80、CD86显著增加（P〈0．05，P〈0．01）；CSA可降低对照组及DHEA处理组OBCDS0、CD86的表达（P〈0．01）。除DHEA组CD28^＋T细胞百分比增加外（P〈0．05），其余各组CD4^＋T细胞CD28和CTLA-4的表达无显著改变（P〉0．05）。结论DHEA可上调鼠OB协同刺激分子CD80、CD86表达，该作用可被CsA阻滞；DHEA还上调CD4^＋T细胞CD28的表达，提示可改善骨．免疫调节网络。     

CD4~+T淋巴细胞功能性区分

确定T 细胞由其表面表达CD3来决定,CD3为T 细胞受体复合体中的一恒定成份。带有αβ-T 细胞受体异二聚体的T 细胞可进一步分为表达CD4和CD8抗原的二类。虽然CD4~+T 细胞通常被称为T 辅助细胞,但是这种认识并不全面。第一,CD4的表达几乎绝对地和外来抗原识别有关,抗原以多肽形式结合至MHCⅡ类分子上。而MHCⅡ类分子特异性可能是CD4与MHCⅡ类抗原结合的结果,此时CD4作为T 细胞受体对抗原-MHCⅡ类复合物的活信号成份。其次,CD4~+T 细胞具有多种不同的功能,其中之一是激活抗原特异性B 细胞。另外,确有一些CD4~+T 细胞能抑制B 细胞的活化。克隆化T 细胞系的功能区分克隆化T 细胞可分成二型。其中一型能     

磷酸化的细胞周期相关蛋白在大鼠海马神经元发育和老化过程中的表达

目的： 观察正常Wistar大鼠发育及老化过程中海马神经元磷酸化的细胞周期相关蛋白的表达,探讨这一过程中海马神经元的细胞周期的变化以及磷酸化细胞周期相关蛋白在其中的调控作用。方法：采用免疫荧光方法观察不同发育时期(1天、11天、1月、3月、15月) 磷酸化周期素依赖激酶2（CDK2）、磷酸化细胞分裂周期激酶2（CDC2）、磷酸化视网膜母细胞瘤（Rb）蛋白表达的规律,并应用Western blotting方法测定不同阶段大鼠海马内磷酸化CDK2、磷酸化CDC2、磷酸化Rb的含量。结果：在各年龄组中神经元特异性核蛋白（NeuN）阳性细胞数量随着年龄增加而逐渐减少,提示神经元数量随年龄的增加而逐渐减少。磷酸化CDK2、磷酸化Rb阳性细胞的数量随着年龄增加而逐渐增多,老年组增加明显,与其它各组间有显著差异,磷酸化CDC2阳性细胞在各年龄组神经元中表达量均较低;蛋白定量亦提示老年组磷酸化CDK2、磷酸化Rb的含量较其它组明显增高。结论：海马神经元数量随年龄增加逐渐减少,而其中磷酸化CDK2和磷酸化Rb却随年龄的增长逐渐增多,提示老化过程中部分神经元再次进入细胞周期,说明磷酸化细胞周期相关蛋白可能参与了这一过程中海马神经元的凋亡。     

参脉注射液对缺血性脑损伤大鼠海马c-fos蛋白表达的影响

为了从分子水平探讨缺血性脑损伤的病理生理改变和参脉注射液的保护作用，我们将30只雄性Wistar大鼠随机分为对照组，缺血组和治疗组，采用免疫组织化学方法观察了缺血性脑损伤时大鼠海马神经元c-fos基因的表达及参脉注射液的保护作用，结果显示，缺血性脑损伤时大鼠海马内神经元c-fos基因的表达明显增多（P＜0．05），而用参脉注射液后明显减少（P＜0．05），提示参脉注射液可减少缺血性脑损伤大鼠海马神经元c-fos基因的表达，从而对缺血性脑损伤具有一定的保护作用。     

P>灵芝孢子防止妊娠高血压大鼠的胎鼠及其生后幼鼠海马细胞增殖下降和神经元存活减少/P>

目的 探讨灵芝孢子对妊娠高血压大鼠的胎鼠及幼鼠海马细胞增殖下降和神经元存活减少的干预作用.方法 40只SD妊娠大鼠分为正常对照组、N硝基左旋精氨酸甲酯(L-NAME) 蒸馏水组、L-NAME 精氨酸组、L-NAME 灵芝孢子组.采用免疫组织化学、Western blottin、RT-PCR、流式细胞计数和电镜等技术对海马组织进行检测.结果 应用L-NAME后,E21海马低氧诱导因子-1α(HIF-1α)和血管内皮生长因子(VEGF)的表达增加,直到P30时仍有表达.E21海马微血管密度增高,P30海马毛细血管结构异常.E21海马细胞的增殖下降,P30海马神经元减少.应用灵芝孢子后,E21海马HIF-1α和VEGF低水平表达,在P30时则未见表达.E21海马微血管密度达到正常水平,P30海马毛细血管结构正常.E21海马细胞增殖上升,P30海马神经元恢复性增多.结论 灵芝孢子能防止妊娠高血压大鼠的胎鼠及幼鼠海马细胞增殖下降和神经元存活减少.     

大鼠心脏移植排斥反应过程中外周血CD28、CD40通路相关分子的变化

目的探讨CD28、CD40共刺激通路与排斥反应的关系,同时也为排斥反应的诊断寻找一种新的检测指标。方法采用大鼠异位心脏移植模型,用免疫组化方法动态检测外周血单核细胞（PBMC）CD28、CTLA4、CD40及CD40L分子的表达。结果在0～4级排斥反应中,外周血细胞CD28分子阳性表达率在各组间的差异无统计学意义。外周血细胞表达CTLA4分子的阳性率随排斥反应增强而升高（P〈0.01）。CD40及CD40L在PBMC中的表达强度也随排斥反应的分级逐渐增强（P〈0.01）。结论外周血CTLA4、CD40及CD40L分子的表达与排斥反应有密切关系,动态检测这些分子有助于对排斥反应状态的评价。     

睡眠剥夺对HSP70表达及脑超微结构的影响

目的：观察睡眠剥夺（SD）后大鼠脑组织HSP70表达的变化及对超微结构的影响。方法：44只雄性SD大鼠随机分为11组，每组4只，免疫组织化学方法检测HSP70的表达，电镜观察海马超微结构的变化。结果：睡眠剥夺后12小时即可在大脑皮质及海马观察到HSP70阳性细胞，2—3天数量达到高峰，7天时明显下降。白天睡眠剥夺12小时（SDd12h）组HSP70阳性细胞数较夜晚睡眠剥夺12小时（SDn12h）组多（P〈0．05）。RS组大脑皮质HSP70阳性细胞数较白天睡眠剥夺1天（SDd1d）组减少（P〈0．05）。白天睡眠剥夺3天（SDd3d）海马出现超微结构改变，白天睡眠剥夺7天（SDd7d）后改变更加明显。结论：睡眠剥夺可影响大鼠脑组织HSP70表达及超微结构。     

基于IL-33/ST2L通路研究黄芩苷对缺血性脑卒中大鼠的神经保护作用

目的：探讨黄芩苷对缺血性脑卒中大鼠的神经功能及IL-33/白介素1受体样1(ST2L)信号通路的影响。方法：将90只大鼠随机分为假手术组、模型组、尼莫地平组[0.4 mg/（kg·d）]、黄芩苷低、中、高剂量组[50、100、150 mg/（kg·d）]，改良Longa线栓法构建缺血性脑卒中大鼠模型。建模24 h后，Longa评分对所有大鼠神经功能损伤进行评分；ELISA法检测大鼠血清IL-6、TNF-α水平；2,3,5-三苯基氯化四唑（TTC）染色测定大鼠脑梗死面积；苏木素-伊红（HE）染色观察大鼠脑组织病理学变化；免疫组化法检测大鼠脑组织小胶质细胞数目；Western blot检测大鼠脑组织中IL-33/ST2L通路蛋白表达。结果：假手术组大鼠脑组织海马区未发生水肿，组织排列层次分明，神经元细胞结构正常；模型组大鼠海马区出现严重水肿，神经元紊乱，细胞核固缩、坏死，神经元细胞大量死亡；尼莫地平组、黄芩苷低、中、高剂量组大鼠水肿程度减轻，神经元细胞、变性、死亡数量减少，随着黄芩苷剂量增加，水肿程度逐渐变轻，神经元细胞死亡数量逐渐减少。与假手术组相比，模型组大鼠Longa评分、脑梗死面积...