RNA干扰逆转肿瘤细胞的多药耐药性

化疗是目前肿瘤治疗的主要措施,而肿瘤多药耐药性（multiresistance,MDR）的产生是肿瘤化疗失败的主要原因。肿瘤MDR机制非常复杂,逆转肿瘤MDR的方法也多种多样,但目前临床上尚未有从根本上完全逆转MDR的理想药物。RNA干扰是最近几年研究逆转MDR的热点,为临床上研制高效、低毒、特异性强的逆转剂提供了前景。     

多药耐药性及其耐药性的逆转进展

<正> 多药耐药性(Multidrug resistance,MDR)是指肿瘤细胞对一种药物耐药的同时,也对其他结构和机制不同的药物产生耐药性.造血系统恶性肿瘤细胞MDR是导致临床化疗失败的主要原因,临床工作者对此进行了广泛的研究,目前知道耐药性的产生至少涉及三种机制①P—170糖蛋白介导的MDR;②拓扑异构酶Ⅱ介导的MDR;③非P—170糖蛋白介导的MDR.近年来国外还相继报导多种钙拮抗     

中药逆转抗肿瘤药物多药耐药性研究进展

肿瘤多药耐药(multidrug resistance,MDR)是目前临床化疗失败的主要原因,具有逆转肿瘤MDR的大部分化药毒副作用比较大且效果差,而中药具有安全有效、多靶点且成本低等优势,弥补了化药抗肿瘤MDR的缺点,文章总结了肿瘤MDR产生的经典机理及中药逆转肿瘤MDR的研究进展。     

肿瘤多药耐药性的相关研究

肿瘤是机体遗传和环境致癌因素以协同序贯的方式,引起遗传物质DNA损伤、突变,同时伴有多个癌基因激活和肿瘤抑制以近失活,是正常细胞不断增生、转化所形成的新生物。国内外研究表明：多药耐药（multidrug resistance,MDR）是导致肿瘤化疗失败的主要原因。肿瘤的耐药性涉及细胞内药物的浓度降低,药物靶分子的改变,代谢解毒,DNA损伤修复功能失衡等多种机制。MDR与P-糖蛋白、多药耐药相关蛋白、乳腺癌耐药蛋白、肺耐药蛋白、拓扑异构酶、谷胱甘肽-s-转移酶,以及细胞凋亡相关蛋白和机制有关。目前有很多逆转剂,但是能很好地逆转肿瘤的耐药性的方法和药物还有待进一步研究。     

肿瘤多药耐药性的相关研究

肿瘤是机体遗传和环境致癌因素以协同序贯的方式,引起遗传物质DNA损伤、突变,同时伴有多个癌基因激活和肿瘤抑制以近失活,是正常细胞不断增生、转化所形成的新生物.国内外研究表明:多药耐药(multidrug resistance,MDR)是导致肿瘤化疗失败的主要原因.肿瘤的耐药性涉及细胞内药物的浓度降低,药物靶分子的改变,代谢解毒,DNA损伤修复功能失衡等多种机制.MDR与P-糖蛋白、多药耐药相关蛋白、乳腺癌耐药蛋白、肺耐药蛋白、拓扑异构酶、谷胱甘肽-s-转移酶,以及细胞凋亡相关蛋白和机制有关.目前有很多逆转剂,但是能很好地逆转肿瘤的耐药性的方法和药物还有待进一步研究.     

肿瘤细胞多药耐药性的研究进展

1970年Biedle等发现体外培养的中国仓鼠卵巢细胞除对所接触的抗癌药物可产生耐药性外 ,对其它未接触过的化学结构、药理靶向和代谢途径不同的抗癌药物也产生了耐药性 ,即交叉耐药 ,也称多药耐药性 (multidrugresistance ,MDR)。研究人员在 30多年中相继发现了许多肿瘤细胞产生MDR的重要机制。1　P -糖蛋白1976年 ,Juliao和ling利用蛋白凝胶电泳技术比较中国仓鼠卵巢细胞 (CHO)及其秋水仙碱耐药株的膜蛋白成分 ,发现后者细胞膜高表达 170KDa的糖蛋白 ,且该糖蛋白的表达水平与细胞的耐药程度呈正相关[1] 。他们认为这种170KDa的糖蛋白…     

索拉非尼逆转肝癌细胞多药耐药的实验研究

目的 探讨索拉非尼体外对人肝癌细胞(BEL-7402/FU)多药耐药性的逆转作用及可能机制.方法 以MTT比色法测定索拉非尼对肝癌细胞的剂量效应曲线,并以流式细胞仪检测索拉非尼对肝癌细胞内罗丹明123 (Rho123)浓度的影响,根据上述实验结果选取合适的索拉非尼实验剂量.以MTT法测定索拉非尼对抗癌药物细胞毒性的影响,用流式细胞仪检测细胞膜转运蛋白(P-gp)的表达,RT-PCR法检测mdr1基因的表达.结果 索拉非尼浓度在4μmol/L时逆转效率较高且毒副作用较小,4 μmol/L的索拉非尼能部分逆转BEL-7402/FU细胞的耐药性,对ADM、5-FU、GEM、DDP的逆转倍数分别为2.98、7.16、1.99、10.08倍,并可部分下调BEL-7402/FU细胞P-gp的表达,使mdrl基因表达与对照组相比下降了27.3%.结论 索拉非尼具有体外逆转人肝癌细胞多药耐药性的作用,可能与下调mdr1基因表达、增加细胞内化疗药物的蓄积有关.     

多药耐药相关蛋白与肿瘤多药耐药性

恶性肿瘤是最常见的恶性疾病 ,已成为人类死亡的主要原因之一。化疗在肿瘤的综合治疗中发挥着重要作用 ,然而 ,由于肿瘤耐药性的产生 ,尤其是多药耐药性的产生 ,使肿瘤患者的治愈率仍很低。多药耐药 (maltidrugrsistance,MDR)是指肿瘤细胞对一种化疗药物产生耐药现象后会对结构、作用靶点和作用机制迥然不同的多种其他抗肿瘤药物产生交叉耐药的一种现象 ,是影响肿瘤化疗效果的重要因素。肿瘤细胞MDR分为内在性 (未接触药物时原已存在的 )和获得性 (接触药物后产生的 )两大类 ,其机制相当复杂 ,比如 :特殊膜糖蛋白的增加而使细胞排出药物…     

双氢青蒿素逆转人结肠癌耐药细胞耐药性的研究

【目的】评价双氢青蒿素逆转人结肠癌细胞HCT8/ADR耐药性的能力,研究其逆转耐药的机制。【方法】采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法、流式细胞术分别进行细胞毒性、细胞凋亡实验评价双氢青蒿素和阿霉素联合用药的药效,采用Western blot法研究逆转耐药的机制。【结果】双氢青蒿素和阿霉素联用后对人结肠癌耐药细胞有较高的毒性,能诱导耐药细胞凋亡,增强耐药细胞的自噬。【结论】双氢青蒿素能逆转耐药性,恢复耐药细胞对化疗药物的敏感性。     

异博定对乳腺癌细胞多药耐药性逆转作用的研究

目的：检测异博定逆转乳腺癌耐药细胞株对阿霉素的耐药性。方法：ＭＴＴ法检测细胞的抑制率变化，流式细胞仪检查异博定对ＭＣＦ－７／Ａｄｒ细胞的药物浓度变化。结果：异博定可提高肿瘤细胞的药物浓度（Ｐ＜０．０１），并且使ＭＣＦ－７／Ａｄｒ细胞对阿霉素的敏感性增加２０倍。结论：本实验证实异博定可增加细胞内抗肿瘤药物浓度，逆转细胞的耐药性，为临床应用异博定逆转肿瘤的耐药性提供了理论基础。     

榄香烯对人肺癌A549细胞系耐顺铂细胞株多药耐药的改善作用及机制研究

[目的]探究榄香烯(elemene,ELE)对顺铂(cisplatin,DDP)耐药人肺癌A549/DDP细胞系多药耐药的改善作用及其作用机制.[方法]将A549/DDP细胞分为A549/DDP组和ELE组,以四甲基偶氮唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)检测24、48、72h时不同...     

Thapsigargin逆转K562/A02细胞多药耐药性的实验研究

目的 探讨内质网Ca^2 -ATP酶抑制剂thapsigargin对白血病多药耐药细胞株K562／A02化疗敏感性的影响。方法 用MTT比色法检测K562／A02细胞耐药性、thapsigargin的增殖抑制活性及其对K562／A02细胞化疗敏感性的影响；丫啶橙(AO)／溴化乙锭(EB)染色荧光显微镜观察thapsigargin处理后K562／A02细胞形态改变；流式细胞仪(FCM)检测P-糖蛋白(P-gp)表达；荧光显微镜检测Pgp功能。结果 ①thapsigargin对K562和K562／A02细胞的增殖抑制活性呈剂量和时间依赖性，K562／A02细胞较K562细胞对thapsigargin更敏感，thapsigargin诱导K562／A02细胞呈现典型的凋亡细胞形态学改变。②K562／A02细胞对阿霉素(ADM)、柔红霉素(DNR)、长春新碱(VCR)、依托泊苷(VP-16)、高三尖杉酯碱(HHT)和米托蒽醌(MXT)均出现不同程度的耐药性；thapsigargin抑制K562／A02细胞P-gP功能而对其表达无影响，thapsigargin能增加K562／A02细胞对ADM、DNR、VCR、VP-16、HHT和MXT的化疗敏感性。结论 Thapsigargin能诱导白血病多药耐药细胞株K562／A02细胞凋亡并能部分逆转K562／A02的多药耐药性；thapsigargin的多药耐药逆转功能可能与其凋亡诱导作用和抑制PgP功能有关。     

MicroRNA-98对A549/DDP细胞顺铂耐药性的影响

目的探讨MicroRNA-98（miR-98）对肺腺癌耐顺铂细胞系A549／DDP顺铂耐药性的影响。方法利用MicroRNA（miRNA）芯片及生物信息学筛选出miR-98。将miR-98质粒载体瞬时转染至A549／DDP细胞：M．rr检测细胞药物敏感性的改变。结果在A549／DDP细胞中miR-98表达水平下调。转染miR．98的A549／DDP细胞生长抑制率明显增高。结论miR-98能够增加肺腺癌耐药细胞株A549／DDP对顺铂的药物敏感性。     

外源性人分化抑制因子3在A549／DDP细胞中的表达及意义

目的:Id 蛋白即分化抑制因子(Id),在人类多种肿瘤中异常表达,并参与肿瘤细胞的增生、分化和凋亡等.文中旨在探讨人分化抑制因子3(Id3)基因体外转染在人肺腺癌细胞顺铂耐药株A549/DDP细胞中的表达及意义. 方法:构建人Id3基因和增强型绿色荧光蛋白(EGFP)真核表达载体Id3/pEGFP,采用脂质体介导的转染技术将Id3融合基因(Id3-EGFP)导入A549/DDP细胞,激光共聚焦显微镜观察细胞内EGFP的表达情况;半定量RT-PCR检测Id3表达的改变;MTT法观察Id3对细胞的增殖抑制情况. 结果:成功构建人Id3/pEGFP真核表达载体并转染A549/DDP细胞,倒置荧光显微镜下转染的A549/DDP细胞发出强绿色荧光,转Id3/pEGFP质粒的细胞其荧光主要表达于细胞核;RT-PCR结果显示Id3 mRNA在转染后的A549/DDP细胞能有效表达;MTT法结果表明,与对照组相比,转染Id3重组质粒的细胞增殖被抑制. 结论:转染的Id3/pEGFP融合基因在A549/DDP细胞能有效表达,外源性Id3基因能抑制该细胞的增殖.     

青蒿素对乳腺癌多药耐药MCF-7/ADR细胞的逆转作用

目的探讨青蒿素在乳腺癌多药耐药中的应用。方法采用MTT法观察青蒿素联合阿霉素(ADR)对乳腺癌耐药株MCF-7/ADR细胞生长增殖的影响;应用流式细胞技术测定青蒿素联合ADR对MCF-7/ADR细胞P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)表达的影响。结果 10、20、40μmol/L青蒿素实验组的细胞耐药逆转倍数分别为1.53、1.90和3.62倍。青蒿素联合ADR可抑制MCF-7/ADR细胞膜P-gp蛋白的表达,0、10、20、40μmol/L青蒿素作用后的细胞表面P-gp表达阳性率分别为(33.41±4.63)%、(23.07±5.48)%、(21.82±3.87)%和(16.62±1.27)%,组间比较差异均有统计学意义(均P<0.05);各组细胞内总P-gp的表达水平分别为(37.19±5.16)%(、35.30±4.77)%(、37.45±5.19)%和(34.98±3.50)%,各组间差异无统计学意义(P>0.05)。结论青蒿素与ADR同共作用于MCF-7/ADR细胞,使细胞对ADR的敏感性增高,青蒿素具有部分逆转MCF-7/ADR细胞耐药的作用,其逆转作用机制可能是通过影响细胞质和细胞膜之间的P-gp交换,降低细胞膜上P-gp表达水平,提高药物在细胞内的聚集,增强药物对肿瘤细胞的杀伤作用。     

中药逆转肿瘤多药耐药的相关研究

多药耐药是化疗失败的关键因素。西药作为逆转剂,其不良反应往往难以耐受,并且作用靶点相对比较单一,价格昂贵,临床应用受到很大限制。中药逆转剂已经逐渐成为研究的热点,主要从单味中药和中成药提取物抗耐药两方面进行研究。单味中药主要研究川芎、榄香烯、全蝎、防己、冬凌草、苦参、砒霜、薏苡仁、鸦胆子,中成药主要研究生脉注射液、复方三根制剂、浙贝母散剂、拮新康。作者认为,中药逆转剂靶点相对广泛,价格低廉,不良作用较少,同时可以将中医的辨证思维融入整个治疗之中,根据患者证候来选择相应的中药逆转剂,但是由于耐药机制十分复杂,单一针对某一个机制的临床疗效并不是很好,一种化疗药物的耐药产生涉及到多个耐药机制的参与,如多种耐药基因、蛋白表达的改变,而这些研究仍处于基础研究阶段,并没有应用于临床,在体内的作用机制也均是凭一些临床经验进行判断。同时,某些中药的逆转机制还不是很明确。     

冬凌草甲素逆转人胃癌细胞SGC 7901/DDP顺铂耐药的作用及机制研究

目的:探讨天然化合物冬凌草甲素(oridonin,Ori)对顺铂(cisplatin,DDP)耐药的胃癌细胞SGC7901/DDP的耐药逆转作用及其相关机制。方法:MTT法检测Ori对SGC7901/DDP的毒性作用及与DDP的协同作用;台盼蓝计数实验及集落形成实验检测Ori对细胞生长的抑制作用;核染色免疫荧光及免疫印迹法检测Ori诱导细胞凋亡作用及逆转SGC7901/DDP细胞DDP耐药的作用机理。结果:Ori能显著抑制SGC7901/DDP细胞增殖、生长和集落形成,并诱导凋亡。机制研究发现,Ori显著抑制与肿瘤多药耐药相关的蛋白的表达,包括P-糖蛋白(P-glycoprotein)、多药耐药性相关蛋白(multidrug resistance-associated protein 1,MRP1)和细胞周期蛋白Cyclin D1;另外,Ori还可以诱导磷酸酶2A的癌性抑制因子(cancerous inhibitor of protein phosphatase 2A,CIP2A)表达下调,Akt磷酸化下调。结论:Ori能够逆转SGC7901/DDP对DDP耐药并诱导凋亡,其机制可能是通过下调多药耐药蛋白P-gp、MRP1及抑制CIP2A/Akt信号级联。