清热抗感冲剂及其含药血清体外抑制腺病毒(ADV3)作用的实验研究

目的:通过清热抗感冲剂体外抑制腺病毒(ADV3)和呼吸道合胞病毒(RSV)的研究,探讨清热抗感冲剂体外抗病毒作用。方法:通过细胞培养,采用观察细胞病变(CPE)和活细胞染色计数法(MTT),观察清热抗感冲剂及其含药血清在Hep-2细胞中,抑制ADV3和RSV的作用。结果:清热抗感冲剂及其含药血清具有抑制ADV3病毒复制作用,其TC50分别为4760μg/mL、1/4.35稀释度;IC50为817μ9/mL、1/9.14稀释度;治疗指数(TI)分别为:5.8、2.03。清热抗感冲剂及其含药血清具有不同程度抑制RSV病毒复制作用,其TC50分别为4760μg/mL、1/4.35稀释度;IC50为178μg/mL、1/54稀释度;治疗指数(TI)分别为:26.7、12.3。结论:清热抗感冲剂及其含药血清具有抑制ADV3和RSV在Hep-2细胞内的复制作用。     

广藿香醇体外抗呼吸道病毒作用研究

目的:观察广藿香醇体外抗流感病毒、腺病毒和柯萨奇病毒的效果,为抗病毒性感冒新药研发提供依据。方法:建立流感病毒感染MDCK细胞、腺病毒感染Hep-2细胞和柯萨奇病毒感染Hela细胞模型,以细胞病变效应(CPE)、噻唑蓝(MTT)法作为观察和检测指标,了解药物对细胞的毒性、药物体外抗病毒效果及作用机理。根据不同病毒的易感性,实验中分别以利巴韦林和阿昔洛韦作为对照药。结果:广藿香醇对MDCK、Hep-2和Hela细胞的TC50浓度均为125μg/ml,TC0浓度为31.25μg/ml。广藿香醇能抑制H1N1、CVB3和Ad-3所致的细胞病变,对H1N1的IC50为31.25μg/ml,治疗指数(TI)为4.00;对CVB3的IC50为62μg/ml,TI为2.00;对Ad-3的IC50为31.25μg/ml,TI为4.00。广藿香醇对3种病毒的直接作用效果都优于抗病毒吸附和抗病毒生物合成,同一浓度下广藿香醇对Ad-3的抑制率明显高于对H1N1和CVB3的抑制。结论:在体外抗病毒实验中,广藿香醇显示出抗柯萨奇病毒、抗腺病毒和抗甲型流感病毒的作用。     

桑叶乙醇提取物体外对呼吸道合胞病毒的抑制作用

目的:研究桑叶体外对呼吸道合胞病毒(RSV)的作用。方法:采用细胞培养技术,将51.2 g·L-1桑叶液(70%乙醇提取物)倍比稀释后与密度为1.0×104/m L Hep-2细胞作用72 h,观察细胞病变效应(CPE),通过MTT法测定半数中毒浓度(TC50)。不同浓度桑叶液、Hep-2细胞与0.01 m L 100 TCID50RSV作用1,2 h后,测定其半数抑制浓度(IC50)和抗病毒指数(TI),以利巴韦林为阳性对照,评判桑叶抗RSV效果。结果:桑叶质量浓度在0.01~12.8 g·L-1,对RSV的抑制率表现出量效关系,TC506.56 g·L-1,IC501.015 g·L-1,TI 6.46。桑叶体外有抗RSV作用,比利巴韦林毒性小,抗病毒指数大,安全范围大(P<0.05)。结论:桑叶对RSV有明显的抑制作用,既能抑制RSV的吸附和生物合成,又能直接杀死病毒。     

广藿香油体外抗呼吸道病毒效果研究

目的:研究广藿香油体外抗流感病毒、呼吸道合胞病毒、腺病毒、柯萨奇病毒及单纯疱疹病毒的效果,为抗病毒性感冒新药研发提供依据。方法:建立流感病毒感染MDCK细胞、呼吸道合胞病毒和腺病毒感染Hep-2细胞、柯萨奇病毒感染Hela细胞模型和单纯疱疹病毒感染Vero细胞模型,以细胞病变效应(CPE)、噻唑蓝(MTT)法作为观察和检测指标,了解不同浓度药物体外抗病毒效果及药物对细胞的毒性,实验中分别以利巴韦林和阿昔洛韦作为对照药。结果:广藿香油对MDCK、Hep-2、Vero和Hela细胞的TC50浓度均为0.101mg/ml,TC0浓度为0.092mg/ml。广藿香油能明显抑制柯萨奇病毒和腺病毒所致的细胞病变,IC50分别为0.081mg/ml、0.084mg/ml,治疗指数(TI)分别为1.25、1.20;可抑制流感病毒,IC50为0.088mg/ml,TI为1.15;对呼吸道合胞病毒作用很低,IC50为0.092mg/ml,TI为1.10;对单纯疱疹病毒几乎没有抑制作用。结论:体外抗病毒实验广藿香油显示出抗柯萨奇病毒、抗腺病毒、抗甲型流感病毒和抗呼吸道合胞病毒的作用,但不具有抗单纯疱疹病毒的作用。     

清热抗感冲剂及其含药血清体外抑制腺病毒（ADV3）作用的实验研究

目的：通过清热抗感冲剂体外抑制腺病毒（ADV，）和呼吸道合胞病毒（aSV）的研究，探讨清热抗感冲荆体外抗病毒作用。方法：通过细胞培养，采用观察细胞病变（CPE）和活细胞染色计数法（MTT），观察清热抗感冲剂及其含药血清在Hep-2细胞中，抑制ADV，和RSV的作用。结果：清热抗感冲剂及其舍药血清具有抑制ADV3病毒复制作用。其，T℃50如分别为4760μg／mL、1／4．35稀释度；IC50为817μ9／mL、1／9．14稀释度；治疗指数（TI）分别为：5．8、2．03。清热抗感冲剂及其含药血清具有不同程度抑制RSV病毒复制作用，其TC50分别为4760μg／mL、1／4．35稀释度；IC50为178μg／mL、1／54稀释度；治疗指数（TI）分别为：26．7、12．3。结论：清热抗感冲剂及其舍药血清具有抑制ADV，和RSV在Hep-2细胞内的复制作用。     

鸡血藤提取物抗柯萨奇B3病毒活性组分研究

目的 研究鸡血藤提取物不同组分的抗柯萨奇B3病毒活性和性质.方法 通过不同溶剂提取鸡血藤活性成分,细胞病变效应法和四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)测定不同提取组分的体外抗柯萨奇B3病毒活性.结果 通过初步分离纯化得到有效成分具有抗柯萨奇B3病毒活性.用MTT法研究了鸡血藤水提物和有效成分的细胞毒性和抗柯萨奇B3病毒活性,CC50分别为725.88,179.17 μg/ml,IC50分别为87.17,9.14 μg/ ml,TI 分别为8.32,19.60.阳性对照为利巴韦林(Ribavirin)的CC50为4 900 μg/ml,IC50为156.2 μg/ml,其TI为31.4.结论 鸡血藤有效成分在体外能明显抑制柯萨奇B3病毒的致细胞病变作用.     

清热抗感冲剂及其含药血清体外抑制呼吸道合胞病毒作用的实验研究

目的研究清热抗感冲剂及其含药血清体外抑制呼吸道合胞病毒(RSV)的作用。方法通过细胞培养,采用观察细胞病变(CPE)和活细胞染色计数法(MTT),观察清热抗感冲剂及其含药血清在Hep-2细胞中抑制RSV的作用。结果清热抗感冲剂及其含药血清具有不同程度抑制RSV病毒复制作用,其半数中毒浓度(TC50)分别为4760μg/mL、1/4.35稀释度;半数有效浓度(IC50)为178μg/mL、1/54稀释度;治疗指数分别为26.7、12.3。结论清热抗感冲剂及其含药血清具有抑制RSV在Hep-2细胞内复制的作用。     

抗病毒颗粒体外抑制呼吸道合胞病毒的实验研究

目的探讨抗病毒颗粒对呼吸道合胞病毒（RSV）的体外抑制作用。方法采用细胞培养技术,以病毒唑为阳性对照药,观察抗病毒颗粒在人喉癌传代细胞（Hep-2）中对RSV的抑制作用。结果在Hep-2细胞中,抗病毒颗粒CC50为9.05,EC50为0.62,TI为2.085,且对RSV抑制作用存在明显的量-效关系。结论抗病毒颗粒在Hep-2细胞中对RSV有明显抑制作用。     

大青叶抗单纯疱疹病毒Ⅰ型的活性研究

目的:评价大青叶不同化学部位抗单纯疱疹病毒Ⅰ型的活性。方法:利用Hep-2细胞体外培养系统,通过噻唑蓝(MTT)比色法和观察细胞病变效应(CPE),以治疗指数(TI)为评价指标,评价大青叶不同化学部位体外抑制单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSV-Ⅰ)对Hep-2细胞的感染作用;并通过改变加药方式,初步探讨抗病毒机制。选择体外抗病毒活性较强的部位,观察其对HSV-Ⅰ脑炎小鼠的保护作用,以综合评价其抗病毒活性。结果:大青叶Ⅱ~Ⅴ部位对HSV-Ⅰ有直接灭活作用,各部位均不能阻止HSV-Ⅰ侵入细胞,除Ⅲ,Ⅴ部位外,其余部位均有抑制HSV-Ⅰ生物合成作用;Ⅳ部位能显著降低HSV-Ⅰ脑炎小鼠死亡率。结论:大青叶Ⅳ部位具有较强的体内外抗HSV-Ⅰ病毒活性。     

大黄茶抗柯萨奇病毒B3(CVB3)的实验研究

目的:观察大黄茶抗CVB3的作用.方法:通过活细胞计数评价了大黄茶对Hep-2细胞的细胞毒作用;通过观察病毒感染后的细胞病变效应计算病毒抑制率,并且用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测药物作用后细胞冻融液中的病毒核酸(CVB3-RNA),评价了大黄茶在细胞培养中的抗CVB3作用.结果大黄茶对Hep-2细胞的半数细胞毒性浓度在0.4mg/ml以上,对CVB3的半数抑制浓度在90μg/ml以内.结论:大黄茶安全性较高并能有效的抑制柯萨奇病毒B3在Hep-2细胞中的增殖.     

莪术油软胶囊抗病毒作用研究

目的:研究莪术油软胶囊的抗病毒作用.方法:用MDCK和Hela细胞分别测定流感病毒A3及腺病毒7型毒力(TCID50)以及药物对各细胞的毒性;采用细胞病变(CPE)抑制法来测定药物对病毒的抑制作用.结果:莪术油对流行性感冒病毒A3及腺病毒7型半数有效浓度(IC50)分别为0.0008ml/ml和0.0004ml/ml;治疗指数(TI)分别为15和30.莪术油软胶囊160、80和40mg/kg灌胃,对流感病毒鼠肺适应株(FM1株)和合胞病毒(RSV)引起的小鼠肺炎,能明显降低肺指数,降低死亡率.结论:莪术油对流行性感冒病毒A3及腺病毒7型有一定的抑制作用.     

大黄茶抗柯萨奇病毒B3(CVB3)的实验研究

目的观察大黄茶抗CVB3的作用.方法通过活细胞计数评价了大黄茶对Hep-2细胞的细胞毒作用;通过观察病毒感染后的细胞病变效应计算病毒抑制率,并且用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测药物作用后细胞冻融液中的病毒核酸(CVB3-RNA),评价了大黄茶在细胞培养中的抗CVB3作用.结果大黄茶对Hep-2细胞的半数细胞毒性浓度在0.4mg/ml以上,对CVB3的半数抑制浓度在90μg/ml以内.结论大黄茶安全性较高并能有效的抑制柯萨奇病毒B3在Hep-2细胞中的增殖.     

金樱子不同提取方法提取物体外抑制病毒活性及机制研究

目的:考察金樱子不同提取物对呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)、Ⅰ型单纯性疱疹病毒(herpes simplex virus type 1,HSV-1)的预防、直接杀灭和穿入人喉癌上皮细胞(human larynx carcinoma epithelial cell,Hep-2)感染的阻断作用。方法:运用体外抗病毒实验CPE法结合CCK-8染色法,以EC_(50)、TC_(50)及TI值作为指标,探讨金樱子甲醇、丙醇提取液对RSV、HSV-1及其穿入Hep-2感染的体外抑制活性及作用机制。结果:金樱子甲醇冷浸提取物对RSV和HSV-1的TI值分别为15.958、7.814;金樱子甲醇超声提取物对RSV和HSV-1的TI值分别为10.455、15.221;丙酮冷浸提取物对RSV的TI值为7.191;丙酮超声提取物对RSV的TI值为6.648。金樱子甲醇冷浸提取物在阻断HSV-1穿入后感染中TI值为5.650;金樱子甲醇超声提取物在阻断HSV-1穿入后感染中TI值为3.185。结论:金樱子提取物在体外能够抑制RSV、HSV-1对Hep-2细胞的感染,且金樱子的甲醇提取物作用机制复杂,有待进一步探究。     

柴胡注射液抑制呼吸道合胞病毒的研究

目的：研究柴胡注射液在细胞培养中抑制呼吸道合胞病毒（RSV）的作用。方法：用细胞培养法,采取Vero细胞先感染病毒2h后给药法,在显微镜下观察细胞病变（CPE）。结果：柴胡注射液组与病毒对照组相比,病变程度有显著差异,柴胡注射液抑制RSV的最大无毒浓度（TD0）,半数有效浓度（IC50）,最小有效浓度（MTC）和治疗指数（TI）分别为1000μg／ml,500μg／ml,250μg／ml和4。结论：柴胡注射液具有明显抑制RSV作用。     

苦丁茶水提物体外抗柯萨奇病毒B3活性的实验研究

目的:探讨苦丁茶水提物体外抗柯萨奇病毒B3(CVB3)的作用及机制的研究.方法:采用组织细胞培养法,通过观察细胞病变(CPE)以及四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞活性、测定病毒抑制率,以确定苦丁茶水提物体外抗病毒活性,并采用预防、治疗和同时用药干预的方法初步探讨其抗病毒作用机制.结果:苦丁茶水提物有明显的体外抗CVB3活性,对HeLa细胞的半数中毒浓度(TC50)为45700.3μg/ml,半数抑制浓度(IC50)为119.18μg/ml,治疗指数(TI)为383.46.结论:苦丁茶水提物在体外具有明显的抑制CVB3作用.     

穿心莲水提取物体外抗柯萨奇病毒B3作用的研究

目的：研究穿心莲水提取物对Hela细胞的毒性与抗柯萨奇病毒B3（CVB3）的作用及其机理。方法：通过观察药物毒性和病毒引起的细胞病变效应,用MTT法检测细胞活性,判断药物毒性及药物抗病毒效应。结果：穿心莲水提取物的半数毒性浓度（TC50）为23093．4μg／mL,半数抑制浓度（IC50）为23．2μg／mL,治疗指数（TI）为995．4。结论：穿心莲水提取物通过保护细胞,抑制病毒的增殖,直接杀灭病毒等途径发挥抗CVB3的作用。     

甘草抗病毒有效部位(GC3-1-4)体外抑制呼吸道合胞病毒的研究

目的：探讨甘草抗病毒有效部位（GC3-1-4）体外抑制呼吸道合胞病毒（RSV）的作用。方法：采用煎煮法、乙醇沉淀法和柱层析法分离提取GC3-1-4。以病毒唑为阳性对照药物，采用细胞培养技术观察GC3-1-4抑制RSV作用。结果：GC3-1-4的TC50为0．45mg／ml，抑制RSV的EC50为41．32μg／ml，TI为10．89。GC3-1-4对RSV的抑制作用存在量效关系；感染RSV后0h、2h、4h、6h、8h加药，GC3-1-4在RSV的活性有抑制作用。化学实验证实GC3-1-4不含甘草酸或多糖类物质。结论：GC3-1-4在Hela细胞中对RSV有明显的抑制作用。     

柳兰叶凤毛菊等19种藏药提取物体外抗呼吸道合胞病毒活性的实验研究

目的 对19种藏药提取物进行体外抗呼吸道合胞病毒(respiratory syncytial virus,RSV)活性的筛选.方法 采用细胞病变效应法(cytopathogenic effect,CPE)观察药物对Hep-2细胞的最大无毒浓度(TC0)和药物抑制RSV的致病变作用.结果 从19种藏药中筛选出柳兰叶凤毛菊Saussurea epilobioides Maxim提取物具有显著的抗RSV活性,其TC0大于500μg/ml,且在预防给药,直接灭活,给药治疗3种加药方式下均具有抗RSV活性,其中预防给药对RSV具有更好的抑制作用.结论 通过对19种藏药提取物的筛选,发现柳兰叶凤毛菊提取物具有抗RSV的活性.     

止嗽膏液体外抗病毒的实验研究

目的 :研究止嗽膏液的抗病毒作用。方法 :采用细胞培养技术 ,观察止嗽膏液在人咽癌(Hep2 )细胞中对呼吸道合胞病毒、腺病毒的抑制作用。结果 :止嗽膏液半数中毒浓度 (TC50 )为2 4 1 0 μg/ml;抗呼吸道合胞病毒的半数有效浓度 (EC50 )为 >80 0 μg/ml;抗腺病毒的半数有浓度(EC50 )为 72 3 4 μg/ml;且根据 5 0 %的抑制浓度 ,其对病毒的抑制作用存在明显的量效反应关系。结论 :止嗽膏液在Hep2细胞中对呼吸道合胞病毒、腺病毒有明显抑制作用     

柴银感冒颗粒抗病毒作用的研究

目的:观察柴银感冒颗粒(柴胡、金银花、大青叶、板蓝根、陈皮、甘草)(无糖型)的体内、外抗病毒作用。方法:以甲型、乙型流感病毒、副流感病毒1型、柯萨奇B族病毒5型、呼吸道合胞病毒等分别接种MDCK细胞,观察记录药物对病毒致细胞病变(CPE)的影响,计算半数抑制浓度(IC50)和选择指数(SI);采用流感病毒性肺炎小鼠模型,观察药物的保护作用,计算生命延长率、死亡保护率等,并计数肺内病毒增殖量。结果:柴银感冒颗粒对甲型、乙型流感病毒、HVJ-1、CoxB5、RSV均有直接抑制作用,其IC50分别为457.0、676.1、347.2、537.0、562.4μg/mL,SI为9.8、6.6、12.8、8.3、7.9;对病毒感染小鼠有明显的保护作用,可延长生存期,降低死亡率,并抑制肺内流感病毒的增殖。结论:柴银感冒颗粒具有直接抗病毒作用。