人脑胶质瘤中p16基因的表达

目的 探讨胶质瘤中p16基因的缺失及免疫组化情况.方法 利用、PCR技术和免疫组化检测43例胶质瘤p16基因的缺失.结果 PCR组:12例脑星形细胞瘤p16E1和p16E2均缺失,占28名(12/43),2例仅缺失p16E1,占5%(2/43);p16E基因缺失多发生在Ⅲ-Ⅳ级脑星形细胞瘤中(Ⅲ级6/16,Ⅳ级8/14),Ⅰ、Ⅱ级与Ⅲ、Ⅳ级比较有显著性差异(P<0.05).免疫组化组:p16表达缺失率为60.5%.P16表达缺失在Ⅲ级(43.6%)、Ⅳ级(85.7%)脑胶质瘤中显著高于Ⅰ-Ⅱ级(22.2%)(P<0.05).结论 p16基因失活可能与脑星形细胞瘤的分化程度有关,p16基因缺失是p16基因失活的主要机制.     

PTEN、E-cd和MMP-9在人脑胶质瘤的表达和意义

目的 通过分析PTEN、E-cd和MMP-9在人脑胶质瘤中的表达,为胶质瘤的靶分子治疗提供依据.方法 采用免疫组织化学方法检测50例人脑胶质瘤和11例正常脑组织中的PTEN、E-cd蛋白和MMP-9的表达.分析人脑胶质瘤组织学分级之间的PTEN、E-cd蛋白和MMP-9的表达关系及胶质瘤与正常脑组织之阃的PTEN、E-cd蛋白和MMP-9的表达关系,并探讨其临床意义.结果 PTEN、E-cd在正常脑组织中的阳性表达为100%,PTEN在Ⅰ～Ⅱ级和Ⅲ～Ⅳ级胶质瘤中阳性表达率分别为75%和38%,组织学分级之间有显著差异(P<0.05),与对照组之间差异有统计学意义(P<0.05);E-cd在Ⅰ～ⅡI级和Ⅲ～Ⅳ级胶质瘤中阳性表达率分别为42%和23%,组织学分级之间差异无统计学意义(P>0.05),与对照组之间差异有统计学意义(P<0.05);MMP-9在对照组阳性表达率为14%,在脑胶质瘤Ⅰ～Ⅱ级为33%,Ⅲ～Ⅳ级为62%,两者比较差异有统计学意义(P<0.05);对照组与神经胶质瘤组相比,MMP-9表达差异有统计学意义(P<0.05).结论 PTEN、E-cd、MMP-9在神经胶质瘤的生物学行为中起重要作用,且可能与其侵袭性有关.     

脑胶质瘤中p16及p53基因表达及相关性研究

目的 探讨脑胶质瘤中p16及p53基因的表达及其相关性分析.方法 采用免疫组化方法检测43例已确诊人脑胶质瘤中P16及p53的表达.结果 p16表达缺失率为60.5%,p53阳性率为48.8%.p16表达缺失在川级(43.6%)、Ⅳ级(85.7%)脑胶质瘤中显著高于Ⅰ-Ⅱ级(22.2%)(P<0.05).p53表达阳性在川级(62.5%)、Ⅳ级(64.3%)脑胶质瘤中显著高于Ⅰ-Ⅱ级(15.4%)(P<0.05).p16阳性且p53阴性(即正常)者在Ⅱ级中为18.2%(2/11),在Ⅲ、Ⅳ级病例中均为0;p16缺失表达伴P53突变(均异常)者在Ⅱ级肿瘤中仅为16.7%(1/6).而在Ⅲ、Ⅳ级病例中两者复合改变者为40.0%(8/20).两种基因的表达与患者的年龄、性别、肿瘤的大小及发病部位无相关性.结论 P16、P53基因异常对脑胶质瘤的形成及其发展有重要作用.p16、p53在脑胶质瘤中的异常表达与肿瘤的分化程度相关.     

p19蛋白在神经胶质瘤中的表达

目的:探讨p19基因在神经胶质瘤发生、发展中的可能作用.方法:应用免疫组化S-P法,对66例神经胶质瘤中的p19蛋白进行检测,与23例正常脑组织进行对照,分析其在神经胶质瘤中的表达情况,应用卡方检验进行统计学分析.结果:p19蛋白在66例神经胶质瘤中总阳性率为28.79%,在正常脑组织中表达阳性率为60.87%,二者相比差异有统计学意义.p19蛋白表达阳性率在Ⅰ级神经胶质瘤中为57.89%,Ⅱ级中为26.92%,Ⅲ～Ⅳ级中为4.76%.Ⅰ级与Ⅱ级阳性率比较,Ⅰ级与Ⅲ～Ⅳ级阳性率比较,Ⅱ级与Ⅲ～Ⅳ级阳性率比较,差异均有统计学意义.结论:p19基因可能参与了神经胶质瘤的发生发展过程,其检测有可能作为判定神经胶质瘤恶性程度的一个辅助指标.     

人脑胶质瘤组织CD105的表达及意义

目的探讨人脑胶质瘤组织CD105 mRNA和蛋白的表达及意义。方法应用组织芯片结合免疫组化技术检测152例脑胶质瘤(WHOⅠ级4例,Ⅱ级32例,Ⅲ级68例,Ⅳ级48例)与20例正常脑组织中CD105蛋白的表达;应用实时荧光定量PCR技术研究22例胶质瘤(Ⅱ级7例,Ⅲ～Ⅳ级15例)与4例正常脑组织中的CD105 mRNA表达。所得结果采用秩和检验、t′检验。结果脑胶质瘤组CD105mRNA表达高于正常组(P=0.0322),Ⅲ～Ⅳ级组高于Ⅱ级组(P<0.05)。CD105标记的微血管密度(MVD)在Ⅲ～Ⅳ级组高于Ⅰ～Ⅱ级组(P<0.05),Ⅰ～Ⅱ级组高于正常组(P<0.05)。结论人脑胶质瘤组织CD105 mRNA在转录水平已上调,CD105的表达与胶质瘤病理分级有关。     

缝隙连接蛋白43及其磷酸化蛋白在人脑胶质瘤中的表达及意义

目的：探讨缝隙连接蛋白43（ Cx43）及其磷酸化蛋白（ p－Cx43）在人脑胶质瘤中的表达及意义。方法收集手术切除并经病理证实的脑胶质瘤标本80例和正常脑组织标本20例,其中脑胶质瘤WHO分级Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级、Ⅳ级各20例。应用免疫组化染色及Western blot技术检测标本中Cx43及p－Cx43的表达。结果Cx43、p－Cx43在不同级别胶质瘤中的表达差异有统计学意义（P＜0.05）,随着胶质瘤级别的升高,Cx43表达逐渐减少,而p－Cx43表达逐渐上升,且与正常脑组织相比,差异有统计学意义（ P＜0.05）,Ⅰ、Ⅱ级与Ⅲ、Ⅳ级相比,差异有统计学意义（ P＜0.01）。结论 Cx43、p－Cx43可能与脑胶质瘤的恶性程度密切相关,两者在脑胶质瘤的发生和发展过程中可能起到一定的作用。     

人脑胶质瘤组织中PTEN与VEGF的表达

目的:检测人胶质瘤组织中PTEN、VEGF的表达,分析其与胶质瘤血管形成和肿瘤分化的关系.方法:应用免疫组织化学SP法检测52例胶质瘤(Ⅰ级15例,Ⅱ级19例,Ⅲ级11例,Ⅳ级7例)组织中PTEN和VEGF蛋白阳性表达情况.结果:Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级胶质瘤组织中PTEN蛋白阳性表达率分别为13/15、14/19、4/11和2/7,Ⅰ、Ⅱ级与Ⅲ、Ⅳ级组织比较,差异有统计学意义(x2=10.78,P=0.009);VEGF蛋白阳性表达率分别为3/15、5/19、6/11和6/7,Ⅰ、Ⅱ级与Ⅲ、Ⅳ级组织比较,差异有统计学意义(x2=9.26,P=0.002).胶质瘤组织中PTEN与VEGF表达呈负相关(rs=-0.385,P=0.005).结论:PTEN低表达和VEGF高表达与胶质瘤分化程度有关.     

脑胶质瘤组织中Survivin和尿激酶型纤溶酶原激活物蛋白的表达

目的:探讨脑胶质瘤组织中Survivin蛋白和尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)的表达及二者的关系.方法:应用免疫组化SP法检测68例脑胶质瘤标本和10例正常脑组织中Survivin和uPA的表达及分布情况.结果:正常脑组织中均未见Survivin和uPA阳性表达;Ⅰ-Ⅱ级与Ⅲ、Ⅳ级脑胶质瘤组织中Survivin蛋白的阳性表达率分别为24.6%、57.1%和84.3%,差异有统计学意义(x2=11.5,P<0.05);uPA蛋白的阳性表达率分别为58.6%,90.5%和94.4%;差异有统计学意义(X2=10.9,P<0.05);在胶质瘤组织中Survivin和uPA的表达成正相关(r=0.519,P<0.05).结论:脑胶质瘤组织中uPA和Survivin蛋白呈高表达,2者与脑胶质瘤恶性程度密切相关.     

黏着斑激酶、磷酸酶和张力蛋白同源缺失基因在脑胶质瘤中的表达及相关性研究

目的：明确黏着斑激酶（FAK）和第十号染色体上磷酸酶和张力蛋白同源缺失基因（PTEN）在脑胶质瘤组织中的表达变化,以及与肿瘤的发生、侵袭性生长和临床病理学特征的关系.方法：应用EliVision免疫组织化学方法检测FAK、PTEN在6例正常脑组织及54例各级脑胶质瘤中的表达情况.结果：FAK在脑胶质瘤中的表达总阳性率为66.67%,其中Ⅰ～Ⅱ级为35.00%,Ⅲ级为81.25%,Ⅳ级为88.89%,Ⅰ～Ⅱ级阳性率均低于Ⅲ级和Ⅳ级（P〈0.01）,而Ⅲ级和Ⅳ级差异无统计学意义（P〉0.05）.PTEN在脑胶质瘤中总阳性率46.30%,其中Ⅰ～Ⅱ级为75.00%,Ⅲ级为 31.25%,Ⅳ级为27.78%.Ⅰ～Ⅱ级阳性率均高于Ⅲ级和Ⅳ级（P〈0.01）,而Ⅲ级和Ⅳ级差异无统计学意义（P〉0.05）.PTEN与FAK在脑胶质瘤中的表达呈负相关关系（P〈0.01）.结论：FAK的阳性率随着脑胶质瘤病理级别的增加而增加,而PTEN的阳性率随着脑胶质瘤病理级别的增加而降低.同时分析二者在肿瘤细胞中的表达,有助于判断脑胶质瘤的病理学分级、预后,以及进一步指导临床治疗.     

脑胶质瘤中脂肪酸酰胺水解酶的表达及意义

目的研究内源性大麻素代谢酶脂肪酸酰胺水解酶(FAAH)在脑胶质瘤组织中的表达情况及其与胶质瘤病理级别的关系,探讨其临床意义.方法选取首次手术切除并经病理检查证实的脑胶质瘤标本23例,其中WHOⅠ级1例,Ⅱ级7例,Ⅲ级5例,Ⅲ~Ⅳ级2例,Ⅳ级8例.另取8例因颅脑外伤行内减压术切除的正常脑组织作为对照.应用实时荧光定量PCR和高效液相色谱-质谱联用技术分别检测各组织标本中FAAH mRNA和FAAH活性的表达.结果 FAAH mRNA、FAAH活性在低级别(WHOⅠ~Ⅱ级)和高级别(WHOⅢ~Ⅳ级)脑胶质瘤组织中的表达水平较正常脑组织明显降低,差异有统计学意义(均P<0.01),且随着肿瘤病理级别的增高而降低,与肿瘤的病理分级呈负相关(均P<0.01).FAAH mRNA与FAAH活性的表达水平呈正相关(P<0.01).结论 FAAH可能参与了脑胶质瘤的发生、发展过程,检测FAAH的表达可评价脑胶质瘤的生物学行为,为脑胶质瘤的临床治疗和预后判断提供参考.     

Expression and significance of P53 protein and MDM-2 protein in human gliomas

Background  P53 is one of the most studied tumor suppressors in the cancer research, and over 50% of human tumors carry P53 mutations. MDM-2 is amplified and/or overexpressed in a variety of human tumors of diverse tissue origin. The aim of this study was to examine the expression of P53 protein and MDM-2 protein in gliomas, and to investigate the relationship between the expression of the two proteins and the histopathological grades of glioma. The relationship between MDM-2 protein expression and P53 protein expression was also analyzed.

Methods  The expression of P53 protein and MDM-2 protein was immunohistochemically detected using monoclonal antibodies in 242 paraffin embedded tissues, including 30 normal brain tissues from patients with craniocerebral injury and 212 tissues from patients with primary glioma (grade I–II group: 5 cases of grade I, 119 cases of grade II; and grade III–IV group: 53 cases of grade III, and 35 cases of grade IV).

Results  The P53 positive rate was significantly higher in the glioma groups than in the control group (P <0.0001). The P53 positive rate was significantly higher in glioma tissues of grade III–IV than in glioma tissues of grade I–II group (P=0.001). The MDM-2 positive rate was significantly higher in glioma groups than in the control group (P <0.0001). There was no significant difference in the MDM-2 positive rate between the two glioma groups (P=0.936). The expression of P53 protein was not related to expression of MDM-2 protein (P=0.069)

Conclusions  Overexpression of P53 protein might be related to the occurrence and progression of glioma. Overexpression of MDM-2 protein may play an important role in glioma tumorigenesis, but may not be involved in glioma progression. The overexpression of MDM-2 protein was an early event in malignant transformation of glioma. MDM-2 may be a key player in glioma in its own right.

     

P21和survivin蛋白在脑胶质瘤组织中的表达及其临床意义

目的:探讨不同级别人脑胶质瘤组织和正常脑组织中P21和survivin蛋白的表达情况,分析其临床意义。方法:按2007年WHO制定的病理分级标准,将41份脑胶质瘤组织标本分为Ⅰ级9份、Ⅱ级14份、Ⅲ级10份和Ⅳ级8份,另外12份正常脑组织作为对照组,采用免疫组织化学法检测脑胶质瘤和正常脑组织中P21和survivin蛋白的表达情况,并分析两者表达的关系。结果:在正常脑组织和脑胶质瘤组织中P21及survivin蛋白阳性表达率分别为91.7%和53.7%及0%和51.2%,不同组织中P21和survivin蛋白的阳性表达率比较差异均有统计学意义(P<0.05)。Ⅰ-Ⅱ和Ⅲ-Ⅳ级脑胶质瘤组织中P21蛋白阳性表达率分别为69.6％及33.3%,而survivin蛋白阳性表达率分别为34.8%和72.2%,Ⅲ-Ⅳ级脑胶质瘤组织中P21蛋白阳性表达率明显低于Ⅰ-Ⅱ级,而survivin蛋白的阳性表达率明显高于Ⅰ-Ⅱ级(P<0.05)。结论:P21蛋白的表达缺失和survivin蛋白的过度表达与脑胶质瘤恶性程度有关联,P21蛋白有抑制脑胶质瘤发生发展的作用,而survivin蛋白在脑胶质瘤的恶变过程中起促进作用。     

Bag-1在胶质瘤中的表达及临床意义

目的：探讨Bcl-2结合抗凋亡基因-1（Bag-1）在胶质瘤组织中的表达及其临床意义。方法：采用免疫组化的方法检测手术切除的56例不同级别胶质瘤组织和10例正常脑组织中Bag-1蛋白的表达情况。结果：Bag-1在胶质瘤组织中高表达,在胶质瘤组织中阳性率为69．64％,其中胶质瘤低级别组（Ⅰ～Ⅱ级）40．91％,高级别组（Ⅲ～Ⅳ级）88．24％,其差异具有统计学意义（P〈0．05）;生存时间〉2年组与生存时间≤2年组间差异有统计学意义（P〈0．05）。结论：Bag-1表达可能参与了胶质瘤的发生、发展过程,可作为胶质瘤恶性程度和预后分析的指标。     

Galectin-3及整合素ανβ3 mRNA在脑胶质瘤细胞中的表达及其意义

目的：探讨半乳糖凝集素-3（Galectin-3）及整合素ανβ3 mRNA在胶质瘤细胞中的表达及二者在胶质瘤的发生及恶性进展中的作用。方法：采用原位杂交法检测5例正常脑组织及40例不同级别胶质瘤中Galectin-3 mRNA、整合素ανβ3 mRNA的表达情况,并分析二者之间的关系。结果：正常脑组织中Galectin-3 mRNA、整合素ανβ3 mRNA的表达均为阴性。Galectin-3 mRNA主要表达于脑胶质瘤细胞的胞浆中,在23例Ⅰ-Ⅱ级胶质瘤标本中阳性2例、弱阳性4例、阴性17例,阳性表达率为29.09%(6/23),阳性指数(LI)值为(4.80±3.22)%;在17例Ⅲ-Ⅳ级胶质瘤标本中强阳性4例、阳性6例、弱阳性1例、阴性6例,阳性表达率为64.71%(11/17),LI值为(27.30±22.72)%,Ⅰ-Ⅱ级胶质瘤Galectin-3 mRNA阳性表达率低于Ⅲ-Ⅳ级（P<0.05）。整合素ανβ3 mRNA主要表达于脑胶质瘤细胞的胞浆中,在23例Ⅰ-Ⅱ级胶质瘤标本中阳性3例、弱阳性4例、阴性16例,阳性表达率为34.43%(7/23),LI值为(5.35±3.79)%;在17例Ⅲ-Ⅳ级胶质瘤标本中强阳性4例、阳性6例、弱阳性3例、阴性4例,阳性表达率为76.47%(13/17),LI值为(29.24±21.10)%,Ⅰ-Ⅱ级胶质瘤整合素ανβ3 mRNA 阳性表达率低于Ⅲ-Ⅳ级（P<0.05）。直线相关分析结果显示,Galectin-3 mRNA与整合素ανβ3 mRNA的阳性细胞表达率呈正相关（r=0.718,P<0.05）。结论：Galectin-3 mRNA、整合素ανβ3 mRNA的表达在Ⅰ-Ⅱ级胶质瘤组明显低于Ⅲ-Ⅳ级胶质瘤组,提示Galectin-3及整合素ανβ3 mRNA检测可作为从分子水平判定人脑胶质瘤恶性生物学行为的指标。     

FAK在脑胶质瘤55例中的表达及其临床意义

目的:探讨脑胶质瘤细胞中局部黏着斑激酶(FAK)蛋白的表达水平与组织学分级之间的关系。方法:将55例脑胶质瘤标本按照WHO胶质瘤分类标准(2000年)分为4组,其中Ⅰ级13例,Ⅱ级16例,Ⅲ级17例,Ⅳ级9例,同时取11例正常脑组织标本(急性颅脑外伤患者手术内减压切除的脑组织标本)为对照组,分别行HE染色和免疫组织化学染色,观察FAK蛋白表达情况,并比较各组间的差异。结果: FAK蛋白在正常脑组织中均不表达;低级别(Ⅰ+Ⅱ)组的阳性表达率低于高级别(Ⅲ+Ⅳ)组(P<0.05);FAK表达强度与胶质瘤病理级别呈正相关(r=0.424,P<0.05)。结论:测定FAK蛋白在人脑胶质瘤中的表达水平将有助于判断人脑胶质瘤细胞的恶性程度。     

CD147及MMP-2在胶质细胞瘤中的表达及意义

目的研究CD147、MMP-2在胶质细胞瘤中的蛋白质表达及其相关性,探讨CD147、MMP-2在胶质细胞瘤侵袭行为中的作用,从而进一步阐明胶质细胞瘤侵袭性的分子机制,为其诊治提供理论依据。方法应用免疫组织化学S-P法检测60例不同病理分级人脑胶质细胞瘤和10例正常脑组织标本中CD147、MMP-2的蛋白表达,测定其阳性细胞数,分析该三项指标与胶质细胞瘤侵袭性的关系。结果 （1）CD147在正常脑组织中无表达（0/10）,在胶质细胞瘤组织中阳性表达率为56.7%（34/60）,两者间表达差异具有显著性（P〈0.01）;CD147在不同病理分级胶质瘤中阳性表达率分别为Ⅰ级35.7%,Ⅱ级43.8%,Ⅲ级66.7%,Ⅳ级80%,与胶质瘤的恶性程度呈正相关（rs=0.5835,P〈0.05）。（2）MMP-2在正常脑组织中无表达（0/10）,在胶质细胞瘤组织中阳性表达率为63.3%（38/60）,两者间表达差异具有显著性（P〈0.01）;MMP-2在不同病理分级胶质瘤中阳性表达率分别为Ⅰ级35.7%,Ⅱ级50%,Ⅲ级80%,Ⅳ级86.7%,与胶质瘤的恶性程度呈正相关（rs=0.6454,P〈0.05）。（3）CD147、MMP-2在胶质细胞瘤中的表达具有相关性（P〈0.01）。结论 CD147、MMP-2与胶质细胞瘤的恶性程度呈正相关,在胶质细胞瘤的侵袭性生长中起着协同作用,共同参与胶质瘤的侵袭性生长。CD147、MMP-2可以作为临床判断胶质细胞瘤恶性程度、侵袭性及预后的有效参考指标。     

脑胶质瘤中G6PD蛋白的表达及与肿瘤分级的相关性

目的观察胶质瘤中G6PD蛋白的表达情况，探讨G6PD在胶质瘤中的表达特点与胶质瘤分级的关系及意义。方法用免疫组化方法检测41例胶质瘤和8例正常脑组织标本中G6PD蛋白的表达并将胶质瘤分级，比较各级之间阳性表达率的差异。结果41例胶质瘤标本中，G6PD蛋白阳性表达率为56．1％（23／41），而8例正常脑组织中，G6PD蛋白阳性表达率为0％，两者相比有显著性差异（P〈0．05）。G6PD蛋白在胶质瘤各病理分级中，阳性表达率分别为Ⅰ＋Ⅱ级42．3％（11／26），Ⅲ＋Ⅳ级80．0％（12／15），两者之间有显著性差异（P〈0．05）。结论G6PD蛋白在胶质瘤中的表达上调，且与胶质瘤病理分级相关。     

垂体瘤转化基因和血管内皮生长因子在胶质瘤中的表达及其相关性研究

目的:探讨胶质瘤中垂体瘤转化基因(PTTG)和血管内皮生长因子(VEGF)在胶质瘤中的表达以及二者之间的相关性。方法:将40例胶质瘤患者手术标本按病理级别分为级8例,级10例,级13例,级9例,逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测PTTG及VEGFmRNA的表达,免疫组化检测PTTG、VEGF蛋白的表达。结果:PTTG蛋白表达在～级的阳性率分别为37.5%,50.0%,76.9%,100.0%,其表达随着肿瘤级别的增高而增加(χ2=9.602,P<0.05);VEGF蛋白～级的阳性率分别为25.0%,40.0%,76.9%,88.9%,二者的表达均随着肿瘤级别的增高而增加(P<0.05)。PTTGmRNA的表达在～级分别为0.907±0.065、1.109±0.083、1.312±0.089、1.499±0.215,组间有极显著性差异(P<0.01);VEGFmRNA的表达在～级分别为1.024±0.118、1.139±0.057、1.415±0.094、1.693±0.128,组间有显著性差异(P<0.01)。PTTG、VEGF蛋白表达呈显著正相关(P<0.01)。结论:PTTG、VEGF的异常表达在胶质瘤中起协同作用,二者共同促进胶质瘤的发生发展。     

星形细胞瘤中Livin的表达及其与细胞增殖、凋亡的关系

目的探讨一种新的凋亡抑止蛋白Livin在人脑星形细胞瘤中的表达及其对瘤细胞增殖和凋亡的影响。方法分别采用免疫组织化学和原位细胞凋亡检测法检测人脑胶质瘤细胞中Livin、PCNA蛋白的表达和凋亡细胞,结合胶质瘤病理分级分析其相关关系。结果随着人脑胶质瘤WH0病理分级的增高,Livin、PCNA的表达强度明显升高（P〈0.05）,细胞凋亡率也明显升高（P〈0.05）,其中高度恶性组（WHO分级Ⅲ、Ⅳ级）均显著高于低度恶性组（WHO分级I、Ⅱ级）（P〈0.05）;随着Livin表达强度的增高,PCNA表达强度及细胞凋亡率均增高,但PCNA的表达比细胞的凋亡有更明显的增高趋势。结论人脑星形细胞瘤中Livin、PCNA的表达强度和细胞凋亡率异常升高;星形细胞瘤的发生和演变可能与Livin、PCNA及细胞凋亡的综合作用密切相关。     

胶质瘤组织和细胞系中 Nanog 基因启动子区甲基化检测

目的：检测胶质瘤组织和细胞系中 Nanog 基因启动子区甲基化状态与 Nanog 基因的表达,并探讨其在胶质瘤发展中的作用。方法采用甲基化特异性 PCR(MSP)法分别检测正常脑组织、胶质瘤组织、胶质瘤癌旁组织、胶质瘤细胞系 U87和 U251中 Nanog 基因启动子区甲基化状态,实时定量 PCR(RT-PCR)法检测相应组织和细胞系中 Nanog 表达情况。结果 MSP 法检测胶质瘤组织 Nanog 基因启动子区呈非甲基化状态,且非甲基化检出率(58．82%)高于癌旁组织(13．63%),差异有统计学意义(χ2=14．852,P <0．01)。对MSP 法检测结果行灰度值分析,高级别胶质瘤中 Nanog 基因启动子区非甲基化程度高于低级别组。 U87和 U251细胞系中 Nanog 基因启动子区呈非甲基化状态。 RT-PCR 结果显示高级别胶质瘤中 Nanog mRNA 相对表达量高于低级别组, U87和 U251细胞系中 Nanog mRNA 的转录明显增多。结论胶质瘤中 Nanog 基因启动子区呈非甲基化状态,且可能促进 Nanog 基因的转录,影响胶质瘤的发生与发展。