多囊卵巢综合征患者子宫内膜细胞色素P450的表达

目的：探讨细胞色素Ｐ４５０芳香化酶（ａｒｏｍａｔａｓｅ ｃｙｔｏｃｈｒｏｍｅ Ｐ４５０）ｍＲＮＡ及蛋白在多囊卵巢综合征（ｐｏｌｙｃｙｓｔｉｃ ｏｖａｒｙ ｓｙｎｄｒｏｍｅ，ＰＣＯＳ）患子宫内膜上的表达及意义。方法：分别用原位杂交和免疫组织化学及Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔｔｉｎｇ方法检测３１例ＰＣＯＳ患和３０例因输卵管不通而不孕或男性不孕的对照组（１５例增殖期，１５例分泌期）的子宫内膜上的Ｐ４５０ａｒｏｍ ｍＲＮＡ及蛋白的表达。结果：ＰＣＯＳ患子宫内膜上Ｐ４５０ａｒｏｍ ｍＲＮＡ呈强阳性表达，而对照组为弱表达或阴性表达；ＰＣＯＳ患子宫内膜上Ｐ４５０ａｒｏｍ蛋白呈弱到强阳性表达，对照组为阴性到阳性表达，两比较差异有显性；ＰＣＯＳ患增殖期与单纯增生比较，Ｐ４５０ａｒｏｍ蛋白表达，差异无显性。结论：ＰＣＯ     

细胞色素芳香化酶基因及环氧合酶-2基因mRNA在子宫内膜异位症异位与在位内膜的表达

目的 探讨细胞色素芳香化酶（P450arom）基因、环氧合酶-2（COX-2）基因mRNA在子宫内膜异位症（内异症）患者异位、在位子宫内膜组织中的表达及其意义。方法 采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测内异症患者在位及异位子宫内膜及正常子宫内膜中P450arom mRNA、COX-2 mRNA的表达情况。结果 P450arom mRNA在内异症患者异位及在位子宫内膜均有强表达，正常子宫内膜无表达，分泌期、增殖期无差别；COX-2 mRNA在内异症患者异位及在位子宫内膜均有强表达，正常子宫内膜弱表达（P〈0．05），且内异症患者在位子宫内膜及正常子宫内膜COX-2 mRNA表达分泌期均略强于增殖期，但差别均无统计学意义（P〉0．05），异位内膜分泌期、增殖期无差别。不同rAFS分期内异症子宫内膜P450arom mRNA、COX-2 mRNA的表达无差别。结论 子宫内膜P450arom mRNA、COX-2 mRNA的高表达与内异症的发生、发展可能密切相关。     

多囊卵巢综合征与子宫内膜胰岛素受体蛋白表达的关系研究

目的 探讨子宫内膜胰岛素受体蛋白的表达与多囊卵巢综合征(PCOS组)患者子宫内膜转化的关系.方法 用免疫组织化学的方法检测81例PCOS患者及45例月经正常妇女(对照组)子宫内膜胰岛素受体蛋白的表达情况;63例PCOS患者经二甲双胍治疗后检测胰岛素受体蛋白表达的改变.结果 胰岛素受体蛋白在对照组各期表达差异无统计学意义(P＞0.05);PCOS组子宫内膜增殖期胰岛素受体蛋白的表达多于分泌期,差异有统计学意义(P＜0.05);两组子宫内膜分泌期胰岛素受体蛋白表达差异无统计学意义(P＞0.05);PCOS组治疗后子宫内膜胰岛素受体在增殖期的表达低于治疗前,差异有统计学意义(P＜0.05) ;但治疗前后在分泌期的表达差异无统计学意义(P＞0.05).结论 PCOS患者子宫内膜的异常增生可能与胰岛素受体增加及其与超生理剂量的胰岛素相结合有关;子宫内膜的转化机制可能与胰岛素受体的表达有关.     

多囊卵巢综合征患者子宫内膜ACE2-Ang-(1-7)-Mas轴的表达

目的 检测正常月经周期子宫内膜和多囊卵巢综合征(PCOS)患者子宫内膜上肾素-血管紧张素系统(RAS)各组分的表达.方法 选取正常月经周期子宫内膜,其中增殖期和分泌期各30例,采用免疫组化SP法检测AngⅡ、AT1R、AT2R、ACE2、Ang-(1-7)、Mas在子宫内膜蛋白水平的表达.收集PCOS患者增殖期子宫内膜15例,正常增殖期子宫内膜15例.常规HE染色判定子宫内膜标本的组织学分期;实时荧光相对定量聚合酶链反应(RQ-PCR)检测AT1R、AT2R、ACE2及Mas在子宫内膜分子水平的表达.结果 正常月经周期子宫内膜AngⅡAT1R、AT2R、ACE2、Ang-(1-7)及Mas的表达呈周期性改变,趋势相似,腺上皮的表达强于间质,分泌期强于增殖期.PCOS患者增殖期子宫内膜中ACE2 mRNA、AT1R mRNA、AT2R mRNA、Mas mRNA明显高于对照组(P＜0.01).结论 宫内膜局部存在RAS系统,其各组分存在着周期性变化.PCOS患者子宫内膜中AT1R、AT2R、ACE2、Mas分子水平表达增强.     

细胞色素芳香化酶及环氧合酶-2在子宫内膜异位症的表达

目的 探讨细胞色素芳香化酶(P450arom)及环氧合酶-2(COX-2)在子宫内膜异位症(内异症)患者异位及在位子宫内膜组织中的表达及其意义.方法 采用免疫组化法检测内异症患者在位及异位子宫内膜及对照组正常子宫内膜中P450arom,COX-2的表达情况.结果 P450arom在内异症患者异位及在位子宫内膜中均有强表达,正常子宫内膜无表达,增生期、分泌期差异无显著性(P＞0.05).COX-2在内异症患者异位及在位子宫内膜亦有强表达,增生期、分泌期差异无显著性(P＞0.05);正常子宫内膜弱表达,分泌期表达强于增生期(P＜0.05).P450arom与COX-2在异位内膜中的表达呈正相关.结论 内异症组织中芳香化酶、COX-2的高表达可能是病变发生发展的重要因素,因此,抑制芳香化酶及COX-2活性可为内异症治疗提供新靶点,对在位内膜芳香化酶的检测也可能成为内异症辅助诊断的重要手段.     

多囊卵巢综合征促排卵治疗后子宫内膜HOXA10的表达

目的:探讨多囊卵巢综合征(PCOS)患者经促排卵治疗后子宫内膜同源框基因A10(HOXA10)蛋白和基因水平表达的特点.方法:PCOS患者20例,月经周期规则的15例患者为对照组. PCOS患者用尿促性素小剂量递增法促排卵2～3周期,选取促排卵治疗成功而并未妊娠的PCOS患者12例,对照组15例,于月经来潮24 h内诊刮子宫内膜,行HE染色观察子宫内膜形态学特点和免疫组织化学测定HOXA10蛋白的表达,并用RT-PCR方法检测子宫内膜HOXA10 mRNA的表达.结果:免疫组织化学检测结果表明,PCOS组和对照组子宫内膜标本均可见HOXA10蛋白的表达,主要表达在腺上皮和间质细胞胞质内,而PCOS组子宫内膜HOXA10蛋白的表达弱于对照组. RT-PCR检测显示PCOS组子宫内膜HOXA10 mRNA表达强度低于对照组.结论:PCOS患者促排卵后子宫内膜HOXA10的低表达现象,可能与子宫内膜的功能受损有关.     

促排卵治疗对黄体中期子宫内膜雌、孕激素受体及其mRNA表达的影响

目的 :了解促排卵治疗对黄体中期子宫内膜雌激素受体 (estrogenreceptor,ER)、孕激素受体 (progesteronereceptor,PR)及其mRNA表达的影响。方法 :应用光学显微镜检测着床窗口子宫内膜、采用免疫组化及原位杂交方法检测正常及多囊卵巢综合征 (polycysticovariansyndrome ,PCOS)妇女促排卵治疗后子宫内膜黄体中期ER、PR及其mRNA的表达 ,放射免疫法测定同期血中雌激素 (estradiol,E2 )及孕激素 (progesterone,P)水平。 结果 :正常妇女黄体中期子宫内膜组织形态 2 2例中有 2 0例为分泌中期改变 ,2例为分泌早期改变。ER、PR弱表达 ,ERmR NA及PRmRNA的表达也较弱 ,而PCOS妇女治疗后黄体中期氯米芬 9/人绒毛膜促性腺激素组及氯米芬 /绝经期促性腺激素 /人绒毛膜促性腺激素组各 15例分别有 8/ 15及 7/ 15光镜下为分泌中期改变 ,其它为分泌早期改变。ER、PR的表达增强 ,其基因的表达也明显增强 ,血清P的水平相对较低。促性腺激素释放激素激动剂 /绝经期促性腺激素 /人绒毛膜促性腺激素组共 10例 ,E2 、P及P/E2 接近对照组 ,上述标志物的表达与对照组相似。但 3组PCOS分泌中期子宫内膜均有不同程度的间质增生、致密 ,腺体与间质发育不同步 ,且间质致密处ER、PR及其mR NA表达均下降。结论 :氯米芬 /人绒毛膜促性腺     

细胞周期蛋白D1、P16与PCNA在子宫内膜异位症在位和异位内膜组织中的表达研究

目的:探讨细胞周期蛋白D1(CyelinD1)、P16与增殖细胞核抗原(Proliferating cell nuclear antigen,PCNA)在子宫内膜异位症发生发展中作用.方法:应用SABC免疫组化技术检测子宫内膜异位症患者(观察组)在位内膜(25例)及异位子宫内膜(28例)和其它良性病变妇女子宫内膜组织(对照组,35例)中cyclinD1、P16及PCNA蛋白表达水平.结果:PCNA蛋白在异位内膜阳性表达均明显高于在位内膜及对照组(P<0.05);CycfinD1蛋白在异位内膜中阳性表达明显高于在位内膜和对照组(P.<0.05);P16蛋白在对照组中阳性表达均明显高于在位内膜及异位内膜(P<0.05).CyclinD1和P21蛋白在异位内膜中表达呈显著负相关性(kappa系数为-0.521,P<0.01).三者在异位内膜增生期与分泌期表达无显著差异性(P>0.05).结论:cyclinD1、P21及PCNA蛋白异常表达在子宫内膜异位症异位内膜增殖中起重要作用.     

C-erbB-2蛋白在子宫内膜病变中的表达及临床意义

目的研究C-erbB-2蛋白在子宫内膜病变中的表达规律度其在子宫内膜癌的发生、预后评估的临床价值。方法用免疫组化法（S-P）检测增生期、分泌期正常子宫内膜各15例作为对照组。子宫内膜增殖症30例、非典型增生30例、子宫内膜癌高、中、低分化各30例，共150例作为实验组，观察C-erbB-2蛋白及雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）在正常子宫内膜及不同内膜病变中的阳性表达。结果C-erbB-2蛋白和ER、PR在子宫内膜增殖症、非典型增生中阳性表达与对照组相比无统计学差异（P〉0．05）。在子宫内膜癌中，C-erbB-2蛋白的阳性表达明显升高，有统计学意义（P〈0．01）；在子宫内膜癌中ER、PR阳性表达降低。与对照组比较有意义。C-erbB-2蛋白阳性表达率与临床分期（P〈0．05）、组织分化程度（P〈0．05）、淋巴转移（P〈0．01）和ER、PR（P〈0．05）有关。结论C-erbB-2蛋白、ER、PR与子宫内膜癌的发生密切相关，C-erbB-2蛋白表达增加、ER及PR表达减少提示子宫内膜病变恶性程度高，且预后不良。     

PCOS患者子宫内膜HOXA-10、LIF及血清IL-6的表达对妊娠结局的影响

目的:分析沧州地区PCOS患者子宫内膜HOXA10、LIF及血清IL-6的表达情况,探讨其对妊娠结局的影响。方法:随机选取我院近年来收治入院的36例PCOS患者(观察组)及36例非PCOS不孕症患者(对照组)作为研究对象,测定患者分泌中期及增生期子宫内膜HOXA10、LIF及血清IL-6,进行对比分析。结果:观察组患者子宫内膜HOXA10、LIF及血清IL-6表达在分泌中期及增生期均显著低于对照组患者,P0.05,有统计学意义。结论:PCOS患者子宫内膜HOXA10、LIF及血清IL-6的低表达是导致患者不孕及反复流产的主要原因,对三者的协同检查为PCOS不孕患者的诊治提供了新方向。     

子宫内膜异位症和子宫腺肌病P450arom和COX-2mRNA的表达及意义

目的研究细胞色素芳香化酶P450（P450arom）基因和环氧化酶-2（cox-2）基因在子宫内膜异位症（EMs）和子宫腺肌病（AM）在位和异位内膜中的表达及相关性。方法应用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）技术,检测22例正常子宫内膜、42例EMs及33例AM的在位和异位内膜中P450arom mRNA和COX-2mRNA的表达,并进行相关性分析。结果P450arom mRNA在正常子宫内膜无表达,在EMs和AM的在位和异位内膜中均有表达,与正常子宫内膜比较差异均有显著性（F=28．777,q=4．624～10．282,P〈0．01）。P450arom mRNA在EMs和AM异位内膜中的表达均高于在位内膜,差异有显著性（q=2．964、2．655,P〈0．01、0．05）。COX-2mRNA在正常子宫内膜无表达或弱表达,在EMs和AM的在位和异位内膜中均有表达,与正常子宫内膜比较差异均有显著性（F=21．307,q=2．583～7．905,P〈0．01）;在正常子宫内膜、EMs在位和异位子宫内膜中分泌期表达高于增殖期,差异均有显著性（t=4．401～15．865,P〈0．05）;在AM表达不随月经周期变化。COX-2mRNA在EMs和AM异位内膜中的表达均高于在位内膜,差异均有显著性（q=2．623、5．908,P〈0．05）。P450arom mRNA和COX-2mRNA在EMs的表达与rAFS分期均无相关性。P450arom mRNA与COX-2mRNA在EMs中的表达水平呈正相关（r=0．964,P〈0．01）;在AM中的表达水平亦呈正相关（r=0．813,P〈0．01）。结论P450arom和COX-2与EMs和AM的发病相关,二者协同作用促进EMs和AM的发生发展。     

P450A在巧克力囊肿异位内膜和在位内膜中的表达

目的研究卵巢巧克力囊肿异位内膜腺上皮、间质细胞及其在位内膜P450芳香化酶蛋白和mRNA表达,探讨其在子宫内膜异位症发病中的作用及其临床意义.方法采用逆转录聚合酶联反应(RT-PCR)和免疫组化技术检测45例巧囊壁、32在位内膜和35例正常内膜中P450芳香化酶(P450A)mRNA及蛋白的表达.结果巧囊壁异位内膜P450AmRNA表达量高于在位内膜(P＜0.01);35例正常内膜中仅有2例表达;免疫组化检测巧囊壁P450A蛋白其表达特征与mRNA一致.结论子宫内膜异位症P450A的表达在其发病中起到重要作用.     

内异症中芳香化酶的表达与其局部雌激素异常合成的关系

目的 研究卵巢巧克力囊肿异位内膜腺上皮、间质细胞及卵巢内异症的在位内膜中P450芳香化酶蛋白和mRNA表达,探讨其在子宫内膜异位症发病中的作用及其临床意义.方法 采用反转录聚合酶联反应(RT-PCR)和免疫组化技术检测45例卵巢巧克力囊肿的囊壁(巧囊)、32例卵巢内异症的在位内膜和35例正常子宫内膜中P450芳香化酶(P450A)mRNA及蛋白的表达.结果 巧囊壁异位内膜P450A mRNA表达量高于在位内膜(P＜0.01);35例正常子宫内膜中仅有2例表达;免疫组化检测巧囊壁P450A蛋白其表达特征与mRNA一致.结论 子宫内膜异位症异位灶中有P450A表达,这种雌激素的合成酶能在异位灶局部合成异常的雌激素;卵巢内异症的在位内膜有P450A表达,提示在位内膜本身局部有雌激素的合成,其保护机制劣于正常内膜.子宫内膜异位症中P450A的表达在其发病中起到重要作用.     

雌激素及其受体、芳香化酶在子宫腺肌病中的作用

目的 探讨雌激素、雌激素受体(ER)及芳香化酶(P450arom)在子宫腺肌病中的作用.方法 收集子宫腺肌病患者病灶组织及石蜡切片,通过酶联免疫法、免疫组织化学法检测雌激素、ER、P450arom在子宫腺肌病组织中的水平,以宫颈CINIII为对照组.通过体外培养子宫腺肌病病灶细胞,采用CCK-8法观察雌激素激活组、ER抑制剂组、ER抑制剂+E2激活组、雌激素剥夺组、雌激素剥夺+ER抑制剂组各组状态下子宫腺肌病病灶细胞的增殖抑制率.结果 与对照组子宫肌层及内膜相比较,子宫腺肌病异位病灶、在位内膜中雌激素、ER、P450arom表达水平明显升高(P＜0.05);子宫腺肌病异位病灶与在位内膜比较雌激素、P450arom表达水平无明显差异(P＞0.05),但ER表达水平明显升高(P＜0.05).ER抑制剂组及ER抑制剂+雌激素激活组均能抑制子宫腺肌病病灶细胞增殖,两组之间抑制率差异无统计学意义(P＞0.05),雌激素剥夺组与雌激素剥夺+ER抑制剂组均能抑制子宫腺肌病病灶细胞增殖,其中雌激素剥夺+ER抑制剂组抑制效果大于雌激素剥夺组(P＜0.05).结论 通过雌激素激活及剥夺状态下证实子宫腺肌病异位病灶及在位内膜过高表达的雌激素、ER、P450arom促进子宫腺肌病病灶细胞增殖,其中雌激素通过与ER结合发挥生物学效应,ER除与雌激素结合外,还可通过其他途径促进子宫腺肌病发生发展.     

隔药饼灸对子宫内膜异位症大鼠雌激素相关因子表达的影响

目的:探索隔药饼灸对子宫内膜异位症大鼠雌激素相关因子表达的影响。方法:采用自体移植法造模,成功后随机将SD大鼠分为模型组、隔药饼灸组和达那唑组,另设未造模的大鼠为空白对照组。空白对照组和模型组大鼠常规固定、暴露关元穴,不做其他处理;其余两组分别给予隔药饼灸法治疗、达那唑悬浊液灌胃,共2个疗程。待治疗结束后,用HE染色观察子宫内膜组织及异位内膜组织形态学变化;ELISA法检测血清E2水平;RT-PCR检测内膜组织芳香化酶(P450arom)和环氧化酶-2(COX-2)的mRNA表达。结果:HE染色结果显示,模型组的异位内膜上皮细胞呈柱状增生,间质细胞密集,局部纤维化,血供丰富;隔药饼灸组的异位内膜上皮细胞萎缩,呈矮立方状,间质细胞萎缩,血供减少,局部呈纤维化。与空白对照组比较,模型组大鼠血清E2水平和异位内膜组织P450arom mRNA、COX-2 mRNA的表达量显著升高(P0.05);与模型组比较,隔药饼灸组和达那唑组大鼠血清E2水平和异位内膜组织P450arom mRNA、COX-2的mRNA表达量明显降低(P0.05);与隔药饼灸组比较,达那唑组血清E2水平和异位内膜组织P450arom mRNA、COX-2 mRNA表达量明显降低(P0.05)。结论:隔药饼灸可能通过改善血液循环,降低子宫内膜异位症大鼠血清E2和异位内膜组织中P450arom、COX-2的表达,从而抑制雌激素的生成代谢、抑制异位病灶的生长。     

子宫腺肌病患者UAE治疗前后子宫内膜中ER、P450arom表达的变化

目的:研究子宫腺肌病子宫动脉栓塞术(UAE)治疗前后子宫内膜中ER、P450arom表达的变化。方法:采用免疫组化法测定33例子宫腺肌病患者治疗前、后30d及90d内膜中ER、P450arom表达的变化及阳性人数的变化,与30例正常对照组患者比较。结果:30例子宫腺肌病组中有78.8%患者内膜中P450arom高表达,表达强度为18.6±3.45,明显高于正常对照组(P<0.01);100%患者ER表达,表达强度为16.1±2.67,明显高于对照组的4.51±0.98(P<0.01);UAE治疗后内膜中ER表达由治疗前的16.1±2.67降低到治疗后的6.23±0.98,ER阳性人数百分比由治疗前的100%降低到治疗后的39.4%;P450arom表达由治疗前的18.6±3.45降低至治疗后的5.3±1.66,阳性人数百分比由78.8%降低至39.4%,各组比较差异有显著性意义(P<0.01)。治疗后1个月ER、P450arom表达开始逐渐下降,治疗后3个月降低最明显。结论:高表达的ER、P450arom在子宫腺肌病发生、发展中发挥重要的作用;UAE主要通过减少子宫腺肌病病灶血供和抑制内膜中ER、P450arom表达发挥其治疗效果;ER、P450arom可作为子宫腺肌病疗效判断和预后的指标之一。     

来曲唑对大鼠子宫内膜异位症的作用及对异位内膜细胞凋亡的影响

目的:初步探讨第3 代芳香化酶抑制剂来曲唑治疗大鼠子宫内膜异位症(endometriosis, EM) 模型异位病灶的作用机制, 及对异位内膜细胞凋亡的影响。方法:用自体子宫内膜移植方法建立大鼠EM 模型, 选择建模成功的大鼠随机分为来曲唑组(n=15) 和对照组(n=15), 比较治疗前后两组大鼠异位病灶的体积、外观变化、病理组织学差异, 并采用免疫组织化学法和RT-PCR 法检测异位病灶中P450 芳香化酶(P450arom)、环氧合酶-2(COX-2)、bcl-2及bax 的表达。结果:与对照组比较, 来曲唑组异位病灶体积明显缩小(P<0.05), 异位病灶中P450arom 和COX-2的蛋白及mRNA 表达均明显减低(P<0.05)。P450arom 与COX-2 在异位病灶中的表达呈正相关(r=0.943, P<0.001;r=0.913, P<0.001)。异位病灶中bcl-2 的蛋白及mRNA 表达较对照组均明显减低(P<0.05), bax 的蛋白及mRNA 表达较对照组明显增高(P<0.05), 来曲唑组bax/bcl-2 的比值较对照组显著增加(P<0.05)。结论:来曲唑可明显缩小异位病灶体积, 可能通过降低异位病灶局部P450arom, COX-2 的表达, 抑制雌激素生成及异位病灶的增殖, 从而促进异位病灶细胞凋亡, 达到治疗目的。