单剂量同时给予浓缩姜黄提取物对硝苯地平体内动态的影响

以硝苯地平为CYP3A4的基质,探讨了单剂量同时给予姜黄提取物对大鼠及健康成人硝苯地平体内动态的影响。方法：①大鼠小肠的CYP3A4活性：给予浓缩的秋姜黄提取物(姜黄末,100 mg/kg,)3 h后,制备小肠微粒体进行测定。②大鼠体内动态试验：硝苯地平(5 mg/kg)与姜黄末(100 mg/kg)单剂量     

附子、肉桂、仙茅对正常大鼠药物代谢酶CYP3A和GST活性的影响

目的:探讨辛热药附子、肉桂、仙茅对正常大鼠药物代谢酶细胞色素P4503A(CYP3A)和谷胱甘肽-S转移酶(GST)活性的影响,为辛热药性的科学阐释及临床安全合理用药提供依据。方法:SD雄性大鼠随机分为4组,空白组灌服自来水,其他各组分别灌胃附子(12g.kg-1.d-1)、肉桂(30g.kg-1.d-1)、仙茅(20g.kg-1.d-1)水煎液,连续7d后,检测肝、小肠微粒体CYP3A活性及肝微粒体和血浆GST活性。结果:与正常组比,附子、肉桂、仙茅组大鼠肝微粒体CYP3A和GST活性显著升高(P<0.01),而小肠微粒体CYP3A活性变化不明显,血浆GST活性有下降趋势。结论:附子、肉桂、仙茅能明显升高大鼠肝脏CYP3A和GST活性,可能是其辛热药性表达的生物学基础之一。     

仙茅体内代谢过程与药物代谢酶CYP3A的相关性研究

目的:探讨仙茅体内代谢过程与药物代谢酶细胞色素P4503A(CYP3A)的相关性,为进一步研究机体CYP3A活性变化对仙茅性-效表达的影响奠定基础。方法:SD雄性大鼠随机分为2组,即正常组和利福平组。利福平组每天灌胃给予200mg/kg药物混悬液,正常组给予等体积蒸馏水,连续7d,第8天每组各取6只大鼠一次性灌胃仙茅水煎液(20g/kg)后,分别于20、50、90、180min时眼眶取血测仙茅入血成分苔黑酚葡萄糖苷血药浓度,其他大鼠断头处死,取肝、小肠、肾测定CYP3A活性。结果:利福平组大鼠肝微粒体CYP3A活性明显升高(P0.05),小肠、肾微粒体CYP3A活性有升高趋势;利福平组大鼠各时间点血药浓度均低于正常组,且在20、50、90时差异有统计学意义(P0.05,P0.01)。结论:利福平诱导后大鼠肝微粒体CYP3A活性升高,而苔黑酚葡萄糖苷血药浓度明显降低,说明仙茅体内代谢过程与药物代谢酶CYP3A相关。     

常态虚寒状态小鼠CYP3A活性P-gp水平比较研究

目的:比较虚寒状态与常态小鼠肝和小肠细胞色素P4503A(CYP3A)活性和P-糖蛋白(P-gp)水平情况。方法:肌注氢化可的松复制小鼠虚寒状态模型,采用聚乙二醇法制备肝和小肠微粒体,测定肝和小肠细胞色素CYP 3A活性;以免疫组化法检测肝和小肠组织P-gp水平。结果:虚寒状态组和正常状态组肝和小肠微粒体内CYP3A活性和P-gp水平存在差异,即正常状态CYP3A活性、P-gp水平高于虚寒状态,且差异显著(P<0.05)。结论:初步发现,CYP3A活性和P-gp水平存在机体状态差异。     

丹皮酚对大鼠肝微粒体细胞色素P450酶含量及活性的影响

目的:考察丹皮酚对大鼠肝微粒体的蛋白含量、CYP450酶总量和主要CYP450酶亚型(CYP1A2、CYP2D6、CYP3A4和CYP2C19)活性的影响。方法:大鼠灌胃给予丹皮酚(100 mg/(kg·d)-1,连续7 d,测定其肝微粒体蛋白含量、CYP450蛋白含量以及CYP1A2、CYP2D6、CYP3A4及CYP2C19活性。结果与空白对照组相比,丹皮酚给药组大鼠肝微粒体蛋白含量及肝微粒体CYP450含量无明显差异(P>0.05)。丹皮酚给药后,给药组大鼠的平均CYP2D6活性是对照组的2倍;而二两组之间CYP1A2、CYP3A4和CYP2C19的活性相当。结论丹皮酚对大鼠CYP2D6活性有一定诱导作用,对CYP1A2、CYP3A4和CYP2C19的活性没有影响。     

和汉药与经消化道CYP3A4代谢药物的相互作用

探讨了连续给予和汉药对肝脏与小肠中CYP活性的影响以及对并用药物体内动态的影响。方法：①和汉药的预处理：对Wistar系雄性大鼠(7周龄)每天2次经口给予男宝、柴苓汤、补中益气汤的混悬液,连续给予1周。给药结束后禁食一夜,用于实验。大鼠小肠、肝微粒体按常规方法制备。②体外代谢实验：在NADPH生成系存在下,将微粒体(500μg)与各种浓度的硝苯地平37℃培     

78种生药提取物对人肝脏微粒体CYP3A4和CYP2D6的抑制作用

探讨了78种生药提取物对人肝脏微粒体的药物代谢酶细胞色素P450(CYP)CYP3A4和CYP2D6的抑制作用。材料与方法:①制备78种生药提取物的甲醇可溶性组分,添加剂量为1.65mg/mL。②从16人(男性11人,女性5人)获取的人肝微粒体储存于-80℃备用。微粒体中CYP的含量为0.385nmol/mg蛋白质。③分别以红霉素N-去甲基作用和右美沙芬O-去甲基作用作为人肝微粒体CYP3A4和CYP2D6活性的指标。用酶免疫测定法检测78种生药提取物对人肝微粒体CYP3A4和CYP2D6的抑制活性。结果:①31种生药提取物对人肝微粒体红霉素N-去甲基作用的抑制活性大于50%,其…     

保健食品中含有的天然成分对CYP的影响:葡萄种子的抑制作用

探讨了保健食品中含有的天然成分对CYP酶的影响。 方法:制备SD系雄性大鼠肝微粒体(Ms),添加各种天然物的提取物。用CYP分子的探针底物测定活性。另外,NADPH、Ms与葡萄种子提取物(GSE)、GSE的各种组分(fr)、茶提取物(GTE)温育后,检测红霉素(ERM)-N脱甲基化酶的活性。 结果:14种天然物提取物中,GSE与GTE可明显抑制氨基比林N-脱甲基化酶活     

桂枝汤对大鼠肝微粒体细胞色素P450酶活性的影响

目的:研究桂枝汤对大鼠肝微粒体细胞色素P450酶CYP1A2、CYP2D6和CYP3A4活性的影响。方法:18只大鼠被随机分成3组,每组6只。以生理盐水为空白对照,大鼠每日灌胃给予桂枝汤10 g/kg,连续7 d,测定其肝微粒体CYP1A2、CYP2D6和CYP3A4活性。结果:与对照组相比,桂枝汤对大鼠CYP1A2、CYP2D6和CYP3A4的活性无明显差异(P>0.05)。结论:桂枝汤对大鼠CYP1A2、CYP2D6和CYP3A4活性无影响。     

四种抗癌中药提取物对大鼠肝CYP3A酶活性及mRNA表达的影响

目的研究4种抗癌中药提取物对大鼠肝脏细胞色素P450 3A(CYP3A)酶在酶活性及mRNA水平的调节作用.方法采用紫外分光光度法测定大鼠肝微粒体CYP450含量及CYP3A同工酶--红霉素N-脱甲基酶(ERD)的活性;采用反转录PCR(RT-PCR)技术检测CYP3A1、CYP3A2 mRNA的表达.结果莪术、苍术、白术的提取物均可明显增加CYP450蛋白含量及CYP3A酶活性,而茯苓提取物无明显作用.在mRNA水平上,莪术、苍术、白术的提取物均能明显诱导CYP3A1的基因表达,茯苓提取物无明显作用;对于CYP3A2的基因表达,莪术和苍术的提取物均有明显的诱导作用,而白术和茯苓的提取物则有显著的抑制作用.结论莪术、苍术、白术的提取物对CYP3A酶的调控均发生在酶活性水平和转录水平,而茯苓提取物对CYP3A酶仅存在转录水平的调控.4种抗癌中药提取物对CYP3A酶的诱导或抑制可能会影响其他药物的体内代谢.     

和汉药与经消化道CYP3A4代谢药物的相互作用[日]

探讨了连续给予和汉药对肝脏与小肠中CYP活性的影响以及对并用药物体内动态的影响。方法：①和汉药的预处理：对Wistar系雄性大鼠（7周龄）每天2次经口给予男宝、柴苓汤、补中益气汤的混悬液，连续给予1周。给药结束后禁食一夜，用于实验。大鼠小肠、肝微粒体按常规方法制备。     

抑制CYP3A活性的绿茶成分

探讨40余种食品提取物对CYP3A活性的抑制作用时发现,青辣椒和绿茶显示强的抑制作用。此次,对绿茶提取物进行分离以筛选其抑制成分。方法:以豚鼠肝微粒体的睾酮6羟化反应检测CYP3A活性。在反应系中添加100mg绿茶提取物,用HPLC法检测6-羟基睾酮的生成量,评价其抑制活性。结果与讨     

归脾汤对雷公藤醇提物致肝损伤大鼠肝微粒体CYP3A4酶活性的影响

目的:建立一个快速、准确的测定大鼠肝微粒体中CYP3A4酶活性的HPLC,研究雷公藤醇提物对肝损伤大鼠肝微粒体CYP3A4酶活性的影响,进而探讨归脾汤对其保护机制。方法:50只大鼠随机分为正常组、模型组、归脾汤组、P450诱导组、P450抑制组。正常组、模型组灌服生理盐水,归脾汤组灌服归脾汤(9g·kg-1),P450诱导组、P450抑制组分别腹腔注射地塞米松(100mg·kg-1)和酮康唑(80mg·kg-1),连续ig 4d后,再以雷公藤醇提物(3.25mg·kg-1)ig 3d造模。选用HPLC以咪达唑仑为探针药物,检测各组大鼠肝微粒体中CYP3A4酶活性。结果:在所建立的HPLC条件下,咪达唑仑的出峰时间在8.960min,能够完全分离,且无其他生物基质峰干扰;线性范围是0.25~20μmol·L-1(r=0.9999),符合检测要求,方法可靠。结果显示,与正常组比较,模型组大鼠CYP3A4活性明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);与模型组比较,归脾汤组、CYP450诱导组大鼠CYP3A4活性亦明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);归脾汤组与CYP450诱导组之间比较,大鼠CYP3A4活性差异不明显,无统计学意义。结论:本方法能够对CYP3A4活性进行准确评价,雷公藤对大鼠肝微粒体CYP3A4酶活性有一定的抑制作用,归脾汤可能通过诱导CYP3A4活性而降低雷公藤的毒性从而发挥对肝脏的保护作用。     

Cocktail法评价注射用益气复脉(冻干)对大鼠肝微粒体CYP1A2、CYP3A的诱导作用

目的:研究注射用益气复脉(冻干)Yi Qi Fu Mai Injection(YQFM)(Lyophilized)对大鼠肝微粒体CYP1A2、CYP3A的诱导作用。方法:将wistar大鼠分为生理盐水对照组,苯巴比妥钠诱导组,YQFM组,连续给药7天后处死,制备肝微粒体。采用Cocktail法,将特异性探针底物非那西丁(CYP1A2)、睾酮(CYP3A)与肝微粒体共孵育,采用高效液相色谱测定孵育所得代谢产物对乙酰氨基酚和6β-羟基睾酮的生成速率,来评价YQFM对CYP1A2、CYP3A的诱导作用。结果:空白对照组、诱导组和YQFM组的对乙酰氨基酚的生成速率分别为(18.04±1.00)、(43.07±2.90)、(27.6±4.5)ng.(mg pro-tein)-1.min-1,6β-羟基睾酮的生成速率分别为(15.79±1.43)、(40.86±3.32)、(32.8±3.67)ng.(mg protein)-1.min-1。结论:YQFM对大鼠肝微粒体CYP1A2、CYP3A有诱导作用。     

姜酚对小鼠肝药酶活性的影响

目的:研究姜酚对小鼠肝脏细胞色素氧化酶P450(CYP450)含量及其亚型CYP2E1与CYP3A活性的影响。方法:小鼠口服给药姜酚(200,100,50 mg.kg-1.d-1),5 d后钙沉淀法制备肝微粒体,测定并考察姜酚对小鼠肝重、微粒体蛋白、CYP450及CYPb5含量的影响;氨基比林法和红霉素法测定肝微粒体CYP亚型CYP2E1与CYP3A的活性。结果:姜酚高、中、低剂量(200,100,50 mg.kg-1.d-1)对小鼠肝重、蛋白含量无影响,能显著降低CYP450的含量以及增加CYPb5的含量(P<0.01);3种剂量姜酚均可抑制CYP2E1的活性(P<0.05),且随着剂量增加抑制作用增强,高剂量姜酚可以抑制CYP3A的活性(P<0.05)。结论:姜酚对小鼠CYP450含量及亚型CYP2E1,CYP3A活性有抑制作用,抑制程度与剂量有关。     

应用大鼠肝微粒体筛选对细胞色素P4502D6有抑制作用的中药

目的从17种中药(单体、提取物和注射液)中快速筛选出对细胞色素P4502D6(CYP2D6)亚型有抑制作用的中药,建立高通量筛选对CYP2D6有抑制作用中药的技术平台。方法取大鼠空白肝微粒体,分别加入17种中药,HPLC法测定大鼠肝微粒体中CYP2D6的探针药物右美沙芬(DM)的代谢率,通过代谢率降低的现象初步筛选出能抑制肝微粒体中CYP2D6代谢的药物。结果槲皮素、黄芩苷、厚朴提取物、清开灵注射液、盐酸川芎嗪注射液可明显降低DM的代谢率(P<0.01)。结论初步筛选出槲皮素、黄芩苷、厚朴提取物、清开灵注射液、盐酸川芎嗪注射液这5种中药可抑制肝微粒体CYP2D6酶活性。此方法可作为高通量筛选对CYP2D6活性有抑制作用中药的技术平台。     

三七总皂苷对大鼠肝组织内药物代谢酶CYP3A的抑制作用及其动力学分析

目的:研究三七总皂苷(total saponins of the root and rhizome of Panax notoginseng,PNS)对大鼠肝组织内药物代谢酶CYP3A的抑制作用及其动力学分析.方法:采用差速离心法制备大鼠微粒体酶,用半数效量概率单位法及Lineweaver-Burk 双倒数作图法求得大鼠肝脏CYP3A的米氏常数(Km)、最大反应速度(Vmax)和三七总皂苷对大鼠肝脏CYP3A的半数抑制浓度(IC50)以及判断三七总皂苷对CYP3A的抑制类型和抑制常数(Ki,Kis).结果:三七总皂苷对大鼠肝组织CYP3A有抑制作用,其IC50 689.54 mg·L-1;对底物氨基比林,CYP3A的Km0.036 mmol·L-1,Vmax是21.01 μmol·min-1·g-1;三七总皂苷对大鼠肝组织CYP3A属于混合性抑制,其抑制常数Ki247.79 mg·L-1,Kis321.79 mg·L-1.结论:三七总皂苷对大鼠肝脏CYP3A的活性有明显抑制作用.     

银杏叶提取物对甲苯磺丁脲降血糖作用的影响

曾报道,银杏叶提取物可诱导大鼠肝药物代谢酶细胞色素P450(CYP)活性,该作用可能对并用药物的代谢及药理作用有影响。本次探讨了银杏叶提取物对由CYP2C9代谢的甲苯磺丁脲降血糖作用的影响。 方法:实验动物为Wistar系雄性大鼠。给药方式分为2种,①大鼠自由摄取含有0.1% 银杏叶提取物的饲料5d后,口服甲苯磺丁脲(40mg/kg,预给药组)。②以给予甲苯磺丁脲15min前口服银杏叶提取物(100mg/kg,同时给药组)。给予甲苯磺丁脲后经时从大鼠尾静脉采血检测血糖,并检测摄入银杏叶提取物后大鼠肝微粒体中各种CYP的活性。 结果与讨论:虽然4h后甲苯…     

热毒宁注射液对大鼠肝微粒体CYP450酶的诱导作用研究

目的：研究热毒宁注射液（RDN）对大鼠肝微粒体CYP450酶的诱导作用。方法：将SD大鼠随机分为空白溶剂组、阳性对照组和热毒宁注射液低、中、高剂量组（1、2、4 mL·kg^-1·d^-1）,分别于连续给药7天后处死,取肝组织称重并制备肝微粒体。计算大鼠肝脏的脏器系数,以BCA法测定微粒体的蛋白含量,以“cocktail”法测定大鼠肝微粒体中5种重要的CYP450酶亚型CYP1A2、CYP2C9、CYP2C19、CYP2D6和CYP3A1/2的活性。结果：与空白溶剂组比较,阳性对照组大鼠的肝脏脏器系数、微粒体得率及各CYP450酶亚型的活性均明显增加（P<0.01）。热毒宁注射液低、中剂量组的脏器系数、微粒体得率和蛋白含量无显著性差异,但高剂量组的脏器系数和微粒体得率有显著性差异（P<0.05）。对酶活性的影响方面,热毒宁注射液能显著诱导大鼠CYP1A2的活性,且呈剂量依赖性;中、高剂量组对CYP2C9和CYP2C19均有一定的诱导作用;对CYP3A1/2和CYP2D6的作用不明显。结论：阳性对照组对大鼠肝微粒体CYP450酶有明显的诱导作用,所建立的实验体系可用于诱导作用的评价;热毒宁注射液对大鼠CYP1A2、CYP2C9和CYP2C19亚型有一定的诱导作用,对CYP3A1/2和CYP2D6无明显作用。     

天王补心丸中生地黄、玄参、天冬和麦冬水提液对大鼠肝CYP450酶含量及其亚型CYP3A, CYP2E1和CYP1A2活性的影响

目的:研究天王补心丸中滋阴类药味生地黄、玄参、天冬和麦冬水提物对大鼠肝肝药酶(CYP450)含量及对亚型CYP3A,CYP2E1,CYP1A2活性的影响,探讨CYP450在天王补心丸代谢中的作用.方法:大鼠灌胃给予生地黄、玄参、天冬和麦冬水提物7d后取肝脏称重并制备肝微粒体,紫外分光光度法测定肝微粒体细胞色素b5(Cytb5),P450的含量及CYP3A的活性,高效液相法测定CYP2E1和CYP1A2的活性.结果:与空白对照组比较,各给药组大鼠肝指数无显著变化;生地黄组CYP450含量极显著减少(P＜0.01),CYP3A活性极显著增加(P＜0.01),CYP1A2活性显著增加(P＜0.05);玄参组CYP450含量减少(P＜0.05),CYP3A和CYP1A2活性均极显著增加(P＜0.01);天冬组Cytb5含量增加(P＜0.05),CYP2E1活性增加(P＜0.05),CYP1A2活性极显著增加(P＜0.01);麦冬组cytb5,CYP450含量无统计学差异,CYP3A活性增加(P＜0.05),CYP2E1活性增加(P＜0.05),CYP1A2活性极显著增加(P＜0.01).结论:天王补心丸中生地黄、玄参降低大鼠肝脏CYP450酶含量并均诱导CYP3A和CYP1A2活性,天冬诱导CYP2E1和CYP1A2活性,麦冬诱导CYP3A,CYP2E1和CYP1A2活性.由于抑制CYP450活性,减少对其他药代谢,滋阴药组在天王补心丸全方配伍中可增强其他各功能组比如补血养血、宁心安神类药味的作用,为探讨天王补心丸的配伍机制提供了理论基础.