补肾生精丸对生精细胞损伤模型大鼠生精细胞凋亡与Bcl-2、Bax、Fas、FasL表达的影响

目的 观察补肾生精丸对腺嘌呤所致生精细胞损伤模型大鼠生精细胞凋亡的影响及凋亡相关基因的调控情况.方法 SD大鼠40只随机分为4组:正常组、模型组、中药治疗组(补肾生精丸组)、中药对照组(五子衍宗丸组).以腺嘌呤灌胃诱发生精细胞损伤肾阳虚模型,用TUNEL法检测各组大鼠睾丸组织生精细胞的凋亡情况;用免疫组化的方法检测Bcl-2、Bax、Fas及FasL的表达.结果 补肾生精丸能够抑制大鼠睾丸曲细精管生精细胞的凋亡,上调抑制凋亡基因Bcl-2的表达,下调促凋亡基因Bax、Fas、FasL的表达,与模型组比较有统计学意义(P<0.01).结论 补肾生精丸对腺嘌呤致生精细胞损伤模型大鼠生精细胞的凋亡有一定的抑制作用,其作用可能与该药调控Bcl-2、Bax、Fas、FasL的表达有关.     

羊睾丸提取液对铅暴露小鼠睾丸生精细胞Bcl-2和Bax表达的影响

目的 研究羊睾丸提取液对铅暴露小鼠睾丸生精细胞凋亡相关基因Bax和Bcl-2表达的影响.方法 30只成年雄性昆明种小鼠分为3组:对照组、实验1组和实验2组,分别给予生理盐水、醋酸铅、醋酸铅+羊睾丸提取液,每天1次,共14 d.停药1周后手术取睾丸.用免疫组织化学技术检测睾丸生精细胞凋亡相关基因Bcl-2和Bax的表达.结果 实验1组细胞凋亡相关基因Bcl-2和Bax表达较对照组差异均有显著性(P<0.01),实验2组较对照组均无显著性差异(P>0.05).结论 一定量的铅负荷可导致小鼠生精细胞凋亡,而羊睾丸提取液可通过上调Bcl-2及下调Bax的表达抑制铅暴露所导致的生精细胞凋亡.     

何首乌颗粒对亚急性衰老大鼠睾丸PCNA表达的影响

目的:观察何首乌颗粒(Heshouwu Granule,HG)对亚急性衰老大鼠睾丸PCNA表达的影响.方法:D-半乳糖(D-gal)连续腹腔注射制作亚急性衰老大鼠模型,检测HG灌胃前后模型大鼠血清睾酮含量及睾丸生精细胞PCNA表达的变化情况.结果:D-半乳糖致亚急性衰老大鼠血清睾酮含量及睾丸PCNA阳性细胞率明显下降,与正常大鼠比较差异显著(P<0.05,P<0.01);经HG灌胃后,二者均升高接近正常水平,与模型大鼠相比有明显差异(P<0.05,P<0.01).结论:HG可提高亚急性衰老大鼠血清睾酮含量及睾丸生精细胞PCNA表达水平,具有一定的延缓衰老作用.     

精索静脉高位结扎术对精索静脉曲张大鼠生精细胞凋亡的影响

目的:通过建立实验性精索静脉曲张大鼠动物模型,探讨精索静脉高位结扎术对同侧睾丸生精细胞凋亡机制的影响。方法:雄性大鼠60只,随机分为对照组、假手术组、EV组(模型组)、Varicocelectomy组(治疗组),每组15只。术后取左侧睾丸,采用HE染色观察睾丸组织学变化,TUNEL法检测生精细胞凋亡指数,免疫组化和RT-PCR法分别检测Bcl-2、Bax和Caspase-3的表达。结果:模型组大鼠左侧睾丸组织可见生精上皮排列紊乱,生精细胞广泛脱落,细胞凋亡指数明显高于对照组、假手术组(P<0.05),治疗后凋亡指数明显减少,与模型组比较,差异有显著性(P<0.05);治疗组中Bax、Caspase-3表达减少,Bcl-2表达增加,与模型组比较,差异有显著性(P<0.05)。结论:精索静脉高位结扎术可抑制睾丸生精细胞凋亡,且Bcl-2、Bax和Caspase-3通过线粒体信号转导通路参与并调控生精细胞凋亡过程,从而在精索静脉曲张疾病中发挥保护作用。     

青春期精索静脉曲张模型大鼠生精细胞凋亡的研究

目的研究精索静脉曲张对青春期大鼠生精细胞凋亡的影响及生精细胞凋亡与Bcl-2/Bax表达的关系,以探讨精索静脉曲张影响睾丸生精功能的机制。方法通过部分结扎左肾静脉建立青春期大鼠左侧精索静脉曲张模型,采用原位末端脱氧核苷酸转移酶标记法检测睾丸生精细胞凋亡情况及免疫组化SABC法检测Bcl-2/Bax的表达情况。结果试验组细胞凋亡指数显著高于对照组(P<0.05),且双侧睾丸组织内均见大量生精细胞凋亡。试验组Bcl-2表达较对照组低,左侧睾丸比右侧睾丸低;而Bax表达较对照组高,左侧睾丸比右侧睾丸高。结论精索静脉曲张可明显改变青春期大鼠凋亡相关基因Bcl-2/Bax的表达,导致双侧睾丸生精细胞凋亡增加,这可能是精索静脉曲张影响睾丸生精功能的机制之一。     

异丙酚对睾丸扭转/复位后生精细胞凋亡及相关基因表达的影响

目的探讨异丙酚对睾丸扭转/复位后睾丸细胞凋亡及相关基因表达的影响.方法30只青春期Wistar大鼠随机等分为3组.组1为对照组(左侧睾丸扭转720°即刻复位);组2、3为睾丸扭转/复位模型组(左侧睾丸扭转720°、2h后复住).组3睾丸复位前5min静脉注射异丙酚20mg/kg,继之输入5%异丙酚50mg/(kg·h)1 h;组1、2以生理盐水代之.术后24 h取左侧睾丸标本分别以原位缺口末端标记法(TUNEL)及免疫组织化学法检测凋亡细胞和Bcl-2、Bax基因蛋白表达.结果与组1比较,组2睾丸生精细胞凋亡指数升高和Bax表达增强(P＜0.01),而睾丸细胞Bcl-2表达下降(P＜0.01),Bcl-2/Bax比值降低,睾丸病理损害明显.与组2比较,组3睾丸上述改变明显减轻(P＜0.01).结论异丙酚通过调节Bcl-2及Bax蛋白表达抑制睾丸扭转/复住所诱导的生精细胞凋亡增加.     

甲醛对凋亡相关基因Bcl-2 Bax在生精细胞表达的影响

目的 研究长期在甲醛含量过高的室内环境中凋亡相关基因Bcl-2、Bax在睾丸和生精小管细胞中表达.方法 利用医用甲醛制备大白鼠的甲醛毒性模型,采用免疫组织化学技术,检测Bcl-2、Bax蛋白在睾丸及生精小管中的表达.结果 高浓度的甲醛作用于大白鼠2个生精周期,每个生精小管中Bcl-2蛋白表达的阳性细胞数目在高剂量组为27±2.47,低剂量组为35±4.61,均显著低于正常组93±2.81,(P<0.05).每个细胞中Bcl-2蛋白表达强度(OD值)在高剂量组为0.132±0.024,低剂量组为0.113±0.021,均明显低于对照组0.183±0.031,P<0.05;Bax蛋白表达的阳性细胞数目在高剂量组为89±20.14,低剂量组为61±14.76,均显著高于正常组23±4.71,P<0.05.每个细胞中Bcl-2蛋白表达强度(OD值)在高剂量组为0.098±0.021,低剂量组为0.085±0.018,均明显高于对照组0.032±0.026,P<0.05.结论 长期处于高浓度甲醛的室内环境中使睾丸和生精细胞中Bcl-2的表达降低,Bax的表达增强.     

精索静脉曲张对青春期大鼠生精细胞凋亡相关基因Bcl-2和Bax表达的影响

目的 研究精索静脉曲张(VC)对青春期大鼠睾丸生精细胞凋亡相关基因Bcl-2／Bax表达的影响,探索精索静脉曲张致不育的机理。方法 通过部分结扎左肾静脉建立青春期大鼠实验性精索静脉曲张模型,分别于术后2周、4周、8周取双侧睾丸,用免疫组化SABC法检测Bcl-2／Bax基因表达。结果 随着精索静脉曲张时间的延长,Bcl-2表达呈下降趋势,曲张组比对照组低,左侧睾丸比右侧睾丸低;而Bax表达呈增加趋势,曲张组比对照组高,左侧睾丸比右侧睾丸高。结论 实验性精索静脉曲张可明显改变青春期大鼠睾丸组织生精细胞凋亡相关基因与Bcl-2／Bax表达。     

丝胶对2型糖尿病大鼠睾丸生精细胞PCNA表达的影响

目的:研究丝胶对2型糖尿病大鼠血清睾酮水平和睾丸生精细胞PCNA表达的影响.方法:40只SD大鼠随机分为4组,正常对照组、糖尿病模型组、丝胶治疗组和阳性对照组,每组10只.糖尿病模型组、丝胶治疗组和阳性对照组大鼠均采用链脲佐菌素(Streptozotocin,STZ)连续腹腔注射建立2型糖尿病大鼠模型.待模型成功建立后,模型组大鼠不再作任何处理;丝胶治疗组大鼠给予丝胶灌胃(2.4g/kg/d),阳性对照组大鼠给予二甲双胍(55.33mg/kg/d)灌胃,时间均为35天.采用ELISA方法检测各组大鼠血清睾酮水平、SP免疫组化法检测睾丸生精细胞增殖细胞核抗原(PCNA)的表达.结果:糖尿病模型大鼠血清睾酮水平、睾丸生精细胞PCNA的表达均明显低于正常对照大鼠(P<0.01).丝胶可明显提高糖尿病大鼠血清睾酮水平和睾丸生精细胞PCNA的表达(丝胶治疗组与模型组比较:P<0.01);且丝胶治疗组与阳性对照组比较无明显差别(P>0.05).结论:丝胶可显著提高2型糖尿病大鼠睾酮的合成及睾丸生精细胞PCNA的表达,明显改善2型糖尿病大鼠的生精功能,且作用与二甲双胍相当.     

逐淤化痰汤对脑出血大鼠细胞凋亡及Bcl-2、Bax蛋白表达的影响

目的 探讨逐淤化痰汤对脑出血大鼠血肿周围脑组织细胞凋亡及Bel-2、Bax蛋白表达的影响.方法 90只SD大鼠随机分为逐淤化痰汤组、脑出血组和假手术组,每组30只.用尾状核注射自体血法建立脑出血模型;在不同时间点以Hoechst法检测神经细胞凋亡数及免疫组化法检测Bcl-2、Bax蛋白表达的变化.结果 出血组脑组织细胞凋亡数和Bcl-2、Bax蛋白表达水平均明显高于假手术组(P<0.01);与出血组相比,逐淤化痰汤组细胞凋亡数与Bax蛋白表达水平均下降(P<0.05或P<0.01),而Bcl-2蛋白表达水平显著增高(P<0.05或P<0.01).结论 逐淤化痰汤可抑制出血后神经细胞凋亡,此作用可能与其上调Bcl-2和下调Bax蛋白表达水平有关.     

川芎嗪对早期糖尿病大鼠胸主动脉PCNA c-myc Bc1-2 Bax表达的影响

目的:探讨川芎嗪对早期糖尿病大鼠胸主动脉PCNA、c-myc、Bc1-2、Bax表达的影响.方法:用链脲佐菌素大剂量单次腹腔注射法造成大鼠糖尿病模型.实验分为4组:正常组、糖尿病模型组、川芎嗪低剂量组及高剂量组.正常组和模型组每天腹腔注射注射用水,川芎嗪低、高剂量组分别用40m9/k9、80m9/k9的量腹腔注射,用药8周后.处死大鼠.分离胸主动脉.作PCNA的免疫组化、c-myc、Bc1-2、Bax原位杂交检测,分析阳性细胞表达率.结果:糖尿病模型组、川芎嗪低、高剂量组的PCNA、c-myc、Bc1-2、Bax表达高于正常组(P<0.01),川芎嗪低、高剂量组PCNA表达低于模型组(P<0.01).川芎嗪低、高剂量组的c_myc、Bc1-2的表达低于模型组(P<0.01),Bax(P<0.05)的表达高于模型组.结论:在糖尿病早期川芎嗪可以通过抑削PCNA、c-myc、Bc1-2的表达,增加Bax的表达,抑制血管平滑肌细胞的增殖,促进其凋亡.     

甲醛对小鼠生精细胞Bcl-2、Bax蛋白表达及超微结构改变的影响

目的:研究甲醛对小鼠睾丸生精细胞Bcl-2、Bax蛋白表达及超微结构的改变.方法:取24只雄性清洁级(ICR)小鼠,随机分为4组,每组6只,用0.2、2、20 mg/kg甲醛腹腔注射,每天一次,连续5 d,第6天用免疫组化法测定小鼠睾丸生精细胞的Bcl-2、Bax蛋白表达率;用电镜观察小鼠睾丸生精细胞超微结构变化.结果:小鼠睾丸生精细胞的Bcl-2蛋白表达率明显低于对照组,差异有显著性(P＜0.05),Bax蛋白表达率明显高于对照组,差异有显著性(P＜0.05);电镜观察结果显示,各浓度甲醛能使生精细胞的细胞核、染色质、线粒体等超微结构发生不同程度的病理改变.结论:甲醛可使小鼠生精细胞Bcl-2和Bax蛋白表达及超微结构发生显著性改变,从而诱导细胞凋亡.     

瓜蒌薤白半夏汤对大鼠缺血再灌注心肌细胞凋亡及Bcl-2、Bax蛋白表达影响

目的 研究瓜萎薤白半夏汤对缺血再灌注损伤大鼠心肌细胞凋亡及Bcl-2、Bax蛋白表达影响.方法 通过结扎大鼠冠状动脉左前降支造成心肌缺血再灌注损伤模型,各组动物至实验时限心肌缺血30min、再灌注90min后,取出心脏.采用TUNEL检测心肌细胞凋亡,免疫组化方法检测心肌Bcl-2、Bax蛋白表达.结果 与假手术组对照,模型组细胞凋亡率及Bax表达水平均明显升高、Bcl-2表达水平降低,组间比较差异有统计学意义(P＜0.01);瓜萎薤白半夏能有效降低Bax表达、升高Bcl-2表达水平,抑制细胞凋亡的发生,与模型组比较,差异有统计学意义(P＜0.01).结论 瓜萎薤白半夏汤可能通过上调Bcl-2、下调Bax蛋白表达而有效抑制心肌缺血再灌注损伤大鼠心肌细胞凋亡的发生.     

淫羊藿总黄酮对痴呆模型大鼠学习记忆功能及Bcl-2、Bax蛋白表达的影响

目的 探讨淫羊藿总黄酮对老年痴呆大鼠行为学及海马Bcl-2、Bax蛋白表达的影响.方法 大鼠海马CAI区微量注射冈田酸,建立AD大鼠模型,淫羊藿总黄酮灌胃,采用Morris水迷宫实验检测行为学,免疫组织化学检测海马Bcl-2、Bax蛋白表达.结果 AD模型组与对照组相比大鼠认知能力明显下降(P<0.01),Bcl-2、Bax蛋白表达增加(P<0.01),淫羊藿总黄酮组与AD模型组相比大鼠认知能力改善(P<0.01),Bcl-2蛋白表达明显增加(P<0.01),Bax蛋白表达明显减少(P<0.01).结论 淫羊藿总黄酮可以通过调节Bcl-2、Bax蛋白表达来抑制细胞凋亡,改善AD大鼠模型的学习记忆能力.     

依达拉奉对脑出血大鼠神经保护作用的实验研究

目的 研究依达拉奉对脑出血后神经功能缺损、细胞凋亡及Bcl-2、Bax表达的影响.方法 应用立体定向技术,将自体不凝血注入大鼠尾状核区制备脑出血模型.110只Wistar雄性大鼠,随机分成4组:正常组、假手术组、ICH对照组、依达拉奉治疗组,后3组分为7个亚组.应用免疫组织化学法及原位细胞凋亡检测脑出血灶周围组织Bcl-2、Bax表达及凋亡细胞.结果 与对照组比较,依达拉奉干预后48～168 h大鼠神经行为学评分明显减少(P＜0.05),ICH对照组及依达拉奉治疗组术后6 h血肿周围皮质原位末端标记(TUNEL)、Bcl-2、Bax阳性细胞明显增加,并持续增多,72 h达到高峰,120 h阳性细胞数下降,各时间点与假手术组比较差异有显著性(P＜0.01).依达拉奉治疗组6～168 h TUNEL、Bax阳性细胞数明显少于同时点ICH对照组(P＜0.01).依达拉奉治疗组术后6～68 h Bcl-2阳性细胞数较同时点ICH对照组明显增加(P＜0.01).Bax蛋白表达与细胞凋亡呈正相关(r=0.865,P＜0.01),Bax/Bcl-2与细胞凋亡呈正相关(r=0.453,P＜0.01). 结论凋亡机制参与了脑出血后继发性损伤的过程,依达拉奉可能通过上调Bcl-2蛋白表达,下调Bax蛋白表达,减轻脑出血后的细胞凋亡,对脑出血后神经损伤起保护作用.     

麝鼠香调控Bcl-2/BaX蛋白表达抑制缺血性大鼠心肌细胞凋亡

目的 研究麝鼠香(Muskrat musk,Mrm)对大鼠心肌缺血(myocardial ischemia,MI)模型心肌细胞凋亡及Bcl-2/Bax蛋白表达的影响.方法 通过结扎大鼠左冠状动脉前降支复制大鼠MI模型.实验动物随机分为6组:假手术组、模型组、阳性对照组、麝鼠香高、中、低(600、300、150mg·kg-1·d-1剂量组).采用原位末端标记(TUNEL)法进行细胞凋亡指数检测;免疫组化法检测Bcl-2、Bax蛋白表达.结果 与模型组比较,麝鼠香高、中剂量组心肌细胞凋亡指数明显降低,Bcl-2蛋白表达水平显著升高,Bax蛋白表达明显降低,Bcl-2/Bax比值升高,差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01).结论 麝鼠香通过调控Bcl-2/Bax蛋白表达,能有效抑制心肌细胞凋亡的发生,对缺血心肌提供保护作用.     

基础理论

051195大鼠睾丸局部热作用对生精细胞Bcl2及Bax蛋白表达的影响/许多…∥生殖与避孕.—2005,25(5).—268～271雄性Sprague Dawley大鼠40只,随机分为热处理组和对照组,热处理组按热处理后0.5d、1d、3d和6d随机分成4个亚组(n=6),每个亚组相应设立对照组(n=4)。应用免疫组织化学方法检测Bcl2和Bax在生精细胞的表达。结果:与对照组相比较,热作用后各组Bcl2阳性细胞表达率及染色阳性细胞Bcl2均显著下降(P<0.01),热作用后各组染色阳性细胞Bax含量均显著增高(P<0.01),除6d组Bax阳性细胞表达率显著下降外(P<0.01),其它各组Bax阳性细胞表达率无…     

精索静脉曲张对青春期大鼠生精细胞HIF-1α、Bcl-2和bax表达的影响

目的 探讨精索静脉曲张(VC)对青春期大鼠生精细胞HIF-1α,Bcl-2和bax的影响.方法 通过部分结扎左肾静脉方法制作左侧精索静脉曲张模型(EV),雄性wistar大鼠36只,随机分为6组,EV持续2周、4周、8周组和相应的接受假手术的对照组(每组6只).于造模成功后2周、4周、8周取实验组及对照组左侧睾丸,并用免疫组化方法检测睾丸组织HIF-1α、Bcl-2和bax的表达,用TUNEL法检测细胞凋亡并计算生精细胞的凋亡指数(AI).结果实验组HIF-1α,bax较对照组表达明显升高(P<0.05),而实验组Bcl-2表达较对照组明显下降(P<0.05).实验组AI较对照组明显升高(P<0.05).结论 精索静脉曲张可致大鼠睾丸组织缺氧,从而诱导睾丸组织细胞调亡增加,影响睾丸生精功能.     

神经生长因子对新生大鼠HIBD后海马区凋亡相关蛋白表达的影响

目的:应用新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)模型,观察神经生长因子对海马区细胞凋亡及相关蛋白Bcl-2和Bax的影响,探讨其神经保护作用的分子生物学机制. 方法:72只大鼠随机分为对照组、HIBD组和NGF治疗组. 应用改良RICE法制作大鼠HIBD模型,TUNEL法检测各组动物海马区细胞凋亡数,免疫组化染色观察Bcl-2, Bax蛋白的表达. 结果:与假手术组相比,新生大鼠HIBD后海马区存在不同程度的细胞凋亡,Bcl-2表达轻度升高,Bax表达明显升高. 与HIBD组比较,NGF治疗后,凋亡细胞减少(P＜0.01),Bcl-2蛋白表达升高(P＜0.01),Bax表达下降(P＜0.01). 结论:HIBD后,新生大鼠海马区细胞存在细胞凋亡,NGF治疗增强Bcl-2表达,减少损伤基因Bax表达,抑制细胞凋亡,具有脑保护作用.     

热应激对大鼠睾丸Bcl-2和Bax表达的影响

目的研究热应激对大鼠睾丸B细胞淋巴瘤/白血病-2(B cell lymphoma/leukemia-2,Bcl-2)和Bcl-2相关X(Bcl-2 associated X,Bax)表达的影响。方法42天龄24只雄性SD大鼠建立单侧隐睾作为热应激处理的模型,随机选取16只大鼠建立左侧隐睾作为热应激处理的模型,其余8只将左侧睾丸还纳入阴囊后关腹作为假手术组。术后第3天和第7天分别采用RT-PCR和免疫组织化学SABC方法检测热应激处理后睾丸Bcl-2、Baxm RNA和蛋白表达的变化。结果与假手术组睾丸相比,热应激后第7天睾丸生精上皮和睾丸间质细胞内Bax mRNA和蛋白表达增高,而Bcl-2 mRNA蛋白在热应激后第3天表达明显降低,差异有显著性(P<0.05)。结论热应激能导致睾丸内Bax表达增高,Bcl-2表达降低,从而促进生精细胞凋亡增加。