Wnt/β-catenin信号通路与肝脏的发育及异常分化

Wnt/β-catenin信号通路在人类生物学的各个方面都发挥着重要作用,该通路在肝脏生物学中的作用也备受关注。Wnt/β-catenin信号通路在肝脏的生长、发育、再生、代谢等方面发挥重要作用,该通路也参与各种肝脏疾病进程,提示Wnt/β-catenin信号通路的正常调控是控制和影响肝脏生命活动的关键,其异常激活与肝脏的病理及肿瘤发生密切相关。本文对该通路与肝脏发育分化及疾病的关系研究作一综述。     

Wnt/β-catenin信号通路相关的牙缺失基因遗传学研究进展

牙缺失是口腔临床最常见的先天性颅面发育异常疾病,由遗传因素或(和)环境因素导致。牙齿发育受多条信号通路调控,其相关基因发生变异可导致牙齿发育异常。其中,Wnt/β-catenin信号通路相关基因缺陷是造成先天性牙缺失的重要原因之一。本文就近年来导致牙缺失的Wnt/β-catenin信号通路关键基因的分子遗传学研究进行综...     

基于Wnt/β-catenin信号通路治疗骨关节炎研究热点及应用前景

文题释义：Wnt信号通路：Wnt是Wingless/Integrated的缩写,由配体蛋白质Wnt和膜蛋白受体结合,激发的一组多下游通道的信号转导的途径,该信号通路在不同的动物物种间极为相似,遗传学上具有高度保守性。通过该途径,细胞表面受体胞内段将活化,将细胞外的信号传递到细胞内。表现为两种信号传导方式,分别是胞间交流(旁分泌)和自体细胞交流(自分泌),经典代表有：Wnt/β-catenin信号通路、平面细胞极性通路(Wnt/PCP通路)和Wnt/Ca²⁺通路。 骨硬化蛋白：由Sost基因编码,是一种分泌型半胱氨酸结蛋白,是Wnt共受体和低蛋白脂蛋白相关受体蛋白5 /低蛋白脂蛋白相关受体蛋白6相关受体的拮抗剂,作用于通路的上游,抑制Wnt 信号通路,从而起到软骨保护作用。背景：Wnt/β-catenin信号通路在骨关节炎的发展中起着重要的作用。 目的：基于Wnt/β-catenin信号通路,对骨关节炎的研究进展做一综述。方法：查阅PubMed、中国知网和万方数据库,以“catenin;wnt;osteoarthritis;arthritis;degenerative;arthritides;deformans;pathway;wnt signaling;signaling pathway;wnt signaling pathways;wnt beta catenin signaling pathway;canonical wnt pathway;canonical wnt;骨关节炎”为检索词,分别组合检索,查找Wnt/β-catenin信号通路治疗骨关节炎的文献,最终纳入74篇文献进行分析。结果与结论：基于Wnt/β-catenin信号通路治疗骨关节炎,主要途径有天然的拮抗剂、小分子抑制剂、激动剂、中草药和药物重新定位等方面。药物作用途径通过激活或者抑制Wnt/β-catenin信号通路,对软骨起到保护作用。通过Wnt/β-catenin信号通路治疗骨关节炎,目前处于实验性研究阶段,但具有较好应用前景。如何精准调控通路,更好的转化应用,有望成为未来研究的热点。ORCID: 0000-0002-9553-7171(贝涛) 中国组织工程研究杂志出版内容重点：组织构建;骨细胞;软骨细胞;细胞培养;成纤维细胞;血管内皮细胞;骨质疏松;组织工程     

Wnt2b/β-catenin/C-myc信号途径在小鼠胚胎心脏中的时空表达

目的 探讨Wnt2b/β-catenin/C-myc信号途径在小鼠胚胎心脏发育中的时空表达.方法正常孕10d、12.5d、15d、17d、18.5d及出生后当天的小鼠胚胎心脏,免疫组织化学、RT-PCR和Western blotting等方法检测Wnt2b、β-catenin及C-myc在小鼠胚胎心脏发育不同时期的表达...     

Wnt/β-catenin信号转导通路与结直肠癌

Wnt/β-catenin信号通路在调控细胞的生长、运动和分化,以及在胚胎发育和肿瘤发生及侵袭转移过程中起重要作用。结直肠癌是一种高发病率高死亡率的恶性肿瘤,近年来的研究进一步阐明Wnt/β-catenin信号转导通路在结直肠癌中所起的作用,并且在实验性临床治疗上取得了一定的进展,多种小分子复合物的发现和基因治疗的尝试给结直肠癌的治疗带来新希望。     

乳腺癌不同分子亚型中Wnt/β-catenin信号传导通路的异常表达

目的检测Wnt信号通路的关键组分β-catenin蛋白在管腔A、管腔B、HER-2过表达、基底细胞样及未分类型(基底细胞样及未分类型统称为三阴型)乳腺癌中的表达及细胞内定位,及其与乳腺癌临床病理参数的关系。方法采用免疫组化Eli Vison两步法检测58例乳腺癌中β-catenin蛋白表达及细胞内定位。结果 (1)管腔A、管腔B、HER-2过表达、基底细胞样及未分类型乳腺癌中β-catenin胞质异常表达阳性率分别为21.1%、50%、60%、100%及60%(三阴型84.6%),差异有显著性(P<0.01)。β-catenin高胞质表达与基底细胞样及三阴型乳腺癌相关(P<0.05)。(2)β-catenin胞质异常表达与组织学分级相关(P<0.01),与淋巴结转移、肿瘤大小、患者年龄无关;与E-cadherin膜表达缺失、Ki-67及CK5/6表达呈正相关(P<0.05),与ER及PR表达呈负相关(P<0.01)。结论乳腺癌中Wnt信号通路的异常与组织学分级、Ki-67及CK5/6表达呈正相关,与ER、PR表达呈负相关。基底细胞样及三阴型分子亚型有更高频率的Wnt信号异常。β-catenin有可能成为基底细胞样及三阴型乳腺癌的治疗靶点。     

抑制Wnt/β-catenin信号通路增加食管癌顺铂化疗敏感性的研究

目的:探讨抑制 Wnt/β-catenin信号通路后食管癌细胞对化疗药物顺铂敏感性的变化.方法:双链SiRNA转染干扰β-catenin基因表达;半定量RT-PCR和Western blot检测基因沉默效果;MTT细胞毒实验检测细胞的生长抑制率.结果:合成的Wnt/β-catenin SiRNA可以显著下调β-catenin mRNA和蛋白的表达水平,对内参对照基因GAPDH没有影响;对照组,SiRNA干扰组,顺铂处理组,SiRNA干扰+顺铂处理组的细胞存活率分别为(100±6.8)％、(87.3±5.2)％、(66.4±4.4)％和(41.8±3.64)％.顺铂处理组与SiRNA干扰+顺铂处理组比较细胞的存活率降低增加了大约30％.结论:干扰β-catenin的表达能显著增强食管癌细胞对化疗药物顺铂的敏感性,为减少化疗药物顺铂用量和其耐药的克服带来了曙光,也为食管癌等恶性肿瘤的化学治疗开辟新途径提供了理论依据.     

Wnt/β-catenin信号通路与大鼠腹膜纤维化-EMT相关研究

目的 探讨Wnt/β-catenin信号通路对大鼠腹膜间皮细胞上皮-间充质转化（EMT）进程的影响作用。方法 选择SPF级雄性Wistar大鼠20只,体质量180～200 g。随机分为对照组、模型组。采用5/6肾切除法+高糖腹膜透析液+脂多糖（LPS）法制作腹膜纤维化模型;大鼠于4周末次腹膜透析后,留取腹膜组织,采用苏木精-伊红（HE）染色观察腹膜组织形态学变化并测量腹膜组织厚度;采用实时定量聚合酶链式反应（PCR）、Western blot和免疫组织化学等方法检测腹膜组织中E-钙黏蛋白（E-cadherin）、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、Collagen-Ⅰ、β-catenin、Wnt-1和淋巴增强因子1(LEF1)的蛋白和mRNA表达。结果 与对照组相比,模型组大鼠腹膜组织明显增厚。模型组大鼠腹膜组织中E-cadherin、α-SMA、Collagen-Ⅰ、β-catenin、Wnt-1和LEF1蛋白与对照组比较明显升高（0.21±0.13 vs 1.33±0.41,0.27±0.20 vs 1.22±0.06,0.26±0.08 vs 1.08±0.13,0.21±0.11...     

Wnt/β-catenin信号转导途径与宫颈癌

信号转导通路异常在肿瘤发生、发展过程中发挥着作用,其中Wnt/β-catenin信号转导通路在调控细胞的生长和分化、胚胎发育及肿瘤的发生发展起重要作用.Wnt/β-catenin信号转导通路异常与宫颈癌的发病机制密切相关.     

Wnt/β-catenin信号途径抑制Raw264.7分化

目的 了解Wnt/β-catenin信号途径对小鼠单核/巨噬细胞Raw264.7的分化调控.方法 将细胞分为4组:阴性对照组(即空Raw264.7组)、实验对照组(即感染Ad-GFP组)、阳性对照组(即50 ng/mL RANKL诱导组)和实验组(即感染Ad-β-catenin组).分别给予上述4组处理因素后常规细胞培养3、6和9d提取细胞总RNA,荧光定量real-time (RT-PCR)检测核因子受体(RANK)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)、组织蛋白酶K(Cathepsin K)及金属蛋白酶-9(MMP-9)mRNA的表达,再于同样处理因素培养6d通过酒石酸抗酸性磷酸酶(TRAP)染色观察Raw264.7的分化情况;Western blot检测TRAP、Cathepsin K蛋白的表达.结果 RT-PCR检测Ad-β-catenin组能下调RANK、TRAP、Cathepsin K和MMP-9 mRNA的表达;TRAP染色显示50 ng/mL RANKL诱导组能成功诱导Raw264.7成多核细胞,空白组和Ad-GFP组有个别多核细胞,Ad-β-catenin组为单核细胞;Western blot检测显示Ad-β-catenin组TRAP、Cathepsin K蛋白表达降低(P＜0.05).结论 Wnt/β-catenin信号途径能抑制RAW264.7分化成熟为破骨细胞.     

中药独活激活Wnt/β-catenin信号通路对骨质疏松大鼠的作用

目的探讨中药独活对去卵巢所致骨质疏松SD大鼠的作用及其可能机制。方法将50只SD大鼠,体重200～250 g,随机分为假手术组、模型组、独活低剂量组(0.9 g/kg)、独活高剂量组(1.8 g/kg)、阳性药组(200 mg/kg依普黄酮),每组10只。利用双侧卵巢切除法制备大鼠骨质疏松模型,手术模型制备成功后,连续灌胃给药60d。测定股骨密度、骨灰重/干重百分比;测定大鼠血清骨钙素(OC)、骨碱性磷酸酶(ALP)、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)、血清钙、无机磷的水平。免疫组化法测定股骨中骨保护素(OPG)、破骨细胞分化因子(RANKL)蛋白表达;Western blot法检测大鼠骨组织中β-catenin、p-β-catenin、GSK-3β、p-GSK-3β蛋白表达。结果独活高剂量和阳性药均能够增加大鼠股骨密度、骨灰重/干重,降低BGP、ALP及TRAP的水平,并增加血清钙的水平,对无机磷的表达无显著性影响,增加骨组织中OPG蛋白表达水平,降低RANKL蛋白表达水平,增加β-catenin、p-GSK-3β蛋白表达水平,降低p-β-catenin、GSK-3β蛋白表达。结论独活高剂量(1.8 mg/kg)对去卵巢导致的骨质疏松大鼠的治疗作用,与激活Wnt/β-catenin信号通路促进骨形成相关。     

Wnt/β-catenin信号通路在实验性大鼠肝癌形成过程中的作用

目的:探讨Wnt/β-catenin信号转导通路与肿瘤发生的关系,为肝癌的防治提供新的思路。方法:选取Wnt/β-catenin信号转导通路中上下游关键因子wnt1、β-catenin、APC、cyclinD1以及c-myc等,应用RT-PCR法观察它们在正常肝脏,不典型增生肝脏和肝癌组织中的转录水平。用免疫组化染色法研究β-catenin、APC和cyclinD1等3个因子有无表达。结果:在正常肝脏中,用RT-PCR未检测到wnt1、cyc-linD1以及c-myc的mRNA转录,免疫组化染色也只观察到β-catenin在细胞膜处有比较弱的表达。诱癌14周后,在发生不典型增生的肝组织中,检测到β-catenin、APC和cyclinD13个基因的转录。通过免疫组化染色也观察到β-catenin蛋白在胞质中的积累,APC和cyclinD1在部分细胞中出现表达。诱癌16周后,在肝癌组织中,除wnt1mRNA外,其他几个因子的mRNA都有转录,免疫组化也印证了上述各个发生转录的因子在蛋白水平都有不同程度的表达。结论:Wnt/β-catenin信号转导通路在大鼠的肝癌形成过程中被激活,其可能是实验性肝癌发生的原因之一。     

Wnt/β-catenin信号通路在牙损伤修复中的作用

目的 通过构建牙本质-牙髓损伤小鼠模型,探讨Wnt/β-catenin信号在其修复中的作用。方法 选择雌性昆明小鼠40只,鼠龄6～8周,体质量18～22 g。将其随机分为Control组、Model组、Li Cl组和DKK1组,每组10只。Control组常规饲养至实验结束,Model组、LiCl组和DKK1组均建立牙本质-牙髓损伤模型并通过牙周膜分别注射0.9%氯化钠溶液（生理盐水）、LiCl（激活Wnt/β-catenin信号通路）和DKK1（抑制Wnt/β-catenin信号通路）干预。损伤后7 d处死小鼠,通过苏木精-伊红（HE）染色,从形态学上观察牙损伤后的情况;Western blot和实时定量聚合酶链式反应（PCR）分别检测Wnt10a、胞内-β连锁蛋白（β-catenin）、支架蛋白Axin2及牙本质涎磷蛋白（DSPP）的mRNA和蛋白水平改变。结果实验成功构建了牙本质-牙髓损伤小鼠模型。使用LiCl和DKK1进行干预,HE染色结果显示LiCl组损伤部位得到良好的修复,Model组的牙本质、牙髓损伤修复不明显,DKK1组的损伤部位则几乎未修复。Western blot和...     

莪术提取物介导Wnt/β-catenin信号通路对人肝癌Hep-G2细胞的影响*

目的：探讨莪术提取物介导Wnt/β-catenin 信号通路对肝癌Hep-G2 细胞的影响。方法：将浓度为20、50、 100 μg/mL 的β- 榄香烯培养液加入Hep-G2 细胞中,分别设为20 μg/mL 组、50 μg/mL 组和100 μg/mL 组,以不 加β- 榄香烯培养液作为对照组,RT-PCR、免疫印迹检测Hep-G2 细胞Wnt1、β-catenin mRNA和蛋白水平,采 用Transwell 法、MTT法检测Hep-G2 细胞的迁移和增殖情况,流式细胞仪检测Hep-G2 细胞凋亡率。结果：对照 组Wnt1、β-catenin mRNA水平均显著高于其他3 个治疗组,100 μg/mL 组Wnt1、β-catenin mRNA水平显著低于 20 μg/mL组、50 μg/mL组。对照组Wnt1、β-catenin蛋白表达高于其他3个治疗组, 100 μg/mL组Wnt1、β-catenin 蛋白表达显著低于20 μg/mL组、50 μg/mL组。对照组Hep-G2细胞凋亡率显著低于其他3个治疗组,100 μg/mL组 Hep-G2细胞凋亡率显著高于20 μg/mL组、50 μg/mL组。100 μg/mL组Hep-G2细胞迁移细胞数最低,显著低于其他3 组。对照组Hep-G2细胞增殖能力显著高于其他3 个治疗组,100 μg/mL组Hep-G2细胞增殖能力显著低于20 μg/mL组、 50 μg/mL组。结论：莪术提取物通过抑制Wnt/β-catenin信号通路活性,抑制肝癌细胞增殖和迁移。     

槲皮素通过Wnt3a/β-catenin信号通路改善小鼠压力负荷性心力衰竭

目的 探讨槲皮素(Quercetin)对小鼠压力负荷性心力衰竭(HF)的影响及作用机制。方法 30只SPF级雄性C57BL/6小鼠随机分成假手术组(Sham)、心力衰竭组(HF)和HF+Quercetin组,采用主动脉弓缩窄术(TAC)构建小鼠压力负荷性HF,术后腹腔注射给予Quercetin, 2次/日,连续6周。小动物超声检测小鼠心功能;称量心脏重量并计算心脏重量指数;HE和Masson染色观察小鼠心脏组织病理学改变和纤维化程度;Western blot检测小鼠心肌组织Bax、Bcl-2、cleaved caspase-3、Wnt3a和β-catenin蛋白的表达。结果 Quercetin显著降低HF小鼠心脏重量和心脏体重比。超声心动图显示Quercetin显著改善HF小鼠的心功能,并降低升主动脉内径。Quercetin治疗改善HF小鼠心脏病理改变和纤维化程度;降低HF小鼠心脏组织Bax、cleaved caspase-3、Wnt3a和β-catenin蛋白的表达,升高Bcl-2的表达。结论 Quercetin通过抑制Wnt3a/βcatenin信号通路对HF小鼠心肌提供保护作用。     

LRP8介导Wnt/β-catenin信号通路促进宫颈癌细胞增殖、迁移和侵袭

目的 探究LRP8在宫颈癌组织中的表达与临床病理特征及预后的相关性,并探讨LRP8对宫颈癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及机制。方法 免疫组化检测LRP8在宫颈癌及癌旁组织中表达情况;根据免疫组化结果将30例宫颈癌组织分为LRP8低表达组和LRP8高表达组,分析LRP8表达与宫颈癌患者年龄、病理学TNM分期、临床分期和组织学分级间相关性;通过GEPIA在线数据库分析LRP8表达与宫颈癌患者总生存期相关性;将LRP8敲减或过表达质粒转染宫颈癌细胞,Western blot检测细胞LRP8表达,CCK-8检测细胞增殖活力,Transwell检测细胞迁移和侵袭能力,Western blot检测细胞β-catenin表达。结果 LRP8在宫颈癌组织中表达上调。LRP8高表达与宫颈癌患者较高的病理学T分期、病理学N分期和临床分期及较低的总生存期相关,与患者年龄、病理学M分期和组织学分级无关。敲减LRP8降低宫颈癌细胞增殖、迁移和侵袭能力及β-catenin蛋白表达水平;反之,过表达LRP8增加宫颈癌细胞增殖、迁移和侵袭能力及β-catenin蛋白表达水平。结论 LRP8在宫颈癌组织中高表达,其高表达...     

哈巴苷通过Wnt/β-catenin通路改善大鼠脑缺血再灌注损伤

目的 探究哈巴苷干预大鼠脑缺血再灌注损伤的作用及其对Wnt/β-catenin信号通路的影响。方法 18只雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组和哈巴苷干预组,每组6只,对各组大鼠进行神经功能评估。再灌注7d后,TTC染色法检测大鼠脑梗死体积;干湿重法检测大鼠脑组织含水量;TUNEL染色检测大鼠脑组织神经细胞凋亡;荧光探针检测大鼠脑组织神经细胞ROS水平;Western blot检测大鼠脑组织β-catenin和active β-catenin表达水平。结果 与对照组相比,模型组大鼠神经功能评分下降,脑梗死体积和脑含水量增加。加入哈巴苷干预后,大鼠神经功能评分提高,脑梗死体积减小,脑水肿减轻。与对照组相比,模型组大鼠神经细胞凋亡率增加,活性氧水平增加;加入哈巴苷干预后,大鼠神经细胞凋亡率下降,活性氧释放减少。与对照组相比,模型组大鼠β-catenin和active β-catenin表达水平提高,加入哈巴苷后其表达水平进一步升高,Wnt/β-catenin信号通路被激活。结论 哈巴苷能够通过激活Wnt/β-catenin信号通路减轻缺血再灌注导致的大鼠脑损伤。     

糖原合酶激酶3β抑制剂TWS119激活NK细胞Wnt/β-catenin信号通路促进CD62L表达

目的探讨糖原合酶激酶3β抑制剂4,6-二取代吡咯并嘧啶(TWS119)调控Wnt/β-catenin信号通路对NK细胞增殖和表型的影响。方法分离健康人外周血单个核细胞(PBMC),加入到含重组人IL-2和人AB血清的NK细胞完全培养基中诱导培养,获得NK细胞。(0~8.0)μmol/L TWS119处理NK细胞72 h,Western blot法检测NK细胞β-catenin的表达、CCK-8法测定NK细胞增殖能力;流式细胞术检测各组NK细胞CD107a和CD62L(L-选择素)的表达。结果培养10 d后的NK细胞纯度达到(61.76±3.74)%;TWS119能够活化NK细胞Wnt/β-catenin信号通路。(0~2.0)μmol/L TWS119处理NK细胞,能显著促进NK细胞增殖,浓度大于2.0μmol/L时增殖率逐渐降低。(0~8.0)μmol/L TWS119处理NK细胞,CD62L的阳性表达率逐渐升高,且呈剂量依赖性;与之相反,CD107a阳性表达率逐渐下降。结论 TWS119活化NK细胞Wnt/β-catenin信号通路可获得早期成熟的CD62L+NK细胞。     

外源性神经生长因子对APP/PS1转基因小鼠Wnt/β-catenin信号通路的调节

目的:探讨外源性神经生长因子(NGF)对APP/PS1转基因小鼠Wnt/β-catenin信号通路的调节。方法:鼻腔给予小鼠NGF治疗14周,应用免疫组织化学检测小鼠脑内β淀粉样蛋白(Aβ)老年斑的分布,应用免疫印迹检测小鼠脑内糖原合酶激酶3β(GSK3β)、p-GSK3β、β-连环蛋白(β-catenin)和p-β-catenin的表达。结果:Aβ免疫组织化学显色结果显示,与对照组小鼠大脑内的Aβ老年斑相比较,NGF治疗组转基因小鼠大脑内的Aβ老年斑数量减少了30.22%,沉积减少了35.85%,差异有统计学意义。免疫印迹结果显示,外源性NGF减少APP/PS1转基因小鼠脑内GSK3β的表达,增加β-catenin的表达。结论:外源性NGF可能通过抑制GSK3β的活性和增加β-catenin的活性,激活Wnt/β-catenin信号通路,对神经元起保护作用。