HSP表达在炎症反应综合征中的作用与意义

热休克蛋白(HSPs)是生物体面临不利生存环境中快速表达的一类保护性蛋白家族，具有修复和维护细胞功能的作用。在炎症反应综合征(SIRs)病理过程中，机体细胞均有HSP表达，并通过分子伴侣、抗凋亡及抗炎机制发挥保护作用。本文对不同组织细胞HSP表达对SIRS发展及转归的意义作一综述。     

蛋白质氧位N-乙酰葡萄糖胺修饰对脓毒症大鼠肾脏的保护作用

目的 探讨应用谷氨酰胺(Gln)增加蛋白质氧位N-乙酰葡萄糖胺(O-linked N-acetylglucosamine,O-GlcNAc)修饰对脓毒症大鼠肾脏保护中的作用.方法 雄性SD大鼠,体重180 g～240 g,完全随机法分为5组:对照组(S组,行开关腹手术,n=12);脓毒症组[C组,行盲肠结扎穿孔(cecal ligation and puncture,CLP)术,n=16];Gln治疗组(G组,行CLP术,术后即刻Gln 0.75 g/kg微量泵注1h,n=16);槲戍素+Gln干预组(Q组,行CLP术,术毕时腹腔注射槲皮素0.4 g/kg,继予Gln微量泵注,n=16);四氧嘧啶+Gln干预组(A组,行CLP术,术毕时腹腔注射四氧嘧啶90 mg/kg后,继予Gln微量泵注,n=16).维持麻醉并记录CLP术后16 h血压.24h测动脉血气分析,血浆肌酐(Cr)、尿液肾损伤分子-1(kidney injury molecule-1,KIM-1)含量,肾组织匀浆热休克蛋白70 (HSP70)、O-GlcNAc表达水平.结果 CLP术后16h,C组平均动脉压(MAP)下降幅度超过基础值30％,G组、Q组、A组大鼠MAP下降明显,24h动脉血乳酸浓度C组、G组、Q组、A组较S组明显升高(P＜O.05).CLP术后24 h,C组血Cr为(57.4±4.9) mmol/L,尿KIM-1为(66.3±8.8) ng/L,较S组的血Cr(35.7±5.9) mmol/L、尿KIM-1 (47.0±3.7) ng/L明显升高,G组血Cr为(42.2±5.4)mmol/L,尿KIM-1为(53.7±3.0) ng/L,较C组明显降低,Q、A两组血Cr分别为(51.4±2.9)、(57.4±2.6)mmol/L,尿KIM-1分别为(70.9±17.7)、(75.3±10.9) ng/L,较G组明显升高,差异均有统计学意义(P＜0.05).肾组织蛋白质O-GlcNAc修饰水平G组较C组明显升高,A组较G组明显降低(P＜0.05);肾组织HSP70表达C组较S组明显升高,G组较C组明显升高,Q、A组较G组明显下降(P＜0.05).结论 Gln通过增加细胞蛋白质O-GlcNAc修饰调节炎症反应,减轻脓毒症大鼠的肾损伤.     

硫化氢在肾脏保护作用机制中的研究进展

硫化氢(H 2S)是重要的气体递质之一,与一氧化碳(CO)和一氧化氮(NO)一样在体内发挥着重要的生物学功能。研究表明,H 2S在肾脏发挥了重要的生理功能,疾病状态下H 2S可参与病理的发生发展并通过不同调控方式发挥抗感染、抗氧化应激和抗纤维化作用来保护肾脏细胞损伤、凋亡,从而保护肾功能。...     

热休克蛋白70表达对未成熟心肌和心肌间质的保护作用

目的 观察热休克蛋白70(HSP70)对未成熟心肌和心肌间质的保护作用.方法 健康新生长耳大白兔30只随机分为5组.对照组:腹腔注射生理盐水0.4 ml 24 h后取离体心脏,建立Langendorff离体心脏灌注模型;E4h、E12h、E24h、E48h组,腹腔注射去甲肾上腺素,4、12、24、48 h后分别取离体心脏,方法同对照组.测定心肌细胞中HSPT0含量、血流动力学指标、心肌含水量(MWC)、心肌肌酸激酶(CK)和乳酸脱氢酶(LDH)漏出率、三磷酸腺苷(ATP)含量、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量、心肌组织羟脯氨酸(HP)含量、内皮素(ET)含量、心肌细胞内Ca2+含量、心肌线粒体Ca2+-ATPase活性及其Ca2+含量、心肌线粒体合成ATP能力[ATP]m,心肌超微结构.结果 E24h组与其他各组比较,HSPT0含量明显增高(P＜0.01),MWC(72.48±1.36)低于其他各组(P＜0.05),ATP含量(11.64±1.87)、SOD活性(235.83±12.30)、心肌线粒体Ca2+-AT-Pase活性(18.46±1.95)、[ATP]m(106.26±9.42),HP含量(6.45±1.53)优于其他各组(P＜0.01),MDA含量(1.17±0.12)、CK(57.38±4.75),LDH漏出率(37.28±3.26)、心肌细胞内Ca2+含量(2.54±0.34)、心肌线粒体Ca2+含量(38.37±3.61)、ET含量(76.84±10.37)低于其他各组(P＜0.01),心肌超微结构损伤较其他各组明显减轻.结论 腹腔注射去甲肾上腺素24 h后可诱导未成熟心肌HSP70高表达,一定量的HSP70表达可明显减轻未成熟心肌和心肌间质的缺血再灌注损伤.     

乳腺癌细胞抗原肽修饰树突状细胞的抗肿瘤作用

目的探讨经重组乳腺癌热休克蛋白70(heat shock protein 70,HSP70)抗原肽复合物修饰后的树突状细胞(dendritic cell,DC)的抗肿瘤作用。方法冻融法获取BALB/C小鼠4T1乳腺癌细胞抗原肽,体外重组HSP70-4T1抗原肽复合物。检测BALB/C小鼠DC经该复合物修饰成熟后IL-12和TNFa的分泌。检测修饰后成熟的DC对BALB/C小鼠脾淋巴细胞的增殖作用及增殖后淋巴细胞对4T1细胞的杀伤功能。BALB/C小鼠注射修饰成熟DC,观察该方法对4T1乳腺癌株的抑制作用。结果0.75μg抗原肽与HSP70结合,可使1×10~6DC成熟;成熟后的5×10~3DC可激活2×10~6小鼠脾淋巴细胞。与直接用HSP70-4T1复合物刺激脾细胞比较,DC途径抗原肽的用量减少40倍。增殖后淋巴细胞对4T1细胞杀伤率为(60.24±6.23)%。接种该DC能有效地抑制肿瘤的生长。结论重组乳腺癌热休克蛋白70-抗原肽复合物能够诱导DC成熟,成熟后的DC能激活淋巴细胞并抑制肿瘤生长。该途径能有效降低肿瘤免疫治疗时抗原肽的使用剂量。     

缺血预处理对鼠肺缺血再灌注损伤的保护作用及其机制

目的探讨缺血预处理（IP）对肺脏缺血再灌注损伤（IRI）的保护机制。方法30只SD大鼠，随机分为预处理组（I组）、对照组（C组）和假手术组（S组），每组10只。I组和C组大鼠常规开胸后建立左上肺缺血再灌注模型，均遭受了IRI，但I组在缺血再灌注前给予IP干预，对以上样本的总蛋白质进行二维凝胶电泳分离，差异表达的蛋白质点进行基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱分析鉴定。S组大鼠开胸后不予特殊处理。免疫印迹法比较三组样本中热休克蛋白27（HSP27）的表达差异。结果建立了分辨率较高、重复性较好的鼠肺IRI双向凝胶电泳参考图谱，45个蛋白质点表达存在差异，其中30个得到了鉴定，HSP27在IP的第一窗口期表达上调。结论HSP27在IP对肺脏IRI的保护机制中起重要作用。     

西地那非的心血管保护作用

在过去的18年中，西地那非从一种颇具潜力的抗心绞痛药物转变为勃起功能障碍的一线治疗药物，最近又发现它还是一种口服有效的治疗肺动脉高压的药物。Kukreja RC对此进行了一项综述[Br J Pharmacol，2007，150（5）：538—540]，指出新近研究表明西地那非具有很强的心血管保护作用，它能够抑制缺血再灌注损伤、改善和逆转阿霉素诱导的心肌病和长期NOS抑制诱导的高血压病。近来的基础和临床研究已经证实，西地那非和其他的5型磷酸二酯酶抑制剂，如伐地那非和他达拉非，在原发性高血压、血管内皮功能障碍、缺血再灌注损伤、心肌梗死的治疗以及促进心室重塑等方面具有重要的保护作用。     

褪黑素对重症急性胰腺炎的保护作用

目的 探讨褪黑素(melatonin,MT)对重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)大鼠胰腺组织中Smac/DIABLO、XIAP mRNA表达的影响及可能机制.方法 54只SD大鼠随机分成假手术(SO)组、重症急性胰腺炎(SAP)组以及MT干预SAP(MS)组,每组18只.通过胰胆管逆行注射3.5%脱氧胆酸钠方法 制备大鼠SAP模型,MS组制造模型前30 min腹腔注射MT.收集各模型组3 h、6 h、12 h标本,观察胰腺组织,检测胰腺组织细胞凋亡.实时定量(real-time)PCR分析胰腺组织中Smac/DIABLO、XIAP mRNA的表达.结果 SAP组和MS组胰腺组织损伤较SO组严重.与SAP组相比,在3 h、6 h、12 h各时点MS组胰腺病理损伤明显减轻,细胞凋亡指数下降(P<0.05),胰腺组织中Smac/DIABLO mRNA表达下调(P<0.05),XIAP mRNA表达上调(P<0.05).结论 MT能明显改善SAP胰腺组织损伤,对急性胰腺炎有保护作用;这可能与调节Smac/DIABLO、XIAPmRNA的表达有关.     

热休克蛋白70对H9C2细胞免受氧糖剥夺损伤的保护作用及分子机制

目的:观察热休克蛋白70(HSP70)在对抗氧糖剥夺中的作用和发挥抗凋亡中的分子机制,寻找HSP70发挥作用的靶点。方法:应用转染的技术将质粒和小干扰RNA(siRNA)转染入H9C2细胞内来过表达和沉默HSP70在细胞内的表达,将细胞分为对照组(control组)、缺氧复氧组(H/R组)、过表达组(H/R+HSP70...     

O-GlcNAc修饰在谷氨酰胺减轻脓毒症大鼠脑损伤中的作用

目的 评价O-GlcNAc修饰在谷氨酰胺减轻脓毒症大鼠脑损伤中的作用.方法 健康清洁级4周龄SD雄性大鼠60只,体重180-240 g,采用随机数字表法,将其随机分为4组:假手术组(S组,n=12)、脓毒症组(CLP组,n=16)、谷氨酰胺组(G组,n=16)及谷氨酰胺+四氧嘧啶组(G+A组,n=1 6).采用盲肠结扎穿孔术(CLP)建立大鼠脓毒症模型,G组术毕静脉注射谷氨酰胺0.75 g/kg,G+A组术毕静脉注射谷氨酰胺0.75 g/kg及腹腔注射四氧嘧啶90 mg/kg,CLP组和S组注射等容量生理盐水.术后24h时记录神经反射评分,断颈处死,测定脑组织含水量,采用Western-blot法测定脑组 织O-GlcNAc表达水平,观察脑组织病理学结果.结果 与S组比较,CLP组、G组及G+A组大鼠脑组织含水量、神经反射评分升高(P＜0.05);与CLP组比较,G组和G+A组大鼠脑组织含水量、神经反射评分降低,G组大鼠脑组织蛋白质O-GlcNAc表达上调(P＜0.05);与G组比较,G+A组大鼠脑组织含水量、神经反射评分升高,脑组织蛋白质O-GlcNAc表达下调(P＜0.05);S组、CLP组及G+A组大鼠间脑组织蛋白质O-GlcNAc表达差异无统计学意义(P＞0.05).G组病理学损伤较CLP组及G+A组轻.结论 O-GlcNAc修饰参与了谷氨酰胺减轻脓毒症大鼠脑损伤的过程.     

胃癌组织中HSP60和HSP70的表达及其意义

目的研究胃癌组织中HSP60和HSP70的表达及其意义.方法将胃癌组织石蜡包埋切片,以ABC免疫组织化学法染色进行观察.结果50例胃癌HSP60和HSP70阳性率分别为56%和64%,高分化和未发生淋巴结转移的胃癌HSP60和HSP70阳性率均明显地低于未分化和有淋巴结转移的胃癌.结论HSP60和HSP70的表达可能与胃癌临床病理特征、生物学行为和预后有较密切的关系,两者可能是反映胃癌生物学行为和预后的重要标记物.     

谷氨酰胺诱导热休克蛋白在感染性休克中的作用

热休克蛋白(heatshockproteins,HSPs)为一组高度保守的蛋白质,因其独特的生物学特性及功能,在生物体内广泛参与了多种复杂的功能活动,人们将其生物活性比喻为“瑞士军刀”[1]。已有研究证明HSPs对感染性休克动物具有保护作用,但是诱导热休克蛋白产生的因素多数对机体有害,体内外实验研究发现Gln能诱导动物的热休克反应,特异性增强起主要保护作用的HSP72和HSP27的表达,从而改善感染性休克动物的生存率。本文对应用Gln诱导体内HSPs表达,从而提高机体对感染性休克的防御作用及可能机制作一综述。1谷氨酰胺对热休克蛋白表达的影响Gln是…     

热休克蛋白在子宫颈癌中的表达及其意义

目的探讨热休克蛋白(heat shock proteins,HSPs)在子宫颈癌组织中的表达情况及意义。方法采用PT—PCRH和免疫印迹法检测HSPs在子宫颈癌组织及正常子宫组织中的蛋白和mRNA的表达水平。结果癌组织中HSP70、HSP86及αB晶状体蛋白表达较正常组织明显增多(P<0.05),且HSP70表达最高(P<0.01)。结论 HSP70在子宫颈癌组织中表达显著增高。     

维拉帕米和超氧化物歧化酶对体外冲击波肾损伤的保护作用

目的：探讨钙离子拮抗剂维拉帕米和自由基清除剂对体外冲击波（ESW）肾损伤的保护作用。方法：120只SD大鼠单肾模型随机分为6组，在单用维拉帕米和（或）联用不同剂量超氧化物歧化酶（SOD）后以JDPN-V型碎石机14kV对鼠肾冲击1000次，观察大鼠肾组织内皮素（ET）和尿ET、N-乙酰-葡萄糖苷酶（NAG）、丙二醛（MDA）水平和Ccr变化及肾脏组织学和超微结构改变。结果：治疗组尿NAG、MDA的升高幅度和Ccr降低幅度均明显小于对照组，组织损伤程度较轻，恢复较快；SOD2万U/kg和4万U/kg组生化指标和病理改变差别无显著性意义；维拉帕米组肾组织和尿ET升高幅度下降，联用组效果好。结论：钙离子拮抗剂可减轻脂质过氧化作用，减少ET释放，对ESW肾损伤有显著的保护作用，与SOD合用效果更佳。     

热休克蛋白在肝细胞癌形成、增殖、复发、转移及抗肿瘤免疫中的作用研究

【摘要】 热休克蛋白(heat shock proteins, HSPs)是一类结构高度保守的蛋白质,主要参与蛋白的转运、折叠、维持蛋白质自身稳定及免疫应答。大量研究表明,HSPs中多个成员如HSP27、HSP70及HSP90,在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma, HCC)中呈过表达。本文就HSPs在肝细胞癌的形成、增殖、复发、转移及抗肿瘤免疫的作用进行综述。     

大鼠肝脏缺血再灌注过程中热休克蛋白的表达研究

用肝组织内合成的热休克蛋白７２（Ｈｅａｔｓｈｏｃｋｐｒｏｔｅｉｎ７２,ＨＳＰ７２为指标,探讨门静脉缺血再灌注对肝脏的损害作用。方法Ｗｉｓｔａｒ系雄性大鼠,随机分成两组：甲组：肝门阻断（Ｐｒｉｎｇｌｅ法）１５分钟术后１、３、４８小时检测血清生化酶ＧＯＴ、ＧＰＴ、ＬＤＨ水平（ＩＵ／Ｌ）及肝组织ＡＴＰ浓度（μｍｏｌ／ｇ）。术后４８小时用Ｗｅｓｔｅｎｂｌｏｔｉｎｇ法测定肝组织内ＨＳＰ７２水平。结果甲组肝组     

热休克蛋白70在人前列腺癌细胞株PC-3m和LNCaP中的表达及其意义

目的　探讨前列腺癌雄激素不敏感性的发生。方法　用细胞免疫化学方法和流式细胞术定位、定量分析体外培养的人前列腺癌雄激素不敏感细胞株PC-3m和雄激素敏感细胞株LNCaP中主要热休克蛋白70(HSP70)的表达。结果　2种不同生物学特性的细胞株表面及细胞内均有HSP70表达,但PC-3m细胞膜及细胞内的阳性染色程度高于LNCaP;流式细胞术测定的PC-3m细胞膜及细胞内的表达量（17.61±4.20,69.54±10.50）分别高于LNCaP（7.42±1.70,21.83±6.30）,两者比较差异均有显著性(P＜0.05)。结论　正常状态下雄激素不敏感前列腺癌细胞株过表达HSP70,可能与雄激素不敏感性的发生、发展有关。     

热休克预处理对严重烧伤大鼠胃黏膜的保护作用及机制

目的观察热休克预处理（HS）对严重烧伤大鼠胃黏膜热休克蛋白（HSP）60、HSP70表达及线粒体超氧化物歧化酶（SOD）、细胞色素氧化酶（CCO）活性的影响，探讨HS对严重烧伤大鼠胃黏膜的保护作用及机制。方法将Wistar大鼠随机分为烧伤组（40只）：烧伤后即制作急性胃黏膜损伤模型；另取8只大鼠不致伤作为空白对照。HS组（40只）：于烧伤前20h行HS，另取8只大鼠仅行HS不烧伤，作为实验对照。放线菌素D组（40只）：在HS前30min静脉注射放线菌素D0．1mg／kg，随后的处理同HS组；另取8只大鼠只注射放线菌素D不烧伤，作为实验对照。于伤后3、6、12、24、48h处死各组大鼠（每组每时相点8只）。取胃黏膜组织检测胃黏膜损伤指数（UI）、HSP70 mRNA、HSP60、HSP70的表达及SOD、CCO的活性。结果大鼠烧伤后uI呈时间依赖性增加，烧伤组伤后24h胃黏膜损伤程度最严重，UI为12．8±1．9。除伤后3h外，HS组大鼠各时相点uI均低于烧伤组（P＜0．05或0．01）。放线菌素D组大鼠胃黏膜损伤程度明显重于烧伤组及HS组（P＜0．05）。烧伤组、HS组除伤后24、48h外其余各时相点HSP70 mRNA均增加，而放线菌素D组伤后24、48h有所增加。与烧伤组比较，HS组大鼠胃黏膜HSP60及HSP70表达显著增加，除伤后48h外其余各时相点比较，差异均有统计学意义（P＜0．05或0．01）。放线菌素D组大鼠HSP60和HSP70表达明显受抑（P＜0．05）。大鼠烧伤后胃黏膜CCO、SOD活性不断降低，经HS后CCO及SOD下降不明显，在伤后6、12、24h均高于同时相点烧伤组（P＜0．05或0．01）。结论HS对大鼠严重烫伤后急性胃黏膜损害具有保护作用，其机制可能与HSP60、HSPT0诱导表达增强，线粒体SOD及CCO活性增加等有关。