以532nm激光为光源的HMME-PDT对人类乳腺癌细胞的杀伤作用

目的：探讨532nm激光不同光剂节参数及血卟啉单甲醚（HMME）不同浓度参数对体外培养的乳腺癌细胞（MCF-7）的光动力学杀伤作用。方法：MCF-7细胞用浓度分别为5μg／ml、10μg／ml、20μg／ml的HMME孵育2h后，以532nm半导体激光照射，能量密度分别为0．3J／cm^2、0．6J／cm^2、1．2J／cm^2,2．4J／cm^2、4．8J／cm^2，24h后用CCK-8检测细胞存活率，并在光镜及电镜下观察细胞的形态变化。结果：随着激光剂景的增大，在一定的范围内，细胞的抑制率呈现上升趋势；能量密度为2．4J／cm^2．HMME浓度为20μg／ml时，达到最大的抑制率为55．5％；并且细胞的抑制率也和HMME浓度呈剂量依赖型；光镜下可观察到细胞坏死和凋亡样改变。结论：以532nm激光为光源的HMME-PDT对MCF-7细胞有明显的杀伤作用．并在一定范围内呈光剂量和HMME浓度剂最依赖型。     

DOX联合HMME-PDT对人肝癌细胞HepG2联合作用的研究

目的:初步探讨阿霉素(DOX)联合血卟啉单甲醚介导的光动力疗法(HMME-PDT)对人肝癌细胞(HepG2)的作用及可能的机制.方法:实验分对照组、单独PDT组、单独DOX组和联合作用组.PDT组所用的光敏剂剂量为2.5μg/mL,能量密度为0.2 J/cm2、0.4 J/cm2、0.8 J/cm2、1.6 J/cm2和3.2 J/cm2.DOX组所用的DOX浓度为0.1 μg/mL、0.2μg/mL和0.4μg/mL.联合作用为不同剂量单独作用的组合,联合时序为PDT后立即加入阿霉素(PDT DOX)或阿霉素先于PDT24h加入(DOX PDT).MTT法检测24h后的细胞活性抑制率,并用金氏公式分析联合效应.荧光显微镜观察不同处理组阿霉素的摄取情况.结果:MTT法结果表明,联合作用的细胞抑制率高于单独作用,这在PDT DOX的联合时序作用中表现更为明显.金氏公式分析表明,PDT DOX的联合作用相对DOX PDT的联合作用产生更明显的协同或相加效应.荧光显微镜实验可以观察到联合作用明显提高了细胞对阿霉素的摄取,并且随着联合剂量的加大摄取加强.结论:相对单独作用,联合作用有更高的细胞活性抑制率,联合效应与联合时序有关,PDT DOX的联合作用的联合效果好.联合作用产生相加或协同效应的机制之一可能是因为PDT处理改变了细胞膜通透性从而更有利于细胞对阿霉素的摄取,最终提高作用效果.     

不同能量HMME-PDT对离体牙侧支根管内粪肠球菌的杀灭效果

目的 观察不同激光能量对血卟啉单甲醚介导的光动力疗法(HMME-PDT)杀灭离体牙侧支根管内粪肠球菌的效果.方法 选取人单根管离体前牙80颗,常规根管预备后建立粪肠球菌感染人工模拟侧支根管模型.实验随机分为8组:A组为阴性对照组,以生理盐水冲洗根管;B组为阳性对照组,以5.25％ NaClO冲洗根管;其余6组为HMME-PDT处理组,各组以40μg/ml血卟啉单甲醚(HMME)为光敏剂,避光孵育5 min后用不同激光功率的532 nm半导体激光在根管内上下提拉螺旋照射120 s,按照激光功率的不同,分为C组(50 mW)、D组(60 mW)、E组(70 mW)、F组(80 mW)、G组(90 mW)、H组(100 mW).各组实验牙标本(每个离体牙近中面侧支根管作为实验前标本,远中面侧支根管作为对应的实验后标本)处理前与处理后即刻用20#K锉取侧支根管内碎屑,然后将碎屑转至含5 ml TPY液体培养基的试管中,10倍递增连续稀释后厌氧培养24 h,菌落计数.结果 不同激光功率PDT组和生理盐水冲洗组相比,杀菌率的差异有统计学意义(P＜0.05);和5.25％ NaClO冲洗组相比,D组、E组、F组、G组、H组杀菌率均明显增高(P＜0.05),而C组与5.25％ NaClO冲洗组杀菌率之间的差异无统计学意义(P＞0.05);不同激光功率的各PDT组的杀菌率随激光功率的增加而增高,其中F组、G组、H组与C组、D组、E组相比,杀菌率显著提高(P＜0.05),而F组、G组、H组3组间杀菌率的差异无统计学意义(P＞0.05).结论 在本实验条件下,HMME-PDT对人工侧支根管内粪肠球菌的最佳杀菌功率参数为80 mW.     

第二代光敏剂血卟啉单甲醚及其临床应用研究进展

第二代光敏剂血卟啉单甲醚是一种化学组分单一、性能稳定、单线态氧产量高、在机体代谢快的新型光敏剂，已在临床试用于鲜红斑痣、肿瘤等疾病的治疗，疗效显著，是一种非常有发展前景的光敏剂。文章对血卟啉单甲醚的特性、作用机制及应用的研究进展进行了综述。     

HMME-PDT对人舌鳞癌Tca8113细胞的作用及影响因素初步研究

目的:初步探讨血卟啉单甲醚(HMME)介导的光动力疗法(HMME-PDT)对人舌鳞癌Tca8113细胞的作用及可能的影响因素。方法:以HMME作为光敏剂、发光二极管(LED)为光源的光动力疗法作用于Tca8113细胞。采用MTT法分别检测光敏剂孵育时间、光敏剂浓度、光剂量及光功率密度对Tca8113细胞抑制率的影响。HE染色观察细胞形态学改变,Hoechst 33342荧光染色观察细胞核凋亡情况。结果:细胞抑制率随光敏剂孵育时间延长而增大,呈时间依赖效应;并且随光敏剂浓度和光剂量增加而增大,呈浓度-光剂量依赖效应;在相同光剂量下,抑制率随光功率密度增加而增大,在高剂量时更明显。HE染色显示,与对照组相比,PDT处理组细胞密度明显降低,死细胞明显增多;Hoechst 33342荧光染色可见核染色质浓集、核固缩、核碎裂,出现凋亡小体,呈典型凋亡形态改变。结论:HMME-PDT能有效杀伤Tca8113细胞,光敏剂孵育时间、光敏剂浓度、光剂量及光功率密度以均是影响PDT疗效的重要因素,HMME-PDT主要通过凋亡方式诱导细胞死亡。     

HMME-PDT对牙骨质片及种植体表面Pg菌斑生物膜的影响

目的 探讨光动力疗法（PDT）对牙骨质片及种植体表面牙龈卟啉单胞菌（Pg）菌斑生物膜的杀灭效果,获得有效杀灭Pg的光敏剂和激光照射的合理剂量.方法 选用Pg标准菌株分别联合经全唾液处理后的无菌牙骨质片和无菌种植体共同培养,建立简易的体外人工牙骨质片和种植体表面细菌附着模型.以血卟啉单甲醚（HMME）为光敏剂,波长630 nm半导体激光为光源,照射牙骨质片表面细菌附着模型60 s后,计算菌落形成单位（CFU）,筛选出最佳激光能量密度（EDL）和HMME剂量,以筛选的合理剂量照射种植体表面细菌附着模型,并用扫描电镜观察PDT对种植体表面菌斑生物膜的影响.结果 当EDL为12J/cm2、HMME质量浓度为25 μg/ml时,PDT可有效杀灭Pg菌斑生物膜（（13.00±5.00） CFU）,且扫描电镜观察到种植体表面无损伤.结论 630nm半导体激光联合HMME介导的光动力疗法（HMME-PDT）对Pg菌斑生物膜有良好的杀灭效果,本实验使用的EDL与HMME剂量较小,有望作为临床治疗剂量.     

研究不同光敏剂诱导的光动力疗法对人白血病细胞的杀伤作用

目的 研究并比较3种卟啉类光敏剂——血卟啉衍生物(HpD)、癌光啉(PsD007)和血卟啉 单甲醚(HMME)诱导的光动力疗法(PDT)对白血病细胞K562的杀伤效应.方法 以人白血病细胞K562为研究对象,分为对照组和PDT组,以梯度浓度的光敏剂与K562细胞共同孵育,经不同能量光照后,用噻唑蓝(MTT)法测定PDT对K562细胞的杀伤作用.结果 与对照组相比,PDT对K562细胞有明显杀伤作用,并随着光敏剂浓度的增加和光照能量的增大,效果增强.PsD007-PDT和HMME-PDT的效果都明显优于HpD-PDT(P＜0.05);而当光敏剂质量浓度较大(25 μg/ml)或能量密度较大(7.2 J/cm2)时,PsD007-PDT的作用效果优于HMME-PDT.结论 PDT对人白血病细胞K562具有明显的杀伤作用,其对细胞的抑制率具有显著的剂量效应关系;PDT对K562的杀伤效应与光敏剂种类有关,HpD-PDT的杀伤效果不如PsD007和HMME;在较高能量密度和较大光敏剂浓度的条件下,PsD007-PDT的效果优于HMME-PDT.     

兔原位直肠癌的光动力治疗效应和不良反应研究

目的 以兔原位直肠癌为动物模型,探讨内镜光动力疗法在治疗腔道肿瘤时照光剂量、操作方法、不良反应等对其疗效的影响,为光动力疗法治疗直肠癌提供临床前依据.方法 建立20只兔VX2原位直肠癌模型,随机分为对照组、PDT低剂量组、PDT中剂量组和PDT高剂量组.血卟啉单甲醚(HMME)光敏剂于PDT前24 h静脉注射兔体内.光源采用630 nm半导体激光器.使用普通内镜和超声内镜观察肿瘤生长情况,并记录生存时间、一般状况、不良反应等.使用苏木精-伊红染色法染色并观察组织病理变化.结果 PDT后第7天,PDT低剂量组40％轻度有效;PDT中剂量组60％明显有效,20％轻度有效;PDT高剂量组20％明显有效,80％轻度有效.PDT低剂量、中剂量、高剂量组的平均生存时间分别为14、10、5d.不良反应主要表现为炎症反应、肠梗阻、肠道蠕动功能丧失以及死亡.结论 PDT剂量是影响疗效的重要因素,合适剂量的PDT对兔直肠癌有较好的消除效果.对这些问题的深入研究有助于PDT治疗直肠癌的临床应用.     

HMME介导的光动力对兔血管平滑肌细胞生长抑制及诱导细胞凋亡的作用

目的：观察原代培养的兔血管平滑肌细胞在HMME-PDT作用下生长的变化及其死亡方式。方法：常规台盼兰染色观察HMME-PDT作用后6h和24h对细胞的杀伤作用，HMME的浓度为10μg／ml，激光剂帚为2．4～9．6J／cm^2；HE染色法观察PDT后24h细胞形态的变化；流式细胞仪Annexin V／PI双染法检测细胞死亡方式；共聚焦品微镜观察HMME在线粒体的定位。结果：台盼兰法检测结果娃示随着PDT能量密度的增加细胞的存活率逐渐下降，光镜下可见大部分细胞呈死亡或凋亡样改变，Annexin V／PI法检测显示PDT 24h后凋亡率可达50．5％．共聚焦显微镜观察到HMME在线粒体内有分布。结论：HMME-PDT能显著抑制兔血管平滑肌细胞的生长．并使其发生明显的凋亡。     

PDT治疗BALB／c荷瘤小鼠喉癌中的激光剂量效应研究

目的 激光照射剂量和光敏剂的种类及浓度可明显影响光动力疗法（PDT）的治疗效果.本研究以BALB/c荷瘤小鼠为对象,探讨不同激光照射剂量对PDT治疗喉癌效果的影响.方法 取48只皮下接种人喉癌上皮细胞Hep-2的BALB/c荷瘤鼠,分成6组,其中1组为对照,其余5组尾静脉注射血卟啉单甲醚（HMME）后3h分别以30、60、120、240、480 J/cm^2能量的波长630 nm激光照射肿瘤组织.隔日观察肿瘤大小、体质量,并在PDT后30 d取肿瘤组织做病理切片.结果 与对照组相比,所有剂量组PDT都使肿瘤消除或部分消除,疗效与剂量呈正相关,120和480 J/cm^2组小鼠肿瘤完全治愈.瘤损部位在PDT作用后1d出现结痂,5d结痂变硬变黑,同时肿瘤开始消退,30 d左右肿瘤完全消失.结论 PDT是治疗小鼠喉癌非常有前景的方法,其最佳照射剂量是120 J/cm^2.     

Effect of photodynamic therapy with photodithazine on morphofunctional parameters of M-1 sarcoma

Efficiency and mechanisms of action of photodynamic therapy of M-1 sarcoma were studied experimentally on rats using photodithazine, a novel chlorine photosensitizer. The tissue and cellular targets for this agent are vascular wall, plasma membrane of tumor cells, and intracellular structures responsible for proliferation and biosynthesis.Translated from Byulleten Eksperimentalnoi Biologii i Meditsiny, Vol. 138, No. 12, pp. 658–664, December, 2004This revised version was published online in April 2005 with a corrected cover date.     

光动力疗法防龋对釉质微量元素的影响

目的 将通体发光光纤应用于光动力疗法(PDT)防龋,探讨其对大鼠磨牙牙釉质中Ca、P含量的影响.方法 接种变形链球菌(S.mutans)制备大鼠致龋模型.将80只Wistar大白鼠随机分成5组:17mW(8 mW/cm2)PDT组(A组)、34 mW(15 mW/cm2)PDT组(B组)、68 rnW(30 mW/cm2)PDT组(C组)、20 g/LNaF溶液组(阳性对照组,D组)和生理盐水组(阴性对照组,E组),每组16只.采用650 nm半导体激光器,以质量浓度为40 μg/ml的血卟啉单甲醚为光敏剂,连续进行4周实验.应用电感耦合等离子体发射光谱法检测各组大鼠磨牙牙釉菌中的Ca、P含量.结果 实验后B、C、D组Ca、P含量明显高于A、E组,差异均具有统计学意义(均P＜0.05).A组Ca、P含量实验前后差异均无统计学意义(均P＞0.05);实验后B、C组Ca、P含量分别高于实验前,差异均具有统计学意义(均P＜0.05).A组Ca增量低于D组,差异具有统计学意义(P＜0.05);B、C两组Ca、P增量明显高于D组,差异均具有统计学意义(均P＜0.05);而B、C两组间Ca、P增量差异均无统计学意义(均P＞0.05).结论 在设定的参数范围内,PDT促进牙齿再矿化效果优于20 g/L NaF溶液.采用PDT防龋可增加大鼠磨牙牙釉质中的Ca、P含量,且Ca、P含量与PDT的功率有关.当PDT功率较低时,对釉质再矿化作用不明显;随着PDT功率的增加,Ca、P含量亦增加;当功率增加至一定数值时,两元素含量增量变化不明显,表明PDT可维持牙齿再矿化微环境.     

光动力疗法对牙菌斑生物膜活性及结构的影响

目的 探讨光动力疗法(PDT)对4种主要致龋菌形成的混合菌菌斑生物膜活性及结构的影响.方法以变形链球菌、血链球菌、嗜酸性乳杆菌和黏性放线菌为实验菌株,建立牙菌斑生物膜模型.实验分为3组:PDT组,洗必泰处理组,生理盐水处理组.平板菌落计数观察牙菌斑生物膜活性,并运用激光共聚焦显微镜(CLSM)对处理后的牙菌斑生物膜进行...     

Haematoporphyrin Based Photodynamic Therapy Combined with Hyperthermia Provided Effective Therapeutic Vaccine Effect against Colon Cancer Growth in Mice

Photodynamic therapy (PDT) has become an attractive option used in tumor treatment via its direct tumoricidal activities or its immune-boosting activities. On the other hand, heat shock protein 70 has been found to be largely associated with the establishment of anti-tumor activities offered by hyperthermia treated tumor cells. In the present study, we found that injection of tumor-bearing mice with colon cancer cell line CT-26 treated with haematoporphyrin based photodynamic therapy (hematoporphyrin monomethyl ether based PDT, HMME-PDT) together with hyperthermia demonstrated the most effective therapeutic effects against tumor growth, followed by cells treated by hyperthermia alone. CT-26 cells treated only with HMME-PDT failed to provide any therapeutic effects, although significant cell death was induced by HMME-PDT. Compared to hyperthermia treatment, HMME-PDT induced more efficient surface localization of HSP70 on CT-26 cells which correlated with efficient activation of cytolytic CD8 T cells and with effective anti-tumor responses. Thus, our study demonstrated that the surface expression of HSP70 may play a more important role than the total expression or release of this molecule in the activation of immune responses. And our study offered a novel modified PDT approach to the treatment of tumor cells intrinsically low on HSP70 expression.     

肿瘤化疗协同光动力疗法联合免疫治疗的研究进展

近几十年来,恶性肿瘤的发病率越来越高,其发病年龄逐渐低龄化,严重威胁着人类的生命健康.目前,临床上有多种抗肿瘤治疗方法,但单一治疗方法往往达不到最佳治疗效果,因此常采用联合治疗的方法.联合治疗在增强治疗效果的同时还能减少药物的毒副作用,且可减轻患者痛苦.化学治疗(化疗)是临床上常用的治疗方法,但其副作用较大,对肿瘤细胞造成损伤的同时也会对人体正常细胞造成不可逆损伤.光动力疗法是利用特定波长的光激发富集在肿瘤局部的光敏剂,光敏剂被活化,在组织内氧的存在下可发生光动力反应直接或间接杀伤肿瘤细胞.化疗或光动力治疗肿瘤后会产生肿瘤相关抗原,免疫系统识别肿瘤相关抗原后会刺激机体产生特异性抗肿瘤免疫反应,在化疗协同光动力疗法的同时联合免疫治疗,能够有效地提高化疗药物的治疗效果、减少药物毒副作用,同时能抑制肿瘤转移,并可诱导机体产生长期抗肿瘤免疫反应,实现最大化的治疗效果.对近年来化疗、光动力疗法以及免疫治疗的研究现状作一综述.     

The effect of sulfasalazine in pentylenetetrazole-induced seizures in rats

We aimed to reveal the anti-convulsant effects sulfasalazine and its mechanism in pentylenetetrazole (PTZ)-induced seizures in rats. Forty-eight male Wistar albino rats (200-250 g) were randomly divided into two groups: 24 for electroencephalography (EEG) recording (group A) and 24 for behavioral studies (group B). About 70 mg/kg PTZ was used for behavioral studies after sulfasalazine administration and 35 mg/kg PTZ was used for EEG recording after sulfasalazine administration. Electrodes were implanted on the dura mater over the left frontal cortex and the reference electrode was implanted over the cerebellum for EEG recording. Racine’s convulsion scale, first myoclonic jerk onset time, spike percentages, brain malondialdehyde (MDA), superoxide dismutase (SOD), and prostaglandin F2α (PGF2α) levels were evaluated between the groups. First myoclonic jerk onset time was significantly shorter in the saline group than both 250 and 500 mg/kg sulfasalazine groups (P<0.05). Racine''s convulsion scores were significantly lower in the 250 and 500 mg/kg sulfasalazine groups than the saline group (P<0.05, P<0.001). The two sulfasalazine groups had lower spike percentages than the saline group (P<0.05). Significantly lower MDA and PGF2α levels were observed in the 250 and 500 mg/kg sulfasalazine groups compared with the saline group (P<0.05, P<0.001, respectively). SOD increased significantly in both sulfasalazine groups compared with the PTZ+saline group (P<0.05). Our study demonstrated that sulfasalazine had protective effects on PTZ-induced convulsions by protecting against oxidative and inflammatory damage associated with PTZ.     

口腔光动力疗法研究进展

光动力学疗法（PDT）是20世纪70年代末形成的治疗新技术,近年来已从实验研究进人到临床应用阶段,其机理是建立在某些特定类型的细胞或生物体能选择性吸收光敏型的药物,在接受特定波长光照射后产生光敏效应的一种治疗方法。目前主要应用于体表和空腔脏器表面的浅表肿瘤的非手术治疗,由于发现光敏剂对肿瘤以外的多种病变组织和病原微生物具有选择性聚集以及新型光敏剂的开发,使光动力疗法在现代临床中应用领域不断扩大。从光动力治疗的效应机制、光动力治疗的光源与光敏剂以及在口腔医学领域中对头颈部肿瘤、黏膜病、口腔致病微生物感染的治疗等方面的应用研究进展进行了综述。