血清酶测定中酶校准品与理论K值校准方式的应用比较

血清酶测定是临床实验室中一项重要的常规工作,其检测结果对疾病的诊断、治疗与监测有很大的参考价值.由于酶蛋白本身的生物特点及其对催化反应条件要求的特殊性.使不同实验室的测定结果间存在较大的差异,可比性远不如其他检测项目[1].     

血清酶测定中酶校准品与理论K值校准方式的应用比较

血清酶测定是临床实验室中一项重要的常规工作．其检测结果对疾病的诊断、治疗与监测有很大的参考价值。由于酶蛋白本身的生物特点及其对催化反应条件要求的特殊性．使不同实验室的测定结果间存在较大的差异．可比性远不如其他检测项目。但因校准方式不同和检测系统的不同．常常导致不同实验室测定结果会有较大差异．即使同一实验室检测系统一致的情况下．不同的校准方式对检测结果也有较大影响。2002年国际临床化学会（IFCC）提出CK、ALT、AST、GGT、ALP等酶活力检测必须使用完整的检测系统,依靠校准品定值．以实现酶的量值溯源．使检测结果具有广泛可比性。本文旨在探讨由于采用酶校准品校准与理论K值校准方式不同而致使检测结果的差异性．现报道如下。     

因子与校准品校准在血清酶检测中的应用比较

目的探讨因子与校准品校准在血清酶检测中的差异。方法应用速率法,采用因子校准与校准品校准2种校准方式,对肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、γ-谷氨酰转移酶(GGT)等5种酶进行检测,室内定值质控血清批内各测20次,随机标本50份分别进行检测,在1h内完成,对2种校准结果进行比较。结果 CK、LDH、ALT、AST、GGT表现为因子校准结果明显低于校准品校准结果。室内定值质控血清因子校准均值分别为CK191.4U/L、LDH178.5U/L、ALT29.0U/L、AST32.8U/L、GGT50.6U/L,校准品校准均值分别为CK212.2U/L、LDH183.4U/L、ALT32.0U/L、AST35.4U/L、GGT55.9U/L;随机标本检测因子校准均值分别为CK110.6U/L、LDH208.1U/L、ALT80.3U/L、AST99.8U/L、GGT84.1U/L,校准品校准均值分别为CK133.2U/L、LDH215.0U/L、ALT95.8U/L、AST115.6U/L、GGT94.8U/L。两法比较差异有统计学意义(P均小于0.001)。结论通过对定值质控血清及随机标本所测酶结果的分析,认为酶活性因子校准有较大的系统误差,校准品校准能更好地反应结果的准确性。     

酶校准品在血清酶测定结果一致性中的应用

目的探讨在不同生化分析仪上检测常用血清酶[丙氨酸转氨酶(ALT)、门冬氨酸转氨酶(AST)、γ-谷氨酰转移酶(GGT)、碱性磷酸酶(ALP)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)]结果的可比性的方法。方法将自动化系统的校准物(cfas)中6个酶活性定值转移至新鲜混合血清,以该混合血清作为校准品,对同一批标本测定校准前后的6个酶活性。结果校准前,同一批标本在2台不同品牌仪器上测得的结果差异有极其显著性(P<0.001)。校准后,同一批标本在2台不同品牌仪器上测得的结果差异无显著性(P>0.05)。结论用cfas转移血清酶定值的新鲜混合血清作为校准品对不同检测系统进行校准,既保证了结果的可溯源性,又可以实现血清酶测定的一致性。     

酶校准品在血清酶测定结果一致性中的应用

目的 探讨在不同生化分析仪上检测常用血清酶[丙氨酸转氨酶（ALT）、门冬氨酸转氨酶（AST）、γ-谷氨酰转移酶（GGT）、碱性磷酸酶（ALP）、乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸激酶（CK）]结果的可比性的方法。方法 将自动化系统的校准物（cfas）中6个酶活性定值转移至新鲜混合血清，以该混合血清作为校准品，对同一批标本测定校准前后的6个酶活性。结果 校准前，同一批标本在2台不同品牌仪器上测得的结果差异有极其显著性（P〈0．001）。校准后，同一批标本在2台不同品牌仪器上测得的结果差异无显著性（P〉0．05）。结论 用cfas转移血清酶定值的新鲜混合血清作为校准品对不同检测系统进行校准，既保证了结果的可溯源性，又可以实现血清酶测定的一致性。     

采用因子与校准品校准在血清酶检测中的应用比较

目的 探讨因子与校准品校准在血清酶检测中的差异。方法 应用速率法,采用因子校准与校准品校准2种校准方式,对肌酸激酶（CK）、乳酸脱氢酶（LDH）、丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）、γ-谷氨酰转移酶（GGT）等5种酶进行检测,室内定值质控血清批内各测20次,随机标本50份分别进行检测,在1h内完成,对2种校准结果进行比较。结果 CK、LDH、ALT、AST、GGT表现为因子校准结果明显低于校准品校准结果。室内定值质控血清因子校准均值分别为CK191．4U／L、LDH178．5U／L、ALT29．0U／L、AST32．8U／L、GGT50．6U／L,校准品校准均值分别为CK212．2U／L、LDH183．4U／L、ALT32．0U／L、AST35．4U／L、GGT55．9U／L;随机标本检测因子校准均值分别为CK110．6U／L、LDH208．1U／L、ALT80．3U／L、AST99．8U／L、GGT84．1U／L,校准品校准均值分别为CK133．2U／L、LDH215．0U／L、ALT95．8U／L、AST115．6U／L、GGT94．8U／L。两法比较差异有统计学意义（P均〈0．001）。结论 通过对定值质控血清及随机标本所测酶结果的分析,认为酶活性检测因子校准有较大的系统误差,校准品校准能更好地反映结果的准确性。     

采用因子与校准品校准在血清酶检测中的应用比较

目的探讨因子与校准品校准在血清酶检测中的差异。方法应用速率法,采用因子校准与校准品校准2种校准方式,对肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、γ-谷氨酰转移酶(GGT)等5种酶进行检测,室内定值质控血清批内各测20次,随机标本50份分别进行检测,在1 h内完成,对2种校准结果进行比较。结果CK、LDH、ALT、AST、GGT表现为因子校准结果明显低于校准品校准结果。室内定值质控血清因子校准均值分别为CK 191.4 U/L、LDH 178.5 U/L、ALT 29.0 U/L、AST 32.8 U/L、GGT50.6 U/L,校准品校准均值分别为CK 212.2 U/L、LDH 183.4 U/L、ALT 32.0 U/L、AST 35.4 U/L、GGT 55.9 U/L;随机标本检测因子校准均值分别为CK 110.6 U/L、LDH 208.1 U/L、ALT 80.3 U/L、AST 99.8 U/L、GGT84.1 U/L,校准品校准均值分别为CK 133.2 U/L、LDH 215.0 U/L、ALT 95.8 U/L、AST 115.6 U/L、GGT 94.8 U/L。两法比较差异有统计学意义(P均<0.001)。结论通过对定值质控血清及随机标本所测酶结果的分析,认为酶活性检测因子校准有较大的系统误差,校准品校准能更好地反映结果的准确性。     

酶校准品在血清酶测定结果标准化中的应用

目的研究酶校准品用于校准不同的“仪器/试剂”测定系统时,能否增加各系统间血清酶测定结果的可比性。方法在日立7170A和CX9全自动生化分析仪上用4种不同的试剂分别测定150份不同浓度分布的新鲜血清中的丙氨酸转氨酶(ALT),天门冬氨酸转氨酶(AST),碱性磷酸酶〔(ALP),100份〕,肌酸激酶(CK),γ-谷氨酰转肽酶(GGT),乳酸脱氢酶(LD)等6种酶的活性。同1份标本用4种不同的“仪器/试剂”测定系统进行校准前和校准后测定,比较各测定系统测定前后的均值。结果发现不同的“仪器/试剂”系统间的测定结果存在一定差异(各系统间均值的CV值≥7.0%,其中ALP为27.0%,GGT为17.4%),用统一的酶校准品校准后,各系统间测定结果的差异明显减小(除ALP和GGT的CV值分别为6.6%和5.1%外,其余各项目的CV值均＜5%)。结论统一的某些酶校准品能增加不同的测定系统间结果的可比性。     

酶校准品在血清酶测定结果标准化中的应用

目的研究酶校准品用于校准不同的“仪器 /试剂”测定系统时 ,能否增加各系统间血清酶测定结果的可比性。方法在日立 7170 A和 CX9全自动生化分析仪上用 4种不同的试剂分别测定 15 0份不同浓度分布的新鲜血清中的丙氨酸转氨酶 (AL T) ,天门冬氨酸转氨酶 (AST) ,碱性磷酸酶〔(AL P) ,10 0份〕,肌酸激酶 (CK) ,γ-谷氨酰转肽酶 (GGT) ,乳酸脱氢酶 (L D)等 6种酶的活性。同 1份标本用 4种不同的“仪器 /试剂”测定系统进行校准前和校准后测定 ,比较各测定系统测定前后的均值。结果发现不同的“仪器 /试剂”系统间的测定结果存在一定差异 (各系统间均值的 CV值≥ 7.0 % ,其中 AL P为 2 7.0 % ,GGT为 17.4% ) ,用统一的酶校准品校准后 ,各系统间测定结果的差异明显减小 (除 AL P和 GGT的 CV值分别为 6 .6 %和 5 .1%外 ,其余各项目的 CV值均 <5 % )。结论统一的某些酶校准品能增加不同的测定系统间结果的可比性。     

应用校准血清校准血清酶测定结果的调查

血清酶类测定的推荐方法为连续监测法测定酶的催化活性。由于血清酶活性除与酶的含量有关外 ,还受到众多因素影响 ,并且公认的酶校正品尚未在常规实验室应用 ,因此 ,酶测定的室间CV %远较一般项目的大。酶催化活性是用设置K值法计算结果 ,K值设置的方法有多种[1] ,且不同试剂、不同仪器间的差异较大。本次调查是用宝灵曼BM和朗道公司Randox生产的两种校准物对不同试剂和仪器间进行校准 ,通过对校准前后 2个混合血清结果的分析 ,探索一种方法 ,以使无锡地区的血清酶类测定的结果达到稳定、可比、统一溯源到一个标准。1　材料和方法1 1　校…     

血清酶活性测定中几种K值的应用比较

目的：认识和验证酶校准品在酶活性测定中对K值的校准。方法：分别用试剂盒K值、两种理论K值和两种校准品校准的K值测定同一质控物中常见的7种酶活性，以偏差进行比较。结果：试剂盒K值和理论K值的测定结果偏差最高达78．8％；用罗氏(Roche)校准品校准K值的测定结果偏差除ALP和GGT偏高外，其余项目均小于10％。结论：提倡使用适合实验室仪器和试剂系统的酶校准品进行K值校准。     

K值校准法在5‘—NT测定中的应用

5’-核苷酸酶(5’-NT)是5’-核苷酸磷酸水解酶,特异性地催化5’-核苷酸磷酸盐水解释放核苷酸和磷酸盐的反应。利用其原理,采用测定次黄嘌吟释放速率5’-NT比色测定法,以 5’-腺苷-磷酸(5’-IMP)作底物,经5’-NT催化释放出的次黄苷,在过量的对核苷特异的核苷磷酸化酶(NP)和黄瞟呤氧化酶(XO)存在下,被转化成次黄瞟呤和尿酸,产生过氧化氢(H_2O_2),再经Trinder’s反应,由过氧化物酶(POX)和受体系统2、4、6-三碘-3-羟基苯甲酸(THIBA),氧化4-氨基安替比林(4-AA)显色,在510nm比色测定H_2O_2生成速率。根据这个反应机理,运用法国梅里埃5’-NT试剂盒,结合日本     

校准品在提高CK-MB测定结果可比性中的应用

[目的]研究应用校准品能否增加不同试剂盒测定结果的可比性。[方法]在MERCK-MEGA全自动生化分析仪上分别应用6种不同厂家的试剂分别测定100份新鲜血清的CK-MB的酶活性。同1份标本用酶校准品进行校准前和校准后的测定，比较6种试剂校准前后的均值。[结果]发现6种试剂间的测定结果存在一定差异（均值的CV值为27.2％），用酶校准品校准后，6种试剂间的结果差异明显减小（均值的CV值为5.4％）[结论]使用酶校准品能够增加同类型不同试剂盒之间测定结果的可比性。     

Hitachi 7600型全自动生化分析仪理论K值与校准K值的应用

目的探讨Hitachi 7600型全自动生化分析仪理论K值与校准K值的应用。方法应用速率法对丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）、γ-谷氨酰转肽酶（γ-GT）、肌酸激酶（CK）及乳酸脱氢酶（LDH）进行检测,理论K值及2种校准血清校准后的K值分别记为K、K1、K2,比较上述酶的3种校准结果。结果 ALT、AST、γ-GT、CK及LDH的理论K值均小于2种实际K值,校准K值的结果明显优于理论K值。5种酶2种校准结果的R2值均大于0.95。结论理论K值不适用于临床实验室,2种校准血清均能满足质控和临床工作的需要。     

K值校准法在5‘—NT测定中的应用

5'-核苷酸酶（5'－NT），在岛津CL－7200全自动生化分析中，采用测定次黄嘌呤释放速率5'－NT比色分析法，选择[装置定数]和[K值接受]校准模式，以底物次黄嘌呤为标准，进行510nm/600nm双波长终点比色，测装置K值，由5'－NT连续监测法反应程序接受K值后，用于一般样品分析，结果在设定的次黄嘌呤标准浓度选择性试验中，次黄嘌呤在200－1000μmol/L时，可求得理想K值；准确性：质控结果均值与靶值误差＜2％，符合WHO允许误差范围；重现性：高低值5'－NT批内CV＜2％，日间＜7．5％；线性试验中，5'－NT线性范围是0－300U／L，相关系数r=0.9988,回归方程Y＝1．0528X－2．413，呈高度直线相关且离散度小，回收率为98．2％－99．4％，30例病人结果用手工法相关统计为r=0.8970,Y=1.2094X 0.8578;40例正常组试验为0．3－10．0U／L，可作为正常参考值。     

选择适合测定系统的酶校准品

目的；研究使用不同的酶校准品校准不同的“仪器／试剂”测定系统的适用性。方法：用Dimension RXL临床生化测定系统和配套试剂以及RXL生化仪与Randox,科华，东菱，中生试剂组成的测定系统分别测定50份新鲜血清和BM cfas,Dade，测定结果，最后进行校正前后的结果比较和校准品可转换性分析。结果：50份新鲜血清校准前后ALT的CV为10．85％和23．07％，AST的CV为10．48％和24．4％，LDH和CV为3．89％和8．62％。CGT的CV22．63％和26．37％。校准后各项目结果的差异没有减小，反而有增大的倾向。结论：临床实验室必须使用适合自己测定系统的校准品才能保证校准结构的准确可靠。     

血清γ-谷氨酰转移酶测定参考方法的建立及在酶校准品定值中的临床应用

目的通过建立γ-谷氨酰转移酶（GGT）测定参考方法，及其对酶校准品进行定值，并将此酶校准品在常规试剂配套使用，探讨血清GGT测定结果的准确性与一致性。方法按照国际临床化学与检验医学联合会（IFCC）有关GGT活性测定的要求，建立参考方法；通过测定有证参考物质（CRM），验证参考方法的准确可靠性；并用参考方法对制备的酶校准品进行准确定值；在不同分析仪上，分别用理论K值和使用校准品校准的方法测定40份人血清，记录测定结果；计算测定结果与参考方法的相对偏倚及变异系数。结果采用参考方法测定CRM，结果在CRM允许范围内；在HITACHI 7600、7060、7170、7180及BECKMAN LX20、OLYMPUS AU400生化分析仪上，测定40份人血清，采用校准品校准较理论K值，相对偏倚≤10％的样品比例明显上升，相对偏倚≥20％的样品比例下降；测定5个浓度水平的人血清，采用理论K值测定结果的变异系数为11．0％～14．0％，采用校准品校准变异系数下降到5．0％以下。结论中生GGT试剂盒与酶校准品配套使用后，测定结果的准确性和一致性有明显提高。     

定值质控血清及血清酶校准品在室内质控中的溯源性研究

目的探讨定值质控血清及血清酶校准品在室内质量控制中的溯源性，建立与国家相关机构关联、实用且准确的方法。方法在0LYMPUSAU-400全自动生化分析仪上用酶校准品以单点定标方式定标和用定值质控血清以两定标方式定标，与理论校准参数KS值3种方法分别测定室内质控血清中的丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、碱性磷酸酶（ALP）、肌酸激酶（cK）、乳酸脱氢酶（LD）、7一谷氨酰转移酶（y-GT）等6种酶的活性，同一批号的室内质控血清分装后在3种参考系统内测定，比较其X±S和相对偏倚（D％）。结果定值质控血清校准的碱性磷酸酶（ALP）、乳酸脱氢酶（LD）与酶校准品差异有统计学意义（P％0．05），丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、肌酸激酶（CK）、7-谷氨酰转移酶（y-GT）差异无统计学意义（P〉0．05）；理论KS值的6种酶与酶校准品差异有统计学意义（P％0．05）。结论定值质控血清校准与血清酶校准品校准结果相近，用两者进行室内质控血清酶的测定方法具有较好的溯源性，在无血清酶校准品时，可以用定值质控血清代替以校准理论KS值。     

不同校准品对血清葡萄糖测定的影响

在临床化学分析中 ,试剂、校准品的使用比较混乱 ,忽略了基体效应对检验结果的影响。我们观察了不同的校准品对血清葡萄糖测定的影响。1　材料和方法1.1　仪器　东芝ＴＢＡ 30。1.2　试剂　中生葡萄糖试剂ＧＯＤ法及单一校准品 ,Ｒｏｃｈｅ血清葡萄糖试剂 (ＧＯＤ法和ＨＫ法 )及ｃｆａｓ校准品。2　实验与结果分别使用不同试剂和校准品进行血清葡萄糖测定 ,分别同时测定 2 0个新鲜病人标本和两种浓度罗氏质控血清 ,每个方法做 3次 ,结果取均值。各组结果作配对ｔ检验 ,经统计学处理后表明 :中生试剂单一校准品结果偏低 ,而使用中生试剂ｃｆ…     

酶校正品在血清酶测定中的应用

目的　应用酶校正品校准不同的“仪器/试剂”测定系统,观察系统间血清酶测定结果的可比性。方法 　以“日立仪器/cfas/罗氏试剂”为参照系统,用cfas对各系统作校正,测定科华及中生试剂在校正前、后的比例误 差与恒定误差。结果　科华丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、γ 谷氨酰基转移酶(GGT)的 比例误差由校正前-17.7%、8.5%、-26.1%变为5.2%、4.1%、0%;恒定误差则由校正前-1.494U/L、-7.290 U/L、2.620U/L变为-2.326U/L、-4.461U/L、4.856U/L;中生ALT、AST、GGT的比例误差由校正前-31.4%、 -23.9%、-27.8%变为-9.3%、-13.4%、-6.7%;恒定误差则由校正前0.0001U/L、-0.451U/L、0.035U/L 变为0.956U/L、3.727U/L、2.236U/L。结论　各系统经校正后的测定结果更接近于参照系统测定值但仍存在一 定的系统误差,需要将系统间存在的比例误差及恒定误差进行校正才能与参照系统的结果相一致。