鲍曼不动杆菌产AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶检测和耐药性分析

目的 分析医院感染菌鲍曼不动杆菌(ABA)临床分离株头孢菌素酶(AmpC酶)、超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的产生及其耐药特点.方法 应用纸片扩散法(K-B法)进行药物敏感试验,用三维试验法检测不动杆菌属产生的AmpC酶和ESBLs.结果 69株鲍曼不动杆菌,产ESBLs 18株(26.1%),产AmpC酶17株(24.6%),同时产AmpC酶和ESBLs 4株(5.8%);产AmpC酶菌株对各种抗菌药物的耐药比产ESBLs菌株多.结论 鲍曼不动杆菌产AmpC酶和ESBLs的比例较高,临床应加强与微生物室的联系,科学用药,才能有效控制感染.     

革兰阴性杆菌中AmpCβ-内酰胺酶的检测及其耐药性分析

目的了解革兰阴性杆菌临床分离株AmpCβ-内酰胺酶的发生率及产酶株的耐药性。方法采用三维试验检测AmpCβ-内酰胺酶;用K-B纸片法进行抗菌药物敏感试验。结果236株革兰阴性杆菌中,三维试验阳性菌株29株;17株(7.2%)单产AmpC酶,8株(3.4%)单产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs),2株(0.8%)同时产AmpC酶和ESBLs,2株(0.8%)为非产AmpC酶和ESBLs菌株;共检出产AmpC酶菌株19株,检出率为8.1%;药物敏感试验结果显示,除亚胺培南和头孢吡肟外,产酶株的耐药率明显高于非产酶株。结论本院革兰阴性杆菌AmpC酶的检出率为8.1%;产酶菌呈多重耐药特性,治疗产酶菌感染首选第四代头孢菌素及碳青霉烯类药物。     

产酶的革兰阴性杆菌对抗生素的耐药性分析

目的：探讨G^-杆菌的产酶情况与耐药模式,并比较产酶菌与非产酶菌对9种抗生素的耐药率。方法：应用头孢西丁三维试验检测AmpC酶,采用美国国家临床实验室标准委员会（NCCLS）表型筛选和确认试验检测超广谱酶β内酰胺酶（ESBLs）菌株,以K-B琼脂扩散法做药敏试验。结果：在149株G^-杆菌中,16株（10.7%）产AmpC酶,32株（21.1%）产ESBLs,2株（2.0%）同时产AmpC酶和ESBLs。产酶株对亚胺培南、头孢吡肟、阿米卡星耐药率低。结论：产AmpC酶和产ESBLs的G^-杆菌为多重耐药菌株,治疗产2种β内酰胺酶细菌引起的感染亚胺培南为首选,头孢吡肟和阿米卡星可作为选用药物之一。     

大肠埃希菌β—内酰胺酶的分类筛检

目的 了解E.coli(大肠埃希菌）所产各种β-内酰胺酶（β-lase)分布情况。方法 采用多底物改良相邻纸片法检测75株E.coli。结果 75株E.coli总β-lase检出率为70．67％，其中产青霉素酶18株（24．00％），产广谱酶8株（10．67％）产ESBLs27株（36．00％）；27株产ESBLs菌株中以头孢他啶、头孢噻肟、氨曲南为底物的均为21株。结论 本组E.coli所产生各种β-lase以青霉素酶、ESBLs为主。     

对头孢吡肟敏感的疑似产超广谱β内酰胺酶大肠埃希菌和克雷伯菌属的分子生物学特征

目的 了解初筛试验疑似产超广谱β内酰胺酶(ESBLs)但确证试验未能确认,而对头孢吡肟敏感的大肠埃希菌和克雷伯菌属中的ESBLs和质粒介导的AmpC酶.方法 纸片扩散法检测18株细菌对常用抗菌药物的敏感性;PCR及多重PCR法检测细菌中的ESBLs和质粒AmpC酶基因;质粒转移接合试验检测耐药质粒的可传递性;细菌基因间重复一致序列(ERIC)-PCR法检测供体大肠埃希菌和受体E.coli J53及其接合子的同源性;脉冲场凝胶电泳(PFGE)对11株大肠埃希菌和6株肺炎克雷伯菌进行同源性分析.结果 18株细菌均为2005年1月至12月期间上海华山医院临床分离的菌株,其中大肠埃希菌11株,肺炎克雷伯菌6株,产酸克雷伯菌1株,按常规方法对细菌进行重新鉴定和药敏试验.18株细菌经美国临床和实验室标准协会(CLSI)推荐的ESBLs初筛试验结果均为ESBLs产生可疑菌株,但确证试验未能确认;所有菌株的头孢吡肟抑菌圈直径均在18 mm以上,显示敏感.PCR检测结果显示,11株大肠埃希菌中有9株产CIT型质粒AmpC酶,DNA测序及序列比对结果证实为CMY-2型AmpC酶,未发现TEM、SHV、CTX-M、PER、VEB、SFO等广谱或ESBLs;6株肺炎克雷伯菌中有5株产DHA型质粒AmpC酶,DNA测序及序列比对结果证实为DHA-1型AmpC酶;5株产DHA-1型AmpC酶的肺炎克雷伯菌株中,4株同时伴有广谱或ESBLs:其中2株产SHV-11型广谱酶,另2株分别产CTX-M-14型ESBLs和SHV-62型ESBLs;1株产酸克雷伯菌亦单产DHA-1型AmpC酶;质粒转移接合试验结果表明,携带耐药基因的质粒可从供体菌转移至敏感细胞中;PFGE结果显示,6株肺炎克雷伯菌的谱型各不相同,而11株大肠埃希菌可分为5种谱型,其中B型包含7株细菌,这7株细菌均产生质粒介导的CMY-2型AmpC酶,并分离自外科病房,提示可能存在克隆菌株的流行传播.结论在确证试验未能确认的疑似产ESBLs中,对头孢吡肟敏感的大肠埃希菌和克雷伯菌属细菌主要产生质粒介导的AmpC酶,但尚有少数菌株同时伴有产ESBLs.对同时产生ESBLs和AmpC酶的菌株,临床微生物实验室必须报告这些菌株对头孢吡肟耐药.     

三维试验检测耐头孢他啶铜绿假单胞菌产β-内酰胺酶

目的了解耐头孢他啶铜绿假单胞菌产β-内酰胺酶的现状。方法采用K-B法进行药敏试验,筛选耐头孢他啶的铜绿假单胞菌,采用改良三维试验检测各种β-内酰胺酶。结果 65株临床分离耐头孢他啶铜绿假单胞菌中产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)30株(46.2%),AmpC酶4株(6.2%),同时产ESBLs和AmpC酶10株(15.4%),同时产金属酶和产ESBLs 15株(23.1%),同时产AmpC酶和金属酶2株(3.1%)。结论益阳市第三人民医院铜绿假单胞以产ESBLs为主,其次为AmpC酶和金属酶。     

大肠埃希菌AmpC酶、超广谱β-内酰胺酶检测及耐药性分析

目的检测大肠埃希菌AmpC酶和超广谱β内酰胺酶(ESBLs),并分析其耐药性,以指导临床合理用药。方法采用改良三维试验法,分别进行AmpC酶和ESBLs测定。结果300株大肠埃希菌AmpC酶、ESBLs检出率分别为3.7%(11/300)、24.7%(74/300),其中同时产AmpC酶和ESBLs菌株检出率为2.3%(7/300)。产酶菌株对17种抗生素(除亚胺培南全部敏感外)的耐药率均高于平均水平。结论大肠埃希菌对β内酰胺类抗生素耐药的主要原因是产生AmpC酶和ESBLs,对产酶菌株临床经验用药可选用碳青霉烯类抗生素。     

胆道感染大肠埃希菌AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶的检测及耐药分析

目的：探讨胆道感染患者中大肠埃希菌产AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的情况及耐药分析。 方法：采用改良的酶提取物三维试验法检测ESBLs和AmpC酶，采用纸片扩散(K-B)法检测大肠埃希菌对18种抗生素的耐药率。结果： 110株大肠埃希菌中检出单产ESBLs 42株，AmpC酶12株，同时产AmpC酶和ESBLs共6株，检出率分别为38.2％、10.9％和5.5％；产酶菌株对抗生素的耐药率大部分均高于不产酶菌株。结论：胆道感染大肠埃希菌对β-内酰胺类抗生素耐药的主要原因是产生AmpC酶和ESBLs，对产酶菌株临床经验用药首选碳青霉烯类抗生素。     

大肠埃希菌AmpC酶、超广谱β-内酰胺酶检测及耐药性分析

目的 检测大肠埃希菌AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶(ESBLs),并分析其耐药性,以指导临床合理用药。方法 采用改良三维试验法,分别进行AmpC酶和ESBLs测定。结果 300株大肠埃希菌AmpC酶、ESBLs检出率分别为3．7％(11／300)、24．7％(74／300),其中同时产AmpC酶和ESBLs菌株检出率为2．3％(7／300)。产酶菌株对17种抗生素(除亚胺培南全部敏感外)的耐药率均高于平均水平。结论 大肠埃希菌对β-内酰胺类抗生素耐药的主要原因是产生AmpC酶和ESBLs,对产酶菌株临床经验用药可选用碳青霉烯类抗生素。     

铜绿假单胞菌的临床分布及β-内酰胺酶耐药表型研究

目的了解医院分离铜绿假单胞菌院内感染临床分布、产酶情况及其耐药性。方法采用手工法及法国生物梅里埃鉴定系统对菌种进行鉴定,用琼脂扩散法进行药敏试验,采用双纸片扩散法、三维试验、协同法分别对细菌超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)、β-内酰胺酶(AmpC酶)、金属酶进行检测。结果铜绿假单胞菌分布于呼吸科、ICU、外科,其中呼吸科和ICU检出率最高,分别占总分离菌株的50.7%和18.7%;临床标本以痰标本为主,分离率为80.6%,其次是脓汁和伤口分泌物;产AmpC酶71株,单产ESBLs酶27株,产金属酶16株,其中同时产ESBLs和AmpC酶菌株17株,产AmpC酶菌株检出率最高。结论多重耐药铜绿假单胞菌以产AmpC酶为主,临床治疗应合理用药,减少耐药菌株产生和控制医院感染。     

3种克雷伯菌产β-内酰胺酶分析

目的研究3种克雷伯菌所产各种β内酰胺酶（plase）分布情况。方法采用多底物纸片法（协同法、拮抗法）、超广谱G-内酰胺酶（ESBLS）确认试验、AmpC酶检测法检测51株克雷伯菌属[产酸克雷伯菌（K．ox）23株,肺炎克雷伯菌臭鼻亚种（K．oz）18株,土生克雷伯菌（K．te）10株]所产各种β—lase。结果（1）51株克雷伯菌属β—lase总检出率为80．4％,其中单独产青霉素酶、广谱酶、ESBLs菌株分别为7、4、21株,产ESBLs菌株总数32株（62．8％）,未检出头孢菌素酶和碳青霉烯酶：产复合酶11株（21．6％）,均产AmpC酶＋ESBLs。（2）在4种产酶形式中,K．te检出率分别10．0％、10．0％、20．0％、20．0％;K．oz检出率分别5．6％、5．6％、33．33％、27．8％：K．ox检出率分别13．0％、8．7％、56．5％、17．4％。结论（1）本组51株克雷伯菌属产β-lase总检出率很高,其中K．ox最高;（2）4种产酶形式以AmpC酶、ESBI。S为主,未检出头孢菌素酶和碳青霉烯酶,各种克雷伯菌属菌所产各种酶的检出率不同。     

双抑制剂扩散协同法检测AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶

目的探讨双抑制剂扩散协同法(double inhibitors diffuse synergr test,DIDST)检测AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的临床应用价值。方法氯唑西林作为AmpC酶的抑制剂,而克拉维酸作为ESBLs的抑制剂,采用DIDST同时检测56株革兰阴性杆菌的AmpC酶和ESBLs,并以改良酶提取物三维试验和纸片扩散法确证试验分别作为AmpC酶和ESBLs的确证试验。结果DIDST检出单产AmpC酶菌株16株(28.6%),单产ESBLs菌株20株(35.7%),同时产AmpC酶和ESBLs菌株5株(8.9%)与改良酶提取物三维试验检测AmpC酶符合率为100%,而与纸片扩散法确证试验检测ESBLs的符合率均为96.4%。结论DIDST可同时检测AmpC酶和ESBLs,方法准确、简便,适用于临床微生物实验室。     

大肠埃希菌产质粒介导AmpC酶的基因型检测

目的 了解大肠埃希菌产质粒介导AmpC酶的现状及其基因型.方法 收集任一第三代头孢菌素和头孢西丁耐药的大肠埃希菌临床分离株42株,以改良三维试验检测超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)和AmpC酶,用碱裂解法提取质粒,应用多重聚合酶链反应(multiplex polymerase chain reaction,MPCR)对AmpC酶的基因进行检测,对PCR扩增阳性的样本进行基因测序以确定基因型.结果 42株大肠埃希菌中,经三维试验检测,单纯产ESBLs者18株(42.8%),单纯产质粒AmpC酶者4株(9.5%),同时产质粒AmpC酶与ESBLs者1株(2.3%),5株AmpC酶三维试验阳性菌株,经PCR扩增其中4株扩增到了清晰的条带,1株扩增为阴性,PCR产物经测序分析其基因型均为DHA-1型.结论 大肠埃希菌临床分离株产ESBLs率较高,并己经出现了质粒介导的AmpC酶,其基因型为DHA-1型.     

重症监护病房铜绿假单胞菌β-内酰胺酶检测与耐药特征分析

目的了解上海市长宁区中心医院重症监护病房铜绿假单胞菌β-内酰胺酶产生情况,为临床治疗及控制医院感染提供依据。方法用K-B法进行常规药敏试验,筛选出78株多重耐药铜绿假单胞菌,用改良三维试验检测各种β-内酰胺酶,同时用2-巯基丙酸抑制试验检测金属酶。结果 78株铜绿假单胞菌中产超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)5株(6.4%)、产碳青酶烯酶(AmpC)31株(39.7%),17株同时产ESBLs和AmpC(21.8%),金属酶筛选出12株(15.4%)阳性。结论该院铜绿假单胞菌β-内酰胺酶以AmPC酶为主,临床应根据药敏试验结果,合理选用抗生素,以减少耐药菌株产生和控制医院感染。     

AmpC酶及超广谱β内酰胺酶在126株革兰阴性杆菌中的分布

目的：研究临床分离的革兰阴性杆菌不同菌株产AmpC酶及超广谱β内酰胺酶(ESBLs)的分布。方法：AmpC酶的检测是通过冻融法获得酶粗提物,然后作三维试验,以狭缝与抑菌圈交界处是否出现扩大的长菌区域来判断试验的结果。ESBLs的检测是采用纸片确证试验。结果：126株对第三代头孢菌素耐药或中介的革兰阴性杆菌中产AmpC酶株有58株(占46％),产ESBLs株有28株(占22．6％)。结论：ESBLs及AmpC酶已成为介导革兰阴性杆菌耐药的两大主要因素。     

产ESBLs、ESBLs+AmpC酶的肺炎克雷伯菌检出及其耐药性分析

近年来,随着β-内酰胺类抗生素,尤其是头孢三代类药物的广泛应用,引起产超广谱β-内酰胺酶（ESBb）、AmpCβ-内酰胺酶（AmpC酶）、ESBLs＋AmpC酶等一系列耐药菌株的产生,细菌耐药现象日益严重。为更好地了解我院临床分离菌株中产ES-BLs、ESBLs＋AmpC酶肺炎克雷伯菌的检出率及耐药性,对138株肺炎克雷伯菌进行ESBLs、ESBLs＋AmpC酶测定及药敏试验,现将结果报道如下。     

大肠埃希菌超广谱β-内酰胺酶与AmpC酶耐药性分析

目的研究本地区大肠埃希菌产超广谱β-内酰胺酶与AmpC酶耐药性。方法收集临床分离无重复大肠埃希菌共116株,利用双纸片协同法检测超广谱β-内酰胺酶(ESBLs);利用3-氨基苯酚硼酸对AmpCβ-内酰胺酶的抑制作用检测表型AmpC酶。K-B法测定细菌对抗生素的耐药性。结果116株大肠埃希菌ESBLs阳性43株(37.1%),ESBLs与AmpC酶同时阳性10株(8.6%),表型未检出AmpC酶单独阳性株。大肠埃希菌的产酶株及非产酶株对碳青霉烯类100%敏感,但产酶株(尤其是同时产ESBLs与AmpC酶)比非产酶株耐药率高,多重耐药性更常见。结论从本院患者送检标本分离的大肠埃希菌中发现AmpC酶,应引起临床重视。碳青霉烯类药物可作为治疗产酶细菌感染的首选药物。     

铜绿假单胞菌产AmpC酶和ESBLs的检测和耐药性分析

目的 研究AmpC酶和ESBLs在临床分离铜绿假单胞菌中的分布及其对耐药性的影响.方法 纸片扩散法测定19种抗生素的耐药性,三维试验检测高产AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）.结果 92株铜绿假单胞菌中,单纯高产AmpC酶者,单纯产ESBLs者,高产AmpC酶并产ESBLs者分别为17.4%、8.7%、10.7%.产酶菌株仅对美洛培南亚胺培南敏感,对大多数抗生素耐药.非产酶菌株对头孢西丁、氨苄西林/舒巴坦、头孢噻肟、头孢唑林高度耐药,对大多数抗生素敏感.结论 产ESBLs和高产AmpC酶的铜绿假单胞菌在临床分离菌株中阳性率较高,产酶菌株对大多数抗生素的耐药性明显高于非产酶菌株.     

肺炎克雷伯菌AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶的检测及耐药分析

目的:探讨本地区肺炎克雷伯菌AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的产生情况及其耐药性。方法:收集80株临床分离无重复肺炎克雷伯菌,通过改良三维试验检测肺炎克雷伯菌AmpC酶和ESBLs的产生情况,运用K-B琼脂扩散法进行药物敏感性试验。结果:从80株临床送检标本中分离的肺炎克雷伯菌中检出单产ESBLs25株,单产AmpC酶8株,同时产AmpC酶和ESBLs共4株,检出率分别为31.3%、10.0%和5.0%。单产AmpC酶、ESBLs及同时产AmpC酶和ESBLs对抗生素的耐药率均高于不产酶菌株(除哌拉西林/他巴唑)。结论:产Ampc酶及ESBLs酶的细菌的耐药性不完全相同,产酶类型不同需选用不同类型的抗生素。     

大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌产ESBLs和AmpC酶及传播方式的检测

目的了解大肠埃希菌(E.coli)和肺炎克雷伯菌(K.pn)产ESBLs和AmpC酶的发生率、耐药性情况及传播方式。方法对临床分离的66株E.coli和38株K.pn,用ESBLs表型确证试验纸片扩散法检测ESBLs,酶提取物三维实验检测AmpC酶,琼脂二倍稀释法测定最低抑菌浓度(MIC),质粒反式接合实验检测耐药基因的传播。结果E.coli和K.pn产ESBLs/AmpC酶的发生率分别为74.2%(49/66)/10.6%(7/66)和71.0%(27/38)/13.1%(5/38),同时产ESBLs和AmpC酶的E.coli和K.pn分别为7.6%(5/66)和10.5%(4/38)。这些产酶株对三代头孢菌素、氨曲南、头孢美唑全部耐药,对含酶抑制剂复合物敏感性较低,对亚胺培南敏感;产ESBLs菌株的传播绝大部分依赖质粒水平转移,而产AmpC酶菌株的传播只有小部分依赖质粒水平转移。结论临床分离的E.coli和K.pn菌株大部分产ESBLs或AmpC酶,且存在一定比例既产ESBLs又产AmpC酶的菌株,对这些菌株的监测和阻止其传播具有重要意义。