促红细胞生成素对全脑缺血再灌注损伤大鼠血红素加氧酶-1表达的影响

目的探讨促红细胞生成素（EPO）对大鼠脑缺血再灌注后血红素加氧酶1（HO-1）表达的影响。方法随机将雄性SD大鼠分为缺血再灌注组、治疗组、假手术组。治疗组按照缺血再灌注后不同时间点给予EPO腹腔注射,假手术组不手术,于各时间点断头取脑,用逆转录-聚合酶链反应技术检测大鼠皮层HO-1 mRNA的表达。结果① 全脑缺血再灌注后HO-1 mRNA的表达发生动态变化,缺血后6h开始明显升高,24h达高峰,此后缓慢下降;② EPO能够显著上调全脑缺血后皮层HO-1 mRNA的表达,缺血再灌注后即注射EPO组与缺血再灌注组各时间点HO-1和β-actin吸光度的比值差异有统计学意义（P＜0.05 ）。结论EPO的神经保护作用可能部分通过上调HO-1的表达来实现。     

细胞穿透肽PEP-1介导血红素加氧酶-1对大鼠缺血心肌的转导及影响

目的:探讨细胞穿透肽PEP-1介导血红素加氧酶-1(HO-1)对大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响。方法:制备融合蛋白PEP-1/HO-1,通过酶联免疫吸附法检测给予融合蛋白后各时间点血清HO-1水平,探讨动物实验给予融合蛋白的最佳时间点。健康雄性SD大鼠18只,体重220-280g,随机分为3组:正常对照组(C组,n=6)、缺血再灌注组(IR组,n=6)和PEP-1/HO-1处理+缺血再灌注组(HO组,n=6)。制备心肌缺血再灌注损伤模型,于再灌注结束后,测定血清肌酸激酶(CK)和乳酸脱氢酶(LDH)的活性及心肌梗死面积。结果:给予融合蛋白后,血清HO-1蛋白浓度在1h和3h达峰值。与C组比较,IR组血清CK和LDH活性升高,心肌梗死面积增加(P<0.05);与IR组比较,HO组血清CK和LDH活性降低,心肌梗死面积减少(P<0.05)。结论:细胞穿透肽PEP-1介导的HO-1对大鼠心肌缺血再灌注损伤具有保护作用。     

血红素加氧酶1对糖尿病大鼠脊髓背角神经元凋亡及痛敏的影响

目的探讨血红素加氧酶1（heme oxygenase-1,HO-1）对链脲菌素（streptozotocin,STZ）诱导的糖尿病大鼠脊髓背角神经元凋亡和神经病理性疼痛的影响以及两者之间可能存在的关系。方法成年雄性SPF级Wistar大鼠24只,体重180～220g,随机分为3组（n=8/组）：正常对照组（C组）,糖尿病组（B组）,Hemin干预组（A组）。A组、B组单次腹腔注射链脲菌素65mg/kg建立糖尿病模型。建模成功后,A组Hemin25μmol/kg隔天腹腔注射1次,连续6周,B、C组同一时间腹腔注射等体积生理盐水。于注射STZ前以及注射STZ后每周测定大鼠后肢机械性缩足反应阈值（mechanical withdrawal threshold,MWT）,6周后麻醉下取坐骨神经电镜观察病理学变化,处死大鼠取L4-6脊髓,尼氏体染色法光镜下观察脊髓背角组织的形态学变化,免疫组化法测定脊髓背角HO-1蛋白的表达,原位末端标记法（TdT-mediated dUTP nick end labeling,TUNEL法）检测脊髓背角凋亡神经元并计算凋亡指数。结果 A组大鼠MWT于注射STZ后28d时较B组明显增加（P〈0.05）,35d时显著增加（P〈0.01）,42d达峰值;A组大鼠于注射STZ后42d时脊髓背角神经元中HO-1的表达较B组增强,而B组较C组也有所增强;A组脊髓背角病理改变程度、坐骨神经髓鞘病变程度及脊髓背角神经元细胞凋亡程度均较B组轻微。结论糖尿病神经病理性疼痛大鼠中存在着脊髓背角神经元的凋亡,HO-1表达上调可对其有一定的抑制作用,并能够减轻神经病理性疼痛,糖尿病大鼠痛敏的形成与脊髓背角神经元凋亡之间可能存在着一定的关系。     

硫化氢供体对实验性高肺血流性肺动脉高压及内源性一氧化碳/血红素氧合酶体系的影响

目的:探讨硫化氢供体--硫氢化钠(sodium hydrosulfide,NaHS)对大鼠高肺血流性肺动脉高压及内源性一氧化碳(carbon monoxide,CO)/血红素氧合酶(heme oxygenase,HO)体系的影响.方法:将32只雄性SD大鼠随机分为分流组(n=8)、分流+NaHS组(n=8)、假手术组(n=8)和假手术+NaHS组(n=8).对分流组和分流+NaHS组大鼠行腹主动脉-下腔静脉穿刺建立高肺血流动物模型.分流11周后,测定肺动脉收缩压(systolic pulmonary artery pressure,SPAP)和肺组织CO含量;光镜下计算肺血管中肌型动脉(muscularized artery,MA)、部分肌型动脉(partially muscularized artery,PMA)和非肌型动脉(non-muscularized artery,NMA)百分比,以及肌型动脉的相对中膜厚度(relative medial thickness,RMT)和相对中膜面积(relative medial areas,RMA);电镜下观察其超微结构变化;应用蛋白质免疫印迹技术(Western blot)检测大鼠肺组织HO-1含量.结果:术后11周,分流组与假手术组比较,大鼠SPAP增高48.6%;肺MA和PMA百分比分别升高74.2%和90.9%,NMA百分比降低32.2%,在中型MA和小型MA中RMT分别升高83.6%和86.9%,RMA分别升高74.4%和39.9%;大鼠肺腺泡水平肌型动脉内皮细胞变性明显,内外弹力层不规则,平滑肌细胞体积增大,呈合成表型;大鼠肺组织CO和HO-1含量变化不明显.而分流+NaHS组与分流组比较,大鼠SPAP降低19.8%;肺MA和PMA百分比分别降低14.4%和12.2%,NMA百分比升高13.9%,在中型MA和小型MA中RMT分别升高16.2%和14.3%,RMA分别升高26.9%和14.3%;大鼠肺腺泡水平肌型动脉内皮细胞变性减轻;内弹力层比较规则;平滑肌细胞呈收缩表型;大鼠肺组织CO含量升高25.5%,HO-1蛋白表达升高114.3%.结论:NaHS可以缓解高肺血流性肺动脉高压形成和肺血管结构重建,其作用机制可能与调节内源性CO/HO-1体系变化有关.     

冠心病合并心力衰竭患者血清HO-1/CO系统水平变化及其意义

目的 通过比较冠心痛所致慢性心力衰竭患者及冠心痛心功能正常患者血清血红素加氧酶-1(HO-1)及一氧化碳(CO)水平差异,进一步探讨HO-1/CO系统在慢性心力衰竭发病中的保护机制.方法 选择慢性心力衰竭患者91例作为观察组,以72例冠心病心功能正常患者作为对照组,采用双抗体酶联免疫吸附(ELISA)测定HO-1浓度,Chalmer S法检测血清CO浓度;通过心力衰竭调查表记录入两组病例一般临床资料,并进行肝肾功能、血脂、NT-proBNP、BNP及心脏超声心动图等检查.结果 观察组血清HO-1水平(8.13±0.27) ng/mL高于对照组(2.80±0.52)ng/mL;观察组CO水平(0.35±0.06)mg/L低于对照组(0.59±0.07) mg/L,差异均有统计学意义(P＜0.01);观察组HO-1水平随心功能分级增高而逐渐增高(P＜0.01),而CO水平随心功能分级增高而逐渐降低(P＜0.01).结论 慢性心力衰竭患者随着心力衰竭加重血清HO-1水平高表达,内源性CO因心力衰竭加重后消耗而逐渐降低.     

血红素加氧酶-1/一氧化碳通路在神经病理性疼痛中作用的研究进展

神经病理性疼痛由各种不同疾病或损伤所引起,成为疼痛治疗的难点之一。血红素加氧酶-1（HO-1）是血红素代谢过程中的重要酶,它将血红素转化为CO、胆绿素和Fe 2+。HO-1/CO通路在抗炎、抗氧化应激、抗细胞凋亡等方面发挥保护作用。近年来有较多研究也表明HO-1/CO通路在缓解疼痛方面有重要作用。     

阿霉素诱导亚铁血红素氧化酶-1在大鼠肝、脾和肾脏组织的表达及其对肝功能的影响

目的：观察阿霉素诱导亚铁血红素氧化酶-1（HO-1）在大鼠肝、脾和肾脏组织的表达及对肝功能的影响。 方法：雄性Wistar大鼠随机分为空白对照组、小剂量阿霉素组(1 mg•kg^-1) 和大剂量阿霉素组(10 mg•kg^-1)，分别于给药后6、12、18、24和48 h切取阿霉素组与对照组部分肝脏用蛋白电泳法检测HO-1表达，切取注药后48 h阿霉素组和对照组部分肝、脾和肾行HO-1免疫组化染色，同时检测三组大鼠肝功能、血清ET-1和TNF-α。 结果：蛋白电泳检测显示HO-1蛋白在正常肝脏内的表达阴性；给药后6 h两组均可检测出HO-1的表达，24 h达到高峰，48 h HO-1表达已明显减弱。免疫组化染色显示，注射阿霉素48 h,肝、脾和肾仍可见大量HO-1染色阳性细胞；对照组肝脏无染色阳性细胞，脾肾可见少量染色阳性细胞。肝功能指标、血清TNF-α和ET-1对照组与小剂量阿霉素组差异无显著性(P>0.05)，大剂量阿霉素组上述指标明显高于对照组和小剂量阿霉素组(P<0.05)。 结论：阿霉素可诱导肝脏、脾脏和肾脏HO-1表达，小剂量阿霉素对大鼠肝脏未造成明显损害。     

婴幼儿喘息性疾病血红素加氧酶-1与一氧化碳的临床意义

目的探讨血红素加氧酶-1（HO-1）与一氧化碳（CO）在喘息性疾病婴幼儿血清中含量变化及其临床意义。方法收集112例4岁以下喘息患儿,根据《儿童社区获得性肺炎管理指南（2013修订）》分为重症组（存在低氧血症）49例和轻症组（无低氧血症）63例;选择同期同年龄段急性支气管炎患儿58例为对照组。采用双抗体夹心ELISA技术测定患儿血清HO-1含量,应用双波长分光光度法测定患儿血中碳氧血红蛋白（COHb）含量,进行组间比较分析。结果急性期（入院时）3组间HO-1和COHb含量差异均有统计学意义（均P＜0.01）,两两比较,仅重症组（2577.01±879.47）ng/L、（3.84±0.87）%明显高于轻症组（1382.90±731.80）ng/L、（1.17±0.60）%和对照组（1113.73±606.25）ng/L、（1.01±0.54）%（均P＜0.01）。重症组HO-1和COHb含量,均为急性期高于恢复期（均P＜0.01）。急性期重症组HO-1与COHb含量呈正相关（r=0.340,P＜0.05）。结论HO-1和CO可能参与婴幼儿喘息性疾病发展过程,急性重症期两者呈正相关,具有诊断疾病、判断严重程度与预后等临床意义。     

血红素加氧酶/一氧化碳系统与糖尿病血管并发症

内源性一氧化碳是一种气体信使分子,是血红素的降解产物。血红素加氧酶是血红素降解过程的限速酶。由于血红素加氧酶/一氧化碳系统具有多种生理学作用,而备受关注。糖尿病长期高血糖使该系统的正常生理作用减弱可能是糖尿病血管并发症的一个重要原因。本文就血红素加氧酶/一氧化碳系统在糖尿病血管并发症中的作用进行综述。     

内源性一氧化碳/血红素氧合酶系统对慢性低氧大鼠脑损伤的影响

近几年来，有多项动物研究发现，内源性一氧化碳(CO)／血红素氧合酶(HO)系统在缺血缺氧性脑损伤过程中有过度升高，提示该系统在缺血缺氧性脑损伤中具有潜在的病理生理意义。本研究的目的是建立低氧模型，了解慢性间断低氧对大鼠脑神经元和微血管的影响，研究HO抑制剂锌原卟啉-9(ZnPP-IX，以下简称ZnPP)对低氧鼠脑的影响，初步探讨内源性CO／HO对慢性间断低氧大鼠脑的作用。     

氯化血红素对大鼠肝脏血红素加氧酶1的诱导表达

目的观察氯化血红素（hemin）对大鼠肝脏血红素加氧酶-1（HO-1）的诱导表达作用。方法SD大鼠18只随机分为两组：氯化血红素处理组共10只，每日早晨hemin15mg／kg腹腔注射，每24h重复1次；生理盐水对照组共8只，每日早晨同时间腹腔注射等量生理盐水，每24h重复1次。第10d处死大鼠后检测血清ALT、AST水平，用免疫组织化学方法观察肝组织HO-1的表达，采用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）检测肝组织HO-1mRNA表达。结果hemin处理组与生理盐水对照组大鼠血清ALT，AST水平无明显差异。hemin处理组肝组织HO-1表达明显高于生理盐水对照组。结论hemin能诱导大鼠肝组织HO-1表达明显增加。     

一氧化氮对高热惊厥大鼠海马血红素氧合酶/一氧化碳体系的影响

目的　研究一氧化氮合酶(NOS)抑制剂Nω硝基L 精氨酸甲酯(L-NAME)对反复高热惊厥(FS)大鼠海马血红素氧合酶1(HO- 1)mRNA和蛋白表达及一氧化碳(CO)含量的影响,以探讨一氧化氮(NO)对HO/CO体系的调节作用。方法　采用热水浴诱导大鼠FS。将发育期大鼠随机分为3组:对照组,FS组和FS+L- NAME组。分光光度计间接测定血浆NO和CO含量;核酸原位杂交法检测海马神经元HO- 1mRNA表达;Western印迹方法检测海马神经元HO -1蛋白含量。结果　与对照组比较,反复FS后海马神经元HO -1mRNA表达明显增高,HO -1蛋白含量升高208% (P<0 .01),血浆CO含量增高94 .57% (P<0. 01)。用L NAME干预FS,血浆NO含量下降13 79% (P<0. 05),海马HO 1mRNA表达明显下降,HO .1蛋白表达下降30 .19% (P<0 .01),血浆CO含量下降16 14% (P<0. 05)。结论　反复FS时,外源性给予NOS抑制剂可降低NO含量,同时引起HO 1的基因表达及CO含量下降。     

软坚护肝片对四氯化碳所致小鼠急性肝损伤的保护作用

目的观察软坚护肝片（RJHGT）对四氯化碳（CCl4）所致小鼠急性肝损伤的保护作用,并探讨其作用机制。方法腹腔注射CCl4制备小鼠急性肝损伤模型,检测血清谷丙转氨酶（AST）、谷草转氨酶（ALT）、碱性磷酸酶（AKP）活性及总抗氧化能力（T—AOC）;检测肝组织丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽（GSH）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）活性。结果RJHGT各组能够减轻肝细胞损伤程度,与模型组比较,RJHGT能降低血清ALT、AST、AKP的活性及肝组织中MDA、GSH的含量（P〈0．01或〈0．05）;提高T-AOC能力及SOD、GSH．PX的活力（P〈0．01或〈0．05）。结论RJHGT对CCl4所致小鼠急性肝损伤具有明显的保护作用,其机制可能与其抗脂质过氧化作用有关。     

高热惊厥大鼠血红素氧合酶-1/一氧化碳体系的变化

目的:研究血红素氧合酶-1(heme oxygenase-1,HO-1) /一氧化碳(carbon monoxide,CO)体系与高热惊厥(febrile convulsion, FC)的关系.方法:采用热水浴诱导大鼠FC,隔日诱导惊厥1次,共诱导10次.发育期大鼠随机分为2组:37.0 ℃水浴正常对照组(n=12),高热处理(44.5 ℃热水浴)组(n=33),高热处理组又分出高热未惊厥组(FC=0,n=13)和FC组(FC≥6次,n=16).用组织原位杂交技术观察大鼠海马CA1区、CA3区和齿状回HO-1 mRNA的变化,用分光光度计检测大鼠左侧颞叶皮层和海马组织匀浆及血浆中CO含量.结果: FC组海马CA1区、CA3区和齿状回HO-1 mRNA表达明显高于正常对照组及高热未惊厥组(P<0.01),FC组脑组织匀浆及血浆中CO含量亦明显高于正常对照组及高热未惊厥组(P<0.05,P<0.01).结论:热水浴诱导大鼠FC可导致HO-1 mRNA表达的增高,并使CO产生增多.     

鱼腥草乙醇提取物对四氯化碳诱导的大鼠急性肝损伤的保护作用

[目的]观察鱼腥草乙醇提取物对四氯化碳诱导的大鼠急性肝损伤的影响.[方法]将SD大鼠分为正常对照组、模型对照组、阳性对照组及大、小剂量鱼腥草乙醇提取物组.分别灌胃给予生理盐水、水飞蓟宾和鱼腥草乙醇提取物,共7 d,最后1天腹腔注射给予四氯化碳,检测各组大鼠血清中丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)及碱性磷酸酶(ALP)值;采用黄嘌呤氧化酶法和硫代巴比妥酸法分别检测肝匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和丙二醛(MDA)水平.[结果]与正常对照组比较,模型对照组血清中ALT,AST,ALP水平显著增加;与模型对照组比较,大剂量鱼腥草乙醇提取物组血清中ALT,AST,ALP活性显著下降,胞浆中SOD和CAT活性明显提高,MDA水平显著降低.[结论]鱼腥草乙醇提取物对四氯化碳所致的大鼠急性肝损伤具有保护作用.     

阿霉素诱导亚铁血红素氧化酶-1对大鼠肝脏缺血再灌注的保护作用

目的:探讨阿霉素诱导亚铁血红素氧化酶-1(HO-1)对大鼠肝脏缺血再灌注的保护作用及其机制。 方法:48只雄性Wistar大鼠,随机分成6组（每组8只）：正常组(N)、阿霉素组(DOX)、原卟啉锌-Ⅸ组(ZnPP)、缺血再灌注组(IR)、阿霉素+缺血再灌注组(DOX-IR)和阿霉素+原卟啉锌+缺血再灌注组(DOX-ZnPP-IR)。测定血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)及乳酸脱氢酶(LDH)含量作为肝功能指标;放射免疫法测定血清肿瘤坏死因子(TNF-α)和内皮素(ET)作为应激标志物指标;应用Western blotting法和免疫组织化学S-P法观察HO-1蛋白表达;透射电子显微镜观察细胞超微结构变化。 结果:DOX-IR组ALT、AST、ET-1和TNF-α值均显著低于IR组 (P<0.05);DOX组与正常组比较,肝功能、ET-1和TNF-α值差异无显著性 (P>0.05);DOX-ZnPP-IR组与IR组比较,肝功能值差异无显著性(P>0.05)。Western blotting法和免疫组织化学S-P法检测显示DOX 组和DOX-IR组 HO-1蛋白表达增加,HO-1在正常肝脏内的表达呈阴性。透射电镜检查IR组肝细胞细可见明显的细胞器损害现象,DOX -IR细胞器受损较轻。 结论：阿霉素预处理可以提高器官对缺血再灌注损伤的耐受性,其机制可能与阿霉素所诱导的HO-1表达有关,小剂量阿霉素对大鼠肝脏未造成明显损害。