兔抗人睾丸乳酸脱氢酶同工酶-X抗血清的制备纯化及免疫性质探讨

以纯化的人睾丸乳酸脱氢酶同工酶-X(简称人LDH-X)为抗原免疫家免,制备了兔抗人睾丸乳酸脱氢酶同工酶-X抗血清(简称人LDH-X抗体)。用辛酸法纯化该抗体。以双扩及免疫电泳鉴定,均呈现单一沉淀线。经免疫交叉反应试验证明人LDH-X与人LDH_(1-5)同工酶有不同的免疫决定簇;纯化的人LDH-K抗体只与人睾丸匀浆、人精液呈现单一沉淀线,而与鼠睾丸LDH-X、兔及牛睾丸匀浆均无交叉反应。从而显示纯化的人LDH-X抗体具有较强的种属特异性。     

大鼠睾丸乳酸脱氢酶同工酶－C_4的分离纯化研究

采用加热、硫酸铵分段盐析和ＤＥＡＥ－ＳｅｐｈａｄｅｘＡ－５０柱层析，从大鼠睾丸中分离纯化了ＬＤＨ－Ｃ４。比活性提高７８４倍，活性回收率为１２．３％，纯化的ＬＤＨ－Ｃ４经聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＰＡＧＥ）鉴定均为一条酶带，位于ＬＤＨ３和ＬＤＨ４之间。     

凝胶过滤层析纯化乳酸脱氢酶同工酶

乳酸脱氢酶 (LDH)广泛存在于生物细胞内。它以NAD+ 为辅酶 ,在细胞代谢过程中起重要的调节作用 ,是最早发现的同工酶之一。近年来随着酶法分析的应用 ,酶促偶联反应不断应用于临床医学及其他研究领域。特别是正确选择以NAD+ 、NADP+为辅酶的脱氢酶做标记酶、工具酶 ,以便准确测定组织中其他一些酶的特性已成为许多人的研究内容[1] 。 2 0世纪 70年代以前常用硫酸盐及有机溶剂分级沉淀 ,然后用离子交换层析分离纯化。这些方法分离周期长、酶活性损失大。近年来也采用亲和层析 ,但需具备一定的条件。本文采用凝胶过滤层析技术 ,建立了一…     

乳酸脱氢酶同工酶

<正> 1952年,Neidlands将牛心肌的乳酸脱氢酶结晶用超速离心法分离,只显示一个峰,用电泳分离法分离得到两条区带,而且二者均具有乳酸脱氢酶(LDH)活性。他第一个发现了LDH的不均一性,否定了一种结晶酶只含一种酶的原始概念,为以后的同工酶研究开创了良好的开端。1957年,Vesell等发现人血清     

精子乳酸脱氢酶同工酶-X在不育患者中的表达

目的 测定不育患者精子乳酸脱氢酶同工酶X的含量，探讨其对男性不育诊断的意义。方法 选择84例不育患者为研究对象（Ⅰ组），对照组为生殖能力正常的61例（Ⅱ组）。精液乳酸脱氧酶X测定采用定量检测试剂盒，用两点法测定。结果不育患者精子乳酸脱氢酶X较对照组均有明显下降，与对照组差异有显著性（P〈0．01），且与精子的A级＋B级具有相关性（r=0．674，P〈0．05）。结论 不育患者精子乳酸脱氢酶X含量下降，能反映精子的活力，是男性不育临床诊断的较好指标。     

移动电话电磁辐射对睾丸乳酸脱氢酶同工酶的影响

目的 :探讨移动电话的电磁辐射对雄鼠生殖功能的影响。方法 :用移动电话的模拟辐射源对小鼠进行全身辐射 ,辐射频率为 935MHz ,每天 2h ,连续 35d ,平均功率密度分别为 0 ,5 70 ,14 0 0 μW·cm-2 。照射 35d后取双侧睾丸和附睾称重 ,并观察睾丸乳酸脱氢酶 (LDH)及其同工酶 (LDH X)的活性和睾丸组织结构及电镜超微结构的变化。结果 :各组间的睾丸和附睾的脏器系数差异无显著性 (P >0 .0 5 ) ;但 14 0 0 μW·cm-2 辐射组的LDH X活性显著下降 (P <0 .0 5 ) ,并出现精子超微结构的改变。结论 :移动电话的电磁辐射可以降低睾丸乳酸脱氢酶同工酶活性 ,可能存在生殖毒性。     

棉酚对人精子乳酸脱氢酶-X 的影响

对10例服棉酚者的精子作LDH同功酶组织化学检查和电泳观察,结果:①精子颈体部的组化反应形成的沉淀主要是LDH-X,服药后沉淀变粗,数量减少以至消失;LDH-X占总LDH的平均含量百分率为42.6％,服药30、50和100天后则分别为31.1,26.3和10.2％,下降显著,提示棉酚可干扰精子的能量代谢。②LDH-X的变化程度因个体对棉酚的敏感性不同而有差异。LDH-X组化检查法简便、特异,可作为判断精子质量的敏感指标。     

人体睾丸组织乳酸脱氢酶同工酶相对活性测定的研究

以成人正常睾丸对照胎儿及成人萎缩睾丸,用琼脂糖凝胶电泳法检测了成人睾丸匀浆中LDH同工酶酶谱。只有成人睾丸匀浆中有一特异同工酶区带-LDHx,介于LDH_3与LDH_4之间,其相对活性为15.1%。LDHx作为精原细胞、精子及精液内LDH同工酶的特异分子形式,它对精子发生及生育能力具有重要意义,因此LDHx的消失或相对活性的降低都将反映睾丸组织生育功能的改变。LDHx的检测也展示了对抗生育研究的前景。     

猪囊尾蚴乳酸脱氢酶和苹果酸脱氢酶同工酶的观察

本文对猪囊尾蚴的乳酸脱氢酶(LDH)和苹果酸脱氢酶(MDH)二种同工酶谱进行了观察。结果表明猪囊尾蚴LDH和MDH同工酶谱均有五条酶带。     

乳酸脱氢酶同工酶测定探讨

同工酶属于多种形式的酶类,虽然它们的蛋白结构不同,生理功用不同,以及理化性质不同,但它们的催化功能相同。为了建立较满意的乳酸脱氢酶(LDH)同工酶分离及测定方法,笔者采用本法对无心、肝、骨骼肌病症的正常人血清随机选择17例,采用琼脂糖电泳法对制板、点样、电泳、酶带染色、比色定量等实验条件进行了探讨。1实验原理以琼脂凝胶作载体,电泳分离血清,用试剂凝胶显色定位,以乳酶钾(或钠)为基质,在有氧化型酶工存在时LDH可使乳酸脱氢生成丙铜酸,使NAD(辅酶)还原为NADH2(还原型酶工),NADH2又将氢传递给吩嗪二甲酯硫酸盐(PMS),PMS…     

猕猴血清蛋白和乳酸脱氢酶同工酶的电泳分析

随着科学技术的发展,在生物医学的研究中越来越广泛地使用猕猴(Macaca mulatta)作为实验动物,因此对正常猕猴的各项生理生化指标的测定十分必要。有关猕猴的血像国内已有一些报道,而猕猴乳酸脱氢酶同工酶谱的报道不多,本文主要报道正常猕猴血清蛋白的电泳结果和乳酸脱氢酶(LDH)同工酶谱。材料和方法 1.动物上海实验动物研究中心动物室的健康成年猕猴20只,雌雄各半,体重为4～7kg,产地为江西省官山自然保护区。 2.采血同日上午8～9点对20只猕猴     

猕猴组织乳酸脱氢酶同工酶测定

猕猴(Macaca mulatta)是一种常用实验动物,广泛用于医学实验,因此,对正常猕猴各项生理生化指标的测定显得十分必要。近年来对其血清分析和蛋白质的多态研究较多,有关猕猴血清乳酸脱氢酶(LDH)同工酶的正常值国内已有报道,但关于猕猴组织LDH同工酶谱尚未见报道。本文应用聚丙烯酰胺凝胶电泳法,比较分析猕猴的心、肺、肝、脾、肾、骨骼肌、胃和肠等8种组织的LDH同工酶的组织分布特异性,为应用猕猴的研究工作提供一些生化数据。材料和方法一、材料上海实验动物研究中心饲养的猕猴,雌雄各1只,体重2公斤左右,产地贵州。二、方法 1.组织液的提取:动物经麻醉放血后,每只猕猴取心肌(左心室)、肺(左上叶)、肝(左叶外缘)、     

东方田鼠乳酸脱氢酶同工酶研究

以ＤＢＡ／２小鼠和Ｗｉｓｔａｒ大鼠作对照，用ＴｉｔａｎⅢ醋酸纤维板电泳技术对东方田鼠（Ｍｉｃｒｏｔｕｓｆｏｒｔｉｓ）的血清、红细胞、骨髓、肝、肾的ＬＤＨ同工酶作了分型测定，对电泳酶谱作了光密度扫描，测定各同工酶组分相对活力，并根据ＬＤＨ同工酶分子结构计算了酶分子中Ａ，Ｂ亚基的含量。结果显示：东方田鼠的血清、红细胞、骨髓和肝中仅含ＬＤＨ５，肾中５种ＬＤＨ同功酶组分均存在，以ＬＤＨ５活力最强；ＬＤＨ同工酶分子Ａ、Ｂ亚基含量与其同工酶活力相对应，除肾内Ａ亚基为０．７０、Ｂ亚基为０．３０外，其他组织中均仅含Ａ亚基。     

东方田鼠乳酸脱氢酶同工酶的研究

为了解普通级KM、NIH、BABL/c小鼠群的健康状况，对2288只淘汰的繁殖群小鼠进行剖检。结果发现KM繁殖群1（KM-1）、KM繁殖群2（KM-2）、NIH、BALB/c小鼠的肺部病变分别为：19.20%（192/1000）、11.85%(34/287)、7.80%(39/500)、11.98%(60/501)；其中肺炎分别占：13.3%()133/1000)、5.57%（16/287）、4.60%(23/500)、9.38%(47/501)；肺肿瘤分别占：5.90%(59/1000)、6.27(18/287)、3.20%(16/500)、2.59%(13/501)。肝脏病变分别为：20.7%(207/1000)、5.57%(16/287)、4.60%(23/500)、1.80%(9/501)。脾脏病变分别为：18.0%(18/1000)、4.88%(14/287)、2.20%(11/500)、1.20%(6/501)。其它器官系统也出现程度不同的病变。剖检结果提示：普通级小鼠群必须提高级别，从实验动物设施、饲养环境条件、饲养方法等诸多方面达到清洁极标准，否则普通级小鼠将影响科研、生产、鉴定等试验结果的准确性、可靠性及重复性。     

乳酸脱氢酶同工酶琼脂糖凝胶电泳的改良

临床实验室测定乳酸脱氢酶（ｌａｃｔａｔｅｄｅｈｙｄｒｏｇｅｎａｓｅ，ＬＤＨ）同工酶的方法目前分为二类，一类是应用免疫抑制法在自动生化分析仪上测定，另一类是做各种载体的电泳来分离区带。我们对醋酸纤维膜和琼脂糖两种载体进行实验，改良了琼脂糖凝胶电泳的方...