胃癌单克隆抗体的制备及其免疫组化研究

以低分化胃癌细胞株MKN-46-9免疫Balb/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0进行融合,获得分泌抗胃癌单克隆抗体的杂交瘤株MG-5,-7,-9及-11。该杂交瘤株可稳定地分泌高效价抗体,能直接用于常规福马林固定,石腊包埋的切片的染色。ABC免疫酶染色表明,对应抗原在各种人体组织的分布有一定的限定性。MG-7及MG-9两种单抗对     

单克隆抗体MG7在大肠癌及腺瘤的免疫组化定位

 应用抗人胃低分化腺癌细胞系MKN46-9的单克隆抗体MG7对112例手术切除的大肠癌标本进行免疫组化观察,阳性106例(94.64％),强阳性占阳性病例的96.23％;96例癌旁粘膜中弱阳性26例(27.08％);14例断端正常粘膜仅1例呈弱阳性。46例大肠腺瘤中管状腺瘤43例,14例阳性(32.56％),3例绒毛状腺瘤均阳性。结果表明,MG7的抗原在大肠癌组织中含量较丰富,并具有相对特异性,同时在癌旁粘膜及大肠腺瘤组织中也有不同程度的表达。     

胃癌单克隆抗体MGcl相应抗原的初步研究

本文报告一株鼠抗人胃癌单克隆抗体MGcl相应抗原的纯化及分析。MGcl经50％饱和硫酸铵盐析,DEAE—52纤维素柱层析后,获得纯化的IgG56,31mg与2g溴化氰活化的sepharose 4B偶联,制备免疫吸附剂。用MGcl免疫亲和层析的方法从胃癌组织中纯化出MGcl相应抗原,经蛋白酶处理,高碘酸氧化,电泳脂蛋白袭色,SDS—PAGE及Immunoblotting等实验分析证实MGcl相应抗原是一种低分子量的糖蛋白,分子量为72Kd和52kd。     

胃癌单克隆抗体MGcl相应抗原的初步研究

本文报告一株鼠抗人胃癌单克隆抗体MGcl相应抗原的纯化及分析。MGcl经50％饱和硫酸铵盐析,DEAE—52纤维素柱层析后,获得纯化的IgG56,31mg与2g溴化氰活化的sepharose 4B偶联,制备免疫吸附剂。用MGcl免疫亲和层析的方法从胃癌组织中纯化出MGcl相应抗原,经蛋白酶处理,高碘酸氧化,电泳脂蛋白袭色,SDS—PAGE及Immunoblotting等实验分析证实MGcl相应抗原是一种低分子量的糖蛋白,分子量为72Kd和52kd。     

胃癌单克隆抗体MG_7、MG_9、MGd_1相应抗原分布的免疫电镜研究

本文应用PAP法包埋前染色对20例不同类型胃癌组织细胞内的MG_7、MG_9、MGd_1相应抗原分布进行了超微结构的定位研究,17例为阳性。初步探讨了此类肿瘤相关抗原可能的合成,分泌运输途径,为临床应用胃癌单克隆抗体开展导向治疗及免疫显像诊断提供了态学依据。     

结肠癌相关抗原MC5—Ag的纯化及分析

本文用一株鼠抗人结肠癌单克隆抗体MC_s,经盐析。DEAE—S_2离子交换层析纯化后与澳化氢活化的Sepharose 4B偶联制备免疫吸附剂。用免疫亲和层析的方法从结肠癌组织中纯化出单抗MC_5相应抗康,经电泳乙酰苏丹黑10B染色,考马斯亮蓝染色,加热实验,高碘酸氧化,SDS—PAGE和免疫印迹等分析证实MC_5相应抗原是一种新的结肠癌相关糖蛋白,分子量分别为67KD和55KD。     

Lectin在单克隆抗体相应抗原研究中的应用

外源性凝集素作为肿瘤碳水化合物抗原研究的理想工具已引起人们的重视。本研究用外源性凝集素对４株胃癌单克隆抗体相应抗原进行了分离、鉴定和检测。首先用刀豆凝集素亲和层析分离胃癌组织Ｎ－糖苷型糖蛋白，并用单抗检测证实单抗ＭＧｄ１，ＭＧ７、ＭＧｂ１、ＭＧｃ１相应抗原均能被刀豆凝集素识别，其中ＭＧｄ１、ＭＧ７也可被ＰＨＡ－Ｅ所识别。Ｌｅｃｔｉｎ－ＭＧ夹心ＥＬＩＳＡ法检测提示四种单抗抗原在肿瘤患者血清中均有分布     

用单克隆抗体研究人类结肠癌的相关抗原

用人类大肠癌细胞株HI29作抗原,融合成三株杂交瘤细胞(Hb_3·Ab_5和Ad_5)。用间接免疫荧光检查,发现这三株细胞产生的抗体,对人类结肠癌组织反应的阳性率分别为86％、45％和58％。三株抗体也对胃癌、胰腺癌和肺癌反应阳性,但对肾癌和各种肉瘤组织阴性。三株抗体对正常结肠上皮阴性,所以能鉴别结肠癌和正常大肠上皮组织,具有相对的器管特异性。此外,抗体对A、B、O型血及人类皮下成纤     

结肠癌单克隆抗体MC3在大肠癌及癌旁病变的表达

应用抗人结肠癌单克隆抗体MC_3、ABC免疫组化染色,对205例大肠癌及癌旁病变进行了观察。MC_3相应抗原在癌旁移行粘膜,轻、中、重度非腺瘤型不典型增生,大肠癌阳性率分别是44.6％、68.4％、80.0％、86.4％、90.2％,阳性率呈递增趋势,而40例正常大肠粘膜全部呈阴性表达。结果表明,MC_3是对大肠癌阳性率较高的标记物,一部分大肠癌可能循非腺瘤途径发生,并对癌旁移行粘膜的性质及临床意义进行了讨论.     

肺癌单克隆抗体3C9及其相关抗原的研究

用肺腺癌细胞系Ａ５４９免疫ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠，常规细胞融合，获得一株ＩｇＭ型单抗３Ｃ９。Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ研究发现该抗体识别５６．４ＫＤ蛋白带。免疫组化研究发现，３Ｃ９相关抗原（３Ｃ９Ａｇ）在肺癌组织中表达阳性率高达９２．５％。３Ｃ９Ａｇ血清学研究发现，其诊断肺癌的敏感性为６４．７％，特异性为９３．０％，准确性为８２．５％。其血清水平与组织学分布相关，在高、中分化的肺癌病人阳性率高于低分化者（Ｐ     

结肠癌MC抗原在肺癌、食管癌、胃癌、皮肤癌及结肠癌中表达状况的分析

本文用我室制备的抗结肠癌单克隆抗体MC 3、5、7、10并ABC免疫酶标组化染色,观察了肺癌、食管癌、胃癌、皮肤癌及结肠癌的阳性率、阳性程度及阳性细胞数,发现MC相应抗原在结肠癌组织中的表达占绝对优势。本文还观察到MC相应抗原在癌细胞中的定位形式可大致分为四型:即胞浆型、胞膜型、胞外型及混合型。讨论了MC抗原上述分布形式在免疫血清学诊断中的意义。     

抗大肠癌单克隆抗体MC3的应用

大肠腺瘤异型增生是肠癌的重要癌前病变,尤其重度异型增生易发展成癌或与癌并存。在形态上重度异型增生有时又难以与高分化腺癌区别,有人认为此病变为良恶性交界性病变,因此寻找能反映恶性变的标记物对肠癌的防治是很重要的。为此,本文应用抗人大肠癌单克隆抗体MC_3对79例大肠腺瘤异型增生(轻度26例、中度39例、重度14例及可疑癌7例);34例大肠癌及5例正常大肠粘膜组织做免疫组化PAP法染色;检测肠癌相关抗原在各类肠腺瘤粘膜中异型增生不同程度中的差异及其意义做初步研究。另外,本文对肠镜活检HE原切片在免疫     

MC5单克隆抗体对大肠息肉的免疫组织化学研究

应用单克隆抗体ＭＣ５对１５６例大肠息肉进行免疫组化检测，腺瘤性息肉９６例，阳性４３例，占４４．８％，非腺瘤性息肉６０例，阳性６例，占１０％，两组相比有显著统计学意义（Ｐ＜０．０１）。在肿瘤性息肉中，绒毛状腺瘤阳性率为６８．２％（１５／２２），绒毛管状腺瘤阳性率为３８．９％（７／１８），管状腺瘤阳性率为３７．５％（２１／５６），它们三者之间无显著统计学意义（Ｐ＞０．０５）。这说明腺瘤性息肉与非腺瘤性息肉在肿瘤抗原表达上有差异。腺瘤性息肉伴不典型增生５９例，其中轻度不典型增生１１例，阳性６例（５４．５％），中度和重度不典型增生４８例，阳性３８例（７９．２％）。本组结果表明，腺瘤性息肉伴不典型增生与ＭＣ５的阳性率相平行，反映出它们的恶变趋势。提示早期切除腺瘤性息肉，对预防大肠癌的发生具有重要意义。     

鼻咽癌单克隆抗体的免疫组化研究

采用间接免疫荧光法,检查5株单克隆抗体(下称单抗)与鼻咽癌组织和其他肿瘤组织的反应,并了解这些单抗所对应的抗原在肿瘤组织的定位及分布。结果表明,5株单抗均与鼻咽癌组织起反应,阳性率分别为H_3:78.38％,H_4:84.21％,H_5:91.43％,H_(12):67.57％,H_(13):70.27％,显示为膜荧光染色,在荧光表现形式上,鳞癌与腺癌不同。单抗与其他癌组织具有不同程度的交叉反应,而与肉瘤组织无反应。 另外,检查3株单抗(H_3,H_4、H_(12))与鼻咽癌病人及鼻咽部正常人的脱落细胞的免疫组化反应,发现均能与鼻咽癌病人的脱落癌细胞发生反应而不与正常的鼻咽部纤毛柱状上皮细胞和红细胞发生反应。     

单克隆抗体MC5与人体胃癌组织反应性的研究

本文用抗结肠单克隆抗体MC5,以ABC免疫组化染色方法,对187例胃癌标本及22例胃转移癌标本进行了组化定位。187例胃癌标本中160例阳性(85.6％);22例胃癌转移标本中17例阳性(77.3％)。结果证明MC5对胃癌组织有较高的敏感性,对胃癌的早期组织诊断,微小胃癌的发现,以及对胃癌的浸润和转移的判断也有重要意义。     

单克隆抗体MC_3相应抗原在大肠癌和大肠息肉中的表达及意义

大肠腺瘤是一种癌前病变,部分病例可发生恶变。因此寻找能反映其潜在微小恶性变的标记物,对于大肠癌的防治及病因的探索均具有重要意义。70年代以来,对于大肠癌及大肠息肉肿瘤相关抗原的研究已有不少报告,但其灵敏度及特异性均不够强。近年来,国内外相继研制出几株结肠癌单克隆抗体,但应用其研究大肠癌前病变的报告甚少。本文用第四军医大学研制的抗人结肠癌单克隆抗体MC_3(简称MC_3)及PAP免疫酶染色法对福尔马林固定、石腊包理的     

单克隆抗体MC_3相应抗原在大肠癌和大肠息肉中的表达及意义

大肠腺瘤是一种癌前病变,部分病例可发生恶变。因此寻找能反映其潜在微小恶性变的标记物,对于大肠癌的防治及病因的探索均具有重要意义。70年代以来,对于大肠癌及大肠息肉肿瘤相关抗原的研究已有不少报告,但其灵敏度及特异性均不够强。近年来,国内外相继研制出几株结肠癌单克隆     

结肠癌单抗MC5的噬菌体呈现型单链可变区片段的制备

背景与目的：MC5是一种特异性良好的针对人结肠癌的鼠源性单克隆抗体,而将鼠源性抗体小型化可使其用于在体研究时引起人抗鼠抗体反应的可能性大大降低。本研究的目的是制备MC5的噬菌体呈现型单链可变区片段（ScFv)。方法：从分泌MC5的杂交瘤细胞分离mRNA,RT-PCR分别扩增抗体的重,轻链可变区DNA（VH和VL DNA）,两者经linker DNA连接形成ScFvDNA,将ScFvDNA与噬粒载体pCANTAB5E的连接产物转化于大肠杆菌TG1,经M13KO7辅助噬菌体感染后,获得重组噬菌体抗体ScFv,以高表达MC5结合抗原的细胞株SW480对重组噬菌体抗体ScFv进行两轮筛选后,随机挑取克隆经ELISA筛选呈现MC5 ScFv的噬菌体单克隆,经竞争ELISA对阳性克隆结合抗原的能力进行鉴定。结果：VH,VL和ScFvDNA分别约为340bp,320bp和750bp,在随机筛检的25个克隆中得到10个呈现MC5ScFv的噬菌体单克隆,其中结合抗原能力强的克隆有3个,结论：用噬菌体呈现技术成功地制备了单抗MC5的ScFv,为拓展该抗体的应用范围奠定了基础。