奈特液对H22荷瘤鼠氧化还原系统影响

奈特液对Ｈ２２荷瘤鼠氧化还原系统影响此课题为山东省科委资助项目贾光，白新生，孙克任（北京医科大学公共卫生学院劳动卫生教研室北京１０００８３山东新华制药厂淄博２５５００５山东医科大学卫生系毒理教研室济南２５００１２）本研究选择体重１８─２２ｇ健康昆明种...     

奈特液对H22荷瘤鼠TPK、PKC活性影响

奈特液对Ｈ２２荷瘤鼠ＴＰＫ、ＰＫＣ活性影响贾光，白新生，孙克任（北京医科大学公共卫生学院劳动卫生教研室北京１０００８３山东新华制药厂淄博２５５００５山东医科大学卫生系毒理教研室济南２５００１２）本研究选择体重１８─２２ｇ健康昆明种小鼠３０只，随机分为...     

在细胞三维立体培养模型中观察VEGF对H460细胞MMP-2表达的影响

目的：建立H460细胞三维立体培养模型,探讨VEGF对H460细胞、MMP-2表达的影响。方法：采用非小细胞肺癌（NCLC）H460细胞系建立肺癌细胞三维立体培养模型,随机分成3组,给与不同浓度的VEGF,明胶酶谱法测定3组MMP-2的表达情况。结果：各组H460细胞生长良好;各实验组的H460细胞在不同浓度的VEGF和不同时间的作用下,细胞内的MMP-2的表达有差异。结论：VEGF能上调11460细胞MMP-2表达,且促进作用具有剂量一时间依赖性;三维立体培养模型有利于观察和研究基质金属蛋白酶在肿瘤侵袭和转移的作用。     

在细胞三维立体培养模型中观察VEGF对H460细胞MMP-2表达的影响

目的:建立H460细胞三维立体培养模型,探讨VEGF对H460细胞、MMP-2表达的影响.方法:采用非小细胞肺癌(NCLC)H460 细胞系建立肺癌细胞三维立体培养模型,随机分成3组,给与不同浓度的VEGF,明胶酶谱法测定3组MMP-2的表达情况.结果:各组H460细胞生长良好;各实验组的H460细胞在不同浓度的VEGF和不同时间的作用下,细胞内的MMP-2的表达有差异.结论:VEGF能上调H460细胞MMP-2表达,且促进作用具有剂量-时间依赖性;三维立体培养模型有利于观察和研究基质金属蛋白酶在肿瘤侵袭和转移的作用.     

重组人血管内皮抑制素联合顺铂对小鼠腹水瘤抑制作用及其机制探讨

目的研究重组人血管内皮抑制素(恩度)联合顺铂治疗小鼠S180腹水瘤的有效性和安全性,并探索其相关作用机制。方法应用小鼠S180细胞株建立腹水瘤动物模型。120只造模后的ICR小鼠随机分为对照组(0.9%NaCl,d1~d10)、恩度组(恩度8mg/kg,d1~d5,d7~d10;0.9%NaCl,d6)、顺铂组(顺铂0.04 mg/kg,d6;0.9%NaCl d1~d5,d7~d10)和恩度联合顺铂组(恩度8mg/kg,d1~d5,d7~d10;顺铂0.04mg/kg,d6)。记录各组小鼠体质量、腹水体积、腹水中肿瘤细胞、红细胞数以及生存期;检测各组小鼠的腹膜渗透性和肝肾功能;流式细胞仪检测腹水肿瘤细胞的凋亡率;ELISA方法检测腹水中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)和基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinases 2,MMP-2)的表达。结果恩度联合顺铂组小鼠的腹水体积为(2.1±1.0)mL,肿瘤细胞数为(10.6±2.5)×107 mL-1,红细胞数为(12.0±3.1)×107 mL-1,上述各指标均低于对照组、恩度组和顺铂组。联合组的中位存活期为24.1d,明显长于对照组(12.7d)、恩度组(16.8d)和顺铂组(18.9d)。顺铂组小鼠腹水中肿瘤细胞的凋亡率为(68.9±5.4)%,明显高于对照组(12.4±2.3)%和恩度组(11.0±3.8)%。恩度组小鼠的腹膜渗透性为(2.03±0.05)ng/mL,VEGF浓度为(23.7±3.0)ng/mL,MMP-2为(10.3±1.1)ng/mL,显著低于对照组和顺铂组。各组小鼠的肝肾功能未发现明显异常。结论恩度联合顺铂治疗S180腹水瘤疗效显著,安全性好;其机制可能与恩度下调VEGF和MMP-2的表达及顺铂促进肿瘤细胞的凋亡有关。     

美洲大蠊提取物CⅡ-3对H22肝癌小鼠血管生成作用的研究

[目的]探讨美洲大蠊提取物CⅡ-3对H22肝癌小鼠肿瘤生长的抑制作用及其机制。[方法]将50只昆明种小鼠接种H22肝癌细胞,随机分为模型组、阳性组以及CⅡ-3低、中、高剂量组,比较各组抑瘤率、脏器指数以及VEGF含量。[结果]高剂量CⅡ-3对H22荷瘤小鼠肿瘤的生长有明显的抑制作用(61.41%),并且能降低小鼠血清中VEGF的含量(361.72±101.84ng/L)。[结论]CⅡ-3能抑制H22肝癌小鼠肿瘤的生长,并对肝癌小鼠的免疫器官有一定程度的保护作用,其机制可能与下调VEGF的表达而抑制肿瘤血管生成有关。     

重组人血管内皮抑制素对肝癌H22腹水瘤小鼠腹水的抑制作用

目的探讨血管内皮抑制素腹腔内给药对H22小鼠腹水瘤生长及腹水的抑制作用。方法取110只昆明小鼠腹腔内接种H22细胞（2x106细胞／只）,建立小鼠腹水瘤模型,接种后随机分为5组：模型对照组（0．9％NS）;低剂量血管内皮抑制素组（4mg／kg）;中剂量血管内皮抑制素组（8mg／kg）;高剂量血管内皮抑制素组（12mg／kg）;阳性对照组（顺铂0．6mg／kg）。接种24h后连续10d给予各药物腹腔内注射,停药24h后处死各组小鼠,测量腹水量并取腹水行相关检测;解剖小鼠,观察腹腔脏器及肺脏的转移情况;通过Evan蓝的吸光度值反映小鼠的腹膜渗透性;观察各组小鼠的生存时间。结果与模型对照组相比,中、高剂量血管内皮抑制素组可显著抑制荷H22腹水瘤小鼠腹水的生成,并减少腹腔内及肺脏转移,延长生存时间。结论血管内皮抑制素腹腔内用药治疗荷H22腹水瘤小鼠腹水具有显著的抑制作用。     

Aglaroxin C对小鼠H22肝癌移植瘤的抑制作用及对其脏器的影响

目的:探讨楝酰胺衍生物Aglaroxin C对小鼠H22肝癌皮下移植瘤的影响及在实验剂量下对小鼠各脏器有无影响。方法:建立BALB/C小鼠H22腋下实体瘤模型,并随机分为Ⅰ组（尾静脉给药对照组）、Ⅱ组（尾静脉给药组,0.1 mg每只）、Ⅲ 组（瘤内给药对照组）、Ⅳ组（瘤内给药组,0.05 mg每只）、Ⅴ组（瘤内给药组,0.1 mg每只）,每组各5只。隔天给药(Aglaroxin C)一次,共4次。每日测量小鼠体重。末次给药24小时后切除肿瘤及各组小鼠主要脏器并称重,计算抑瘤率、脏器系数。用各组肿瘤及各脏器制作病理切片,苏木精-伊红染色（hematoxylin-eosin staining,HE染色）,并在光镜下观察其细胞形态学变化。结果:Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅳ组、Ⅴ组的瘤体质量分别为（2.11±0.50） g、(1.59±0.14) g、(2.30±0.64) g、(1.66±0.12) g、(1.06±0.14) g,Ⅱ组瘤体质量明显小于Ⅰ组（P＜0.01),Ⅲ组、Ⅳ组、Ⅴ组比较差异有统计学意义（P＜0.01)。Ⅴ组的抑瘤率最高达53.91%。显微镜下观察肿瘤病理切片,给药组坏死肿瘤细胞明显增多,对照组肿瘤细胞坏死轻微;各组小鼠体质量组间变化无明显统计学意义（P＞0.05）;显微镜下观察各脏器病理切片,各给药组与对照组相比,无明显异常;脏器系数各剂量组与对照组组间比较,差异无统计学意义（P＞0.05）。结论:Aglaroxin C对小鼠H22肝癌皮下移植瘤的生长有抑制作用,在实验剂量下对小鼠各脏器无明显影响。     

消癌解毒方抑制肝癌H22移植瘤的生长及其机制

目的:研究消癌解毒方(Xiaoai Jiedu Recipe,XJR)对肝癌H22细胞小鼠移植瘤的抑制作用及其可能的机制。方法:建立小鼠H22移植瘤模型,分对照组和XJR低、中、高剂量(10、30、90g/kg)组及顺铂(0.001g/kg)组进行治疗,检测各组移植瘤生长情况,H-E染色观察各组移植瘤组织的病理改变。流式细胞术检测各组移植瘤细胞周期及凋亡率,ELISA法测定各组移植瘤小鼠外周血VEGF水平。结果:与对照组比较,XJR各剂量以及顺铂对H22移植瘤的生长均具有显著的抑制作用,抑瘤率分别为24.5%、42.8%、21.1%、58.6%(P<0.05或P<0.01)。病理观察见中剂量XJP组和顺铂组移植瘤组织大片状坏死,有明显染色质固缩环。中剂量XJR和顺铂将移植瘤组织细胞阻滞于G0/G1期(P<0.05),S期细胞数明显减少(P<0.05)。中剂量XJR组移植瘤细胞的凋亡率与顺铂组相当[(60.52±6.40)%vs(71.32±16.02)%,P>0.05]。中、高剂量XJR组和顺铂组小鼠外周血VEGF水平均显著降低[(104.3±6.1)、(105.8±7.2)、(88.6±4.3)vs(120.7±12.6)ng/ml,P<0.05或P<0.01]。结论:XJR能抑制H22小鼠移植瘤的生长,促进移植瘤细胞凋亡、抑制VEGF的产生可能是其抗癌作用机制之一。     

血管内皮生长因子2型受体胞外1～3区核酸疫苗的构建及对H22肿瘤生长的抑制作用

背景与目的:大多数实体肿瘤的生长转移都需要新生血管的支持,血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)在肿瘤的血管生成中居中心地位,而flk1(fetalliverkinase1)是VEGF发挥作用的关键。阻断VEGF同flk1的结合可望达到抑制肿瘤生长的目的。我们构建了小鼠flk1胞外1～3区核酸疫苗,并检验疫苗对肝癌细胞H22小鼠移植瘤生长的抑制作用。方法:RT-PCR法克隆flk1胞外1～3区基因片段,将片段插入质粒pcDNA3.1(+),构建核酸疫苗pcDNA3.1(+)-flk1-Domain1-3;脂质体转染COS7细胞,Westernblot法检测flk1-Domain1-3的真核表达;采用标准4h51Cr释放实验检验疫苗免疫小鼠特异性CTL。30只小鼠分为疫苗接种组,pcDNA3.1(+)接种组和生理盐水接种组。股四头肌肌肉丰厚处接种10天后再皮下接种H22细胞,记录肿瘤的生长情况、体积、湿重、微血管密度、小鼠死亡时间,观察疫苗对小鼠H22皮下移植瘤生长的抑制作用。结果:PCR扩增出1252bp大小的基因片段,测序证明所获基因序列阅读框架与GenBank所公布的flk1胞外1～3区一致。Westernblot显示转染疫苗的细胞中有分子量约为44kDa的蛋白表达,与flk1胞外1～3区蛋白大小一致;51Cr释放实验提示,疫苗可引起针对内皮细胞的特异性CTL反应。疫苗对肿瘤的预防作用实验发现,肿瘤出现时     

蟾蜍毒素对H22荷瘤小鼠疗效及毒副作用的实验研究

目的:探讨醇溶性蟾蜍毒素在小鼠体内对H22肝癌细胞的抑制作用及其毒副作用,为进一步分离纯化蟾酥和开发抗肿瘤新药提供动物实验基础。方法:采用减压蒸馏等方法进一步部分分离纯化乙醇溶解的蟾蜍分泌物原浆,获得醇溶性的蟾蜍毒素混合物(ethanolextractofChinesetoadvenom,EET),分别将其作用于H22实体瘤和腹水瘤小鼠模型,计算肿瘤抑制率和生命延长率,判断疗效;同时通过血生化和病理等检测观察其对各脏器的毒副作用。结果:与对照组比较,5mg/kg和0.5mg/kg的EET对H22荷瘤小鼠实体瘤组织的抑瘤率分别是51.6%和41.2%,t=2.346,P=0.028;t=2.109,P=0.045。对腹水瘤小鼠的生命延长率分别是34.7%和27.7%,t=3.346,P=0.002;t=2.312,P=0.035。同时,0.5mg/kg的EET可明显升高白细胞达(11.6±2.3)×109L-1,t=3.326,P=0.002。但EET在5mg/kg时可引起总胆红素升高达(46.5±14.8)μmol/L,t=2.347,P=0.036。结论:0.5～5mg/kg的EET可以明显抑制荷瘤小鼠体内H22肿瘤细胞的生长,且远远低于华蟾素的有效剂量范围;但EET的剂量达到5mg/kg时可以损伤肝脏。     

基质金属蛋白酶-9及血管内皮生长因子在卵巢癌组织中的表达及临床意义

目的:观察卵巢癌患者基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)和血管内皮生长因子(vascular endothelial cell growth factor,VEGF)的表达水平,分析卵巢癌MMP-9和VEGF表达的临床意义.方法:将60份卵巢癌组织作为恶性组,60例卵巢良性肿瘤组织作为良性组,将获取的60份健康卵巢组织作为健康组,应用免疫组化法检测各组卵巢组织中MMP-9、VEGF阳性表达情况,应用RT-PCR检测不同卵巢组织中MMP-9 mRNA、VEGF mRNA相对表达量,应用Western blot法检测MMP-9和VEGF的蛋白水平,同时对比不同临床病理特征的卵巢癌组织中MMP-9、VEGF表达水平.结果:恶性组MMP-9阳性率(53.33%)、强阳性率(25.00%)和VEGF阳性率(55.00%)、强阳性率(26.67%)显著高于其他组(P<0.05),良性组MMP-9阳性率(23.33%)、VEGF阳性率(26.67%)显著高于健康组(P<0.05);恶性组MMP-9 mRNA、MMP-9蛋白、VEGF mRNA、VEGF蛋白显著高于其他组,其次为良性组,三组间MMP-9和VEGF表达水平差异显著(P<0.05);卵巢癌组织不同临床分期、不同淋巴结转移者的MMP-9、VEGF表达水平具有显著差异(P<0.05),且MMP-9表达和VEGF表达具有显著正相关性(P<0.05).结论:MMP-9、VEGF在卵巢癌中均为高表达,且二者表达强度与卵巢癌临床分期、淋巴结转移情况密切相关.     

姜黄水提液抗氧化与抑瘤作用的初步研究

背景与目的:观察姜黄水提液对荷H22肝癌小鼠实体瘤的抑制作用及其对荷瘤鼠体内抗氧化能力的影响.材料与方法:建立移植性H22肝癌小鼠实体瘤的模型,灌胃给药,观察姜黄水提液及纯姜黄素给药后各处理组小鼠实体瘤重,肝重,脾重以及GSH、SOD的变化情况.结果:纯姜黄素组抑瘤率为37.97%,姜黄水提液各剂量组未见抑瘤作用.姜黄水提液与纯姜黄素均使荷瘤鼠体内GSH和SOD水平升高,两者效果相似.结论:中药姜黄水提液对H22肝癌小鼠实体瘤抑制作用不明显;但是姜黄水提液和纯姜黄素均能提高实验小鼠体内的GSH和SOD的水平,有良好的提高体内抗氧化能力作用.     

小剂量羟基喜树碱抗鼠H22移植瘤血管生成的体内实验研究

背景与目的：有研究提示某些化疗药物在小剂量应用时具有一定的抗血管生成作用,因此本研究旨在探讨小剂量羟基喜树碱（hydroxycamptothecin, HCPT）对小鼠H22细胞移植瘤的生长抑制作用及对血管生成的抑制作用。方法：建立小鼠皮下肝癌H22模型; 以环磷酰胺（cyclophosphamide, CTX）为阳性对照,0.9%氯化钠溶液为阴性对照,HCPT（0.2和0.4 mg/kg）连续腹腔给药10 d,观察用药后移植肿瘤生长情况,计算抑瘤率; 免疫组织化学法检测肿瘤组织中血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）的表达及微血管密度（microvessel density, MVD）。结果：HCPT抑瘤作用明显,0.2和0.4 mg/kg治疗组的抑瘤率分别为23.53%和43.25%,与0.9%氯化钠溶液对照组相比,差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：小剂量HCPT对小鼠H22移植瘤具有一定的生长抑制作用;同时可明显抑制肿瘤组织中VEGF的表达水平和MVD,推测其抗肿瘤作用可能与对血管生成抑制作用有关。     

人参皂甙Rg3对小鼠肝癌H22腹水瘤的治疗研究

目的：研究人参皂甙Rg3治疗小鼠恶性腹腔积液的疗效。方法：100只雌、雄各半昆明种小鼠随机分为5组：Ⅰ组生理盐水组（0．9％NS）;Ⅱ组顺铂组（DDP0．5mg／kg）;Ⅲ组低剂量人参皂甙Rg3组（LPD0．3mg／kg）;Ⅳ组中剂量人参皂甙Rg3组（MPD1．0mg／kg）;Ⅴ组高剂量人参皂甙Rg3组（HPD3．0mg／kg）。所有小鼠肝癌H22腹水瘤模型建立后24小时开始分别腹腔注射0．2ml／只治疗,每日1次,共14天,同时观察小鼠的生活状态和体重。治疗结束后24小时,处死各组半数小鼠测各项指标,剩余小鼠停止治疗并观察生存时间。结果：各用药组较生理盐水组在腹水量（P〈0．05）、腹水中瘤细胞数和瘤细胞存活率方面都下降（P〈0．05）;随着人参皂甙Rg3给药浓度的增加,腹水中瘤细胞数及瘤细胞存活率下降（P〈0．05）;人参皂甙Rg3高剂量组腹水中瘤细胞数及瘤细胞存活率低于DDP组（P〈0．05）。各实验用药组较生理盐水组小鼠寿命延长,其中中剂量人参皂甙Rg3组延长最明显（P〈0．05）。结论：人参皂甙Rg3对小鼠恶性腹腔积液的形成具有抑制作用,这为临床应用提供了实验依据。     

五倍子酸对H22肝癌细胞荷瘤小鼠的抑瘤作用

目的 观察五倍子酸(trihydroxybenzoic acid,TBA)对小鼠移植性肝癌H22肿瘤生长的抑制作用。方法 建立移植性H22肝癌细胞荷瘤小鼠模型,每组10只,TBA高、中、低剂量组TBA溶液0.50g/kg、0.25g/kg、0.13g/kg灌胃给药;对照组0.5%羧甲基纤维素钠溶液0.2mL/10g灌胃给药;阳性对照组CTX 20mg/kg腹腔注射,每天固定时间给药一次,连续给药10d。观察各组小鼠实体瘤重,计算抑瘤率,HE染色检测肿瘤组织细胞形态变化。结果 TBA 0.50g/kg、0.25g/kg和0.13g/kg组小鼠平均瘤重不同程度下降,其中TBA 0.25g/kg组平均瘤重与对照组比较差异有统计学意义(P＜0.05),TBA三组抑瘤率分别为24.83%、45.52%和15.86%。结论 TBA灌胃给药可以不同程度抑制H22肿瘤的生长。