甲状腺乳头状癌组织VEGF-C／D及受体和D2-40表达与淋巴结转移相关性分析

目的：分析VEGF_C／D及受体VEGFR3和D2—40在甲状腺乳头状癌（papillary thyroid carcinoma,PTC）组织中的表达及与淋巴结转移的关系。方法：应用免疫组化SP法检测2009—01—01—2012—1028河北北方学院附属第=医院收治的68例PTC和30例甲状腺腺瘤患者组织中VEGF_c／D、VEGFR-3、D2—40的表达水平,比较VEGF-C／D和受体VEGFR-3在PTC和腺瘤,PTC有无淋巴结转移病例中的差异;并分别计数VEGFR3和D2—40淋巴管密度（1ymphatic vessel density,LVD）。结果：PTC和腺瘤组织中VEGF-C阳性率分别为85．29％和16．67％,x^2=47．70,P〈0．001;VEGF-D阳性率分别为77．94％和13．33％,x^2=35．7l,P〈O．001;VEGFR3阳性率分别为83．82％和13．33％,x^2=43．56,P〈O．001;D2—40阳性率分别为79．41％和10．00％,x^2=35．19,P〈O．001。PTC伴淋巴结转移组和无淋巴结转移组VEGFC阳性率分别为100％和77．55％,x^2=3．876,P=0．034,r=0．259,P=0．024;VEGFR-3阳性率分别为100％和77．55％,x^2=5．088,P=0．027,r=0．274,P=0．024。PTC组和腺瘤组D240阳性LVD密度分别为3．44±0．4和0．5．4--0．4,t=12．526,P〈0．001;VEGFR-3阳性LVD密度分别为4．1±O．7和0．7±0．6,t=3．163,P〈0．001。PTC伴淋巴结转移组和无淋巴结转移组D2—40阳性LVD密度分别为5．6±3．7和2．7±1．5,x^2=2．758,P=0．009;VEGFR3阳性LVD密度分别为6．9±3．5和3．3±0．9,x^2=3．224,P=0．002;癌周VEGFR-3阳性LVD密度（12．6±4．1）高于D2—40的（7．9±4．3）,x2=2．106,P=0．04。结论：甲状腺乳头状癌VEGF-C／D、VEGFR3和D2—40高表达与淋巴结转移密切相关,联合检测可作为预测PTC淋巴结转移的重要指标。     

VEGF在非小细胞肺癌中的表达及临床意义

[目的]探讨血管内皮生长因子（VEGF）在非小细胞肺癌（NSCLC）中的表达及其临床意义。[方法]应用免疫组化法检测30例肺癌组织和25例癌旁组织中VEGF表达。[结果]NSCLC组织中VEGF阳性表达率为70．00％,癌旁组织中的阳性表达率为20．00％（Х^2=11．745,P=0．001）;在腺癌、鳞癌、大细胞癌中VEGF阳性率差异无统计学意义（P〉0．05）;Ⅲ～Ⅳ期NSCLC中的VEGF阳性表达率为88．24％,高于Ⅰ～Ⅱ期的46．15％（Х^2=4．37,P=0．037）;VEGF在淋巴结转移组的阳性率为78.26％,在无淋巴结转移组中为42．86％,两组比较差异有显著性（Х^2=5．06,P=0．024）。[结论]VEGF在NSCLC组织中高表达;VEGF表达与NSCLC淋巴结转移、TNM分期呈正相关．而与NSCLC的组织学分类无关。     

Mel-18和Bmi-1在食管鳞状细胞癌中的表达及其临床意义

目的探讨Mel-18和Bmi-1在食管鳞状细胞癌中的表达及其临床意义。方法采用实时定量聚合酶链反应（QRT—PCR）及Westernblot方法检测29例食管鳞状细胞癌组织及配对癌旁组织中Mel-18和Bmi-1mRNA的表达。另选取芯片库中60例食管鳞状细胞癌及癌旁组织。免疫组织化学方法检测以上所有89例食管鳞状细胞癌组织及配对癌旁组织中Mel-18和Bmi-1蛋白的表达,分析二者在食管鳞状细胞癌中的表达情况与各临床病理因素之间的关系。结果QRT．PCR结果显示食管鳞状细胞癌中Mel-18mRNA阴性表达率为55．17％（16／29）,Bmi．1mRNA阳性表达率为62．07％（18／29）。Westernblot结果显示,与癌旁组织比较,食管鳞状细胞癌中Mel-18蛋白低表达（0．724±0．095比0．899±0．089,t=2．319,P=0．028）,Bmi．1蛋白高表达（0．980±0．068比0．729-1-0．066,t=2．863,P=0．008）,差异均有统计学意义。免疫组织化学结果显示食管鳞状细胞癌组织中Mel-18的阴性表达率高于癌旁组织,差异有统计学意义[66．3％（59／89）比31．5％（28／89）,X。21．606,P〈0．05];食管鳞状细胞癌中Bmi-1的阳性表达率高于癌旁组织,差异具有统计学意义[74．2％（66／89）比30．3％（27／89）,Х^2=34．249,P〈0．05]。89例食管鳞状细胞癌患者中,Mel-18表达与肿瘤的临床分期（Х^2=8．003,P=0．004）、浸润深度（Х^2=17．094,P=0．001）、淋巴结转移（Х^2=5．156,P=0．026）相关,Bmi-1表达与分化程度（Х^2=14．625,P=0．001）、临床分期（Х^2=7．863,P=0．005）、淋巴结转移（Х^2=5．771,P=0．005）相关。另外,通过QRT—PCR及免疫组织化学检测发现在食管鳞状细胞癌中Mel-18和Bmi-1的表达负相关（r=-0．592,P=0．001;r=-0．285,P=0．007）。结论在食管鳞状细胞癌的发生发展中,Mel-18可能起抑癌作用,而Bmi-1可能起致癌作用,二者可望成为食管鳞状细胞癌明确诊断及判断预后的新指标。     

甲状腺癌组织RBP2表达与临床病理因素相关性分析

目的：探讨110例甲状腺乳头状癌（papillary thyroid carcinoma,PTC）、20例结节性甲状腺肿（nodular goiter,NG）和23倒癌旁组织（precancerous tissue,PT）中RBP2表达与临床参数的关系。方法：免疫组化SP法测定2009—01—12—2012—03-20济宁医学院附属医院收集的NG、PTC和PT组织中RBP2分布的位置、表达及与临床参数的关系。结果：PTC、NG和PT组织中RBP2的阳性表达差异有统计学意义,x2=-17．201,P〈0．001。在PTC组织中RBP2的阳性表达率为52．7％,弱阳性表达率为36．2％;在NG组织中RBP2阳性表达率为30．0％,其中83．3％为弱阳性表达;与PT组织相比,RBP2的表达差异有统计学意义x2=-2．261,P=0．024。NG组织中RBP2的表达在年龄（U=-0．481,P=0．630）和性别（x2=-0．825,P=0．409）方面差异均无统计学意义。PT组织RBP2弱阳性表达率为4．3％（1／23）,RBP2的表达在年龄（U=-0．877,P=0．380）、性别（U=-0．594,P=0．552）、临床分期（U=-1．369,P=0．171）和淋巴结转移（U=-0．802,p=0．423）差异均无统计学意义。PTC组织与PT组织相比,两者差异有统计学意义,U=-4．149,P〈O．001;与NG组织相比,两者差异有统计学意义,U=-2．085,P=0．037。PTC组织中无淋巴结转移组RBP2的阳性率与淋巴结转移组之间差异无统计学意义,U=-1．432,P=0．152;RBP2的表达在性别（U=-0．777,P=0．437）、临床分期（U=-1．726,P=0．084）和年龄（U=-L236,P=0．216）之间差异无统计学意义。结论：RBP2是甲状腺肿瘤发生早期及恶性转化的重要标志,其表达的增加可以视作是判断甲状腺肿瘤发生的重要临床参考指标。     

支气管镜在肺癌诊断中的应用——1315例支气管镜检查结果分析

目的探讨支气管镜在肺癌诊断中的应用。方法回顾性分析我院1998-2005年1315例肺癌患者支气管镜检查结果,应用SPSS10．0医学软件进行统计学分析。结果本组患者男女比例2．5：1,60-69岁为发病年龄高峰占33．0％。其中31．08％（418／1315）为腺癌,其次为鳞癌和小细胞癌,分别占31．0％（408／1315）和25．0％（329／1315）。病变部位以中心型多见,占89．7％（1180／1315）,31．7％（417／1315）发生于上叶支气管（P〈0．001）,左右支气管发生率相似。60．8％（800／1315）镜下表现为增生型,其次为浸润型、外压型、正常型,分别占28．1％（370／1315）、2．8％（37／1315）和8．2％（108／1315）,增生型鳞癌多见（40．6％）（P〈0．001）,浸润型、外压型和正常型腺癌多见,分别为48．9％、51．4％和63．0％（P≤0．001）。78．6％（1034／1315）经支气管镜确诊,其中钳检阳性率83．4％（966／1158）,刷检阳性率14．0％（176／1257）,肺泡灌洗阳性率31．0％（26／84）,经支气管镜肺活检阳性率73．9％（17／23）,经支气管镜淋巴结针吸活检阳性率63．6％（14／22）,21．4％（281／1315）经其他方法确诊。鳞癌和小细胞癌钳检阳性率为81．6％和89．1％,均高于腺癌（P〈0．001和P=0．023）,鳞癌刷检阳性率为9．1％,低于腺癌（13．2％）（P=0．029）和小细胞癌（21．0％）（P=0．001）。中心型肺癌钳检阳性率（80．3％）和刷检阳性率（14．4％）均明显高于周围型（P〈0．001）。增生型肺癌钳检阳性率（88．4％）及刷检阳性率（15．6％）均明显高于其他镜下表型（P〈0．001）。正常型联合取材阳性率（23．1％）高于单纯钳检和刷检（P〈0．001）。结论经支气管镜确诊肺癌男性多于女性腺癌比例较前呈明显上升态势;经支气管镜确诊肺癌好发于段以上支气管;支气管镜确诊肺癌阳性率高;联合取材可明显提高正常型肺癌诊断阳性率;经支气管镜淋巴结针吸活检安全有效,有助于提高支气管镜诊断阳性率。     

细胞外基质蛋白Periostin、血管内皮生长因子和基质金属蛋白酶-9在乳腺浸润性导管癌中的表达及其临床意义

目的探讨细胞外基质蛋白Periostin、血管内皮生长因子（VEGF）和基质金属蛋白酶-9（MMP-9）在乳腺浸润性导管癌中的表达差异及其与临床病理特征的关系。方法应用免疫组织化学法检测58例乳腺浸润性导管癌组织和25例癌旁正常乳腺组织中Periostin、VEGF和MMP-9的表达水平。结果在乳腺浸润性导管癌和正常乳腺组织中,Periostin的阳性率分别为63．8％（37／58）和0,VEGF的阳性率分别为69．0％（40／58）和8．0％（2／25）,MMP-9的阳性率分别为70．7％（41／58）和16．0％（4／25）,三者在两组间阳性率差异均有统计学意义（均P〈0．001）。Periostin阳性率与TNM分期有关（X2=4．835,P=0．028）,与患者年龄、组织学分级、淋巴结转移均无关;VEGF阳性率与TNM分期、淋巴结转移有关（X2=4．230,P=0．040;X2=9．667,P=0．002）,与患者年龄、组织学分级无关（均P〉0．05）;MMP-9阳性率与TNM分期、淋巴结转移有关（x2=8．456,P=0．004;X2=5．494,P=0．019）,与患者年龄、组织学分级无关（均P〉0．05）。Periostin、VEGF和MMP-9在乳腺浸润性导管癌组织中呈两两正相关（r分别为0．348、0．303、0．469,均P〈0．05）。结论Periostin、VEGF和MMP-9在乳腺浸润性导管癌的发生、发展及侵袭转移中起重要作用,它们在乳腺浸滑『生导管癌的表达两两相关。     

微小病毒B19感染与甲状腺乳头状癌的关系

目的：探讨人类微小病毒B19感染（parvovirus B19，B19）与甲状腺乳头状癌（Papillary thyroid carcinoma,PTC）的关系。方法：对38例手术切除的PTC患者甲状腺组织（其中30例伴有周围正常甲状腺组织）及16例甲状腺腺瘤患者腺瘤旁正常甲状腺组织，分别用巢式聚合酶链反应（nested polymerase chain reaction，nPCR）、原位杂交（in situ hybridization，ISH）和免疫组织化学（immunohistochemistu，IHC）检测B19病毒DNA和病毒蛋白的表达。结果：nPCR扩增出173bp的B19特异性目的条带。ISH和IHC检测出B19病毒DNA和蛋白分别位于肿瘤细胞胞核和胞浆内在PTC中，nPCR、ISH和IHC阳性率分别为97.4％（37／38）、78.9％（30／38）和63.2％（24／38）．而腺瘤旁正常甲状腺组织中，阳性率分别为43．8％（7／16）、12．5％（2／16）和6．25％（1／16）：两者比较差异有统计学意义（3种方法均P〈0．001）：癌旁甲状腺组织ISH和IHC阳性率分别为23.3％（7／30）和10．0％（3／30），与之相对应的30例PTC（ISH：80．0％；IHC：60．0％）相比，差异有统计学意义（两者均P〈0.001）。结论：PTC患者甲状腺肿瘤组织中B19感染率明显高于腺瘤旁和癌旁正常甲状腺组织，提示B19感染在PTC的发生中可能起重要的作用。     

多灶陛甲状腺乳头状癌中CD44v6和Survivin的表达及其意义

目的探讨多灶性甲状腺乳头状癌（PTC）中CD44v6和Survivin的表达及意义。方法应用免疫组织化学SP法检测47例多灶性PTC中CD44v6和Survivin的表达,并与其癌旁组织及同期122例单灶PTC对照,比较不同临床因素中CD44v6、Survivin表达差异,及CD44v6、Survivin两者在多灶PTC中表达的相关性。结果多灶性PTC占同期PTC的27．8％（47／169）,与家族史、淋巴结转移、腺外浸润有关（X^2=4．189,X^2=6．159,X^2=4．079,均P〈0．05）,而与性别、年龄、是否是微小癌及癌灶大小无关（均P〉0．05）。多灶性PTC中CD44v6和Survivin阳性表达率为70．2％（33／47）和66．0％（31／47）,癌旁组织均为2．1％（1／47）,差异均有统计学意义（X^2=47．184,P=0．000;x^2=42．641,P=0．000）;CD44v6和Survivin的表达与有无腺外浸润（x^2=4．723,P=0．030;X^2=4．023,P=0．045）、有无淋巴结转移（X^2=5．771,P=0．016;x^2=5．686,P=0．017）有关,而与性别、年龄、家族史、是否是微小癌、病灶数目无关（均P〉0．05）;多灶PTC中癌灶间CD44v6和Survivin的表达差异无统计学意义（均P〉0．05）;CD44v6和Survivin在多灶PTC中的表达呈正相关（x^2=10．154,P〈0．01）。术后随访5年。9年9个月,两组PTC患者均健在。结论多发癌灶是PTC的临床特征之一,CD44v6和Survivin在多灶性PTC中高表达,与多灶PTC的发生、侵袭和转移密切相关。     

食管鳞癌中Survivin和Nm23-h1表达及其联合检测的临床意义

目的：探讨Survivin与Nm23-h1基因在食管鳞状细胞癌、癌旁组织、正常组织中的表达情况及其联合检测与淋巴结转移的关系。方法：采用免疫组化sP法观察78例食管鳞癌手术切除标本,30例食管鳞癌切除标本断端（距肿瘤〉5cm）和食管鳞癌切除标本断端（距肿瘤〈2cm）30例的石蜡标本切片中Survivin和Nm23-h1的表达情况,分析其与临床病理特征的关系。结果：Survivin在食管鳞癌组织,癌旁组织,正常组织的阳性表达率分别为70．51％,20．0％,6．67％,有显著性差异（P=0．001）。Nm23-h1在食管鳞癌组织,癌旁组织,正常组织的阳性表达率分别为60．26％,80．00％,96．67％,有显著性差异。（P=0．001）。Survivin表达与肿瘤分化程度、TNM分期、淋巴结转移相关（P〈0．05）。Nm23-h1表达与患者的TNM分期、淋巴结转移相关（P〈0．05）。Survivin阳性率与淋巴结转移呈正相关（P=0．008）,nm23-h1阳性率与淋巴结转移呈负相关（P=0．001）。Survivin与nm23-h1呈低度负相关（P=0．001）,在促进肿瘤的进展和转移过程中起联合作用。结论：Survivin蛋白的抑制凋亡作用和nm23蛋白的抑制转移作用可能在食管鳞癌的发生、发展过程中起重要作用,联合检测是判断食管鳞癌患者淋巴结转移倾向及预后的重要指标。     

胃癌组织芯片快速制备及RegIV编码产物检测

目的：建立快速胃癌组织芯片（tissuemicroarray,TMA）制作方法,探讨其在RegⅣ编码产物检测和研究中的应用。方法：收集日本富山大学医学部1993-04-20-2010-11-29胃癌石蜡标本372例和相应癌旁黏膜标本（距离癌组织〉4cm）198例,应用AZUMAYA芯片机构建48阵列组织芯片,利用免疫组化和原位杂交检测RegIV蛋白和mRNA的原位表达。在OlympusBX41显微镜下选定切取部位,利用2mm的穿刺针切除供体蜡块,不用制备受体蜡块,直接将切除组织放入金属包埋皿的固定盒上制备48阵列芯片。结果：组织芯片经HE染色确定了组织病理学诊断,免疫组化和原位杂交均发现在肠上皮化生和黏液分泌性肿瘤细胞质中存在RegⅣ蛋白和tuRNA表达。胃黏膜肠化生中RegⅣ蛋白表达为100％（63／63）,高于胃炎的29．0％（27／93,χ^2=73．67,P〈0．001）、腺瘤的85．7％（36／42,χ^2=9．54,P〈0．005）和胃癌的45．2％（168／372,χ^2=65．06,P〈0．001）。胃癌组织中,印戒细胞癌阳性率为95．3％（41／43）,高于低分化癌的27．4％（32／117）,χ^2=55．89,P〈0．001。原位杂交发现,癌旁黏膜肠化生上皮细胞中RegIVmRNA表达阳性率为95．2％（40／42）,高于癌旁正常黏膜的38．6％（17／44,χ^2=30．63,P〈0．001）和胃癌的20．3％（14／69,X2=55．74,P〈0．001）。结论：制备TMA不需要制备受体蜡块,提高了TMA制作速度。异常RegⅣ表达与胃黏膜肠化生球样异型增生-印戒细胞癌的发生途径关系密切。     

RUNX3基因启动子区甲基化与肝癌临床病理特征的Meta分析

目的 探讨Runt相关转录因子3（RUNX3）基因启动子区甲基化与肝细胞癌（HCC）临床病理特征间的关系。方法 参照Cochrane协作网制定的检索策略,计算机检索MEDLINE、Cochrane Library Database、EMBASE、CINAHL、Web of Science、中国生物医学文献数据库（CBM）、万方及中国知网数据库,检索时间截止于2013年1月。收集关于RUNX3基因启动子区甲基化与HCC临床病理特征关系的研究,由2名评价者按照纳入和排除标准独立选择文献、提取资料、评价质量。采用STATA 12.0软件进行Meta分析,计算比值比（OR）及其95％可信区间（CI）并行敏感性分析和发表偏倚评估。结果 最终纳入8篇文献共包括598例研究对象,共提取513个癌组织、429个癌旁组织及85个正常肝组织。纳入结果在肿瘤组织vs.癌旁组织、肿瘤组织vs.正常组织、癌旁组织vs.正常组织、TNM分期、组织学分级和侵袭级别的比较模型中均无异质性。各模型Meta分析结果显示,癌组织RUNX3启动子区甲基化率均高于癌旁或正常组织（肿瘤组织vs.癌旁组织：OR=20.81,95％CI：13.00～31.15,P＜0.001;肿瘤组织vs.正常组织：OR=19.33,95％CI：13.54～27.62,P＜0.001;癌旁组织vs.正常组织：OR=1.01,95％CI：0.36～2.85,P=0.981）;在癌组织中,RUNX3基因启动子区甲基化率与TNM分期、组织学分级及侵袭级别均有关,Ⅲ～Ⅳ期、3～4级和T3～T4级的RUNX3启动子区甲基化率高于Ⅰ～Ⅱ期、1～2级和T1～T2级（TNM分期：OR=1.17,95％CI：1.01～1.87,P=0.048;组织学分级：OR=1.48,95％CI：1.04～1.82,P=0.025;侵袭级别：OR=1.07,95％CI：1.00～1.72,P=0.049）。结论 HCC中RUNX3基因启动子区高甲基化,且与HCC的发生发展有关。     

Ⅱ期结直肠癌组织ＶＥＧＦ-Ａ与ＭＶＤ检测的临床意义

目的　探讨Ⅱ期结直肠癌组织血管内皮生长因子Ａ（ＶＥＧＦ-Ａ）与微血管密度（ＭＶＤ）检测的临床意义。方法　用免疫组化ＰＶ６０００法检测５６例Ⅱ期结直肠癌组织及１３例正常组织的ＶＥＧＦ-Ａ表达与ＭＶＤ,分析其与患者临床病理特征的关系以及对生存的影响。结果　（１）肿瘤组织ＶＥＧＦ-Ａ表达和ＭＶＤ明显高于正常组织（６４.３％ｖｓ．０,２３.６９±５.７７９ｖｓ．７.９±１.２７;Ｐ均＝０.０００）;原发肿瘤＞５ｃｍ癌组织ＶＥＧＦ-Ａ表达明显高于＜５ｃｍ者（８５.０％ ｖｓ．５２.８％,Ｐ＝０.０３4）,发生复发或转移患者的癌组织ＶＥＧＦ-Ａ和ＭＶＤ明显高于未发生复发或转移者（５７.１％ ｖｓ．２８.９％,Ｐ＝０.０３９;２８.９４±４.２０８ｖｓ．２２.４１±５.４２８,Ｐ＝０.０００）;年龄＞６０岁患者的癌组织ＭＶＤ明显高于≤６０岁患者（２７.３６±５.６５８ｖｓ．２１.６７±４.９５９,Ｐ＝０.００１）,低分化患者癌组织ＭＶＤ明显高于中高分化者（２７.６５±６.３２９ｖｓ．２３.１６±５.４１６,Ｐ＝０.０１３）;ＶＥＧＦ-Ａ阴性组与弱阳性组及强阳性组ＭＶＤ值的差异均有统计学意义（２１.８０±４.６０ｖｓ．２４.５１±５.０７,Ｐ＝０.０２７;２１.８０±４.６０ｖｓ．２５.７９±３.７８,Ｐ＝０.００６）,ＶＥＧＦ-Ａ弱阳性组和强阳性组ＭＶＤ值的差异无统计学意义（２４.５１±５.０７ｖｓ．２５.７９±３.７８,Ｐ＝０.６６６）。（２）５６例Ⅱ期结直肠癌患者１、３、５年生存率分别为９８.２３％、８７.３７％和７５.９６％;癌组织ＶＥＧＦ-Ａ表达与患者ＤＦＳ（χ^２ ＝８.５７０,Ｐ＝０.０１４,ｒ＝－０.２９２）和ＯＳ（χ^２＝６.５０２,Ｐ＝０.０３９,ｒ＝－０.２８１）相关,ＶＥＧＦ-Ａ表达越强,ＤＦＳ和ＯＳ越短;癌组织ＭＶＤ与患者的ＤＦＳ相关（χ^２＝６.８０６,Ｐ＝０.０３２,ｒ＝－０.２１３）,ＭＶＤ越高,ＤＦＳ越短,但是与ＯＳ无明显相关性（χ^２＝１.９０２,Ｐ＝０.１６８,ｒ＝－０.０２２）。结论　Ⅱ期结直肠癌组织ＶＥＧＦ-Ａ表达和ＭＶＤ与患者的临床病理特征有一定的关系,可能是判断预后的重要参考指标。     

CD4^＋IL-9^＋细胞在大肠癌免疫微环境中的分布及临床意义

目的：检测CD4^＋IL-9^＋（Th9）细胞在大肠癌免疫微环境中的表型和分布特征,分析其与临床病理的相关性。方法：选取2013-06-05-2013-10-10广西医科大学第一附属医院初次行手术治疗的45例大肠癌患者的肿瘤组织、相对应癌旁组织以及外周血（术前和术后）,同时抽取15例健康志愿者外周血,用流式细胞仪检测各标本中Th9、Th1和Th2在CD4＋细胞中的比例,记录患者的临床病理资料（性别、年龄、民族、Ducks分期、肿瘤大小、淋巴结转移、CEA和AFP水平）;另选取5例同期肠癌患者的肿瘤组织对Th9细胞表型特征（CD45RO／CD45RA）进行流式细胞仪测定。结果：肠癌组织中的Th9细胞比例为（1．12_＋0．33）％,明显高于癌旁组织（0．85±0．29）％和术前外周血（0．65±0．27）％,P值均〈0．05;肠癌组织中Th9细胞表面高表达CD45RO蛋白为（85．23±5．91）％,低表达CD45RA蛋白为（18．23±6．78）％;术前外周血Th9细胞比例为（0．65±0．27）％,明显高于术后外周血（0．47±0．24）％,P=0．0012;Th9细胞与肠癌临床病理相关性分析表明,其与Ducks分期有关,P〈0．05,与其他因素无关;肠癌组织中Th9细胞比例与Th1细胞无明显相关,r=0．140,P=0．360,与Th2细胞比例呈负相关,r=-0．65,P〈0．001。结论：Th9淋巴细胞在大肠肿瘤微坏境存在聚集现象,其与肿瘤的进展有关,可能参与了大肠癌免疫微环境的调节进而影响了肿瘤的发生和发展。     

沉默Bmi-1表达对人食管鳞癌细胞生长影响观察

目的：通过RNA干扰（RNAinterference,RNAi）抑制人食管鳞癌细胞Ecal09Bmi-1表达,探讨其对Ecal09细胞生物学特性的影响及可能机制。方法：通过对Bmi-1的小干扰RNA（siRNA）重组腺相关病毒（Bmi-1shRNA）转染Ecal09细胞,以转染空病毒（AAV—Null）的Ecal09细胞作阴性对照组,以未转染Ecal09细胞作空白对照组（PBS）,应用蛋白质印迹法分析,绘制细胞生长曲线、流式细胞检测、裸鼠成瘤实验和免疫组化分析等方法观察RNAi对Bmi-1基因的抑制情况及沉默Bmi1表达在体外及体内对Ecal09细胞增殖、侵袭、致瘤和凋亡的影响。结果：转染Bmi-1shRNA后蛋白质印迹法检测结果显示,Bmi-1shRNA组蛋白条带灰度扫描值为681．74±28．89,明显低于AAV—Null组的964．00±41．73（P=0．001）和空白对照组的1005．51±41．16,P=-0.001;AAV—Null组与空白对照组比较,差异无统计学意义,P=0．007。实验组细胞生长曲线较平缓,细胞生长速度较对照组（P=0．009）和空白对照组（P-0．031）明显降低。Ecal09细胞转染AAV—Bmi-1shRNA后,Bmi-1shRNA组增殖指数（proliferationindex,PI）为0．42±0．13,明显低于AAV-Null组的0．81±0．37（P=0．023）和空白对照组的0．91±0．25（P=0．006）,提示RNAi后细胞增殖活性明显降低。裸鼠成瘤实验提示转染Bmi-1shRNA后肿瘤生长减慢,Bmi-1shRNA组肿瘤质量（1．47±0．35）g明显低于AAV—Null组的（1．83±0．28）g（P=0．028）和空白对照组的（1．96±0．40）g,P=0．004;Bmi-1shRNA组细胞凋亡指数（16．9±5．31）％明显高于AAvlNull组的（9．57±3．84）％和空白对照组的（8．13±3．97）％,差异有统计学意义,P值均为0．001。结论：沉默Bmi-1表达能显著抑制Ecal09细胞生长,减慢肿瘤细胞的增殖,促进凋亡,抑制肿瘤生长。     

淋巴管密度在甲状腺乳头状癌和滤泡癌的表达及意义

[目的]探讨淋巴管密度（LVD）在甲状腺乳头状癌（PTC）和滤泡癌的表达及意义。[方法]采用免疫组化技术,以D2-40标记淋巴管内皮,CD31标记血管内皮,对105例PTC、18例甲状腺滤泡癌和21例滤泡性腺瘤进行LVD和微血管密度（MVD）的检测。对LVD与乳头状癌的临床病理资料的关系,及乳头状癌和滤泡癌中MVD和LVD的表达差异进行了统计分析。[结果]（1）PTC中均可见D2-40阳性淋巴管,其瘤周LVD较瘤内为高,淋巴结转移组（瘤内6.80±4.40;瘤周13.63±5.09）较无转移组（瘤内4.30±3.06;瘤周10.17±4.53）为高,两组比较有统计学差异（P〈0.01）。（2）甲状腺乳头状癌的瘤内LVD与TNM分期有关,高分期组（Ⅲ期/Ⅳ期）的瘤内LVD（7.33±4.79）较低分期组（Ⅰ期/Ⅱ期,5.16±3.71）为高,两者相比有统计学差异（P〈0.05）。（3）甲状腺乳头状癌的瘤内LVD（5.47±3.93）较滤泡癌的瘤内LVD（1.56±1.92）为高,两者相比,差异具有统计学意义（P〈0.05）。[结论]甲状腺乳头状癌LVD与淋巴结转移密切相关,瘤周淋巴管的扩张形态和相对较高的LVD在甲状腺乳头状癌淋巴道转移中可能发挥了重要的作用。     

CAFs对乳腺癌细胞生物学特性的影响及机制探讨

目的：通过乳腺癌间质成纤维细胞（ carcinoma-associated fibroblasts,CAFs）与乳腺癌细胞系MDA-MB-231共培养的体外细胞实验及裸鼠接种的在体动物实验,观察CAFs对乳腺癌细胞增殖、凋亡、侵袭和转移活性的影响,并探讨其作用机制。方法：体外实验：分离培养浸润性导管癌组织中CAFs和正常成纤维细胞（ normal fibroblasts,NFs）,然后分别与乳腺癌细胞MDA-MB-231体外共培养,采用MTT法、流式细胞仪、Ma-trigel人工模拟基底膜法分别检测乳腺癌细胞的增殖、凋亡、细胞黏附和侵袭能力。动物在体实验：选择乳腺癌细胞系MDA-MB-231、CAFs和NFs,结合生理盐水（NS）、基质细胞衍生因子-1（SDF-1）及其配体拮抗剂AMD3100,组成不同的组别并接种于裸鼠（共6组）。观察肿瘤的大小,有无淋巴结、肺、肝脏转移。留取血标本及肿瘤组织行SDF-1表达水平的检测。结果：MDA-MB-231与CAFs和NFs共培养后乳腺癌细胞的增殖活性显著增强,其中CAFs的作用较NFs更强（P＝0.011）;CAFs组的黏附能力（34.70±4.84个/视野）明显强于NFs组（20.16±3.09个/视野）,P＝0.000;而CAFs组的侵袭性（89.0±4.62个/视野）也明显强于NFs组（81.6±6.08个/视野,P＝0.045）。CAFs组中的MDA-MB-231的早期凋亡率（2.9±2.4）较NFs组（5.0±4.2）明显降低（P＝0.026）;MDA231﹢CAFs ﹢NS 组的种植肿瘤平均体积最大（9.092±2.662cm3, P＝0.000）;此外,该组共有4只（66.6％）,MDA231﹢NS组有2只（33.3％）存在腋窝淋巴结转移,未见肝肺转移灶。在MDA231﹢CAFs﹢NS组中,血标本 SDF -1值（75.25±16.23pg/ml）、肿瘤组织标本中 SDF -1mRNA值（11.686±8.926）、组织中SDF-1蛋白表达水平（1.006±0.327）均为最高,与其他各组相比均有统计学差异（ P＝0.000）。结论：CAFs可影响乳腺癌肿瘤细胞的生物学特性,具有促进肿瘤细胞增殖,增强其黏附、侵袭及转移能力。其机制可能是通过乳腺癌间质成纤维细胞分泌SDF-1与其特定的受体CXCR4结合这一信号通路来实现的。     

结直肠癌组织δ-catenin表达与临床病理因素及预后相关性分析

目的：探讨δ-catenin在结直肠癌组织中的表达与临床病理参数及预后关系。方法：应用免疫组织化学法检测2004—04—15—2010—04—15中国医科大学附属盛京医院病理结直肠癌标本110例及正常结直肠组织标本（外伤等非肿瘤原因肠切除标本）15例中δ-catenin蛋白的表达,其中70例有完整的术后随访资料,40例有配对的转移淋巴结标本。应用Real-timePCR和蛋白质印迹法定量比较30例结直肠癌与癌旁结直肠黏膜中δ-catenin的mRNA和蛋白表达差异。结果：免疫组织化学检测结果显示,在结直肠癌组织中δ-catenin呈阳性表迭68．18％（75／110）,而在正常结直肠黏膜上皮细胞中仅呈现较弱表达（5例）或不表达（10例）。δ-catenin的阳性表达与结直肠癌患者的病灶所在部位（χ^2=0．163,P=0．686）、肿瘤大小（χ^2=2．386,P=0．122）、年龄（χ^2=0．112,P=0．738）和性别（χ^2=0．082,P=0．775）均无关,而与分化程度（χ^2=2．393,P=0．012）、TNM分期（χ^2=6．320,P=0．012）和淋巴结转移（χ^2=5．771,P=0．016）密切相关。70例有完整随访资料的结直肠癌患者5年生存率为64．29％（45／70）,δ-catenin阳性表达的患者5年生存率为51．11%（23／45）,显著低于阴性表达者的88．00％（22／25）,P=0．005。Cox模型多因素分析结果显示,乎catenin阳性表达很可能是影响结直肠癌患者预后的独立危险因素,P=0．031。Real-timePCR检测结果显示,结直肠癌组织δ-cateninmRNA表达水平为22．61±2．57,显著高于正常肠黏膜组织的3．25±0．88,两者比较差异有统计学意义,t=7．137,P〈O．001。蛋白质印迹法检测结果显示,结直肠癌组织争catenin蛋白表达量为0．95±0．11,显著高于正常肠黏膜组织的0．32士0．07,两者比较差异有统计学意义,t=7．772,P〈0．001。结论：结直肠癌组织中δ-catenin过度表达,与低分化?     

血管内皮生长因子及色素上皮衍生因子在乳腺癌中的表达及临床意义

目的：探讨血管内皮生长因子（VEGF）、色素上皮衍生因子（PEDF）在乳腺癌组织中的表达水平及其与乳腺癌病理特征的关系。方法采用Envision免疫组织化学方法对20例乳腺良性病变组织（纤维腺瘤）、85例乳腺浸润性导管癌组织中的VEGF、PEDF和CD34表达情况进行检测。 CD34表达反映微血管密度（ MVD ）。计数资料采用χ2检验, Spearman 等级相关分析方法进行相关性分析。结果 VEGF 在乳腺癌组织中的阳性表达率为71.7％（61/85）,高于在乳腺良性组织中的阳性表达率40％（8/20）,差异有统计学意义（χ2＝9.959, P＝0.002）;PEDF在乳腺癌组织中的阳性表达率为41.2％（35/85）,低于在乳腺良性组织中的阳性表达率90％（18/20）,差异有统计学意义（χ2＝19.683, P＝0.000）。在乳腺癌组织中VEGF与PEDF表达呈负相关（ r＝-0.365, P＝0.019）。乳腺癌组织中VEGF表达与肿瘤直径（χ2＝26.31,P＝0.000）、TNM分期（χ2＝5.428,P＝0.020）、淋巴结转移有关（χ2＝5.368, P＝0.021）;PEDF表达与TNM分期（χ2＝8.584, P＝0.003）、肿瘤直径（χ2＝11.079,P＝0.001）、绝经状态（χ2＝4.507,P＝0.034）、ER状态有关（χ2＝3.974,P＝0.046）。 MVD值在PEDF阴性组高于阳性组（38.67±6.52比22.56±5.16,Z＝-0.984,P＝0.000）,在VEGF阳性组则高于阴性组（38.78±6.28比25.36±5.12,Z＝-0.972,P＝0.000）。结论乳腺癌组织中存在PEDF、VEGF的表达相关性,且与MVD相关,对认识乳腺癌的生物学特性以及指导乳腺癌的诊疗具有重要意义。     

吲哚胺2,3-双加氧酶、c-myc在膀胱尿路上皮癌中的表达及其意义

目的 探讨吲哚胺2,3-双加氧酶（IDO）、c-myc在膀胱尿路上皮癌中的表达及其临床意义.方法 采用荧光定量聚合酶链反应（PCR）检测新鲜肿瘤及黏膜标本各20例IDO mRNA表达,采用SP法检测肿瘤石蜡标本84例及黏膜22例IDO、c-myc蛋白的表达,分析二者与临床病理特征的关系.结果 在膀胱尿路上皮癌组织中,IDO、c-myc蛋白表达强度与患者年龄、性别无关.在浸润型膀胱尿路上皮癌组织中IDO蛋白表达高于非浸润型（x2=5.600,P=0.018）,随着组织分级及国际抗癌联盟（UICC）分期增高,IDO蛋白阳性表达率增高（x2=20.268,P=0.000;x2=12.075,P=0.007）.c-myc蛋白在正常膀胱组织中无阳性表达,在膀胱尿路上皮癌组织中44例（52.4％）表达阳性,二者阳性表达率差异有统计学意义（x2=10.733,P=0.001）;c-myc蛋白表达强度与组织学分类、组织分级及UICC分期无关.在膀胱尿路上皮癌组织中IDO蛋白表达强度与c-myc蛋白表达强度呈正相关（r=0.205,P=0.047）,与组织学分类、组织分级及UICC分期呈正相关（r=0.258,P=0.018;r=0.491,P=0.000;r=0.365,P=0.001）.IDO mRNA在膀胱尿路上皮癌组织中的表达（7.696 1±1.745 2）明显高于正常膀胱组织（6.397 0±1.205 1）（t=2.367,P=0.023）.Ta～T1期膀胱尿路上皮癌组织中IDO mRNA的平均表达水平为6.803 4±1.567 5,明显低于T2～T4期的9.183 8±0.690 3（t=4.955,P=0.000）;IDO mRNA在Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级膀胱尿路上皮癌组织中的平均表达水平分别为7.058 7±1.771 5、7.934 2±1.530 5、9.290 7±0.574 5,随着分级增高而增高,差异有统计学意义（t=2.729,P=0.011）.结论 IDO表达与膀胱尿路上皮癌预后不良相关,c-myc表达强度与膀胱尿路上皮癌病变进展无关,但可能与膀胱尿路上皮癌病变发生有关.IDO可能成为膀胱尿路上皮癌预后的预测因子,IDO、c-myc有可能成为肿瘤化疗的一个分子靶向目标.